赤雹根总皂苷抗炎作用研究

目的:观察赤雹根总皂苷的抗炎活性,为其研究开发提供实验依据.方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀法,角叉菜胶致小鼠足肿胀法,小鼠棉球肉芽肿法,评价赤雹根总皂苷的抗炎作用.二甲苯耳肿胀法和角叉菜胶致足肿胀法,各组小鼠每日灌胃给药1次,连续3d,末次给药后30 min,复制模型.小鼠棉球肉芽肿实验,棉球植入术后小鼠连续灌胃给药7d.实验动物均分为赤雹根总皂苷高、中、低( 240,120,60 mg·kg-1)剂量组、阿司匹林(100 mg·kg-1)组、模型组(生理盐水).结果:赤雹根总皂苷高、中、低剂量组小鼠的耳肿胀度[(1.46±0.19),(1.68±0.15),(1.99±0.17) mmg]较模型组(2.31±0.24)mg明显降低(P＜0.01);赤雹根总皂苷各剂量组小鼠足肿胀度[(28.7±5.03),(33.8±4.65),(43.33±4.98) mg]较模型组(55.18±2.96) mg明显降低(P＜0.01);赤雹根总皂苷各组小鼠肉芽肿质量(5.08±0.37,6.76±0.44,8.66±0.55) mg较模型组(12.05 ±1.22) mg明显降低(P＜0.01),且各实验中赤雹根总皂苷高和(或)中剂量效果优于阿司匹林(P＜0.05～0.01).角叉菜胶致小鼠足肿胀实验中,赤雹根总皂苷各组小鼠血清前列腺素E2(PGE2)吸光度值(0.193±0.022,0.219±0.035,0.250±0.037)和一氧化氮(N0)含量(5.85±3.50,9.62±3.61,16.79±3.14)μmol·L-1较模型组PGE2吸光度值(0.545±0.06),NO含量(23.02±3.18)μmol· L-1明显降低(P＜0.01).结论:赤雹根总皂苷有显著的抗炎作用,其抗炎作用与抑制炎症介质PGE,和NO的合成释放有关.     

满药赤雹根总皂苷抗炎作用实验研究

目的:评价赤雹根总皂苷(TSRT)的抗炎活性.方法:二甲苯致小鼠耳肿胀实验,昆明种小鼠,随机分为TSRT240,120,60 mg·kg-1剂量组,Asp 200 mg·kg-1组及模型对照组,连续ig给药3 d.角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验,Wistar大鼠,随机分为TSRT 200,100,50 mg·kg-1剂量组,Asp 160 mg·kg-1组及模型对照组,连续ig给药3d.大鼠皮内色素渗出实验,分组及给药剂量同“大鼠足跖肿胀实验”,ig给药1次.小鼠棉球肉芽肿实验,分组及给药剂量同“小鼠耳肿胀实验”,连续ig给药7d.以耳肿胀度、足跖肿胀度、色素渗出量及肉芽肿质量为指标评价TSRT对急、慢性炎症的影响.结果:在小鼠耳肿胀实验中,TSRT 240,120,60 mg·kg-1剂量组小鼠耳肿胀度均明显低于模型对照组(P＜0.01);在大鼠足跖肿胀实验中,致炎后1-4h,TSRT 200,100 mg·kg-1剂量组大鼠足趾肿度均明显低于模型对照组(P＜0.01),致炎后2～4h,TSRT 50 mg·kg-1剂量组大鼠足趾肿度均明显低于模型对照组(P＜0.05);大鼠皮内色素渗出实验中,各剂量组皮内蓝斑的面积及色素渗出量均低于模型对照组(P＜0.05～P＜0.01);大鼠棉球肉芽肿质量显著低于模型对照组(P＜0.05～P＜0.01).结论:赤雹根总皂苷对急慢性炎症有明显的抗炎作用.     

