红霉素在早产鼠高氧肺损伤中对白细胞介素6、8及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达的影响

目的 探讨红霉素在早产鼠高氧肺损伤中对白细胞介素6 （IL-6）,IL-8及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的干预作用.方法 96只早产新生SD大鼠生后1d分为四组：Ⅰ组空气暴露＋生理盐水、Ⅱ组空气暴露＋红霉素、Ⅲ组高氧暴露＋生理盐水、Ⅳ组高氧暴露＋红霉素,每组各24只.四组分别于高氧或空气暴露后1、7、14d处死取肺组织做病理学检查.采取双抗体夹心酶联免疫吸附试验分析肺组织匀浆细胞因子IL-6、IL-8和γ-GCS的水平,并采取半定量逆转录聚合酶链反应测定γ-GCS mRNA的表达.结果 Ⅰ、Ⅱ组肺组织无明显病理改变,Ⅲ组肺泡炎性改变及水肿较Ⅳ组更为明显.Ⅳ组γ-GCS水平在7、14 d较Ⅲ组降低,但是γ-GCS mRNA表达较γ-GCS mRNA均明显增强（P均＜0.05）.Ⅲ组1、7、14 d IL-6及IL-8水平较Ⅰ组均显著增强（P均＜0.05）.Ⅳ组IL-6水平在1、7、14d与Ⅲ组比较,差异均有统计学意义（P均＜0.05）,而IL-8水平仅在7、14d较Ⅲ组明显下降（P均＜0.05）.结论 氧化爆发诱导的炎症介质IL-6及IL-8参与高氧肺损伤发病过程,红霉素可抑制其释放,影响γ-GCS活性从而提高谷胱甘肽抗氧化能力.     

盐酸氨溴索对新生大鼠高氧慢性肺损伤肺纤维化的干预研究

目的探讨盐酸氨溴索对高氧性肺损伤新生大鼠肺组织纤维化的干预作用。方法出生12 h内的清洁级SD大鼠30只作为研究对象,随机分成3组(每组10只):空气对照组(A组)、高氧组(B组)、高氧加盐酸氨溴索组(C组)。除A组外,B组和C组均建立高氧肺损伤动物模型。C组新生大鼠每天腹腔注射溶于9 g/L氯化钠溶液中的盐酸氨溴索[20 mg/(kg.d)],A、B组新生鼠每日腹腔注射等量9 g/L氯化钠溶液,持续14 d。第14 d处死,取其肺组织切片,伊红染色法(HE)观察其肺组织病理变化;Masson三色染色图像定量分析计算其胶原纤维阳性面积百分比,酶联免疫分析法(ELISA法)测定肺组织Ⅲ和Ⅳ型胶原蛋白,判断其肺纤维化程度。结果 B组第14天肺组织病理发现间质细胞增多,肺泡数目减少,肺组织出现纤维化改变;C组肺组织病理改变明显减轻。与A组比较,B组Ⅲ型胶原及Ⅳ型胶原表达明显增多,胶原纤维阳性面积百分比明显增高(P<0.05)。C组与B组比较,Ⅲ型胶原及Ⅳ型胶原表达及胶原纤维阳性面积百分比明显下降(P<0.05)。结论盐酸氨溴索早期干预可减轻高氧性肺损伤新生大鼠的肺组织纤维化程度。     

脓毒症大鼠急性肺损伤肺血管通透性、炎症因子、诱导型一氧化氮合酶的变化及意义

目的:观察脓毒症大鼠急性肺损伤肺血管通透性、炎症因子、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的变化特点及其意义.方法:24只雄性SD大鼠随机分为脓毒症组和对照组,脓毒症组按5 mg/kg体重腹腔注射脂多糖(LPS),对照组给予等量生理盐水,于注射后2h、6h经腹主动脉采血、处死,比较动脉血气分析、ELISA法检测的肺组织iNOS、白介素-6(IL-6)含量、右下肺肺组织病理切片计算的病理学肺损伤积分.结果:与对照组比较,脓毒症组大鼠氧合指数显著下降、肺组织iNOS、IL-6含量、病理学肺损伤积分均显著增加,P＜0.01.结论:脓毒症大鼠肺iNOS的过度表达增加了炎症因子的释放、增加肺血管通透性,加重肺损伤.     

