甘利欣对肺纤维化大鼠的TGF-β1,IFN-γ,IL-4的影响

目的 :建立大鼠肺纤维化动物模型,探讨甘利欣治疗博莱霉素致肺纤维化大鼠的作用机制。 方法 :将大鼠40只,随机分成4组:博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型组(BLM组)、生理盐水对照组、甘利欣治疗组、地塞米松(dexamethasone,DXM)治疗组。经实验后观察各组大鼠免疫组化TGF-β₁、IFN-γ表达观察;HE染色病理观察及测定各组大鼠血清TGF-β₁ IL-4、IFN-γ含量。 结果 : ①甘利欣治疗组大鼠肺纤维化程度较轻微;②模型组大鼠肺组织TGF-β₁染色呈强阳性反应,IFN-γ染色较淡,而甘利欣治疗组TGF-β₁、IFN-γ染色则相反。免疫组化TGF-β₁甘利欣组与地塞米松组相比,P为0.018。免疫组化IFN-γ甘利欣组与地塞米松组相比,P为0.618;③模型组大鼠血清TGF-β₁、IL-4含量较高,IFN-γ含量较低,而甘利欣治疗组、DXM治疗组则相反。大鼠血清TGF-β₁地塞米松组与甘利欣组相比P为0.169;大鼠血清IL-4地塞米松组、甘利欣组相比无差异;地塞米松组和甘利欣组IFN-γ均数相比也无差异(P>0.05),但两组与模型组相比P分别为0.001,0.000。 结论 :甘利欣可以减轻大鼠肺纤维化损伤和肺组织的TGF-β₁ 、IL-4的表达,并降低他们在血清中的含量,增加血清中的IFN-γ含量,增强肺组织IFN-γ的表达。     

沙苑子黄酮抗CCl4大鼠肝纤维化作用及对IFN-γ,TGF-β1的影响

 目的观察沙苑子黄酮对四氯化碳(CCl_{4)诱导的大鼠肝纤维化及细胞因子干扰素(IFNγ),生长转化因子β1(TGFβ1)的影响。方法采用CCl4诱导大鼠肝纤维化,期间给予灌服沙苑子黄酮(30,60,120mg·kg^-1),设秋水仙碱组作对照,给药6周后,测定血清谷丙氨转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和总胆红素(TBILI)含量;放射免疫分析法测定血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)含量;ELISA法测定血清IFNγ,TGFβ1蛋白含量;光镜观察肝细胞结构和肝纤维化程度。结果沙苑子黄酮预防给药,明显降低CCl4诱导的肝纤维化大鼠血清ALT,AST活性(P<001,P<001),显著降低血清TBILI,HA和LN含量(P<001,P<001,P<001),血清IFNγ含量明显增加(P<001),而血清TGFβ1含量明显降低(P<005)。病理学观察结果,沙苑子黄酮预防组大鼠胶原纤维沉积明显减轻,假小叶结构明显减少。结论沙苑子黄酮预防给药,可抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化形成,其作用可能与调节细胞因子IFNγ,TGFβ1有关。}     

盆炎方对盆腔炎性疾病后遗症大鼠卵巢、子宫组织TGF-β1、TβRⅡ蛋白的影响

目的通过观察盆腔炎方对盆腔炎性疾病后遗症雌性大鼠子宫组织、卵巢组织转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及其受体Ⅱ(transforming growth factor-βreceptorⅡ,TβRⅡ)水平的影响,探讨其治疗盆腔炎性疾病后遗症的机制。方法将124只SD雌性大鼠随机抽取空白组10只、假手术组10只后造模,造模成功后按体质量随机分为盆炎方高、中、低剂量组,模型组及妇科千金胶囊组各15只。药物干预21天后,采用免疫组化法检测大鼠卵巢、子宫组织TGF-β1、TβRⅡ的表达。结果与空白组和假手术组比较,模型组子宫、卵巢组织TGF-β1、TβRⅡ表达均升高,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,盆炎方各剂量组和妇科千金胶囊组能不同程度地降低模型大鼠子宫组织、卵巢组织TGF-β1及TβRⅡ水平,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。盆炎方各剂量组中,以高剂量组的疗效最佳,且与妇科千金胶囊相当。结论盆炎方可能通过降低盆腔炎性疾病后遗症模型大鼠子宫组织、卵巢组织中粘连修复相关指标TGF-β1及TβRⅡ的表达,缓解和消除局部炎症过程,从而治疗盆腔炎性疾病后遗症。     

