肿瘤DNA疫苗:诱导抗肿瘤抗原的CTL应答

CD8 T细胞可以识别肿瘤抗原,因此促使DNA疫苗诱导抗肿瘤抗原的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答至关重要。本文主要介绍了DNA疫苗在免疫学方面的最新进展,以及一些增强DNA疫苗诱导CTL应答的方法。     

用基因枪接种核酸诱导体液和CTL应答

作者用减量质粒DNA抗原表达载体经颗粒介导(基因枪)DNA转移到表皮的技术,来评估其诱导体液和细胞毒性T细胞(CTL)应答的能力。     

不同方法提取的肿瘤抗原对小鼠CTL的体外激活效应的比较

目的 梯度高渗法，弱酸洗脱法，43℃加热处理等方法提取小鼠HepA22肝癌细胞抗原，用以致敏小鼠脾细胞，观察其对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的体外激活效应。方法①梯度高渗法，即2．7％NaCl，1．8％NaCl和蒸馏水3次低温高速离心，收集上清提取。②弱酸洗脱，以pH3．3的枸橼酸—磷酸盐缓冲液室温下处理HepA-22细胞5min，低速离心，收获上清。③43℃加热处理，将HepA-22细胞置于43℃．恒温水浴16h。④用提取的抗原致敏小鼠脾细胞，MTT法检测其体外CTL杀伤活性。结果 ①相同抗原浓度，不同条件或不同提取方法所获得的抗原对小鼠脾细胞CTL杀伤能力的激活作用不相同。②经过43℃处理后提取的抗原比未经加热处理提取的抗原作用大。③弱酸洗脱提取的膜抗原作用最明显。④去掉膜抗原后再提取的蛋白激活作用最小。⑤同种提取方法不同浓度抗原作用不同，随着浓度增高，CTL活性增强。结论 ①43℃加热处理可以诱导HepA-22细胞产生HSP-抗原肽复合物，增加其对小鼠CTL活性激活作用。②弱酸可以洗脱肿瘤细胞表面的I类抗原肽，该多肽致敏的小鼠脾细胞可以有效地诱导特异性抗肿瘤免疫功能。     

新型多价人CTL肽构建物可诱导HLA-A~*0201转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答

1型人类嗜 T淋巴细胞病毒 ( HTLV- 1 )是成人 T淋巴细胞白血病 ( ATL )和 HTLV-1相关的脊髓病 /热带痉挛性截瘫 ( HAM/TSP)的致病因素 ,特异性细胞免疫应答对于消除慢病毒感染非常重要 ,而多肽类细胞毒性 T细胞 ( CTL)表位疫苗可诱发抗病毒的特异性 CTL 应答。作者研究了 HTLV- 1TAX蛋白的 3个 CTL表位肽诱导转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答的结果。　　在设计多肽疫苗时 ,尽可能多地包含CTL表位有可能同时诱导产生较为广泛的特异性细胞免疫应答。因此 ,作者将三个与HLA- A*0 2 0 1相匹配的 CTL 表位肽分别通过两个精…     

新型多价人CTL肽构建物可诱导HLA-A^＊0201转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答

1型人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-1)是成人T淋巴细胞白血病(ATL)和HTLV-1相关的脊髓病／热带痉挛性截瘫(HAM／TSP)的致病因素，特异性细胞免疫应答对于消除慢病毒感染非常重要，而多肽类细胞毒性T细胞(CTL)表位疫苗可诱发抗病毒的特异性CTL应答。作者研究了HTLV-1 TAX蛋白的3个CTL表位肽诱导转基因小鼠产生特异性细胞免疫应答的结果。     

