肝细胞癌周期蛋白A与周期抑制蛋白p27kip1的相关性研究

目的 探讨周期蛋白 A(Cyclin A)和周期蛋白依赖激酶抑制蛋白 p27~(kip1)在肝癌中的表达及其相互关系。方法 采用免疫组织化学方法检测35例肝细胞癌(HCC)和22例肝硬化(LC)组织中的周期蛋白A和周期蛋白依赖激酶抑制蛋白p27~(kip1)的表达。结果 35例HCC中23例周期蛋白A高表达,12例低表达;22例肝硬化中4例周期蛋白A高表达,18例低表达,两者差异有非常显著性(P<0.001);HCC中周期蛋白 A与p27~(kip1)呈正相关(P<0.05)。结论 周期蛋白A 高表达可能是肝硬化中肝细胞癌变的主要原因之一,可能是造成肝癌细胞不断增殖的原因。周期蛋白A高表达与p27~(kip1)蛋白高表达有关。     

肝细胞癌组织中p16,p27蛋白的表达及其意义

为探讨p16,p2 7蛋白在肝细胞癌 (HCC )中的表达情况、相互关系及其临床病理学意义。笔者应用免疫组织化学方法 (SABC法 ) ,检测 49例HCC组织及癌旁组织中 p16,p2 7蛋白表达水平。结果示 49例HCC中 ,p16,p2 7蛋白阳性表达率分别为 3 6.73 %和 40 .82 % ;而癌旁组织阳性表达率为89 .80 %和 91.84%。p16蛋白表达与HCC的分化程度密切相关 (P <0 .0 5 ) ,高分化I～II级中p16阳性率为 5 5 .5 6% ,显著高于III～IV级的 2 5 .81%。p2 7蛋白表达与HCC有无淋巴结、远处转移有显著相关性 (P <0 .0 1)。提示 p16与p2 7蛋白的表达缺失在HCC发生中可能起重要作用。p2 7蛋白可作为衡量HCC预后的有用指标。     

原发性肝细胞癌中p16蛋白的表达及其基因的缺失性研究

目的　研究原发性肝细胞癌中p16蛋白的表达及其基因的缺失情况,探讨p16基因与肝癌的关系。　方法　采用回顾性调查研究方法,收集我院原发性肝癌25例,用免疫组织化学SP法、聚合酶链反应（PCR）方法检测肝癌及癌旁组织中p16蛋白的表达及其基因的扩增情况。　结果25例肝癌中,p16蛋白阴性表达率为68%（17/25）,癌旁组织中p16蛋白阴性表达率为4%（1/25）。两者差异有显著意义(P<0.01)。p16蛋白的表达与肝癌分化程度关系密切(P<0.05),而与癌灶体积、甲胎球蛋白（AFP）值的差异无显著意义(P>0.05)。p16基因在癌组织中的缺失率（28%,7/25）显著高于癌旁组织（4%,1/25）（P<0.05）。p16基因缺失与肝癌分化程度、癌灶体积、AFP值无关(P>0.05)。　结论　p16基因失活与肝癌发生关系密切。除了基因缺失之外,还有其他引起p16基因失活的因素存在。p16蛋白的检测可能是预测病人预后的一个指标,但尚需进一步证实。     

人原发性肝细胞癌中锌指蛋白A20、NF-κB p65及多药耐药P-gp蛋白的表达

目的检测锌指蛋白A20、NF-κB p65蛋白及P-gp蛋白在人原发性肝细胞癌和癌旁组织中的表达,比较两者之间的差异,并探讨其与肝细胞癌临床病理学特征的关系。方法收集2009年2月至2010年8月期间于华西医院肝脏及血管外科行手术切除的32例原发性肝细胞癌患者的肝癌组织标本及对应的癌旁组织26例,行免疫组织化学染色,同时收集患者完整的临床病理学资料。结果锌指蛋白A20、NF-κB p65蛋白及P-gp蛋白在原发性肝细胞癌组织中的表达阳性率分别为87.5%(28/32)、81.3%(26/32)及65.6%(21/32),高于癌旁组织中的61.5%(16/26)、34.6%(9/26)及30.8%(8/26),P<0.05。锌指蛋白A20的表达与乙肝表面抗原(HbsAg)表达情况及肝硬变情况有关(P<0.05);NF-κB p65蛋白和P-gp蛋白的表达均与HbsAg表达情况有关(P<0.05)。结论锌指蛋白A20、NF-κB p65蛋白及P-gp蛋白在原发性肝细胞癌组织中均呈高表达,而在癌旁组织中呈低表达;3种蛋白可能对肝脏肿瘤的良恶性判断起指导作用。     

