慢粒白血病abl癌基因表达的研究

选择分别位于ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的Ｍｂｃｒｌ第二外显子和ａｂｌ的第二外显子上的两条引物，对１８例慢粒白血病及２例急淋白血病标本进行逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）检测。结果：在１８例包括ｐｈ（＋）和ｐｈ（－）不同病期的慢粒白血病患者血中均检出ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的表达，其中１４例为Ｋ－２８型表达，１例为Ｌ－６型表达，３例为Ｋ－２８型，Ｌ－６型同时表达；２例急淋白血病标本中１例为Ｋ－２８型表达。研究结果表明，１．ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因是慢粒白血病的一个重要分子生物学特征；２．ｐｈ（＋）和ｐｈ（－）慢粒白血病的分子生物学基础相同，即均有ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因；３．至少部分急淋白血病与慢粒白血病有相同的分子生物学基础；４．ｂｃｒ的断裂点位置可能有一定的临床意义，但有待进一步研究；５．同时表达Ｌ－６型和Ｋ－２８型的情况多见于急变区，此现象提示体内可能同时有两类不同嵌合的白血病细胞或白血病急变期ｂｃｒ出现新的重排。     

慢粒白血病abl癌基因表达的研究

选择分别位于ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的Ｍｂｃｒ１第二外显子和ａｂｌ的第二外显子上的两条引物，对１８例慢粒白血病及２例急淋白血病本进行逆转录ＰＣＲ检测。结果：１８例包括ｐｈ（＋）和ｐｈ（－）不同病期的慢粒白血病患者血中均检出ｂｃｒ／ａｂｌ嵌合基因的表害，其中１４例为Ｋ－２８型表达，１例为Ｌ－６型表达，３例为Ｋ－２８型，Ｌ－６型同时表达；２例急淋白血病标本中１例为Ｋ－２８型表达。研究结果表明，１．ｂｃｒ     

成人急性淋巴细胞白血病分子生物学改变与临床治疗及预后关系的初步研究

应用多聚酶链反应技术检测了１４例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因、ＴＣＲγ基因重排及ＩｇＨ基因重排，结果发现，ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因阳性５例，阳性率３５．７％，其中４例为Ｂ－ＡＬＬ，１例ＴＣＲγ及ＩｇＨ基因重排均阴性。ｂｃｒ／ａｂｌ（＋）患者与ｂｃｒ／ａｂｌ（－）患者在临床表现方面无显著性差异，但ｂｃｒ／ａｂｌ（＋）患者治疗效果比ｂｃｒ／ａｂｌ（－）患者差。     

白血病 BCR-ABL 融合基因逆转录 PCR 检测中的实验因素探讨

建立白血病中费城（Ｐｈ）染色体上独特的ｂｃｒ－ａｂｌ融合基因的逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）快速检测方法。利用正交设计原理优化逆转录反应条件，探讨该法中引物设计和嵌套式ＰＣＲ对检测灵敏度的影响，利用扩增产物所含限制性酶切位点进行产物特异性鉴定。运用此法检测１２例慢性粒细胞白血病，除１例阴性外，其余１１例阳性标本含不同类型（ｂ３ａ２，ｂ２ａ２，Ｂ１ａ２）ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ。讨论了用于临床标本检测中应考虑的问题。     

针对bcr-abl融合基因不同位点的三个单核酶体外切割活性的比较

目的：针对ｂｃｒ－ａｂｌ融合基因设计并构建了３个针对不同位点的特异性单核酶体转录载体,通过体外切割试验比较其对ｂｃｒ－ａｂｌ合基因的切割效率,为慢粒基因治疗打下基础。方法：（１）首先针对ｂｃｒ－ａｂｌ融合位点设计,合成３个相邻的锤头状核酶,将其定向克隆入改建的ｐＤＥＳ载体中,构建３个单核酶体外转录载体并进行序列测定。（２）同时通过ＰＣＲ方法扩增ｂｃｒ－ａｂｌ融合位点３７６ｂｐ序列,克隆人ｐＢｌｕｅ     

