痛泻要方组成药物对大鼠结肠平滑肌运动的影响及机制

目的 :观察痛泻要方拆分成分防风(RS)、白术(LA)和白芍(WPR)对离体大鼠结肠平滑肌的影响,并探讨其部分机制。 方法 : 制备大鼠结肠平滑肌肌条,以9 g ·L^-1 NaCl溶液为对照,观察白术、白芍和防风对平滑肌自发收缩的影响和防风对乙酰胆碱(Ach)引起的肌条收缩的影响,并用3种工具药(纳络酮(NLT)、心得安(XDA)、酚妥拉明(FILM))初步探讨了防风的作用机制。 结果: 与NS组相比较,白术、白芍均对大鼠平滑肌有促进收缩的作用,且白术的作用大于白芍;防风各剂量组(10~40 g ·L^-1)均对平滑肌收缩有剂量依赖性的抑制作用。不同浓度的防风对Ach引起的肌条收缩作用均有抑制,并呈剂量依赖关系。先用工具药充分孵育后再加入RS,与对照组(NS+RS)比较,NLT+RS组面积的回升有统计学意义(P<0.05);FTLM组振幅和面积回升差异均有统计学意义(P<0.01),与阴性对照组(NS)的差异则无统计学意义。 结论: 痛泻要方主要成分白术和白芍对大鼠结肠平滑肌均有促进收缩的作用。防风有抑制作用,其作用机制与肾上腺素能α受体有关,与胆碱能M受体可能也有一定关系。     

痛泻要方组成药物对大鼠结肠平滑肌运动的影响及机制

目的 :观察痛泻要方拆分成分防风(RS)、白术(LA)和白芍(WPR)对离体大鼠结肠平滑肌的影响,并探讨其部分机制。 方法 : 制备大鼠结肠平滑肌肌条,以9 g ·L^-1 NaCl溶液为对照,观察白术、白芍和防风对平滑肌自发收缩的影响和防风对乙酰胆碱(Ach)引起的肌条收缩的影响,并用3种工具药(纳络酮(NLT)、心得安(XDA)、酚妥拉明(FILM))初步探讨了防风的作用机制。 结果: 与NS组相比较,白术、白芍均对大鼠平滑肌有促进收缩的作用,且白术的作用大于白芍;防风各剂量组(10~40 g ·L^-1)均对平滑肌收缩有剂量依赖性的抑制作用。不同浓度的防风对Ach引起的肌条收缩作用均有抑制,并呈剂量依赖关系。先用工具药充分孵育后再加入RS,与对照组(NS+RS)比较,NLT+RS组面积的回升有统计学意义(P<0.05);FTLM组振幅和面积回升差异均有统计学意义(P<0.01),与阴性对照组(NS)的差异则无统计学意义。 结论: 痛泻要方主要成分白术和白芍对大鼠结肠平滑肌均有促进收缩的作用。防风有抑制作用,其作用机制与肾上腺素能α受体有关,与胆碱能M受体可能也有一定关系。     

槟榔促大鼠结肠平滑肌收缩的量效及机制探讨

目的：观察槟榔对离体大鼠结肠平滑肌收缩运动的影响,并初步探讨其机制。方法：制备大鼠结肠平滑肌肌条,以9g/LNaCl溶液（NS）、槟榔为对照组,分别记录单独使用槟榔和阻断剂（酚妥拉明、维拉帕米和阿托品）孵育后槟榔引起的收缩效应。结果：不同浓度槟榔对离体大鼠结肠平滑肌的促进作用明显,与NS对照组比较,槟榔0.1g/L、1g/L、10g/L浓度时引起的肌条收缩最大振幅和面积均有统计学意义（P〈0.05）;与单独槟榔组比较,阻断剂维拉帕米和阿托品对槟榔引起的肌条收缩有抑制作用,其最大收缩振幅和面积均有统计学意义（P〈0.05）;而阻断剂酚妥拉明对肌条的收缩振幅和面积的影响均无统计学意义（P〉0.05）。结论：槟榔对大鼠结肠平滑肌的收缩活动有兴奋作用,且呈正相剂量关系,引起的收缩效应可被M受体阻断剂阿托品和Ca2＋阻断剂维拉帕米阻断,而未能被α-受体阻断剂酚妥拉明阻断。     