极化调节蛋白aPKC-ι与cyclin E在肝癌中的表达及意义

目的 探讨细胞极化调节蛋白aPKC-ι与Cyclin E在肝细胞肝癌(HCC)及其癌旁组织中表达情况及关系.方法 采用RT-PCR方法 检测aPKC-ι基冈在9例正常肝、43例HCC及其癌旁组织中的表达}免疫组化检测aPKC-ι,Cyclin E蛋白的表达,对所得结果 进行分类和统计分析.结果 aPKC-ι在HCC中的基因表达值为0.844±0.315,明显高于癌旁0.530士0.217及正常肝组织0.372±0.130(P=0.009);aPKC-ι蛋白在HCC、癌旁组织阳性率分别为58.1%(25/43)、23.6%(10/43),分化程度越低、分级越晚表达越高,表达有显著性差异(P<0.05);Cyclin E蛋白在HCC、癌旁组织阳性率分别为65.1%(28/43)、51.6%(22/43),分化程度越低、分级越晚表达越高,表达有显著性差异(P<0.05);aPKC-ι蛋白的表达与Cyclin E蛋白的表达呈正相关(P<0.05).结论 aPKC-ι和Cyclin E在HCC的表达提示其在HCC侵袭、转移中发挥重要作用;两者在HCC中共表达,为进一步研究肝癌侵袭转移机制提供了理论依据.     

Snail蛋白表达与肝细胞癌术后预后的相关性研究

目的研究Snail蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与临床病理特征和术后预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法,检测Snail蛋白在103例肝细胞癌及25例正常肝组织中的表达及其在细胞中的定位。结果Snail蛋白高度表达于肝癌组织的细胞核、细胞质,正常肝组织中表达较少甚至不表达,阳性率分别为51.5%和16%,两者差异有统计学意义(P0.05)。Snail在肝癌中的高表达与肝癌的pTNM分期、肿瘤有无包膜和微血管侵犯有关(P0.05)。结论HCC患者的术后的预后与Snail蛋白的表达有关,Snail蛋白有可能成为肝癌术后预测复发判断预后的生物学标志。     

YB-1蛋白在肝癌细胞的表达部位及其意义

目的 探讨YB-1蛋白在肝细胞癌( Hepatocellular carcinoma,HCC)组织、2种肝癌细胞株、正常肝细胞株中的表达及其与肝癌患者临床参数的关系.方法 采用免疫组化检测YB-1蛋白在58例HCC组织及相应例癌旁组织、20例正常肝组织中的表达;用Western blot法检测上述HCC 组织、癌旁组织、正常肝组织及肝癌细胞株QGY-7701、SMMC-7721、正常肝细胞株L02中核移位YB-1蛋白表达.结果 免疫组化显示在HCC组织,YB-1蛋白主要表达于癌细胞胞浆,其阳性率(72.4％,42/58)明显高于癌旁(41.4％,24/58及正常肝组织(35.0％,7/2) (P＜0.05).其中18例(31.0％,18/58)HCC组织伴有明显YB-1核阳性表达,且核表达与HCC病理分级、门静脉癌栓、肿瘤大小相关(P＜0.05).Western blot检测同样证实核移位的YB-1蛋白在肝癌组织(0.474±0.107)显著高于癌旁组织及正常肝组织(P＜0.05).核移位的YB-1蛋白在2种肝癌细胞株中均高于正常肝细胞株(P＜0.05),其差异较织织更为明显.结论 YB-1蛋白在HCC中高表达及核移位可能促进了肝癌的发生发展,有可能成为肝癌治疗的新靶点.     

域含蛋白7A在肝细胞癌中的表达及其与预后的关系

目的:探讨域含蛋白7A(THSD7A)基因在肝细胞癌(HCC)中的表达情况及临床意义。方法:分别用RT-PCR与免疫组化法检测30例新鲜HCC及癌旁组织标本中THSD7A m RNA表达及75例HCC及癌旁组织石蜡标本中THSD7A蛋白的表达,分析其与HCC患者临床病理因素及预后的关系。结果:与癌旁组织比较,在HCC组织中THSD7A m RNA表达下调(P0.05);THSD7A在HCC组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织(24.0%vs.87.0%,P0.05)。THSD7A蛋白的表达与患者结节数目(P=0.011)、Edmondson-Steiner分级(P=0.013)、BCLC分期(P=0.048)有关。THSD7A蛋白低表达患者总体生存率(P=0.016)与无瘤生存率(P=0.013)均明显低于THSD7A高表达患者。结论:THSD7A在HCC中可能发挥抑癌基因的作用,THSD7A表达降低患者预后不良。     