补阳还五汤对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smad3表达的影响

目的： 观察补阳还五汤对博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织病理及转化生长因子β₁（TGF-β₁）_mRNA,Smad3 mRNA表达的影响。方法： 将144只健康雄性SD大鼠随机分成6组,即假手术（NS）组、模型（BLM）组、强的松（P）组、补阳还五汤高、中、低（A,B,C）组,每组各24只。除NS组外,其余各组采用一次性气管滴注博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,NS组气管内滴注等量NS,造模第2天起,A,B,C组用补阳还五汤（剂量分别为18.48,9.24,4.62 g·kg^-1）灌胃,P组用强的松混悬液（4.2 mg·kg^-1）灌胃,NS组及BLM组用NS（10 mL·kg^-1）灌胃,于造模后第7,14,28 d分3批处死动物,每次8只,取左肺制备病理切片,行HE,Masson染色观察肺泡炎及肺纤维化程度改变情况;取右肺上中叶组织,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组大鼠肺组织TGF-β₁mRNA,Smad3 mRNA的表达。结果： ①BLM组大鼠肺泡炎及肺纤维化程度在不同时间点均明显高于同期NS组,差异明显（P<0.01）;②与BLM组相比,补阳还五汤各剂量组肺泡炎及肺纤维化程度有不同程度的改善（P<0.01 或 P<0.05）;③与NS组相比,BLM组肺组织TGF-β₁,Smad3表达水平在不同时间点均明显增高（P<0.01）,尤以第7天最为明显,并随时间推移有逐渐下降的趋势;④补阳还五汤各剂量组TGF-β₁,Smad3表达水平与同期BLM组相有不同程度的降低（P<0.01或P<0.05）,其中B组在7,14,28 d,C组在14,28 d下降较明显（P<0.01）,A组与同期BLM组相比虽有所降低,但早期不如B,C组明显。结论： 补阳还五汤可以明显改善模型大鼠肺组织肺泡炎和肺纤维化程度,抑制博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织TGF-β₁mRNA、Smad3mRNA的表达上调,从而减轻肺纤维化程度。     

鳖甲煎丸对肝纤维化大鼠TGF-β1/samd信号通路的影响

目的 探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机制。方法 SD大鼠随机分成6组：对照组,模型组,秋水仙碱（0.1 mg/kg）阳性对照组,鳖甲煎丸低、中、高剂量（0.55、1.1、2.2 g/kg）组。除对照组外,其他各组大鼠sc 40% CCl₄橄榄油溶液,每周2次,连续给予6周,建立大鼠肝纤维化模型。在造模同时,各给药组每天给予相应药物10 mL/(kg?d) 1次,连续给药11周。于11周末处死大鼠,免疫组化法检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测大鼠肝组织中转化生长因子（TGF-β₁）及smad 3基因的表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠肝组织α-SMA蛋白及TGF-β₁、smad 3基因的表达显著上调（P＜0.05）。与模型组比较,鳖甲煎丸和秋水仙碱可显著降低大鼠肝组织α-SMA蛋白及TGF-β₁、smad 3基因的表达,其中以鳖甲煎丸2.2 g/kg的效果更显著。结论 鳖甲煎丸抗肝纤维化作用机制可能与其下调TGF-β₁/smad 3信号通路、抑制肝星状细胞活化和增殖有关。     

葛根复方对重症肌无力大鼠IFN-γ和TGF-β1的影响

目的:研究葛根复方对重症肌无力大鼠干扰素γ(IFN-γ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)影响,并探讨其作用机制。方法:将80只lewis大鼠随机分为4组,造模成功后分别给予阳性对照组(强的松),葛根复方组连续灌胃治疗4W给予药物治疗。结果:与空白组比较,造模组的IFN-γ表达水平显著升高,与模型组比较,强的松组和中药组大鼠的血清中IFN-γ含量明显降低;治疗后与强的松组比较,中药组IFN-γ含量要偏低与空白组比较,造模组的TGF-β1表达水平显著降低,与模型组比较,强的松组,中药组大鼠的TGF-β1含量明显升高;治疗后与强的松组比较,中药组TGF-β1含量要偏高。结论:葛根复方抑制了IFN-γ的含量,促进俄TGF-β1含量升高。     