水通道蛋白1、5在肺出血新生大鼠肺组织中的表达

目的研究新生大鼠肺出血发生的过程中水通道蛋白1、5在肺中表达的变化和意义。方法将80只4～5 d龄新生SD大鼠分为4组,对照组1组和实验组3组,对照组为常温常氧6 h;实验组分别为低温缺氧1 h复温供氧2 h、低温缺氧2 h复温供氧2 h和低温缺氧4 h复温供氧2 h,用断头法处死大鼠后开胸取肺做病理切片和免疫组化染色。结果观察到随着低温缺氧时间的延长病理改变可从正常肺组织向着肺水肿、点状肺出血、局灶性肺出血至弥漫性肺出血的方向发展。水通道蛋白1(AQP 1)主要表达于胸膜脏层周围毛细血管内皮细胞腔膜面和基侧膜面以及脏层胸膜的间皮细胞,肺泡Ⅱ型上皮细胞顶膜面也有少量表达,AQP 1还存在于气管腔上皮细胞顶膜面和支气管黏膜下腺上皮细胞。水通道蛋白5(AQP 5)表达于Ⅰ型上皮细胞的顶膜。随着低温缺氧时间的延长,复温供氧后AQP 1在肺毛细血管内皮细胞表达明显下降,这种减少全肺均能观察到,肺泡Ⅰ型上皮细胞AQP 5的表达也一致减少。对应的病理改变为细胞炎症反应,肺水肿、肺泡腔及间质出血。结论 AQP 1、AQP 5与新生大鼠肺出血关系密切,AQP 1、AQP 5可能与肺水肿、肺出血的形成有关。通过调节AQP 1及AQP 5的表达可能预防新生儿肺出血的发生。     

雷公藤内酯醇对氧诱导早产儿视网膜病变新生鼠视网膜血管形成的影响

目的探讨雷公藤内酯醇对氧诱导早产儿视网膜病变新生鼠视网膜血管形成的影响。方法将28只SD新生鼠随机分为空白对照组、阴性对照组、阳性对照组和雷公藤内酯醇治疗组。高氧诱导建立新生鼠ROP模型。7组分别腹腔注射生理盐水、血管抑素、雷公藤内酯醇。观察并比较视网膜血管形态改变、血管内皮细胞核数及VEGF表达。结果视网膜铺片显示,第17d阴性对照组血管密度增高、形态异常,雷公藤内酯醇治疗组血管形态和密度较阴性对照组明显好转。第17d,雷公藤内酯醇治疗组视网膜VEGF表达和血管内皮细胞核数与阴性对照组相比均显著降低(P<0.05),且随着剂量的加大,其抑制新生血管形成作用组间增强。结论高氧可成功诱导ROP动物模型。雷公藤内酯醇在高氧诱导的早产儿视网膜病变新生SD大鼠模型中对视网膜发挥保护作用。     

地塞米松对实验性博莱酶素致大鼠肺纤维化防治作用观察

目的观察地塞米松对博莱酶素致大鼠肺纤维化的防治作用。方法32只大鼠随机分为对照组（n=8）、治疗组（n=12）和致伤组（n=12），治疗组和致伤组经气管内注射博莱酶素制备肺急性损伤模型，对照组注射蒸馏水。造模后，治疗组每日经腹腔注射地塞米松进行治疗，致伤组及对照组每日给予生理盐水。于不同时期（3d、7d、14d、27d）处死大鼠后进行肺泡灌洗，瑞氏染色细胞分类，肺组织HE染色，测定肺组织胶原总量。结果病理切片显示致伤组大鼠肺泡间隔明显增宽，较多纤维母细胞增生及炎性细胞浸润，后期肺组织实变；治疗组各期病理变化较致伤组明显减轻，且在后期肺泡壁有恢复的倾向。肺泡灌洗液中性粒细胞致伤组和治疗组大鼠在第7天时达到峰值，但治疗组低于致伤组（P〈0．05），第14天时明显低于致伤组（P〈0．01）；肺胶原总量致伤组和治疗组在第14天时达到峰值，但致伤组明显高于对照组（P〈0．01），治疗组则明显低于致伤组（P〈0．01）。结论地塞米松通过抑制肺部炎性细胞在肺组织中的聚集、浸润，以及纤维细胞增殖导致的胶原分泌增加，有效防治肺纤维化。     