赤雹果水提取物镇痛作用与前列腺素E2关系研究

目的探讨赤雹果水提取物（WEFTD）镇痛作用与前列腺素E2（PGE2）的关系。方法采用小鼠扭体法观察PGE2的镇痛作用。采用PGE2试剂盒检测小鼠腹腔液中PGE2的含量,以吸光度（A）值表示PGE2的含量。结果WEFTD可显著减少小鼠的扭体反应次数（与模型组比较P〈0．05—0．01）,显著降低小鼠腹腔液中PGE2含量（与模型组比较P〈0．05—0．01）。结论WEFTD具有显著的镇痛作用,其镇痛机制与抑制PGE2合成或释放有关。     

赤雹果总有机酸治疗原发性痛经作用机制研究

目的:探讨赤雹果总有机酸(FTDBP)治疗原发性痛经作用机制。方法:将Wistar雌性大鼠48只随机分为正常对照组、模型组、元胡止痛片对照组、FTDBP高、中、低剂量组(剂量分别为0.13,0.26,0.52 g.kg-1)。以20 U.kg-1缩宫素腹腔注射建立大鼠痛经模型,采用酶联免疫分析法检测大鼠血清和子宫组织中前列腺素F2α(PGF2α)含量和子宫组织中内皮素(ET)含量;运用甲基百里香酚蓝比色法(MTB)检测大鼠子宫组织中钙离子(Ca2+)含量。结果:FTDBP高剂量组大鼠血清和子宫组织中前列腺素PGF2α含量均显著低于模型对照组(P<0.01),FTDBP中、低剂量组大鼠血清和子宫组织中PGF2α含量均显著低于模型对照组(P<0.05);子宫组织中Ca2+和ET含量显著低于模型对照组(P<0.01)。结论:FTDBP治疗原发性痛经的作用机制可能是通过抑制大鼠的PGF2α,Ga2+和ET的释放或合成。     

赤雹果不同提取物的镇痛活性比较研究

目的评价赤雹果不同提取物的镇痛活性,筛选镇痛活性强的提取物,为进一步提取和分离其镇痛活性部位或成分提供依据。方法采用小鼠扭体法、小鼠热板法对赤雹果石油醚提取物(F1)、醋酸乙酯提取物(F2)、正丁醇提取物(F3)、乙醇提取物(F4)和水提取物(F5)的镇痛活性进行了比较研究。结果所用的5种赤雹果提取物对2种疼痛模型均有一定的镇痛作用,对小鼠扭体反应的抑制率依次为:F553.6%,F339.4%,F436.3%,F234.6%,F119.0%;在小鼠热板实验,痛阈提高率依次为:F554.6%,F442.9%,F315.6%,F213.0%,F19.1%。结论赤雹果5种提取物均有不同程度的镇痛活性,其中F5镇痛活性最强;F4和F3也有一定的镇痛活性,F2和F1的镇痛活性较弱,结果提示赤雹果镇痛活性物质主要存在于F5,其次是F4和F3。     

赤雹果乙醇提取物治疗 子宫内膜炎继发痛经作用机制研究

目的:探讨赤雹果乙醇提取物(AETF)治疗继发性痛经的机制。方法:采用植入塑料管法,制备大鼠子宫内膜炎继发性痛经模型。观察AETF对模型大鼠子宫组织匀浆中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响。结果:AETF 0.3,0.6,1.2 g.kg-1剂量组子宫组织匀浆中NO的含量明显低于模型组(P<0.01),SOD的活性明显高于模型组(P<0.05);0.6,1.2 g.kg-1剂量组子宫匀浆中MDA的含量明显低于模型组(P<0.01),GSH-Px的活性显著高于模型组(P<0.05)。结论:AETF治疗继发性痛经作用机制与抑制致炎致痛介质的产生和促进过氧化物的清除有关。     

满药赤雹果不同成分抗菌活性研究

目的:研究赤雹果不同提取物体内、外抗菌活性,筛选抗菌活性提取物。方法:体外抗菌实验采用营养肉汤对金黄色葡萄球菌等14个菌株进行试管连续稀释法和营养琼脂扩散法测定赤雹果不同提取物的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度。采用金黄色葡萄球菌26002-6标准株感染昆明种小鼠作为模型测定赤雹果不同提取物对该小鼠的保护作用。结果:赤雹果挥发油对标准菌株:金黄色葡萄球菌26001-26、金黄色葡萄球菌26002-6、大肠杆菌44102-3a3、白色葡萄球菌26069-5、甲型副伤寒杆菌50001-25、乙型副伤寒杆菌50076-1、伤寒杆菌50071-10的MIC分别为0.17,0.08,0.33,0.17,0.33,0.33,0.66 g.L-1,MBC分别为0.17,0.17,0.33,0.33,0.66,0.66,1.32 g.L-1;对临床分离菌株:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌0415、大肠杆菌0416、粪肠球菌0318、奇异变形杆菌、鲍曼不动杆菌0207、肺炎链球菌09030813的MIC分别为0.66,0.66,0.66,0.66,0.08,0.66,1.32 g.L-1,MBC分别为1.32,1.32,1.32,1.32,0.08,1.32,2.64 g.L-1。赤雹果水提物和赤雹果多糖仅对部分细菌有作用。赤雹果挥发油和赤雹果多糖对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有明显保护作用,小鼠平均存活天数为(5.90±1.79),(4.89±2.03)d;赤雹果水提物对金黄色葡萄球菌感染小鼠保护作用较弱。结论:赤雹果抗菌活性部位为挥发油及多糖类成分。     