地龙注射液对屋尘螨致敏气道上皮细胞TGF-β1/Smad2表达的影响

 目的 观察地龙注射液对细胞哮喘模型中转化生长因子（TGF）-β₁、Smad2表达的影响,探讨地龙在支气管哮喘治疗中的作用机制及价值。方法 给予人支气管上皮细胞系BEP2D（HBE）以不同的干预和治疗,分为：单纯培养组即对照组（A组）,屋尘螨(dermatophagoides pteronyssinus,Derp1)（10 μg·mL^-1）组（B组）,Derp1（10 μg·mL^-1）+ 地塞米松（dexamethasone,DEX）（1×10^-6mol·L^-1）组（C组）,Derp1（10 μg·mL^-1）+地龙注射液（0.9 mg·mL^-1）组（D组）,Derp1（10 μg·mL^-1）+地龙注射液（9 mg·mL^-1）组（E组）, Derp1（10 μg·mL^-1）+地龙注射液（18 mg·mL^-1）组（F组）,培养72 h,RT-PCR法检测各组细胞TGF-β₁ mRNA, Smad2 mRNA 表达;并收集以上各组上清液,作用于人胚肺成纤维细胞（HLF）72 h,免疫细胞化学法检测纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)表达。结果 B组TGF-β₁mRNA, Smad2 mRNA表达较A组明显升高（P<0.01）;各地龙组及C组,TGF-β₁ mRNA、Smad2 mRNA表达低于B组,有显著性差异(P<0.01),与A组比较均无显著性差异（P>0.05）;各组HLF中FN表达与HBE各对应组TGF-β₁ mRNA表达呈正相关性。结论 地龙注射液有抑制哮喘气道重构的作用,其机制可能与抑制TGF-β₁/Smad2 信号通路有关。     

化纤方对肺纤维化模型大鼠的肺系数及炎症因子MCP-1、IL-1β的影响

目的:探讨化纤方对博莱霉素造模的肺纤维化模型大鼠肺系数及血清炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响。方法:SD大鼠雌雄各半,随机分成空白对照组,模型组,阳性对照泼尼松组,化纤方组。除空白对照组外,其余3组均予博莱霉素制作肺纤维化大鼠模型,造模第2天起泼尼松组和化纤方组给予每日灌胃给药,分别于给药后7、11、23 d取材,分离肺组织并计算肺指数。ELISA法测定肺组织中炎症因子IL-1β及MCP-1的含量。结果:与空白对照组相比,模型组大鼠肺系数明显增加(P0.05);与模型组比较,各给药组大鼠肺系数有不同程度的下降(P0.01);化纤方与泼尼松比较,有统计学意义(P0.05);模型组、泼尼松组和化纤方组血清中IL-1β含量较空白对照组明显升高(P0.05),化纤方组血清中IL-1β含量较模型组明显降低(P0.01);模型组和化纤方组血清中MCP-1含量较空白对照组明显增高(P0.01或P0.05),化纤方组血清MCP-1含量与模型组相比显著下降(P0.01),但与泼尼松组比较明显增高(P0.05)。结论:化纤方能够较好地控制模型大鼠肺系数的增长,并通过降低血清中IL-1β和MCP-1的含量抑制肺纤维化,对博莱霉素致大鼠肺损伤具有一定的保护作用。     