穴位注射胞二磷胆碱对脑外伤大鼠学习记忆功能的影响

目的观察足三里穴位注射胞二磷胆碱疗法对脑外伤大鼠学习记忆功能的影响。方法采用改进的Feeney 法建立大鼠脑外伤模型。40 只大鼠随机分为假手术组、对照组、穴位注水组、腹腔给药组和穴位注药组,每组8 只。假手术组不造模,腹腔注射等体积生理盐水。其他组造模后,对照组：腹腔注射等体积生理盐水;穴位注水组：足三里穴注射等体积生理盐水;腹腔给药组：胞二磷胆碱500 mg/kg 腹腔注射;穴位注药组：胞二磷胆碱以生理盐水溶解为500 mg/ml,500 mg/kg 足三里穴注射。连续14 d。通过水迷宫实验和避暗实验测定大鼠学习记忆功能。结果在Morris 水迷宫实验中,除假手术组外,穴位注药组大鼠逃避潜伏期短于其他组(P<0.05);在避暗实验中,穴位注药组大鼠学习记忆潜伏期较其他组长(P<0.05),错误次数较少。结论穴位注射胞二磷胆碱能明显改善脑外伤大鼠的学习记忆功能。     

芪丹颗粒对博莱霉素致大鼠肺纤维化时FasL、Caspase-3表达的作用

目的观察芪丹颗粒对博莱霉素A5诱导的肺纤维化大鼠病变严重程度及FasL、Caspase-3表达的影响,以探讨其可能的作用机制。方法70只健康雄性清洁级Sprague-Daw ley(SD)大鼠,随机分成4组。28、42d正常对照组(对照组)各5只,模型组各10只,芪丹组各10只,氢可组各10只。对照组气管内和灌胃均用生理盐水,余SD大鼠气管内灌注博莱霉素A5诱导肺纤维化,第15d开始每日分别给予芪丹颗粒剂灌胃(芪丹组3125mg/kg)、腹腔注射氢可(氢可组25mg/kg)。分别在第28、42d处死。苏木素-伊红(HE)染色观察肺泡炎及纤维化程度,免疫组化观察石蜡切片中FasL及Caspase-3的表达。结果芪丹颗粒剂组较氢可组及模型组肺纤维化及肺泡炎程度轻。FasL表达芪丹组28、42d与对照组差异有统计学意义,P0.01;与模型组及氢可组比较差异无显著性。Caspase-3芪丹组与模型组及氢可组比较表达差异无显著性意义。结论芪丹颗粒剂可减轻博莱霉素A5诱导的肺纤维化大鼠的肺纤维化及肺泡炎。肺纤维化形成后期应用芪丹颗粒剂对FasL及Caspase-3的表达无减轻。     