VEGF,p53,P21WAF/CIP1和C-myc蛋白表达与肝细胞癌预后关系的研究

目的：探讨肝细胞癌（HCC）中VEGF,p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白表达的情况及其与肝癌预后的关系。方法：用MaxvisionTM免疫组化法,检测61例HCC组织及其中52例癌旁组织VEGF,突变型p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白的表达,观察相应的临床病理指标并进行统计学分析。结果：61例肝癌标本中,VEGF,p53,p21WAF/CIP1和C-myc蛋白阳性表达率分别为60.7%(37/61),39.3%(24/61),21.3%(13/61)和39.3%（24/61）;52例癌旁组织中上述4种蛋白阳性表达率依次为：38.5%(20/52),0%(0/52),5.8%(3/52)和59.6%（31/52）。两种组织中4种蛋白阳性表达率差异均有显著性(P<0.05)。肝癌组织中VEGF,p53蛋白表达与肿瘤门静脉癌栓的发生存在明显相关(P<0.05);Kaplan—Meier法生存分析发现VEGF,p53蛋白阳性表达患者肿瘤术后复发时间明显早于阴性表达者;多因素分析显示,肿瘤细胞分化、癌栓形成、VEGF及p53蛋白表达是HCC术后复发的风险因素。结论：肝癌组织中VEGF和p53蛋白的异常表达与肝癌的预后密切相关,可作为肝癌预后判断的参考指标。     

p14ARF蛋白在人肝细胞癌中的表达缺失及其临床意义

目的研究人肝细胞癌中p14ARF蛋白的表达缺失情况及其与临床病理的关系。方法采用链霉菌素-生物素（SP）免疫组织化学法及免疫印记反应（Western blot）对45例肝细胞癌组织、39例癌旁组织及37例非肿瘤肝组织标本进行检测分析。结果p14ARF蛋白在肝癌肿瘤组织中表达缺失率为84．496（38／45），p14ARF蛋白Ⅰ级-Ⅱ级（高分化）病例p14ARF蛋白缺失率为44．496，Ⅲ级-Ⅳ级（低分化）病例p14ARF蛋白缺失率为94．496（P〈0．05）。结论p14ARF蛋白表达缺失与肝细胞癌的发生、发展有一定相关性。提示p14ARF基因的失活可能是肝细胞癌恶性演变的重要因素。     

Cyclin D1在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Cyclin D1在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测50例HCC组织、20例正常肝组织中Cyclin D1蛋白的表达情况。结果Cyclin D1蛋白在肝癌组织中的阳性率为44．0％,极显著高于正常肝组织（均为阴性表达）（P〈0．01）;阳性表达与肝癌的肝内转移和肝癌的分化程度有关（P〈0．05,P〈0．05）。Cyclin D1的过表达均与病人术后〈3年生存期有关（P〈0．05）。结论Cyclin D1在HCC的发生、发展过程中起着不同程度的作用,检测Cyclin D1对判定HCC预后可提供一定的依据。     

Cyclin D1和p16在肥大乳房腺体组织中的表达及意义

目的：探讨Cyclin D1以及p16蛋白在肥大乳房乳腺组织中的表达及意义。方法：采用免疫组化SP法,检测35例肥大乳房及16例正常体积乳房乳腺组织中cyclinD1及p16蛋白的表达情况及相互联系。结果：35例肥大乳房腺体组织中Cyclin D1蛋白阳性表达率51.4%（18/35）,16例正常体积乳房标本腺体组织中无一例Cyclin D1呈阳性表达（0/16）,两组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。肥大乳房组腺体组织中p16蛋白阴性表达率为77.2%（27/35）,正常体积乳房腺体组织中阴性率为31.3%（5/16）,两组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）。在Cyclin D1阳性表达的18例样本中,p16阴性表达者17例,阳性表达者1例,Cyclin D1阴性表达的17例样本中,p16阴性表达者10例,阳性表达者7例。Pearson相关性分析显示,Cyclin D1与p16的表达呈负相关（P〈0.05）。结论：①Cyclin D1在肥大乳房腺体中呈高表达,p16呈低表达,提示其可能参与了肥大乳房的发生和发展;②Cyclin D1和p16在肥大乳房组织中的表达呈负相关,提示二者存在着一定的调控关系。     

凋亡抑制蛋白Survivin在肝癌中的表达和意义

目的 检测肝细胞癌中凋亡抑制蛋白Survivin的表达，并探讨其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学技术和蛋白印迹技术，研究38例肝癌标本和10例肝硬化标本中Survivin蛋白的表达。结果 38例肝癌标本中23例表达Survivin蛋白，其中16例高，中分化肝癌，9例表达Survivin,22例低分化肝癌组织14例表达Survivin蛋白，而在癌周非癌组织和肝硬化组织中未检测到Survivin的表达。结论 Survivin在肝癌中高度表达可能与肝癌的发生发展有关，与预后的关系有待进一步的研究。     

