宫颈脱落细胞HPV E6/E7mRNA、HR-HPV DNA在宫颈病变筛查中的应用

目的 探讨HPV E6/E7 mRNA与高危型孔头瘤病毒（HR-HPV） DNA在宫颈病变筛查中的应用价值.方法 对301例宫颈病变疑似病例进行宫颈脱落细胞取样,分别检测慢性宫颈炎、宫颈癌前病变、宫颈鳞状细胞癌中HPV E6/E7 mRNA与HR-HPV DNA的表达,比较二者在不同年龄组及病变程度中表达的差异.结果 在宫颈癌前病变及宫颈鳞状细胞癌患者中HPV E6/E7 mRNA的特异性和阳性预测值高于HR-HPV DNA（P均＜0.05）,敏感性低于HR-HPV DNA（P ＜0.05）.30岁以下与30～39岁受检者中HPV E6/E7 mRNA的阳性率低于HR-HPV DNA（P均＜0.05）.CIN2、CIN3及宫颈癌患者HPV E6/E7 mRNA阳性率高于慢性宫颈炎患者,且CIN3者高于CIN2者（P均＜0.05）,CIN1、CIN2、CIN3及宫颈癌患者HR-HPV DNA阳性率高于慢性宫颈炎患者（P均＜0.05）.结论 对于宫颈癌及癌前病变,HPV E6/E7 mRNA的阳性率及其诊断的特异性高于HR-HPV DNA,可作为筛查和随访的指标.     

宫颈脱落细胞HR-HPV载量与宫颈病变严重程度的关系

目的探讨宫颈脱落细胞中高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）载量与宫颈病变程度的关系。方法经病理检查确诊的宫颈病变患者171例,包括慢性宫颈炎68例、轻度宫颈上皮内瘤变（CINⅠ）35例、中重度宫颈上皮内瘤变（CINIⅡ～Ⅲ）45例、宫颈癌23例,采集其宫颈脱落细胞,采用第二代杂交试验（HC-Ⅱ）进行宫颈脱落细胞HR-HPV载量检测。结果 171例患者宫颈脱落细胞中HR-HPV阳性者114例,其中慢性宫颈炎患者中有26例、CINⅠ患者中有26、CINIⅡ～Ⅲ患者中有41例、宫颈癌患者中有21例;宫颈癌、CINⅡ～Ⅲ患者中HR-HPV检出率与慢性宫颈炎、CINⅠ患者相比,P均〈0.01。慢性宫颈炎、CINⅠ、CINIⅡ～Ⅲ、宫颈癌患者宫颈脱落细胞中HR-HPV载量分别为（113.65±370.65）（、639.83±967.19）（、851.19±864.41）（、1 114.70±850.65）pg/ml,各级病变之间HR-HPV载量相比,P均〈0.01。结论宫颈脱落细胞HR-HPV载量与宫颈病变程度有关。     

不同CIN分级宫颈病变组织中hTERC基因表达及意义

目的：观察不同CIN分级宫颈病变组织中 hTERC基因表达情况,探讨 hTERC基因表达异常与宫颈病变CIN分级的相关性。方法利用荧光原位杂交技术（ FISH方法）检测150例宫颈病变患者（其中CIN Ⅰ级30例、CINⅡ级30例、CIN Ⅲ级30例、宫颈癌60例）以及30例因良性病变切除子宫患者宫颈组织内的hTERC基因表达情况。分析hTERC基因表达情况与宫颈病变患者的分化程度、临床分期、预后的关系。结果随宫颈病变CIN级别加重,hTERC 基因阳性表达率呈逐渐增高趋势（P＜0．05）。宫颈癌组织中hTERC基因表达与宫颈癌临床分期、分化程度、淋巴结转移无关（ P＞0．05）宫颈癌组织中hTERC基因表达阳性者与hTERC基因表达阴性者5年累积生存率差异无统计学意义。结论 hTERC基因在各级CIN和宫须癌组织中均有阳性表达,其阳性表达率随着宫颈病变程度增加而增加。采用FISH方法检测宫颈组织hTERC基因阳性表达率有助于宫颈病变筛查。     