高浓度氧对未成年大鼠肺部炎症反应的影响

目的 探讨高浓度氧对未成年大鼠肺部炎症反应的影响.方法 将40只出生21 d的SD大鼠按随机数字表法分为空气对照组及高氧暴露12、24、48、72 h组,每组8只,分别将大鼠置于空气和常压高氧箱(氧含量达92%～94%)中.于相应时间点采用放血法处死大鼠后取肺组织,并行支气管肺泡灌洗.采用硫代巴比妥酸法和比色法分别测定肺组织丙二醛(MDA)含量及髓过氧化物酶(MPO)活性;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10含量;观察肺组织病理改变,并进行肺损伤评分.结果 与空气对照组比较,高氧暴露12 h肺组织MDA含量(mmol/g)即显著升高(2.24±0.43比1.57±0.31),MPO活性(U/g)于高氧暴露24 h显著升高(1.24±0.25比0.69±0.22),并均随高氧暴露时间延长逐渐增加(P<0.05或P<0.01).BALF中TNF-α、IL-6和IL-10含量于高氧暴露24 h时较空气对照组显著增加[TNF-α(ng/L):135.2±44.0比94.5±22.3,IL-6(ng/L):73.1±14.2比55.7±17.3,IL-10(ng/L):67.9±21.7比48.2±7.6,P<0.05或P<0.01];但高氧暴露48 h时较24 h时显著降低(48 h时BALF中TNF-α、IL-6、IL-10分别为105.4±17.0,54.3±17.4,50.9±6.9,均P<0.05).高氧暴露12 h时肺损伤评分(分)即较空气对照组显著升高(4.5±1.4比1.3±0.5),并随高氧暴露时间延长进一步升高(P<0.05或P<0.01).结论 高浓度氧可引起未成年大鼠肺部炎症损伤;炎症细胞因子的出现高峰均在高氧暴露24 h.     

富氢水干预对耐力训练大鼠氧化-抗氧化能力的影响

目的:观察自由饮用富氢水8周,中等强度耐力训练大鼠氧化应激损伤指标、抗氧化指标的变化,分析富氢水对运动性氧化应激损伤的保护作用。方法:将40只110—140g SD雄性大鼠随机分为4组:安静对照组(N=8,C组);运动对照组(N=12,CS组);补充富氢水组(N=8,H组);补充富氢水运动组(N=12,HS组)。C组、CS组大鼠自由进食,饮水。H组、HS组大鼠自由进食,饮用富氢水,实验共持续8周。自第5周开始,CS组、HS组大鼠进行中等强度耐力跑台训练,训练4周。训练结束后次日,全部大鼠在24h内心尖取血,分离血清。测定血清氧化应激指标(MDA、8-OHdG、3-NT);抗氧化指标(TAOC、T-SOD、CAT、GSH-Px)。结果:①大鼠血清8-OHdG、3-NT指标无组间差异;运动对照组大鼠血清MDA含量显著高于安静对照组(P0.05);补充富氢水运动组大鼠血清MDA含量显著低于运动对照组(P0.05)。②大鼠血清T-SOD活性水平无组间差异;运动对照组大鼠血清CAT活性极显著高于安静对照组(P0.01);补充富氢水运动组大鼠血清CAT活性、GSH-Px活性、T-AOC水平均显著高于运动对照组(P0.05)。结论:4周中等强度耐力训练引起大鼠脂质过氧化损伤,8周自由饮用富氢水显著降低运动性氧化应激引起的脂质过氧化损伤并显著提高大鼠的抗氧化能力。     

胰岛素样生长因子结合蛋白-2与足月及早产新生大鼠高氧肺损伤的关系

目的 探讨高浓度氧对足月及早产新生大鼠肺发育的影响及高氧肺损伤与胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)的关系.方法 将孕22 d自然出生(足月)及孕21 d行剖宫术提前娩出(早产)的新生大鼠在生后2 d随机分为足月空气组(I组)、足月高氧组(Ⅱ组)、早产空气组(Ⅲ组)、早产高氧组(Ⅳ组).Ⅱ、Ⅳ组持续暴露于氧含量为85%的氧箱中,I、Ⅲ组置于同室空气中.每日记录大鼠存活率,分别于出生后4、7、10、14和21 d活杀取肺组织标本,作病理学检查、辐射状肺泡计数(RAC).用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别测定IGFBP-2肺表达浓度及mRNA表达.结果 高氧组自出生7 d后大鼠存活率较空气组显著下降(P均0.05).空气组肺组织无炎症病变;高氧组出生7 d和14 d时呈肺泡炎改变,21 d时肺泡炎改变明显加重,且肺泡生成受阻滞,肺泡结构囊泡化;Ⅱ、Ⅳ组各时间点RAC值较相应I、Ⅲ组显著减少(P均<0.01).高氧Ⅱ、Ⅳ组出生4 d和14 d IGFBP-2表达强度均较对应的I、Ⅲ组增强(P均<0.01);IGFBP-2 mRNA表达变化与其肽浓度变化相似.结论 长期高氧暴露可引起足月和早产新生大鼠亚急性肺损伤和肺发育阻滞,IGFBP-2异常表达;这可能是高氧导致亚急性肺损伤及肺发育阻滞的重要机制之一.     

