乙酰肝素酶蛋白表达与肝癌侵袭转移关系的研究

乙酰肝素酶（heparanase,HPSE）是一种葡糖苷酸内切酶,能特异性降解硫酸肝素多糖的硫酸肝素侧链,破坏细胞外基质和基底膜,乙酰肝素酶与肿瘤血管形成、侵袭转移密切相关。我们采用免疫组织化学法检测 HPSE 蛋白在肝细胞肝癌、癌旁肝组织及正常肝组织中的表达,探讨 HPSE 蛋白与肝癌临床病理特征的关系。     

肝细胞肝癌中乙酰肝素酶mRNA的表达及其意义

目的：探讨在肝细胞肝癌中乙酰肝素酶（heparanase，HPA）mRNA的表达和临床意义，及其同患者预后和临床病理特征的关系。方法：用实时荧光定量PCR检测30例肝细胞肝癌患者肝癌肝组织及非肝癌肝组织中乙酰肝素酶基因和GAPDH基因的表达，通过2^-△△CT。方法分析相对基因表达差异。结果：肝癌组织中HPA mRNA的表达水平明显低于同一患者非肝癌肝组织中该基因的表达。结果采用配对样本的Wilcoxon符号秩检验，P=0．027〈0．05，差异有显著性。结论：HPA mRNA表达的降低可能是导致肝癌发生和进展的原因。     

乙酰肝素酶在肿瘤侵袭转移中的表达及其相关调控

乙酰肝素酶是一种内切-β-葡萄糖醛酸苷酶。可以特异性的切割细胞外基质上的硫酸肝素蛋白多糖。在炎症、恶性肿瘤等病理过程中呈过度表达。在肿瘤细胞的侵袭和转移过程中发挥重要的作用。在正常生理状态下,乙酰肝素酶的基因以及蛋白的表达受到机体内多方面的调控。     

肝素酶表达与胃癌生物学行为的关系

胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一，在我国恶性肿瘤的死亡率统计中，胃癌居于首位。目前对胃癌转移分子机制的研究，已经成为胃癌研究领域的关键问题。随着淋巴结清除术的推广和规范，以及综合治疗技术的应用，胃癌的治疗效果有所提高，但对其生物学行为的判定尚缺乏有效的分子生物学指标。本研究采用免疫组化SP法及RT-PCR检测胃癌组织及癌旁组织中肝素酶的表达情况，探讨肝素酶与胃癌侵袭和转移的相互关系。     

肝素酶RNAi对HepG2肝癌细胞生物学行为的影响

目的利用筛选出的肝素酶有效干扰细胞株HepG2/RNAi/1和HepG2/RNAi/3研究肝素酶RNAi对HepG2肝癌细胞生物学行为的影响。方法通过MTT实验、流式细胞技术、平皿克隆形成实验、Transwell侵袭实验、裸鼠成瘤实验分别检测HepG2肝癌细胞肝素酶RNAi后生长速度、单个细胞形成克隆能力、侵袭能力及成瘤能力的变化。结果MTT实验表明HepG2/RNAi/1与HepG2/RNAi/3组细胞增殖能力明显低于HepG2组和HepG2/RNAi/N组;流式细胞生长周期实验表明,与HepG2和HepG2/RNAi/N细胞相比,HepG2/RNAi/1与HepG2/RNAi/3 G0/G1期细胞比例增加,而增殖指数下降;平皿克隆形成实验表明HepG2/RNAi/1与HepG2/RNAi/3组单个细胞形成克隆的能力与HepG2组和HepG2/RNAi/N组相比显著降低[分别为(34±4)、(26±5)和(138±7)、(123±22),P<0.05)];Transwell体外侵袭实验表明,HepG2/RNAi/1与HepG2/RNAi/3细胞穿膜数较HepG2和HepG2/RNAi/N细胞穿膜数明显减少[分别为(85.1±9.1)、(78.1±10.4)和(182.2±9.7)(、183.5±9.3),P<0.05)];裸鼠成瘤实验显示,HepG2、HepG2/RNAi/N细胞成瘤率为100%,虽然HepG2/RNAi/1细胞成瘤亦为100%,但裸鼠皮下肿瘤体积较HepG2、HepG2/RNAi/N细胞明显缩小[分别为(0.099±0.030)和(0.585±0.135)(、0.690±0.099),P<0.01)],而HepG2/RNAi/3细胞裸鼠皮下未见肿瘤形成。结论肝素酶RNA干扰可以明显抑制HepG2肝癌细胞增殖速度、单个细胞克隆形成能力、体外侵袭能力以及裸鼠皮下成瘤能力。     