清热活血散结复方对放射性肺炎及肺纤维化血清细胞因子IL-6,TNF-α,TGF-β1水平的影响

目的：观察清热活血散结复方预防放射性肺炎及肺纤维化的临床疗效和对血清细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β1 （TGF-β1）的影响。方法：采用前瞻性随机对照设计,将符合入选标准的患者随机分为治疗组和对照组,每组各62例。对照组单纯行放疗,治疗组在进行放疗的同时口服清热活血散结中药。观察放疗前后、治疗后6个月两组患者的一般情况、临床症状、胸部CT、肺损伤（RTOG标准）,并采用身体机能状态量表（karnofsky performance status scale,KPS）进行评估,比较放射性肺炎发生率及放疗前后两组患者血清细胞因子IL-6,TNF-α,TGF-β1 水平。结果：两组均无脱落及剔除病例,基线资料无明显差异。与对照组比较,放疗后中药治疗组能够明显提高患者的KPS评分,治疗组肺损伤等级评价的改善情况明显优于对照组（P<0.05）,治疗组放射性肺炎及肺纤维化发生率低于对照组（38.71% vs 72.58%,P<0.05）;两组放疗前血清IL-6,TNF-α,TGF-β1 水平比较无统计学差异;放疗结束、放疗后6月,治疗组血清IL-6,TNF-α,TGF-β1 水平均明显低于对照组（P<0.01）,血清IL-6,TNF-α,TGF-β1 水平均在放疗结束时达到高峰。结论：清热活血散结复方安全有效,能够降低放射性肺炎及肺纤维化的发生率,并可减轻患者症状,改善患者生存质量;其作用机制可能与降低放射性肺炎及肺纤维化患者的血清IL-6,TGF-β₁水平有关。     

猪苓和泽泻对肺纤维化大鼠模型血清TGF-β1、TNF-α影响研究

目的:观察猪苓和泽泻对肺纤维化大鼠模型血清TGF-β1、TNF-α的影响。方法:将72只健康雄性Wistar大鼠随机分为6组,以支气管内注射博莱霉素的方法制作肺纤维化动物模型。给药后第14天、28天光镜下观察大鼠肺组织病理变化情况,ELISA法检测各组血清中TGF-β1、TNF-α的浓度。结果:各组病理学指标提示大鼠肺组织出现明显的肺间质纤维化,提示动物模型复制成功。通过肺纤维化模型大鼠的病理学改变及血清内TGF-β1、TNF-α浓度比较,各给药组与模型对照组均有显著性差异(P<0.05)。醋酸泼尼松组的指标改善程度最为显著,猪苓加泽泻组次之,猪苓组及泽泻组最弱。结论:猪苓、泽泻及其合用可降低肺纤维化大鼠血清中TGF-β1、TNF-α浓度,减轻博莱霉素诱发的肺纤维化进程。     

郑氏一号熏洗药对急性软组织损伤大鼠IL-1β、PGE2的影响

目的：观察郑氏一号熏洗药对小鼠的抗炎作用以及对急性软组织损伤大鼠病理组织变化及局部组织白细胞介素1β、 前列腺素E₂含量影响。方法：成年SD大鼠及昆明种小鼠按实验需要分别随机分为赋形剂对照组,郑氏一号熏洗药低、中、高剂量组（0.013,0.026,0.053 g·mL^-1）,云南白药酊组（0.01 g·mL^-1）,采用小鼠热板刺激诱发疼痛,醋酸扭体、大鼠蛋清性足肿胀和棉球性肉芽肿等急、慢性炎症模型,观察本品抗炎镇痛作用;采用打击法建立大鼠急性软组织挫伤模型,分别应用相应药物予以治疗,并于造模后2,4,6 d取材,采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测损伤局部骨骼肌组织白介素1β（IL-1β）、前列腺素E₂（PGE₂）的含量。结果：郑氏一号熏洗药可明显降低小鼠热板刺激及醋酸所致疼痛反应（P<0.05）,可显著抑制大鼠蛋清性足肿胀和棉球性肉芽组织增生（P<0.05）;能显著抑制大鼠急性软组织损伤后受伤局部 IL-1β和PGE₂含量的升高（P<0.01）。结论：郑氏一号熏洗药具有明显的抗炎镇痛作用,是通过抑制受伤局部 IL-1β,PGE₂含量升高来实现,可能是其治疗软组织损伤的疗效机制之一。     