痛泻要方对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠肥大细胞及辣椒素受体的影响

目的：通过观察腹泻型肠易激综合征（IBS—D）大鼠结肠肥大细胞以及辣椒素受体表达的变化,探讨病泻要方治疗腹泻型IBS—D的可能机制。方法：40只Wistar大鼠随机分为4组,正常组、模型组、阳性对照组、治疗组,每组10只。采用番泻叶＋束缚应激刺激复制IBS—D动物模型,正常组及模型组予生理盐水灌胃,对照组予得舒特灌胃,治疗组予痛泻要方颗粒剂灌胃,治疗2周。应用甲苯胺蓝染色检测结肠肥大细胞表达;应用免疫组化及实时荧光定量PCR检测结肠辣椒素受体蛋白及其mRNA表达。结果：模型组大鼠结肠肥大细胞增多,结肠辣椒素受体蛋白及其mRNA阳性表达增强,与正常组比较,有统计学意义（P〈0．05）;治疗组及阳性对照组大鼠结肠肥大细胞数目减少,结肠辣椒素受体蛋白阳性分布面积及其mRNA表达减少,与模型组比较,有统计学意义（P〈0．05）;治疗组与阳性对照组比较,肥大细胞及辣椒素受体变化无统计学意义（P〉0．05）。结论：IBS—D内脏敏感性增高及胃肠运动功能紊乱,与肥大细胞增多、辣椒素受体异常表达相关;痛泻要方可能通过调控肥大细胞和辣椒素受体发挥缓解腹泻型IBS—D的效应。     

痛泻要方核心药组论证

方剂都有其特定的组成药物,而组成药物中的核心配伍药组则显得尤为关键,它决定着整个方剂的主要功用和主治取向.从中医方剂配伍理论、中医文献资料、现代药理研究、中医临床运用等方面论证白术、白芍为痛泻要方的核心药组.     

痛泻要方加减防风对实验性UC大鼠结肠黏膜的影响

目的:观察痛泻要方中加减防风的分量对溃疡性结肠炎(UC)结肠黏膜过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)蛋白的影响,探讨防风在方中的作用。方法:雌性SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只。用50%2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)乙醇液复制大鼠UC模型,药物组按生药18,20,22 g·kg-1剂量,分别灌胃给予缺防风方、防风减半方及全方提取物,阳性组按0.3 g·kg-1剂量给予柳氮磺吡啶(SASP),灌胃体积均为10 m L·kg-1,空白组、模型组灌服等量生理盐水,持续给药28 d。从大鼠体重变化、结肠组织黏膜损伤指数及结肠病理切片等方面考察痛泻要方加减防风的量对溃疡性结肠炎的防治作用,采用免疫组化检测PPAR-γ蛋白表达水平。结果:肉眼观察模型组大鼠结肠组织黏膜层可见炎症和溃疡形成,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05),证实造模成功。模型组大鼠结肠组织PPAR-γ蛋白表达量均低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,痛泻要方全方组PPAR-γ基因和蛋白表达量较防风减量组、缺防风组有明显升高,全方组及防风剂量减半组与模型组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:防风作为痛泻要方的使药,有引导药物进入病变部位的作用,防风用量在一定程度上决定痛泻要方对UC的治疗效果。     

防风对大鼠和小鼠胃肠运动的抑制作用及机制研究

目的观察防风(RS)对大小鼠胃肠运动的抑制作用并探讨其机制。方法采用苯酚红测定法观察RS对小鼠胃肠运动的影响;制备大鼠结肠平滑肌肌条并放置在浴槽中,滴加RS及其他试剂并记录肌条的收缩曲线加以分析;分离并培养大鼠结肠平滑肌细胞,探针孵育后,不同缓冲液条件下测定NS及RS处理前后细胞的荧光值并加以分析。结果 RS各组对小鼠小肠推进和胃排空均有抑制作用;RS各组均抑制离体大鼠结肠平滑肌肌条收缩,抑制Ach引起的肌条收缩。RS剂量与峰高和同线下面积有量效关系。不同缓冲液对RS处理后的荧光值和抑制率有显著性差异。结论防风可抑制小鼠小肠推进及胃排空,抑制离体大鼠结肠平滑肌收缩,机制与肾上腺素能α受体及M胆碱受体有关,与阿片受体和β受体无关;防风可降低细胞内游离钙离子浓度,其机制与抑制细胞外钙离子内流有关,与抑制细胞内钙离子释放无关。     