满药赤雹果水提取物治疗原发性痛经的实验研究

目的 观察赤雹果水提取物(WEFT)对缩宫素诱发小鼠原发性痛经模型及离体大鼠子宫平滑肌兴奋性的影响,为临床用其治疗原发性痛经提供实验依据.方法 采用缩宫素制备小鼠原发性痛经模型,以小鼠扭体反应潜伏期和扭体次数为指标,观察WEFT对缩宫素诱发原发的痛反应的影响;以离体子宫平滑肌收缩幅度和频率为指标,观察WEFT对缩宫素诱发大鼠离体子宫平滑肌兴奋性的影响,借以评价WEFT对原发性痛经治疗作用.结果 ①WEFT 2.0 g/kg,1.0 g/kg组小鼠扭体反应的潜伏期(7.23±1.62)min,(6.49±1.81)min 显著延长,与空白对照组(4.32±1.13) min比较差异显著 (P＜0.05或P＜0.01);扭体反应次数(14.3±3.46)次/30 min,17.4±3.53)次/30 min,与空白对照组(32.3±5.64)次/30 min比较差异显著 (P＜0.01).②在大鼠离体子宫实验中,WEFT的终浓度在0.1～1.6 mg/ml范围内可剂量依赖性的抑制缩宫素诱发的大鼠离体子宫的兴奋性,显著降低离体子宫的收缩的幅度,减少收缩频率,与对照组比较差异有显著意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 WEFT对缩宫素诱发小鼠原发性痛经模型的痛反应和大鼠离体子宫平滑肌兴奋性有显著的抑制作用,提示WEFT对原发性痛经有显著的治疗作用.     

赤雹果总有机酸对大鼠离体子宫平滑肌的作用及机制研究

目的:观察赤雹果总有机酸(FTDBP)对大鼠离体子宫平滑肌活力的影响.方法:选用8周龄Wistar雌性未孕大鼠,以子宫平滑肌的收缩频率、收缩幅度指标,计算子宫平滑肌活力及FTDBP的半数抑制浓度(IC50).以盐酸普萘洛尔、盐酸苯海拉明、盐酸雷尼替丁、硫酸阿托品为阻断剂,观察FTDBP对子宫平滑肌作用与β,H1,H2,M受体的关系,探讨FTDBP对子宫平滑肌的作用机制.结果:与模型组比较,FTDBP剂量组(0.032,0.064,0.128 g·L-1)和元胡止痛片组对缩宫素所致大鼠离体子宫平滑肌的收缩频率、收缩幅度和活力均有明显的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),IC50为0.100 24 g·L-1;与模型组比较,硫酸阿托品组大鼠子宫平滑肌的收缩频率、幅度和活力差异无统计学意义.结论:FTDBP对大鼠子宫平滑肌活力有明显的抑制作用,其作用是通过抑制M受体实现的,与H1,H2,β受体无关.     

满药赤雹果挥发油体外抗菌活性研究

目的研究赤雹果挥发油体外抗菌活性。方法采用试管连续稀释法和琼脂扩散法测定赤雹果挥发油的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果赤雹果挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(两株)、粪肠球菌、鲍曼不动杆菌临床分离株和伤寒杆菌标准株的MIC为0.66 mg/ml,MBC为1.32 mg/ml;对大肠杆菌44102-3a3的MIC为0.33 mg/ml,MBC为0.33 mg/ml;对甲型副伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌的MIC为0.33 mg/ml,MBC为0.66 mg/ml;对金葡菌26001-26和白葡菌的MIC均为0.17 mg/ml,MBC分别为0.17 mg/ml和0.33 mg/ml;对金葡菌26002-6和奇异变形杆菌的MIC为0.083 mg/ml,MBC分别为0.17 mg/ml和0.083 mg/ml;对肺炎链球菌的MIC为1.32 mg/ml,MBC为2.64 mg/ml。结论赤雹果挥发油在体外有显著的抗菌作用。     

赤雹根镇痛作用及有效部位研究

目的 观察赤雹根的镇痛作用并筛选其有效部位.方法 采用小鼠48℃热板法和扭体法,观察赤雹根水提物、醇提物及醇提物的石油醚萃取物、氯仿萃取物、正丁醇萃取物及水溶性部分的镇痛作用.结果 除石油醚萃取物以外,其余赤雹根各提取物均能明显延长热板试验小鼠痛反应潜伏期,减少ip酒石酸锑钾所致小鼠扭体次数,上述作用的主要有效部位之一为正丁醇萃取物中所含的总皂苷.结论 赤雹根具有明显的镇痛作用,其所含总皂苷为其镇痛作用的主要有效部位之一.     