慢性粒细胞白血病60例分析

是一步探讨慢性粒细胞白血病（慢粒）的分期、分型和治疗,对６０例患者的临床资料进行了分析。并用Ｒ显带技术检查了４９例患者的染色体核型,用逆转录－聚合酶链反应法检查了１３例ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因。结果发现慢粒急变期Ｈｂ和ＢＰＣ明显低于慢性期;５例为Ｐｈ（一）,４４例为Ｐｈ（＋）;６６．７％的慢粒急变患者有额外染色体异常;５例行异基因骨髓移植术后转为正常核型;８例Ｐｈ（＋）患者ｂｃｒ／ａｂｌ基因亦阳性,     

急性髓系白血病H-ras、凋亡及多药耐药的研究

目的研究急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｈｒａｓ／Ｐ２１、抗凋亡基因（ｂｃｌ２）、细胞凋亡与多药耐药基因（ｍｄｒ１／Ｐｇｐ）对疗效的影响,并证实流式细胞术（ＦＣＭ）检测Ｐｇｐ和逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ间的相关。方法用ＦＣＭ检测８５例初治ＡＭＬ患者的Ｈｒａｓ／Ｐ２１、ｂｃｌ２、细胞凋亡和ｍｄｒ１产物Ｐｇｐ的表达;用ＲＴＰＣＲ检测其中４７例的ｍｄｒ１／ｍＲＮＡ。结果Ｐ２１＋／Ｐｇｐ＋者完全缓解（ＣＲ）率明显低于Ｐ２１－／Ｐｇｐ－者（分别为５８．１％和１００％,Ｐ＜０．０２５）,高ｂｃｌ２／Ｐｇｐ＋的ＣＲ率明显低于低ｂｃｌ２／Ｐｇｐ－者（分别为６０％和９６．３％,Ｐ＜０．００５）。Ｐｇｐ＋３１例中２９例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性,Ｐｇｐ－１６例中仅２例ｍｄｒ１ｍＲＮＡ阳性。结论Ｐｇｐ＋同时Ｐ２１＋、高ｂｃｌ２者ＣＲ低,ＦＣＭ检测Ｐｇｐ和ＲＴＰＣＲ检测ｍｄｒ１ｍＲＮＡ相关性良好     

成人急性淋巴细胞白血病分子生物学改变与临床治疗及预后…

应用多聚酶链反应技术检测了１４例急性淋巴细胞白血病患者的ｂｃｒ／ａｂｌ融合基因、ＴＣＲｒ基因重排及ＩｇＨ基因重排，结果发现，ｂｃｒ／ｆａｂｌ融合基因阳性５例，阳性率３５．７％，其中４例为Ｂ－ＡＬＬ，例ＴＣＲｒ及ＩｇＨ基因重排均阴性。     

PML-RAR_α融合基因检测方法学的建立

应用筑巢式逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测２３例急性早幼粒白血病（ＡＰＬ），早幼粒白血病基因ＰＭＬ维甲酸受体α融合基因（ＰＭＬ－ＲＡＲα），肯定了２例与急非淋白血病Ｍ２不易鉴别的不典型ＡＰＬ。１５例缓解在２年以内ＡＰＬ此融合基因均阳性，其中Ｌ型８例，Ｓ型７例，Ｌ型中尚发现一个变异型。８例缓解在３年以上ＡＰＬ，此融合基因４例阳性，其中Ｌ型３例，Ｓ型１例，Ｌ型１例已有复发倾向，而缓解超过４年ＡＰＬ此融合基因均为阴性。     