水通道蛋白5在高氧肺损伤中的表达及调节机制

目的探讨水通道蛋白5(AQP5)在高氧肺损伤中的表达及其地塞米松对AQP5的调节作用。方法2周左右Wistar大鼠64只,按随机数字表法分为空气对照组、高氧暴露3、7、14d组和相应的地塞米松干预组。高氧暴露组置于常压氧仓中(O2体积分数≥95%);空气对照组置于同室常压空气中(O2体积分数为21%);各地塞米松干预组在暴露于空气或高氧的同时,经腹腔注射地塞米松5mg·kg-1·d-1,连续3d。采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组化方法观察AQP5的mRNA表达和分布变化,并与地塞米松干预后进行比较分析。结果AQP5主要表达在肺泡型上皮细胞及气道分泌上皮顶质膜;与空气对照组相比,高氧暴露不同时间后,AQP5特异性表达部位保持不变,但随暴露时间延长,AQP5表达呈逐渐减弱趋势,高氧暴露3、7和14d,AQP5mRNA较空气对照组均降低(P均<0.05)。与同期高氧暴露组比较,地塞米松干预后不同时间点AQP5mRNA表达均无明显变化(P均>0.05)。结论高氧肺损伤时AQP5表达降低,可能是高氧肺损伤肺水肿形成的原因之一;而未见地塞米松对高氧肺损伤AQP5的表达有调节作用。     

高氧致大鼠急性肺损伤Toll样受体2和4的变化及意义

目的 探讨Toll样受体(TLRs)在高氧致急性肺损伤(ALI)发病过程中的作用.方法 将32只SD大鼠按随机数字表法分为空气对照组和高氧暴露24、48、72 h组,每组8只.分别于相应时间点活杀8只大鼠,取肺组织标本,测定肺湿/干重(W/D)比值并行肺组织病理评分,用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织TLR2和TLR4的mRNA表达,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)测定肺组织TLR2和TLR4的蛋白表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)含量.结果 各高氧暴露组肺W/D比值均较空气对照组明显增高(P均<0.01).高氧暴露48 h、72 h肺组织病理评分[(2.69±0.53)分,(3.94±0.62)分]均明显高于空气对照组[(0.41±0.38)分,P均<0.01].RT-PCR结果显示,高氧暴露组肺组织TLR2和TLR4 mRNA表达均明显高于空气对照组(0.67±0.15和0.63±0.19),并均于24 h达高峰(1.82±0.33,1.35±0.26,P均<0.05).Western blotting结果显示,高氧暴露组TLR2和TLR4蛋白表达均较空气对照组[(7.20±0.51)%和(14.26±0.19)%]明显增高,分别于48 h、72 h达峰值[(28.12±0.24)%,(81.35±0.82)%,P均<0.05].ELISA结果显示,高氧暴露组肺组织匀浆IL-6含量较空气对照组[(639.38±95.24)pg/L]明显增高,于72 h达高峰[(1 300.58±442.24)pg/L,P<0.05].结论 在高氧引起的ALI中,TLR2和TLR4在肺组织炎症启动和维持中起重要作用.     

Pulmonary toxicity of oxygen

Prolonged exposure to hyperoxia in order to compensate for inefficient ventilation can lead to progressive pulmonary damage and death. Since pulmonary macrophages control bacterial and viral penetration, we studied the effect of hyperoxia on pulmonary alveolar macrophages from newborn and adult rats, kept in air or in a 95% normobaric oxygen atmosphere. The viability of pulmonary alveolar macrophages in bronchoalveolar lavages of newborn rats after 3 d in oxygen was significantly lower than that of newborn rats after 3 days in air. The functional capacity, as measured by the phagocytosis of Candida was similarly affected and these observations mays explain why infections develop. Adult rat macrophages were not sensitive to hyperoxia.     