肝癌组织中基质金属蛋白酶表达与侵袭转移的关系研究

目的检测肝癌患者血液及组织中MMP-2、MMP-9的表达,分析二者与肝癌侵袭转移的关系。方法选取2013年1月至2014年10月在我院住院行手术切除的肝细胞癌(HCC)患者40例作为试验组,经病理确诊为HCC,且未经放、化疗等抗肿瘤治疗;对照组患者40例,包括局灶性增生性结节16例,肝血管瘤13例,肝外伤11例。采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学法检测入组患者血液及组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达。结果采用酶联免疫吸附法对两组患者MMP-2、MMP-9的水平进行检测,结果发现,试验组患者血液中MMP-2水平(0.384±0.026)、MMP-9水平(0.337±0.012)明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);采用免疫组织化学法对试验组肝癌组织、癌旁组织、对照组进行MMP-2、MMP-9的检测,结果发现,肝癌组织中MMP-2强阳性(+++)表达30例,MMP-9强阳性(+++)表达31例,阳性率为87.5%、85.0%;癌旁组织无MMP-2、MMP-9强阳性表达,阳性率分别为10.0%、12.5%;对照MMP-2、MMP-9阳性率分别为7.5%、10.0%。试验组肝癌组织MMP-2、MMP-9的表达阳性率较癌旁组织及对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-2、MMP-9的表达与静脉浸润、肝内外转移、包膜有关(P<0.05),与性别、年龄、病灶大小、肝硬化、甲胎蛋白(AFP)、HBs Ag无关(P>0.05)。结论 MMP-2、MMP-9在肝癌中表达升高,与有无静脉浸润、有无肝内外转移及有无包膜有关,并且出现静脉浸润、有肝内外转移、无包膜的肝癌中,MMP-2、MMP-9表达明显升高,与肝癌的生长、侵袭和转移有密切的关系。     

DLC-1基因在原发性肝癌组织中表达的临床意义研究

目的研究DLC-1基因与肝癌发生、转移乃至复发的临床意义。方法收集南通大学附属肿瘤医院2005年3月-2006年10月间73例HCC及癌旁正常组织（其中12例含癌栓）和24例肝血管瘤手术切除标本，标本均经过病理证实。依据临床以及病理学特征分为高侵袭组币口低侵袭组，采用PCR对所有组织标本DLC-1基因表达进行分析。结果研究发现肝血管瘤、癌旁组织、部分肝癌组织中表达的DLC-1基因大约为450bp，肝癌组织、癌旁组织和肝血管瘤中DLC-1基因表达阳性率依次为69．86％，97．26％和100％，统计学分析这三种组织之间有明显差异（P〈0．05）。DLC-1基因表达在HCC高侵袭组明显低于低侵袭组，二者之间有明显的差异（P〈0．05）。短期随访发现DLC-1表达阴性者的HCC患者中住生存期低于表达阳性患者，且易复发（P〈0.05）。结论定期动态监测高危人群的DLC-1基因表达可能对肝癌患者早期转移复发有一定的临床诊断价值。     