赤雹果多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 观察赤雹果多糖对免疫抑制模型小鼠免疫功能的影响.方法 采用环磷酰胺(CY)造模法制作小鼠免疫抑制模型,观察赤雹果多糖对实验动物免疫器官重量指数、碳粒廓清能力、迟发型变态反应(DTH)、溶血素(IgM)含量的影响.结果 赤雹果多糖400,200 mg·kg-1剂量组能显著提高小鼠免疫脏器指数、单核巨噬细胞的吞噬功能及小鼠迟发型超敏反应, 促进溶血素的生成.结论 赤雹果多糖有显著提高免疫抑制小鼠免疫功能的作用.     

赤雹不同药用部位中总黄酮含量的测定

目的 建立赤雹不同药用部位中总黄酮含量的测定方法.方法 以芦丁为标准品,采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定赤雹不同药用部位中总黄酮的含量.结果 芦丁在5～50 μg/ml范围内呈良好的线性关系;平均回收率(赤雹全草、叶、果实,n=6)分别为99.4%,99.1%,98.7%,RSD分别为1.77%,1.83%,1.83%.结论 该方法简单,数据可信,为科学使用赤雹不同药用部位提供了可靠依据.     

赤雹根总皂苷镇痛作用机制研究

目的探讨赤雹根总皂苷(TSTD)镇痛作用与阿片受体、NO及PGE2的关系,为其临床应用提供实验依据。方法采用小鼠热板法实验,观察纳洛酮、L-精氨酸(L-Arg)和左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对赤雹根总皂苷镇痛作用的影响,探讨其镇痛作用与阿片受体及NO含量的关系;通过观察TSTD对疼痛模型小鼠组织中PGE2含量的影响,探索其镇痛作用与PGE2的关系。结果 TSTD组痛阈显著高于模型组(P<0.01);TSTD组与纳洛酮+TSTD组痛阈差异无显著统计学意义(P>0.05);L-Arg+TSTD组痛阈显著低于TSTD组(P<0.01)。TSTD+L-NAME组痛阈高于TSTD组。TSTD组小鼠血清和脑组织中NO的含量显著低于NS对照组(P<0.05),TSTD+L-Arg组NO含量高于TSTD组(P<0.05),TSTD+L-NAME组NO含量低于TSTD组(P<0.05)。TSTD组动物腹腔液和血清中PGE2的含量低于NS对照组(P<0.01)。结论 TSTD镇痛作用与阿片受体无关,与抑制NO和PGE2的合成或释放有关。     

赤雹根总皂苷镇痛作用研究

目的:观察赤雹根总皂苷的镇痛作用,探讨赤雹根镇痛作用的有效部位。方法:采用小鼠48℃热板法、小鼠48℃热水浸尾法、灌胃酒石酸锑钾致小鼠扭体法,评价赤雹根总皂苷的镇痛作用。结果:48℃热板试验中,赤雹根总皂苷各剂量组(240mg/kg、120mg/kg、60mg/kg)小鼠痛反应潜伏期(35.73±3.84)s、(28.20±3.74)s、(27.00±3.38)s均显著高于NS对照组(24.88±5.02)s,且差异有统计学意义(P<0.05～0.01)。小鼠48℃甩尾实验中,赤雹根总皂苷各剂量组药后40min、60min缩尾潜伏期(11.89±1.36)s、(10.83±1.09)s、(10.30±2.20)s、(8.98±1.65)s、(9.08±1.22)s、(8.01±2.04)s均显著高于NS组(7.27±1.32)s,且差异有统计学意义(P<0.05)。酒石酸锑钾致小鼠扭体反应实验中,赤雹根总皂苷各剂量组15min内小鼠扭体反应次数(24.10±2.77)次、(28.40±3.75)次、(35.60±4.99)次均显著低于NS组(40.40±5.04)次,且差异有统计学意义(P<0.05～0.01)。结论:赤雹根总皂苷具有显著的镇痛作用。     