健脾化湿颗粒对大鼠结肠上皮细胞OCLN、AQPs及平滑肌细胞cAMP、AC的影响

目的探究健脾化湿颗粒对大鼠结肠上皮细胞OCLN、AQPs及平滑肌细胞cAMP、AC的影响。方法采用CCK-8法检测不同浓度健脾化湿颗粒对上皮细胞的存活率影响;利用Western blot检测健脾化湿颗粒对上皮细胞OCLN、AQP3、AQP4蛋白表达的影响;分别用健脾化湿颗粒及Ach、阿托品干预平滑肌细胞后,利用显微标尺测量平滑肌细胞长度,ELISA法检测平滑肌细胞cAMP、AC的水平。结果健脾化湿颗粒(≤1 mg/mL)处理上皮细胞24 h后,细胞存活率≥90%。与正常组比较,健脾化湿颗粒上调上皮细胞OCLN、AQP3,AQP4蛋白表达,促进结肠平滑肌的舒张,下调结肠平滑肌AC、cAMP的水平(P<0.05,P<0.01)。健脾化湿颗粒可抑制Ach引起的平滑肌细胞收缩,及cAMP、AC水平的上调;与阿托品协同作用促进平滑肌细胞舒张,及cAMP、AC水平的下调(P<0.05,P<0.01)。结论健脾化湿颗粒可能通过调节离体大鼠结肠OCLN、AQP3、AQP4蛋白表达及平滑肌细胞舒缩功能来改善D-IBS腹泻症状。     

痛泻要方对大鼠结肠组织病理形态及抗炎机制研究

目的:观察痛泻要方治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的疗效,并探讨其作用机制。方法:采用TNBS/乙醇灌肠法制备结肠炎大鼠模型,光镜观察结肠组织病理形态变化并评分,采用ELISA法检测大鼠血清IL-2、IL-10、IL-6水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血清IL-2、IL-6含量均明显升高,IL-10含量显著下降,差异具有统计学意义(P0.01);痛泻要方高、中、低剂量组血清IL-2、IL-6水平均较模型组降低,而IL-10水平明显升高,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:痛泻要方能够通过下调促炎因子IL-2、IL-6的表达,升高抗炎因子IL-10的表达,促进抗炎和抑炎因子的平衡,调节肠道异常免疫反应、抑制炎症反应,修复溃疡,进而防治UC。     

痛泻要方破壁饮片对大鼠离体结肠平滑肌收缩的影响

目的研究痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液对大鼠离体结肠平滑肌收缩的影响。方法以不同质量浓度0、6、24、48和60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液、先加入10~(-4)mol/L乙酰胆碱(Ach)再加入60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液、先加入100mmol/L氯化钾(KCl)再加入60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液、先加入1μmol/L阿托品(Atr)再加入60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液,分别作用于大鼠离体结肠平滑肌,于PowerLab8/30生物机能系统记录大鼠离体结肠平滑肌收缩张力、频率和振幅。结果质量浓度为24、48、60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液可显著抑制大鼠离体结肠平滑肌自发性收缩张力(P0.05),作用呈剂量浓度依赖性,但对频率和振幅无明显影响;60mg(生药)/mL痛泻要方传统中药饮片及破壁饮片水提液,可显著抑制Ach、KCl诱导所致大鼠离体结肠平滑肌收缩张力、频率和振幅(P0.05),同时可拮抗Atr诱导所致大鼠离体结肠平滑肌松弛的张力、频率和振幅(P0.05),使大鼠离体结肠平滑肌恢复正常运动。结论痛泻要方破壁饮片水提液可有效抑制大鼠离体结肠平滑肌自发运动收缩张力;可显著抑制Ach、KCl诱导所致大鼠离体结肠平滑肌收缩,对抗Atr诱导的大鼠离体结肠平滑肌松弛,其作用效果与传统中药饮片一致。     

苍术对大鼠离体小肠、结肠收缩活动的影响

30－200％浓度的苍术水煎剂剂量依赖性减小大鼠离体近端结肠纵行肌条的收缩波平均振幅,其作用可部分被心得安阻断,酚妥拉明、消炎痛和L－NNA对其活动无明显影响,提示苍术对大鼠结肠纵行肌的兴奋作用部分由肾上腺素能β受体介导。苍术对大鼠离体小肠、近端结肠环行肌和远端结肠纵、环行肌的收缩活动无明显影响。     

大承气汤对大鼠肠平滑肌细胞内磷酸二酯酶的影响

目的：探讨大承气汤的“通里功下”作用与肌醇脂质信号系统的关系,进一步阐明大承气汤的作用机制,方法：采用反相高效液相色谱法分别测定了手术对照组,肠梗阻模型组,不同剂量大承气汤组的大鼠肠平滑肌细胞内磷酸二酯酶（PDE）的含量,结果：体内实验发现：50％,100％,250％,大承气汤可使肠梗阻大鼠肠平滑肌细胞内PDE含量明显升高（P＜0．05）,体外实验发现：50％,100％,250％大承气汤可使肠便阻大鼠平滑肌细胞内PDE含量明显升高（P＜0．05）,结论：大承气汤可使大鼠肠平滑肌细胞内钙调蛋白（CaM)活性提高,由此推断,大承气汤的通里攻下作用很可能是通过激活肌醇脂质（IP3）信号转导系统使胃肠道平滑肌细胞内Ca2 释放增加,再通过CaM间接地激活一系列的蛋白激酶而实现。     