逆转录病毒介导的p16基因治疗原发性肝癌的实验研究

目的 调查转入野生型p16cDNA对肝细胞性肝癌细胞生物学行为的影响。方法 构建p16基因的逆转录病毒表达载体pCLXSN-p16。完成病毒包装后，分别感染p16表达阴性与阳性的肝癌细胞株，并筛选出各自稳定表达株，观测转基因后外源P16蛋白的表达及肿瘤细胞的生长情况。并检测肿瘤细胞的凋亡与生长周期。结果 我们包装产生的pCLXSN-p16假病毒具有感染肿瘤细胞并表达外源P16蛋白的功能，p16表达阴性的细胞SNU-449转入野生型p16基因后，细胞生长速度明显减慢，G0-G1期细胞明显多于转基因前，而p16表达阳性的细胞HepG2.2.15，转入外源p16cDNA后，其生长状况及细胞周期则未见明显改变，就SNU-449与HepG2.2.15细胞株而言，转入p16cDNA后，其生长状况及细胞周期则未见明显改变，就SNU-449与HepG2.2.15细胞株而言。转入p16cDNA均未能诱导细胞凋亡。结论 转入外源p16基因可抑制P16蛋白表达阴性的肝癌细胞的生长。     

原发性肝癌及癌旁组织中抑癌基因p16的表达及其临床意义

目的 探讨抑癌基因ｐ１６在肝癌及癌旁中的表达及意义。方法 应用免疫组化方法对５０例肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁肝硬化组织（４４例）手术切除石蜡包埋标本进行Ｐ１６基因蛋白表达的测定,结合临床病理指标进行分析。结果 ｐ１６基因在ＨＣＣ中的阳性表达４８％（２４／５０）,癌旁９１％（２４／５０）,癌旁９１％（４０／４４）。ｐ１６基因表达与ＨＣＣ的分化程度密切相关（ｐ＝０．０１４）,在分化Ⅰ－Ⅱ级中ｐ１６阳性率     

P~(16)、P~(53)、P~(21)/WAF1蛋白的表达与原发性肝癌诊断与预后关系的研究

目的:探讨肝癌和癌旁组织中P~(16)、P~(53)、P~(21)/WAF1蛋白的表达与原发性肝癌的诊断和预后的关系。方法:应用免疫组化技术检测48例手术切除肝癌及癌旁组织中肿瘤相关基因的表达。结果:P~(16)、P~(53)、P~(21)/WAF1蛋白在肿瘤组织中的阳性表达分别为39.6％、56.2％、43.7％,与癌旁组织中的表达差异有显著性(P<0.05),瘤体直径大于5cm、包膜不完整的肿瘤、生存期小于2年和伴有瘤栓的肿瘤组中,P~(21)、P(53)、P~(16)与癌旁组织的表达差异有显著性(P<0.05);在生存期大于2年和复发时间大于6个月的病例中,肿瘤组织表达P~(16)蛋白明显高于生存期小于2年和复发时间小于6个月的病例(P<0.05);在伴有瘤栓和侵润生长的肿瘤组织中P~(53)蛋白表达与不伴有瘤栓和膨胀生长的表达差异有显著性;P~(21)在低分化和早期复发的肿瘤组织中表达显著高于高分化和复发时间较晚的肿瘤组织(P<0.05)。结论:P~(53)基因突变与肝癌的分期、门静脉癌栓的形成、肿瘤的侵袭性有关,是肝癌发展的晚期事件,P~(21)与肝癌的分化和预后有关;P~(16)与肝癌的复发和预后有关。P~(16)、P~(53)、P~(21)可以作为对肝癌分化、侵袭、转移和预后进行预测的标志。     

肝癌组织中HBx蛋白与上皮-间叶样表型转化的关系

目的 探讨肝癌组织中是否存在上皮-间叶样表型转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)及其与HBx蛋白表达的关系.方法 采用免疫组织化学方法对76例肝癌患者的癌组织标本进行检测.结果 上皮细胞标志物上皮钙黏素、β-连环素表达缺失率分别为34%(26/76)、20%(15/76),HBx和问叶细胞标志物神经钙黏素、纤维连接蛋白表达阳性率分别为68%(52/76)、55%(42/76)、46%(35/76);上皮钙黏素表达缺失与神经钙黏素和HBx蛋白阳性表达有关(P＜0.01),神经钙黏素和纤维连接蛋白阳性表达与β-连环素表达缺失和HBx蛋白阳性表达均有关(P＜0.05).结论 肝癌组织中存在EMT,其发生可能与HBx蛋白表达有关.