常通口服液对肠粘连大鼠血IL-1β、TGF-β1的影响

目的观察常通口服液(大黄、枳实、丹参等)对大鼠肠粘连模型血白细胞介素1β(IL1β)、转化生长因子β1(TGFβ1)的影响。方法选用SD♂大鼠,随机分为6组正常对照组、模型对照组、四磨汤组及常通口服液低、中,高剂量组。除正常对照组外,其余大鼠均按Ellis法制备成肠粘连模型。常通中剂量组与模型对照组于术后第1,3,5,7,9日采血,其余各组于术后第7天取血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL1β及TGFβ1水平。此外,各组于术后第7天进行粘连程度肉眼分级。结果模型对照组的IL1β、TGFβ1水平明显高于正常对照组(P<0.01);与模型对照组相比,常通口服液中,高剂量组的IL1β,TGFβ1含量均显著降低(P<0.05)。结论常通口服液能降低肠粘连大鼠血清IL1β、TGFβ1含量。细胞因子IL1β、TGFβ在肠粘连形成中发挥一定作用。     

葛根素对酒精性肝损伤大鼠肝组织TGF-β1和α-SMA表达的影响

目的：研究葛根素对酒精性肝损伤大鼠肝组织转化生长因子-β₁(TGF-β₁)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的调控作用，探讨葛根素对酒精性肝损伤的防治机制。方法：将75只SD大鼠随机分成5组：正常组10只、模型组20只(乙醇等混合液，2次/d)、阳性对照组15只(乙醇等混合液＋复方鳖甲软肝片，1 g·kg^-1·d^-1)、葛根素大剂量组15只(乙醇等混合液＋葛根素片1.5 g·kg^-1·d^-1 )、葛根素小剂量组15只(乙醇等混合液＋葛根素片0.75 g·kg^-1·d^-1 )，8周后抽取股静脉血并处死，观察肝脏组织病理变化，检测肝组织TGF-β₁和α-SMA的表达。结果：模型组大鼠肝组织病理变化和肝纤维化积分与其他各组相比都有显著性改变(P<0.05)；葛根素大、小剂量组肝组织TGF-β₁和α-SMA表达水平明显低于模型组(P<0.01)；且葛根素大剂量组α-SMA水平明显低于对照组(P<0.05)，小剂量组与模型组相比无显著性差异。结论：酒精性肝损伤大鼠肝脏组织TGF-β₁和α-SMA有不同程度的升高，葛根素对其有调控作用，葛根素对酒精性肝损伤有保护作用。     

丹参联合川芎嗪对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1表达及羟脯氨酸含量的影响

目的观察丹参联合川芎嗪注射液腹腔注射对博来霉素(BLM)致肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及羟脯氨酸含量的影响。方法将90只成年雄性SD大鼠,随机分为6组:生理盐水(NS)组、BLM组、地塞米松(DM)组,中药干预组(A组、B组、C组)。NS组气管内灌注NS,BLM组、DM组及中药干预组(A组、B组、C组)气管内灌注BLM,随后NS组和BLM组每日腹腔注射NS,DM组每日腹腔注射DM,中药干预组(A组、B组、C组)每日给予不同剂量丹参和川芎嗪复合制剂腹腔注射,分别于气管内灌注药物后第7天,第14天和第28天处死每组大鼠各5只,左肺多聚甲醛固定后行HE染色、Masson染色进行肺泡炎及肺纤维化程度的判定;免疫组化法测定肺组织中TGF-β1的表达;右肺行肺组织羟脯氨酸含量的测定;血清用于检测肝肾功能。结果①NS组大鼠各时间点肺组织未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润及纤维化的形成。BLM组大鼠第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,第14天时炎症细胞减少,肺泡间隔内成纤维细胞显著增多,肺泡结构破坏,第28天时肺纤维化程度进一步加重,形成广泛纤维化。与BLM组比较,DM组大鼠各时间点肺泡炎及纤维化程度减轻(P<0.05)。A组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度与BLM组类似(P>0.05)。B组、C组第14天肺泡炎及肺纤维化程度明显低于BLM组(P<0.05)。B组、C组第28天肺纤维化程度明显低于BLM组(P<0.05)。②与NS组比较,BLM组、DM组及中药干预组(A组、B组、C组)肺组织中TGF-β1的表达水平和羟脯氨酸含量明显升高(P<0.05)。③与BLM组比较,DM组及中药干预组(B组、C组)肺组织中TGF-β1的表达水平及羟脯氨酸含量明显降低(P<0.05)。④大鼠血清肝肾功能检测结果显示各组两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹参联合川芎嗪腹腔注射能减轻BLM所致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,其机制可能与抑制肺组织TGF-β1的表达,减少羟脯氨酸含量有关。     