乙酰肝素酶与妇科肿瘤转移

乙酰肝素酶（Hpa）是一种能切割细胞外基质和基底膜中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）多糖侧链一硫酸乙酰肝素（HS）的葡萄糖醛酸内切酶。硫酸乙酰肝素蛋白聚糖是一种广泛存在于脊椎动物组织细胞外基质（ECM）和细胞表面的复杂的生物大分子，是构成基底膜的主要成分。乙酰肝素酶通过催化HS侧链的N硫酸葡萄胺末端硫酸酯，切断细胞表面和ECM中HSPG上的侧链，从而破坏基底膜和ECM的稳定结构，降低细胞间的屏障作用，释放结合HSPG的活性分子，产生一系列生物效应。     

肝素酶 mRNA在乳腺癌组织中的表达研究

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,具有较强的侵袭性和转移性。而肿瘤细胞要实现侵袭和转移,首先必须突破由基底膜和细胞外基质构成的组织屏障。近来的研究发现,肝素酶(heparanase,Hpa)不仅可以特异性地降解该屏障的主要成分--硫酸乙酰肝素蛋白多糖,还能协同多种因子,通过多条     

乙酰肝素酶与肿瘤关系的研究进展

对乙酰肝素酶(HPSE)的基因定位、结构、生物学作用及其对肿瘤血管生成的影响,特别是HPSE在恶性肿瘤组织中的表达情况和该酶参与肿瘤转移的机制进行综述。     

口腔鳞状细胞癌侵袭和转移过程中上皮-间充质细胞转换作用的研究进展

上皮-间充质细胞转换（epithelial—mesenehymaltransition,EMT）是一个动态的、可逆的过程,使细胞从鹅卵石状的上皮表型转向细长的间充质表型。受微环境和很多因素的诱导,EMT参与胚胎发育、慢性炎症、伤口愈合及肿瘤侵袭转移过程。细胞经历EMT后具有多种生物学特性,包括迁移、侵袭、被诱导成干细胞、防止凋亡、防止衰老及抑制免疫等,在肿瘤的转移、复发和耐药中起着关键作用。弄清EMT在口腔鳞状细胞癌（oralsquamouscellcarcinoma,OSCC）中的作用机制,有助于了解OSCC发展的生物学行为,以发现新的生物标志物用于OSCC患者的诊断、靶向治疗和预后判定。     

环氧化酶-2与大肠癌侵袭及转移的关系

目的探讨环氧化酶-2(COX2)的表达与大肠癌侵袭和转移的关系。方法采用免疫组化法检测44例大肠癌患者肠黏膜标本中COX2的表达情况。结果 COX2的表达在不同TNM的分期组、有无浆膜浸润组及有无淋巴结转移组中差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 COX2表达与大肠癌侵袭、转移呈正相关,其表达增加提示大肠癌有较高的恶性生物学行为。     

CT灌注成像肝细胞癌边缘血流灌注与肿瘤转移和预后的关系

目的 采用CT灌注成像研究肝细胞癌边缘血流动力学变化和肿瘤发生转移的关系,以探讨预测肝癌发生转移的潜在可能性.方法 选择34例经手术病理证实的肝细胞癌患者,术前全部病例进行多层螺旋CT灌注成像,统计瘤周组织的血流灌注指标,并将结果与患者随访情况进行比较分析.结果 ①肿瘤边缘出现高灌注组发生转移的机会明显高于轻中度灌注组.②肿瘤边缘出现高灌注带组转移发生率明显高于无高灌注带组.③肿瘤边缘高灌注带与镜下血管计数呈正相关.结论 可以从肝细胞癌边缘有无异常血流灌注来判断肿瘤是否发生潜在转移.     