PML—RARa融合基因检测方法学的建立

应用筑巢式逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测２３例急性早幼粒白血病（ＡＰＬ）早幼粒白血病基因ＰＭＬ维甲酸受体α融合基因（ＰＭＬ－ＲＡＲａ）肯定了２例与急淋白血病Ｍ２不易鉴别的不典型ＡＰＬ，１５例缓在２年以内ＡＰＬ此融合基因均阳性，其中Ｌ型８例，Ｓ型７例，Ｌ型中尚发现一个变异型，８例缓解在３年以上ＡＰＬ，此融合基因４例阳性，其中Ｌ型３例，Ｓ型１例，Ｌ型１例已有复发倾向，而缓解超过４年ＡＰＬ此     

慢性粒细胞白血病Ph1染色体和bcr/abl融合基因检测的意义

目的：探讨Ph¹染色体和bcr/abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病诊断中的意义。 方法：选择95例慢性粒细胞白血病患者和20例缺铁性贫血患者作为研究对象,采用骨髓细胞短期培养法制备染色体、采用RT-PCR法分析bcr/abl融合基因。 结果：95例慢性粒细胞白血病患者中,Ph¹染色体阳性者83例（87.4%）,bcr/abl阳性阳性者90例（94.7%）,Ph¹和bcr/abl均阳性83例（94.7%）,Ph¹阴性、bcr/abl阳性7例（7.4%）,Ph¹和bcr/abl均阴性5例（5.3%）。20例缺铁性贫血患者Ph¹和bcr/abl均阴性。 结论：Ph¹染色体、bcr/abl融合基因的检测有助于慢性粒细胞白血病的诊断和鉴别诊断。     

Ph1染色体及bcr/abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病中的诊断意义

目的 探讨Ph1染色体和bcr/abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病诊断中的意义.方法 选择28例慢性粒细胞白血病患者和20例缺铁性贫血患者作为研究对象,采用骨髓细胞短期培养法制备染色体、采用RT-PCR法分析bcr/abl融合基因.结果 28例慢性粒细胞白血病患者中,Ph1染色体阳性者25例(89.3%),bcr/abl阳性者26例(92.9%),Ph1和bcr/abl均阳性25例(89.3%),Ph1阴性、bcr/abl阳性1例(3.6%),Ph1和bcr/abl均阴性2例(7.1%).20例缺铁性贫血患者Ph1和bcr/abl均阴性.结论 Ph1染色体、bcr/abl融合基因的检测有助于慢性粒细胞白血病的诊断和鉴别诊断.     

以血小板计数增多发病的慢性粒细胞白血病临床研究

目的研究以血小板计数增多发病的慢性粒细胞白血病的临床表现与生物学特点。方法对患者外周血细胞形态、骨髓细胞形态、染色体、融合基因进行检查。结果以血小板计数增多发病的慢性粒细胞白血病的临床发病率低,易误诊为原发性血小板增多症,可检测到bcr/abl融合基因及Ph染色体,随病程进展,可进一步向加速期、急变期演变,应及早干预。结论对于以血小板计数增多发病的患者,应注意检测bcr/abl融合基因及Ph染色体,鉴别慢性粒细胞白血病与原发性血小板增多症,以避免误诊、误治。     

bcr／ab1融合基因在慢性粒细胞白血病中的表达及临床意义

目的探讨bcr／ab1融合基因的表达在慢性粒细胞白血病（CML）中的诊断、疗效及预后观察中的意义。方法采用荧光定量逆转录多聚酶链反应（FQ-PCR）技术，对8例复治CML患者和作为对照组的2例急性非淋巴细胞性白血病患者的骨髓或外周血进行bcr／ab1融合基因检测；同时比较患者的血象、骨髓象等相关实验室指标。结果CML中7例慢性期（CP）和1例急变期（BC）患者，均不同程度地表达了bcr／ab1融合基因，而对照组该融合基因的表达为阴性。结论bcr／ab1基因是CML发病的分子基础，定量检测bcr／ab1融合基因对于CML的诊断、临床分型、疗效观察及预后判断有重要意义。     