化瘀通阳方对溃疡性结肠炎大鼠血清IL-1β、IFN-γ表达的影响

目的 研究化瘀通阳方对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜损伤及血清白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响.方法 从32只Wistar大鼠中随机选择8只作为空白组,余24只采用灌胃联合自由饮用5％葡聚糖硫酸钠溶液法复制溃疡性结肠炎模型.将造模成功的17只大鼠随机分为模型组5只、美沙拉嗪组6只及化瘀通...     

水蛭宣痹化纤汤对特发性肺纤维化大鼠TGF-β1、LN的影响

目的：探讨水蛭宣痹化纤汤对特发性肺纤维化大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）、层粘连蛋白（LN）的影响。方法：60只大鼠随机分为5组,除正常对照组,其他4组采用暴露气管注射博莱霉素法建立特发性肺纤维化大鼠模型,给药21天后,腹主动脉取血2mL离心得到血清,用酶联免疫吸附法（ELIsA）检测TGE-β1、LN的含量。结果：水蛭宣痹化纤汤能显著减少大鼠血清中TGF-β1、LN含量。结论：水蛭宣痹化纤汤通过调节TGF-β1、LN的含量达到抑制纤维化发展的作用,提示该药可用于人类特发性肺纤维化的防治。     

柴胡疏肝散对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的:探讨柴胡疏肝散对肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)的作用机制。方法:60只Wistar大鼠被随机均分为6组:正常组、模型组、柴胡疏肝散高、中、低剂量组、柴胡疏肝散预防组。除正常组外,其余各组均采用猪血清ip诱发HF,0.5 m L/只,2次/周,连续10周,5周后即可形成HF。预防组于造模同时给药(以柴胡疏肝散6.3 g·kg-1),柴胡疏肝散高、中、低剂量组[(12.6,6.3,3.15)g·kg-1]于造模第6周给药,连续10周。采用RT-PCR法检测各组肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1),Smad2,Smad3,Smad4和Smad7的mRNA表达,免疫组化法分别检测肝组织TGF-β1,磷酸化Smad 2/3(p-Smad 2/3)和Smad7蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组TGF-β1,Smad2,Smad3的mRNA和TGF-β1,p-Smad 2/3蛋白表达均显著增加(均P0.01),Smad7基因表达显著降低(均P0.01);与模型组比较,柴胡疏肝散中剂量组TGF-β1和Smad3 mRNA表达均显著降低,p-Smad 2/3和TGF-β1蛋白表达显著减弱(P0.05,P0.01),Smad7基因表达显著增加(P0.01)。结论:柴胡疏肝散有明显的抗HF作用,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

人工冬虫夏草菌液对博莱霉素致小鼠肺纤维化的保护作用

目的：研究人工冬虫夏草菌液(cordyceps sinensi)对博莱霉素(BLM)致肺纤维化小鼠的保护作用。方法：小鼠随机分为4组,模型组经鼻滴入博莱霉素5 mg·kg^-1建立肺间质纤维化模型,人工冬虫夏草菌液预防治疗组于滴入BLM前48 h予人工冬虫夏草菌液灌胃,人工冬虫夏草菌液治疗组于滴入BLM后第14天给人工冬虫夏草菌液灌胃,并与正常小鼠进行对照。第28天收获其支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,右肺行苏木精-伊红(HE)和Masson三色染色,并观察电镜下细胞超微结构的改变,左肺经酸解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中转化生长因子-β(transforming growth factor-β1,TGF-β1),干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ),白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)的浓度。结果：虫草菌液干预组与模型组比较,小鼠肺系数明显下降(P<005)；肺泡炎、纤维化程度均有改善(P<005),其中人工冬虫夏草菌液防治组改善最明显；肺HYP含量下降(P<005)；BALF中TGF-β,IL-4含量亦明显下降(P<005)；防治组可使IFN-γ含量升高(P<005)。结论：人工冬虫夏草菌液可以在某种程度上减轻BLM诱导的肺泡炎及肺纤维化程度,对肺纤维化有一定预防作用；其作用机制可能是通过抑制TGF-β1在肺组织中的表达,并调整Ⅰ型/Ⅱ型细胞因子平衡达到的。     