地塞米松对高氧肺损伤大鼠肺组织基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的影响

目的 观察地塞米松对高氧暴露大鼠肺组织中基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMPs)表达的影响,探讨地塞米松治疗高氧肺损伤的作用机制。方法 2周龄Wistar大鼠32只,随机分为空气组和高氧组(各16只)。高氧暴露7 d后,取两组大鼠各8只检测支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量和肺湿/干重比(W/D),并观察肺组织病理学改变。余16只大鼠行肺组织培养,空气组8只作为空气对照组,高氧组8只各设高氧对照组,高氧 地塞米松1×10-8、1×10-6和1×10-4mol/L组,培养24 h后用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA的表达。结果①与空气组相比,高氧组肺组织出现水肿、出血、炎性细胞浸润;BALF中蛋白含量、W/D明显增高。②高氧对照组MMPs、TIMPs mRNA表达和MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值较空气对照组明显增高。③地塞米松能剂量依赖性下调MMP-2、MMP-9 mRNA表达;对TIMP-1、TIMP-2 mRNA表达有一定程度的抑制效应;随地塞米松浓度的增加,MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值亦逐渐降低。结论 地塞米松下调MMPs mRNA表达,调节MMPs/TIMPs之间的失衡,可能是其减轻高氧肺损伤的机制之一。     

Recombinant tumor necrosis factor/cachectin and interleukin 1 pretreatment decreases lung oxidized glutathione accumulation, lung injury, and mortality in rats exposed to hyperoxia

Single, preexposure, parenteral injection with both recombinant tumor necrosis factor/cachectin (TNF/C) and interleukin-1 (IL-1) prolonged the survival of rats (144 +/- 9 h) in continuous hyperoxia (greater than 99% O2 at 1 atm) when compared with rats injected with boiled TNF/C and boiled IL-1 (61 +/- 2 h), TNF/C alone (61 +/- 2 h), IL-1 alone (62 +/- 2 h), or saline (64 +/- 3 h). After exposure to hyperoxia for 52 h, pleural effusion volume, pulmonary artery pressure, total pulmonary resistance, and lung morphologic damage were decreased in those rats given TNF/C and IL-1 as compared with saline-injected rats. In parallel, ratios of reduced (GSH) to oxidized (GSSG) glutathione were greater (P less than 0.05) in lungs of TNF/C + IL-1-injected rats (91 +/- 20) than of saline-injected rats (30 +/- 4) that had been exposed to hyperoxia for 52 h. No differences were found in superoxide dismutase, glutathione peroxidase, glutathione reductase, glucose-6-phosphate dehydrogenase, or catalase activities in lungs of TNF/C + IL-1- or saline-treated, hyperoxia-exposed rats. Our results indicate that pretreatment with TNF/C and IL-1 favorably altered lung glutathione redox status, decreased lung injury, and enhanced survival of rats exposed to hyperoxia.     

Effect of endogenous nitric oxide on hyperoxia and tumor necrosis factor-alpha-induced leukosequestration and proinflammatory cytokine release in rat airways