hTERC基因在子宫颈上皮脱落细胞的表达及临床意义

目的探讨端粒酶（hTERC）在不同程度子宫颈病变脱落细胞中的表达及临床意义。方法应用荧光原位杂交（FISH）技术检测正常子宫颈脱落细胞、子宫颈上皮内瘤变（C IN）及宫颈癌脱落细胞中hTERC的表达情况。结果 hTERC基因在C INⅠ、Ⅱ、Ⅲ级及宫颈癌中的阳性表达率分别为15.00%、61.90%、63.64%、93.75%,均显著高于正常,其中C INⅡ-Ⅲ级显著高于Ⅰ级（P〈0.01）,宫颈癌显著高于C INⅠ-Ⅲ级（P〈0.05或〈0.01）;宫颈癌与C INⅡ-Ⅲ级的hTERC基因扩增百分比、平均拷贝数均有统计学差异（P〈0.05）。结论端粒酶的异常激活可发生在宫颈癌的各个阶段,随着组织学病变程度增加,hTERC基因扩增阳性率及扩增程度增加。检测子宫颈病变脱落细胞中的hTERC基因可作为子宫颈癌早期筛查和诊断的辅助指标。     

HPV DNA HCⅡ检测在宫颈病变筛查中的应用

目的探讨用第二代杂交捕获技术（HCⅡ）行HPV DNA检测在宫颈病变筛查中的价值。方法采用HCU对2153例宫颈疾病患者行宫颈脱落细胞HPV DNA检测。结果2153例受检者中701例（32．6％）检测出HPV DNA。其中宫颈癌患者检出率为93．9％,宫颈上皮内瘤变为54．6％,明显高于其他妇科良性疾患的31．5％,P均〈0．05。CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ宫颈病变中HPV检出率分别为29．9％、53．8％、80．2％,HPV检出率随着病变的严重程度增高而增高。结论HCⅡ技术检测HPV DNA是宫颈癌前病变筛查的重要手段。     

宫颈癌患者宫颈脱落细胞HPV、病变组织Brn-3a的表达变化及意义

目的观察宫颈癌脱落细胞中人乳头状瘤病毒（HPV）及病变组织中Brn-3a的表达变化,并探讨其临床意义。方法选择经病理确诊的19例宫颈癌、55例CIN（CINⅠ级20例、CINⅡ级16例和CINⅢ级19例）和30例宫颈炎患者,采用基因芯片技术检测其宫颈脱落细胞中的HPV,采用免疫组化SP法检测宫颈病变组织中的Brn-3a。结果宫颈炎、CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级和宫颈癌患者宫颈脱落细胞中HPV阳性率分别为43.3%、50.0%、68.8%、84.2%、94.7%,宫颈组织中Brn-3a阳性率分别为6.7%、15.0%、62.5%、78.9%、89.5%。CINⅡ~Ⅲ级及宫颈癌组患者HPV、Brn-3a阳性率均明显高于宫颈炎和CINⅠ患者（P均〈0.01）。宫颈癌患者宫颈脱落细胞HPV及病变组织中Brn-3a的表达呈正相关（r=0.283,P〈0.01）。结论宫颈癌脱落细胞中HPV及病变组织中的Brn-3a高表达,两项指标联合检测有助于宫颈癌前病变的诊断。     

宫颈细胞 HPV E6／E7 mRNA 检测在宫颈病变诊断中的价值

目的：评价高危型人乳头状瘤病毒（ HPV） E6/E7 mRNA检测对宫颈病变的诊断价值。方法520例患者采用b-DNA技术检测HPV E6/E7 mRNA,并用宫颈液基细胞学（ TCT）行宫颈细胞学检查,对其中任何一项阳性者做阴道镜下宫颈活组织检查,以组织病理为金标准,计算HPV E6/E7 mRNA阳性对高级别宫颈上皮内瘤样病变（ CIN）、宫颈浸润癌诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值,并与TCT检查进行比较。结果520例患者中HPV E6/E7 mRNA阳性158例, TCT异常222例。 TCT 异常者中HPV E6/E7 mRNA阳性率较TCT 正常者中HPV E6/E7 mRNA阳性率高（P＜0．05）。146例慢性宫颈炎、CINⅠ级患者与124例高级别CIN、宫颈浸润癌患者中HPV E6/E7 mRNA阳性率比较,P＜0．05。 HPV E6/E7 mRNA阳性对高级别CIN及宫颈浸润癌诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为74．19％、83．33％、58．23％、71．43％,TCT 检查分别为81．53％、69．44％、81．45％、92．28％,两者特异度及阳性预测值比较, P均＜0．05。结论在宫颈癌筛查中检测高危型HPV E6/E7 mRNA对预测高级别CIN,尤其对评估癌症风险有重要的临床价值。     