新型阳离子纳粒-重组抗原鼻内免疫诱导的强粘膜和全身抗体及CTL应答

作者对新型阳离子纳粒 ( SMBVTM)用作两种重组蛋白——乙肝表面抗原 ( HBs Ag)和 β-半乳糖苷酶 ( gal)的鼻内疫苗传递系统进行了评估。 SMBVTM由磷脂层围绕的正电荷多糖核心组成 ,大小 6 0 nm。HBs Ag是颗粒性抗原 ,β- gal是可溶性单体抗原。两种抗原分别与 SMBVTM配方 ,形成 SMBVTM- HBs Ag和 SMBVTM- β- gal,鼻内免疫 7～ 9周龄的雌性 BALB/ c鼠 ,间隔 3周免疫 2或 3次。　　试验结果 :( 1 )配方中 HBs Ag的用量为1、3、1 0μg,β- gal的用量为 1、5、2 0μg时 ,各组均能产生血清 Ig G抗体 ,2或 3次免疫后抗体滴度…     

可抑制牙斑形成的药物制剂

一种抑制牙斑形成的药剂是下列一种或多种药用植物,包括童氏老鹳草Gerani-um thumbergii(地上部分),蓝桉Eucalyp-tus globulus(地上部分),菱Trapnbispinosa果和石榴Punica granatum的果皮、树皮或根皮的酸性有机溶媒提取物。使用的酸性溶媒最好是含0.1％～20％(重量)有机酸(乙酸、丙酸、最好是乳酸)的低级     

副粘病毒融合肽与麻疹病毒核蛋白的CTL表位连结物能掺入ISCOM并可诱导CTL应答

抗原掺入的免疫刺激复合物(ISCOM)可诱导机体产生高水平体液免疫和细胞免疫.本实验将亲水性麻疹病毒(MV)核蛋白(NP)的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位(NP29)与副粘病毒融合肽(F1)嵌合制成IS-COM,用以诱导CTL的溶细胞效应.首先合成代表WVNP281-290氨基酸序列的NP29和含位于NP29CTL表位羧基端融合蛋白序列的NP29-F1,进而制备IS-COM.用表达MVNP的腺病毒载体RAd 68腹腔注射BALB/c小鼠,5～6天后取脾,分离淋巴细胞.用NP29和NP29-F1体外刺激后,与靶细胞P815共同培育,证实NP29-F1与NP29体外诱导的溶靶细胞效应相同.将乳化于弗氏完全佐剂的NP29免疫BALB/c     

脐血树突状细胞提呈抗原对特异性CTL诱导杀伤的探讨

利用pH3．3柠檬酸．磷酸盐缓冲液（0．131M柠檬酸／0．066M Na2HPO4）提取的QGY-7703细胞膜外抗原多肽（50μg／m1），经过细胞因子GM-CSF（100ng／m1）、TNF-a（1000U／m1）以及IL-4（50ng／m1）诱导脐血造血干细胞分化的脐血树突状细胞（DC）进行抗原加工和提呈后，可以有效地激活外周血淋巴细胞（PBLC），形成特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）．使其对QGY-7703细胞具有明显的杀伤活性，且这种杀伤活性在50：1以后随效：靶比例的增加而更加明显，在对QGY-7703、SPGA-1、HL-60以及K562细胞的杀伤比较时，更加明显地表现出杀伤细胞的特异性，而且研究还表明，这种选择性杀伤作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡途径杀死肿瘤细胞，本研究进一步表明应用脐血来源的脐血树突状细胞可以作为肿瘤免疫中的抗原提呈细胞（APC），并执行其抗原提呈作用，激活特异性细胞毒性T淋巴细胞执行其细胞免疫功能。     

青霉素诱导小鼠产生特异性非IgE抗体应答

青霉素诱导小鼠产生特异性非ＩｇＥ抗体应答张蕾，王永铭，陈斌艳，沈刚１（上海医科大学药学院药理教研室；１儿科医院，上海２０００３２，中国）关键词青霉素类；免疫球蛋白Ｍ；免疫球蛋白Ｇ；免疫球蛋白Ａ；酶联免疫吸附试验；半抗原；交叉反应；药物过敏目的：研究青...     