筑巢式PCR检测慢性粒细胞白血病bcr/ablm RNA

目的：观察慢性粒细胞性白血病（CML）患者bcr／ablmRNA的表达情况。方法：应用逆转录筑巢式聚合酶链反应（NestedPCR）检测了32例CML患者的bcr／ablmRNA。结果：30例检测到bcr／ablmRNA;其中19例检测到bcrexon3／ablexon2mRNA,7M表达bcrexon2／abl。exon2mRNA．4例同时表达这两种mRNA。结论：NestedPCR是检测CML患者bcr／ablmRNA有效而敏感的方法。     

双色ES探针检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因的应用研究

目的:探讨使用bcr/abl双色ES探针的荧光原位杂交(fluorescence in-situ hybridization,FISH)应用于慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因检测的意义.方法:使用荧光原位杂交方法对2005年1月至2006年2月本院收治的12例慢性粒细胞白血病患者之骨髓细胞进行检测分析.结果:12例CML均检出bcr/abl基因的存在,其中2例伴ASS基因缺失.结论:使用bcr/abl双色ES探针进行荧光原位杂交能为bcr/abl融合基因的检测提供准确直观的依据.     

慢性粒细胞性白血病bcr/abl融合基因的表达

目的：研究慢性粒细胞性白血病患者bcr／abl融合基因阳性率及其临床意义。方法：取慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓或外周血，提取单核细胞的总RNA，用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)，观察其ber／abl基因的表达。结果：9例CML患者中，8例ber／abl基因阳性，占88.9％。结论：bcr／abl基因检测可以用来辅助CML的临床诊断。     

初发慢性髓系白血病bcr/abl融合基因转录子与临床关系的观察

目的　研究初发慢性髓系白血病bcr/abl融合基因转录子类型与临床关系。方法　使用RT PCR对 5 1例初发CML患者进行bcr/abl融合基因转录子检测。结果　b3a2型患者血小板数高于b2a2型患者 ,但b3a2型患者WBC数低于b2a2型患者 (P <0 .0 5 ) ;血红蛋白浓度与b2a2型患者比较无差异 (P >0 .0 5 ) ;b3a2型和b2a2型患者比较AKP和Ph1染色体比例无差异 (P >0 .0 5 ) ;M bcr/abl阳性患者伴m bcr/abl阳性率为 47 0 % ,其中b3a2型患者有m bcr/abl融合基因转录子 14例 ,b2a2型患者有 10例。结论　b3a2型CML患者初发时更易有血小板升高表现 ,但b2a2型患者更易有WBC数升高的表现 ,较多的初发CML患者同时伴有m bcr/abl阳性。     

Genistein 对K562细胞生长及CyclinD1基因和bcr-abl融合基因表达的影响

目的 研究Genistein抑制K562细胞生长的机制及对CyclinD1基因和bcr-abl融合基因表达的影响。方法 用RT－PCR方法检测Genistein作用于K562细胞前后CyclinD1基因和bcr-abl融合基因的mRNA表达变化,用免疫荧光、流式细胞仪和电镜检测CDK4蛋白的表达、细胞周期及凋亡。结果 K562细胞中CyclinD1基因、bcr-abl融合基因的mRNA和CDK4蛋白表达阳性,用Genistein与K562细胞共同孵育后,bcr-abl融合基因的mRNA表达阴性,CyclinD1的mRNA和CDK4蛋白表达下降,细胞阻滞于G2／M期,K562细胞出现凋亡。结果 bcr-abl融合基因、CyclinD1基因和CDK4蛋白在K562细胞中高表达,Genistein能使K562细胞生长受抑,诱导其调亡,抑制bcr-abl基因的mRNA表达,并使CyclinD1基因的mRNA和CDK4蛋白表达下降,表明bcr-abl融合基因、CyclinD1基因和CDK4对慢粒发展存在内在关系。