局部细胞中HPVl6基因表达量及突变与其宫颈持续感染的关系

目的探讨宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒（HPV）16基因的表达量及突变与其宫颈持续感染的关系。方法选取96例HPVl6感染患者,其中33例宫颈脱落细胞HPVl6持续阳性（持续感染组）,63例6个月后复查转为阴性（非持续感染组）。采用半定量PCR技术检测两组（宫颈脱落细胞中）HPVl6E5、E6、E7及长控制区（LCR）基因表达量,基因测序法检测HPVl6E5、E6、E7及LCR基因突变。结果持续感染组HP~16E5、E6、E7、LCR基因表达量分别为0．20±0．02、0．30±0．02、0．19±0．01、0．53±0．02,非持续感染组分别为0．17±0．02、0．27±0．03、0．16±O．06、0．504-0．04,两组比较P均〉0．05。持续感染组与非持续感染组3978A→c（144L）位点突变例数分别为33、63例,4041A→G（165V）位点突变例数分别为33、63例,4076A—T（同义突变）位点突变例数分别为28、31例;两组4076A→T突变例数比较,P〈0．01。持续感染组与非持续感染组E6基因178T→G（D25E）位点突变例数分别为10、4例,两组比较,P〈0．05;持续感染组与非持续感染组E7基因647A→G（N29S）与846T→c（同义突变）联合突变例数分别为9、8例,两组比较,P〉0．05;持续感染组与非持续感染组7761c→T位点突变例数分别为33、63例,P〉0．05;7727A→c位点突变例数分别为14、4例,两组比较,P〈0．01。结论宫颈脱落细胞中HPVl6基因表达量与持续性感染无密切关系,HPVl6E5、E6、LCR基因突变与宫颈持续性感染有关,其中HPVl6E54076A→T（同义突变）、E6178T→G（D25E）与LCR7727A→c突变点可能是导致HPVl6持续感染的关键突变位点。     

hTERC基因在不同类型宫颈脱落细胞中的表达及临床意义

目的端粒酶RNA(hTERC)基因在不同类型宫颈脱落细胞中的表达及临床意义。方法随机选取2010年2月至2013年11月该院102例妇科门诊患者的宫颈脱落细胞标本,对每位研究对象进行宫颈组织液基细胞检测、hTERC基因检测以及人乳头瘤病毒(HPV)检测,比较不同病变类型、不同组织类型、存在或不存在HPV感染者宫颈脱落细胞的hTERC基因阳性率。结果 102例对象hTERC基因阳性52例(51.0%),HPV阳性者66例(64.7%),鳞状上皮细胞病变(NILM)级30例、非典型鳞状细胞(ASCUS)级21例、低级别鳞状细胞病变(LSIL)级9例、高度鳞状上皮内病变(HSIL)级26例、SCCA级2例、ASC-H级14例和AGC级0例;随着宫颈脱落细胞病变程度越高,其hTERC基因阳性率越高(χ2=60.673,P=0.000);不同细胞学等级间的hTERC基因阳性率存在统计学差异(χ2=40.617,P=0.000);HPV感染阳性组的hTERC基因阳性率〔45例(68.2%)〕高于阴性组〔7例(19.4%)〕(χ2=20.234,P=0.013)。结论 hTERC基因在不同类型宫颈脱落细胞中的表达存在差异性,通过FISH技术检测hTERC基因可早期筛查宫颈癌。     

阴道镜在宫颈上皮内瘤样病变诊断中的应用

对1 764例妇女同时行阴道镜检查及病理检查.以组织病理学诊断为金标准判断阴道镜诊断宫颈上皮内瘤样病变(CIN)的价值.结果 显示,阴道镜检查诊断CIN及子宫颈癌的总灵敏度为69.7%、特异度为70.1%、阳性预测值为73.8%、阴性预测值为65.8%、假阳性率为26.2%、假阴性率为34.2%.其中,诊断子宫颈癌的灵敏度和特异度分别为74.6%和98.9%.认为阴道镜检查适合作为CIN的筛查手段,但应配合阴道镜直视下活检以减少漏诊.     