赤雹根总皂苷对类风湿性关节炎大鼠血清细胞因子的影响

目的研究赤雹根总皂苷对类风湿性关节炎大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α的影响。方法以弗氏完全佐剂诱导大鼠佐剂性关节炎,将造模成功50只大鼠随机分为模型组,赤雹根总皂苷160,80,40 mg/(kg·d)组和雷公藤12 mg/(kg·d)组,另取10只正常大鼠作正常对照。连续灌胃给药21 d。观测各组大鼠继发关节肿胀度和关节炎指数;给药后第22天,处死大鼠,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量。结果赤雹根总皂苷能明显降低佐剂性关节炎大鼠继发侧的关节肿胀度和关节炎指数(P<0.01);与正常对照组相比,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高(P<0.01);赤雹根总皂苷灌胃治疗后,各组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量较模型组明显降低(P<0.01)。结论赤雹根总皂苷对大鼠类风湿性关节炎有治疗作用,且该作用与抑制IL-1β、IL-6、TNF-α的合成有关。     

正交实验法优选满药赤雹果挥发油的提取工艺

目的采用正交实验法优选满药赤雹果挥发油的最佳提取工艺条件。方法采用水蒸气蒸馏法,以挥发油收率为指标,以药材粉碎粒径(A)、浸泡时间(B)、加水量(C)、提取时间(D)为影响因素进行正交实验。结果最佳提取工艺条件为粉碎粒径10目,浸泡时间4h,加水量12倍,蒸馏时间7 h。结论优选得到的提取工艺简单、易行。     

赤雹根总皂苷体外诱导人白血病NB4细胞凋亡及其机制研究

目的 探讨赤雹根总皂苷(TSTR)对白血病NB4细胞的诱导凋亡作用及其机制.方法 以不同的浓度的TSTR作用于体外培养的NB4细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞术(FCM)检测不同浓度TSTR作用后细胞凋亡率,应用Western blot检测细胞凋亡后Caspase-3及其裂解底物多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP(poly ADP-ribose polymerase)的表达水平.结果 与空白对照组比较,给药24 h后,TSTR能显著抑制NB4细胞增殖和促进NB4细胞凋亡,并呈剂量依赖性,Western blot检测结果表明TSTR作用24h后Caspase-3酶原呈下调趋势,出现的17kDa亚单位呈上调趋势,同时PARP裂解出现89kDa的亚单位呈上调趋势.结论 TSTR对白血病NB4细胞具有显著的抑制增殖和诱导凋亡作用,TSTR诱导NB4细胞凋亡可能通过激活Caspase-3而实现.     

The analgesic and anti-rheumatic effects of Thladiantha dubia fruit crude polysaccharide fraction in mice and rats

Ethnopharmacological relevance

The fruit of Thladiantha dubia has been used in Chinese manchu nationality folk medicine for treatment of various pains, such as rheumatic pain, lumbocrural pain, and dysmenorrhea. The aim of the present study was to evaluate the anti-rheumatic effect of Thladiantha dubia fruit crude polysaccharide (TF-P) fraction in rats.

Materials and methods

TF-P was evaluated in mice for analgesic activity using acetic acid-induced abdominal contractions test and for anti-inflammatory activity using xylene-induced ear oedema model. Moreover, rheumatoid arthritis (RA) was induced by injection of CFA into the subplantar surface of the hind paw of the male Wistar rats. Joint swelling was measured. In order to evaluate the effect of TF-P on disease progression, proinflammatory mediators (TNF-α and IL-2), and antioxidant indicators (SOD, MDA, and NO) were determined in rats induced by CFA. Pathologic changes of RA in rats were also observed under light microscope.

Results and conclusions

In the present study, TF-P at the dose of 200 mg/kg (according to the clinical traditional dosage) significantly reduced writhings and stretchings induced by the acetic acid in mice. TF-P significantly inhibited xylene-induced ear oedema in mice, compared with control group. TF-P significantly inhibited inoculated and non-inoculated joint swellings in rats induced by CFA. TF-P had no effect of body weight in rats. The histopathological analysis suggested that TF-P obviously alleviated the degree of RA rats. TF-P treated rats preserved a nearly normal histological architecture of the joint.Results of the present study confirm the use of Thladiantha dubia traditionally for the treatment of painful and inflammatory conditions. Those results suggest TF-P has protective and therapeutic effects on RA rats induced by CFA.