青霉素诱导小鼠产生特异性非IgE抗体应答

目的：研究青霉素能否诱导小鼠体内特异性非ＩｇＥ抗体应答。 方法：酶联免疫吸附试验测定抗体应答和抗原性交叉反应，半抗原抑制试验检测被抗体识别的抗原分子。 结果：青霉素免疫后的５０天内，特异性ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ的阳性率为１００％，５０％－１００％，１７％－１００％。特异性ＩｇＭ和ＩｇＧ还能识别氨苄西林和哌拉西林。陈旧青霉素以剂量依赖方式特异性阻断抗体结合，而新鲜青霉素无作用。 结论：青霉素能在小鼠     

重组毕赤酵母HBsAg诱导小鼠细胞免疫应答的研究

目的   研究毕赤酵母表达的重组HBsAg(Pichia-rHBsAg)在小鼠中诱导T细胞免疫应答的能力,评价疫苗的免疫原性.   方法  以rHBsAg免疫雌性BALB/c小鼠,制备小鼠脾淋巴细胞,并在体外以抗原/特异性多肽刺激.采用ELISA法测定抗原特异性T淋巴细胞分泌的细胞因子,酶联免疫斑点法(ELISPOT)测定CTL频数.   结果 由毕赤酵母表达的rHBsAg可在小鼠中诱导Th1和Th2型免疫应答;加铝佐剂的rHBsAg诱导IFN-γ的水平及CTL克隆明显高于无佐剂抗原;Pichia-rHBsAg刺激小鼠细胞免疫应答的水平强于酵母-rHBsAg,与中国仓鼠卵巢细胞-rHBsAg相仿.   结论   Pichia-rHBsAg可在BALB/c小鼠中诱导较强的细胞免疫应答.     

负载冻融抗原的DC诱导特异性CTL杀伤胃癌细胞的实验研究

目的 研究负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)活化的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对胃癌细胞的体外杀伤作用.方法 冻融法获取胃癌细胞抗原,联合应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导培养外周血BC并负载肿瘤抗原,激活自体T淋巴细胞,制备特异性CTLs,MTT法检测对胃癌细胞的体外杀伤作用.ELISA法检测γ干扰素(IFNγ)分泌情况.结果 负载胃癌抗原的DC激活的CTLs表现出对胃癌细胞的特异性杀伤作用,产生高水平的IFNY(P<0.01);而对B16黑色素瘤细胞没有杀伤作用不产生高水平的IFNγ.未负载胃癌抗原DC刺激的CTLs对胃癌细胞无杀伤作用.结论 应用细胞因子从人外周血中诱导的DC负载胃癌抗原后,激活的CTLs在体外对胃癌细胞能产生高效而特异性的杀伤作用.     

合成短肽与人类相容性佐剂诱导的抗HIV-1蛋白的CTL应答

全球性预防艾滋病的希望寄托于开发有效的疫苗。诱导抗不同人类免疫缺陷病毒( HIV)表位的抗体应答和广泛的细胞毒性 T细胞 ( CTL)应答可消除感染初期宿主体内的病毒。为使机体产生强有力的免疫应答 ,作者使用合成短肽与免疫刺激剂佐剂一同接种转基因小鼠 ,观察了抗 HIV- 1蛋白 CTL应答的诱导情况。　　作者合成了 6种 HIV短肽 ( RT4 76 -484、 p1 777- 85、 gp1 6 0 31 8- 32 7、 RT346 -354、gp4 1 81 4 - 82 3及 RT956 - 96 4) ,将合成肽同 1 4 k Da( D,L-聚乳酸 -乙醇酸共聚物( PL GA)制成微球。微球的大小通过激光散射技术…     

裸DNA免疫诱导HCMV gB特异性中和抗体和pp65特异性CTL应答

作者构建了含人巨细胞病毒（HCMV）糖蛋白B（gB）或磷蛋白65（pp65）基因片段的表达质粒:pK-gB（含四环素控制成分的全长gB）、p△RC-gB（膜结合型全长gB）、p△RC-gB680（缺乏跨膜区的分泌型gB）和p△RC-pp65。将这些质粒分别注射雌性BALB/c小鼠四头肌,第4及第8周各加强免疫1次,每组10只小鼠。定期取血清作ELISA和微量中和试验或取脾细胞进行pp65特异性细胞毒性T细胞（CTL）试验以评价这些质粒的免疫原性。