补肺益肾方对TGF-β1/BMP-4诱导的肺血管平滑肌细胞TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的:探讨补肺益肾方对转化生长因子-β1(TGF-β1)/骨形成蛋白-4(BMP-4)诱导的肺血管平滑肌细胞增殖及TGF-β1/Smad信号传导的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:应用TGF-β1/BMP-4诱导人肺动脉平滑肌细胞增殖。细胞分为正常组(10%正常大鼠血清),诱导增殖组(含7.5μg·L-1TGF-β1与5.0μg·L-1BMP-4的10%正常大鼠血清),4%补肺益肾方含药血清(含7.5μg·L-1TGF-β1与5.0μg·L-1BMP-4,6%正常大鼠血清及4%补肺益肾大鼠血清),6%补肺益肾方含药血清(含7.5μg·L-1TGF-β1与5.0μg·L-1BMP-4,4%正常大鼠血清及6%补肺益肾大鼠血清)及8%补肺益肾方含药血清组(含7.5μg·L-1TGF-β1与5.0μg·L-1BMP-4,2%正常大鼠血清及8%补肺益肾大鼠血清)。24 h后,显微镜下观察细胞的密度,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brd U)法检测细胞增殖,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Smad1,2,3和5以及p-Smad2/3蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1),结缔组织生长因子(CTGF),分化抑制因子-1(ID-1)和ID-2 mRNA的表达。结果:TGF-β1/BMP-4作用24 h后,细胞密度增加、细胞增殖率显著增加(P0.05),补肺益肾方抑制TGF-β1/BMP-4诱导的细胞增殖,显示出浓度依赖性,其中8%浓度显著抑制细胞增殖(P0.01)。TGF-β1/BMP-4及补肺益肾方均不影响Smad1,2,3和5蛋白的表达;但TGF-β1/BMP-4诱导p-Smad2/3的表达(P0.05),8%补肺益肾方显著抑制TGF-β1/BMP-4诱导的p-Smad2/3表达(P0.05)。TGF-β1/Smad2通路的下游效应基因的检测发现,TGF-β1/BMP-4及补肺益肾方均不影响PAI-1,ID-1和ID-2 mRNA的表达;但TGF-β1/BMP-4诱导后,CTGF mRNA表达水平的显著增加(P0.01),8%补肺益肾方抑制TGF-β1/BMP-4诱导的CTGF mRNA的表达(P0.05)。结论:补肺益肾方抑制TGF-β1与BMP-4合用诱导的肺动脉平滑肌细胞的增殖,抑制p-Smad2/3/CTGF通路的活化是可能的作用途径。     

转化生长因子β1刺激大鼠肺成纤维细胞增殖的体外研究

目的: 探讨转化生长因子β₁(TGF-β₁)对大鼠肺成纤维细胞体外增殖的影响。 方法: 体外原代及传代培养SD大鼠肺成纤维细胞,传至第4代,进行细胞增殖实验。细胞随机分为5组,即无血清细胞基础培养液(DMEM)组、分别含10.0,5.0, 2.5, 1.25 μg·L^-1 TGF-β₁ DMEM组。分别在24, 48, 72 h 3个不同刺激时间点应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)观察SD大鼠肺成纤维细胞增殖情况。进行统计学方差分析及多重比较,探讨TGF-β₁刺激大鼠肺成纤维细胞增殖的最佳浓度和最佳时间点。 结果: 24 h时间点各组数据经方差分析,差异无统计学意义。48 h时间点各组数据结果进行非参数检验,P<0.05,差异有统计学意义。72 h时间点各组数据结果进行方差分析,P<0.05,差异有统计学意义;进一步进行多重比较:与空白组比较,TGF-β₁ 10.0, 2.5 μg·L^-1组(P<0.05),TGF-β₁ 1.25, 2.5 μg·L^-1组(P<0.01);其余各组比较均无显著差异。 结论: TGF-β₁刺激质量浓度2.5 μg·L^-1, 作用于大鼠肺成纤维细胞72 h,细胞增殖显著。