黄芪对大鼠离体胃平滑肌条运动的影响

黄芪可增高大鼠胃底、胃体平滑肌条的张力,增加幽门环行肌条的运动指数,并呈一定的剂量效应关系。阿托品、六烃季胺、异博定、消炎痛可不同程度地阻断黄芪对胃离体肌条的兴奋效应     

紫苏梗对大鼠离体结肠肌条收缩运动的影响

[目的]观察紫苏梗水提液对正常及肢体缺血-再灌注大鼠结肠环形肌条收缩波平均振幅和张力的影响。[方法]利用肢体缺血-再灌注大鼠制备胃肠动力障碍(FD)模型。取大鼠结肠环形肌条,置于恒温灌流肌槽内,通过多导生理记录仪记录紫苏梗在结肠环形肌条收缩活动中的作用。[结果]紫苏梗水提液能升高FD模型大鼠结肠环形肌条收缩波平均振幅、降低结肠张力,对正常大鼠则无明显影响。[结论]紫苏梗水提液对FD模型大鼠结肠环形肌条收缩运动具有明显兴奋作用,而对正常大鼠结肠收缩运动无兴奋作用。     

生、煨葛根对大鼠离体十二指肠平滑肌运动的影响

目的观察生、煨葛根对大鼠离体十二指肠平滑肌运动的影响,以探讨葛根炮制前后的止泻作用差异和相关作用机制。方法采用离体肠张力检测装置,以平均张力为主要指标,观察生、煨葛根对大鼠离体十二指肠平滑肌自发运动的影响以及氯化钡（BaCl2）、乙酰胆碱（Ach）、去甲肾上腺素（NA）、异丙肾上腺素（ISO）与生、煨葛根对肠肌作用的相互影响。结果生、煨葛根在2．4～29．1g／L范围内能抑制肠肌的自发运动,使平均张力降低且呈剂量依赖性;生、煨葛根低（5．0g／L）、中（14．8g／L）、高（29．1g/L）剂量均能抑制BaCl2引起的痉挛性收缩;生、煨葛根对Ach引起的肠肌兴奋有拈抗作用,但Ach对生、煨葛根抑制作用后的肠肌未显示出兴奋作用;生、煨葛根对NA、ISO引起的肠肌抑制有抑制作用,NA、ISO对生、煨葛根引起的肠肌抑制仍能表现出抑制作用。结论生、煨葛根均能抑制大鼠离体十二指肠平滑肌运动,煨葛根较生葛根作用明显;其作用机制可能是通过阻断M受体或直接作用于平滑肌,降低平滑肌细胞内Ca2＋浓度实现的。     

黄连水煎剂对未孕大鼠离体子宫平滑肌运动的影响

目的 :探讨黄连水煎剂对未孕大鼠离体子宫平滑肌运动的影响。方法 :利用BL 3 10智能型生物信号显示与处理系统记录平滑肌条的等长收缩活动。结果 :黄连水煎剂能明显延长收缩波持续时间 ,增加收缩波面积且有显著正相剂量效应关系 ,还可增加收缩波的振幅但无剂量效应关系 ,黄连水煎剂的这作用可被异搏定 (L型电压依赖性Ca2 通道阻断剂 )所阻断。结论 :黄连水煎剂在体外可增强子宫平滑肌的收缩 ,该作用是通过L型钙通道而发挥的。     

苍术对大鼠离体胃平滑肌条运动的影响

苍术水煎剂可增高大鼠胃底和胃体平滑肌条的张力,并呈一定的剂量效应关系。阿托品、六烃季胺和异搏定可不同程度地阻断苍术对胃平滑肌条的兴奋作用     

紫苏梗影响结肠平滑肌细胞收缩作用的实验研究

[目的]观察紫苏梗水提液对肢体缺血再灌注大鼠离体结肠平滑肌细胞运动的影响,并探讨其作用机制.[方法]建立肢体缺血/再灌注大鼠胃肠动力障碍模型.酶法分离大鼠结肠平滑肌细胞,采用图像分析系统测定细胞长度,利用工具药探讨机制.[结果]肢体缺血,再灌注后,结肠平滑肌细胞平均长度明显增加.紫苏梗水提液可明显增加模型大鼠结肠平滑肌细胞的收缩率,最适剂量为50g/L.钙鳌合剂(EGTA)和钙通道阻断剂盐酸维拉帕米均可完全抑制紫苏梗水提液对结肠平滑肌细胞的收缩作用.[结论]紫苏梗水提液对肢体缺血再灌注大鼠离体单个结肠平滑肌细胞有明显的收缩作用,其作用主要通过胞外Ca2+内流介导.