OBJECTIVE: To investigate the effects of endogenous nitric oxide on hyperoxia and tumor necrosis factor-alpha-induced leukosequestration and proinflammatory cytokine release in rat airways. DESIGN: Prospective, randomized, controlled animal study. SETTING: Experimental laboratory. SUBJECTS: Male Sprague-Dawley rats weighing 350-500 g. INTERVENTIONS: The rats were pretreated with N(G)-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME; 10 mg/kg) or saline intravenously 4-6 mins before intratracheal administration of tumor necrosis factor-alpha, 95% oxygen, or both, when the vasopressor effect of L-NAME had reached a plateau. MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: Bronchoalveolar lavage fluid was recovered from the airway of rats after exposure to 95% oxygen and tumor necrosis factor-alpha for 6 hrs under ventilator support. Neutrophils in lavage fluid were isolated and examined for the inducible nitric oxide synthase expression by flow-cytometric assay. Tumor necrosis factor-alpha and interleukin-1 beta in lavage fluid were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. The percentage of neutrophils in bronchoalveolar fluid was significantly higher in rats exposed to hyperoxia + tumor necrosis factor-alpha (29.7 +/- 12.5%) compared with rats with hyperoxia (16.3 +/- 1.2%), tumor necrosis factor-alpha (4.2 +/- 1.1%), or room air (5.0 +/- 1.8%) alone (p <.05). Rats exposed to hyperoxia + tumor necrosis factor-alpha had significantly higher concentrations of inducible nitric oxide synthase of neutrophils (350.1 +/- 75.7 mean fluorescence intensity), compared with rats with hyperoxia (64.9 +/- 1.6 mean fluorescence intensity), tumor necrosis factor-alpha (102.6 +/- 15.3 mean fluorescence intensity), or room air (111.2 +/- 25.8 mean fluorescence intensity) alone (p <.05). Rats exposed to hyperoxia + tumor necrosis factor-alpha significantly produced higher concentrations of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-1 beta, compared with rats with tumor necrosis factor-alpha, hyperoxia, or room air alone. Hyperoxia + tumor necrosis factor-alpha also significantly increased growth-related oncogene/cytokine-induced neutrophil chemoattractant (GRO/CINC)-1 in bronchoalveolar fluid, compared with those receiving tumor necrosis factor-alpha alone, hyperoxia alone, or room air alone. L-NAME significantly enhanced the percentage of neutrophil recovery and the production of tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1 beta, and GRO/CINC-1 in airways compared with the corresponding hyperoxia + tumor necrosis factor-alpha treatment alone. CONCLUSIONS: Endogenous nitric oxide may be an important endogenous inhibitor of hyperoxia + tumor necrosis factor-alpha-induced leukocyte recruitment and subsequently tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1 beta, and GRO/CINC-1 release.     

N-乙酰半胱氨酸对高氧肺损伤保护机制与p38丝裂素活化蛋白激酶途径的相关性研究

目的 观察p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)信号途径在高氧肺损伤中的表达,探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)在高氧肺损伤中的保护作用及机制.方法 将30只幼年Wistar大鼠按随机数字表法分为空气对照组(A组)、高氧暴露组(B组)、高氧+NAC干预组(C组)、高氧+p38MAPK特异性抑制剂(SB203580)干预组(D组)、高氧+NAC+SB203580联合干预组(E组),每组6只.实验7 d后,光镜下观察肺组织病理改变,并行肺损伤评分;测定肺湿/干重(W/D)比值、支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)含量、肺通透系数;采用免疫组化法检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)在肺组织中的分布;用蛋白质免疫印迹法检测p-p38MAPK蛋白含量.结果 与A组比较,高氧各组均有不同程度的肺损伤,但药物干预各组(C、D、E组)肺损伤均较B组有所减轻.免疫组化显示,高氧各组p-p38MAPK阳性表达较A组明显增强,尤高表达在炎性浸润细胞;药物干预后(C、D、E组)p-p38MAPK阳性细胞较B组明显减少.蛋白质免疫印迹法显示,B组p-p38MAPK蛋白含量明显高于A组(0.20±0.03比0.11±0.01,P<0.05);干预后C、D、E组p-p38MAPK蛋白含量低于B组(0.16±0.02、0.15±0.01、0.14±0.02比0.20±0.03,均P<0.05),但仍高于A组(均P<0.05),而C、D、E组间则无明显差异.各组肺W/D比值、BALF中TP含量、肺通透系数改变与p-p38MAPK蛋白含量变化趋势一致.结论 高氧应激可激活损伤肺组织p38MAPK活性;NAC抗氧化肺保护作用机制可能是通过下调高氧诱导p38MAPK的激活而对肺损伤起保护作用.