Lack of mutations in the human telomerase RNA component (hTERC) gene in Fanconi's anemia

As some patients with Fanconi s anemia (FA) present excessive telomere shortening correlating with poor outcome, we investigated whether human telomerase RNA component (hTERC) mutations also play a role in telomere shortening in 115 FA patients. Only one patient was heterozygous for the G58A polymorphism. No other mutation or deletion was found. We conclude that hTERC gene mutations do not contribute to telomere shortening in FA.     

Lack of mutations of the human telomerase RNA gene (hTERC) in myelodysplastic syndrome

Myelodysplastic syndrome (MDS), considered a pre-leukemic state, has recently been categorized as a subset of bone marrow failure syndromes. Unlike other subtypes of bone marrow failure syndromes, such as aplastic anemia or dyskeratosis congenita, little is known about genetic alterations of human telomerase in MDS, despite the fact that immune cells from patients with MDS frequently exhibit telomere attrition.     

Using cervical auscultation in the clinical dysphagia examination in long-term care

The ability of the clinical dysphagia examination to identify patients who aspirate and to determine specialized diet management has been suspect. In long-term care, however, the clinical examination can be the only assessment procedure available to clinicians. Cervical auscultation with stethoscope was incorporated into the clinical examination for dysphagia in an attempt to enhance the clinical examination's ability to detect aspiration and to determine specialized diet management in long-term care. Comparison of the clinical examination's results with results from videofluoroscopy revealed significant agreement in both areas. Results support the use of cervical ausculatation as a highly sensitive and specific method of dysphagia assessment in long-term care.Work was performed at the VA Medical Center, St. Cloud, MN     

IDO基因转染宫颈癌细胞SiHa在体外抑制NK细胞杀伤作用的研究

目的通过IDO基因转染,研究IDO在体外对NK细胞杀伤能力的抑制作用。方法 IDO蛋白表达和空白质粒分别稳定转染至人宫颈癌细胞SiHa,应用Western blot检测IDO在SiHa、SiHa/Mock和SiHa/IDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3组肿瘤细胞体外生长速度和对NK细胞杀伤作用的敏感性。结果 IDO蛋白在Si-Ha/IDO细胞中表达阳性,在SiHa和SiHa/Mock细胞中无表达。3组肿瘤细胞体外生长曲线无统计学差异,P>0.05。SiHa/IDO细胞存活的百分比高于其他2组对照(SiHa和SiHa/Mock)细胞,P<0.05。结论 IDO对宫颈癌细胞体外生长速度无影响,但可抑制宫颈癌细胞SiHa对NK细胞杀伤作用的敏感性。因此,IDO不仅可以作为宫颈癌判断预后的指标,同时也可以作为宫颈癌基因治疗的潜在新靶点。     

TERC基因在宫颈肿瘤中的表达及意义

目的探讨宫颈肿瘤脱落细胞中TERC基因扩增与病情进展的相关性。方法采用荧光原位杂交技术检测102份宫颈肿瘤脱落细胞中TERC基因扩增情况,以正常宫颈脱落细胞为对照组。结果 CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈浸润癌TERC阳性率分别为25.0%、63.6%、69.2%、95.5%,均显著高于对照组;随病情进展,阳性率和扩增倍数逐渐升高,P〈0.01。结论 TERC基因扩增与宫颈肿瘤密切相关,可促进宫颈癌的发生及发展。     

过表达N-Myc下游调节基因3促进Hela宫颈癌细胞增殖和迁移

目的研究过表达N-Myc下游调节基因(NDRG)3对Hela宫颈癌细胞增殖和迁移的作用。方法构建NDRG3过表达载体,利用Lipofectamine 2000转染试剂建立稳定转染NDRG3的Hela宫颈癌细胞株,细胞计数试剂(CCK)8和Transwell方法研究细胞增殖和迁移能力,酶联免疫吸附实验研究趋化因子CXC配体(L)5的表达情况。结果过表达NDRG3可明显促进Hela的增殖和迁移能力,并上调Hela的分泌性CXCL5蛋白水平。结论 NDRG3可经上调肿瘤相关基因CXCL5的水平参与宫颈癌进程。     

75例少精不育患者精细胞GSTM1基因检测结果分析

目的探讨精细胞谷胱苷肽转硫酶（GST）M1基因多态性与少精不育症的关系。方法应用RT-PCR法对75例少精不育患者（观察组）及36例健康男性（对照组）精细胞GSTM1基因进行多态性研究。结果观察组GSTM1基因缺失率高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论精细胞GSTM1基因多态性与少精不育症关系密切,其具体作用机制有待进一步研究。