金属蛋白酶-2/金属蛋白酶组织抑制因子2比值与肝细胞癌侵袭力的关系研究

目的:探讨金属蛋白酶-2/金属蛋白酶组织抑制因子2、非活化金属蛋白酶-2前酶/金属蛋白酶组织抑制因子2比值与肝细胞癌侵袭力的关系。方法:利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱和反向酶谱分析技术对32例肝细胞癌组织中金属蛋白酶-2和金属蛋白酶组织抑制因子2含量及非活化的金属蛋白酶-2前酶/金属蛋白酶组织抑制因子-2,金属蛋白酶-2/金属蛋白酶组织抑制因子2比值进行检测并对比分析。结果:金属蛋白酶组织抑制因子2的分子量为18 000;癌旁组织中非活化金属蛋白酶-2的前酶/金属蛋白酶组织抑制因子2(0.94),金属蛋白酶-2/金属蛋白酶组织抑制因子2(0.42)均<1.0;肝细胞肝癌组织中非活化金属蛋白酶-2前酶/金属蛋白酶组织抑制因子2(1.70),金属蛋白酶-2/金属蛋白酶组织抑制因子2(1.64)均>1.0;转移组的2项比值也明显高于无转移组(P<0.01)。结论:非活化金属蛋白酶-2前酶/金属蛋白酶组织抑制因子2,金属蛋白酶-2/金属蛋白酶组织抑制因子2的异常变化可能是评价肝细胞癌生物学行为的有力指标。     

CCR3在肾透明细胞癌中的表达及对肾透明细胞癌细胞侵袭、转移能力的影响

目的 研究CCR类趋化因子受体3(CCR3)在肾透明细胞癌中的表达及对肾透明细胞癌细胞侵袭、转移能力的影响.方法 回顾性选取2019年4月至2020年4月在湖南中医药高等专科学校附属第一医院就诊的肾透明细胞癌组织标本50例,选取50例癌旁组织为对照,进行免疫组化染色.选取人肾透明细胞癌细胞系786-0和人肾透明细胞癌细...     

黄嘌呤氧化还原酶的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的:探讨胃癌中黄嘌呤氧化还原酶(XOR)的表达及其与胃癌侵袭转移的关系,评估其在胃癌中的意义。方法:采用SP免疫组化技术,检测264例胃癌组织标本中XOR的表达水平,研究XOR表达与临床病理参数以及5年生存率之间的关系。结果:XOR在胃癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织(P<0.01);XOR表达与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结状况、肿瘤大小有密切关系(P<0.05)。XOR高表达者5年生存率为47%,XOR低表达者为22%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.001)。XOR低表达者预后不良。结论:XOR可能是胃癌具有侵袭生物学特性的一个新的标志物。     

原发性肝细胞癌超声造影表现与DNA增殖水平关系探讨

目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)超声造影增强表现与肝癌细胞DNA增殖水平的关系及其临床意义。方法48例分为3组,A组(HCC典型组):超声造影呈“快进快退”28例;B组(HCC非典型组):呈“快进慢退”7例;C组:肝内局灶性结节性增生(FNH)13例。造影后记录各肿瘤结节的造影始增时间、峰值时间、始退时间及增强持续时间,并行统计学分析。造影结束后48例均行超声引导经皮穿刺活检并送病理组织学检查与流式细胞术检查,记录各肿瘤结节细胞增殖的DNA各期比率以及增殖系数(PI),计算各组间DNA非整倍体(异倍体)干系的百分比率,并行统计学分析。最后,对所有肝癌结节及A、B两组肝癌结节的造影增强持续时间和肿瘤细胞DNAS期比率及增殖系数做相关性分析。结果超声造影检查:始退时间A组(36.96±4.73)s明显短于B组(64.14±5.43)s与C组(59.69±7.45)s(均P<0.05);增强持续时间A、B与C组分别为(54.26±10.98)s,(116.71±12.96)s和(169.15±35.03)s,3组间差异均具有统计学意义(均P<0.05)。肿瘤细胞DNA分析:A组肝癌细胞表现为高增值的S期比率及增殖系数分别为(34.60±4.18)%、(50.26±5.64)%,均显著高于B组的(23.65±3.34)%、(33.46±4.63)%和C组的(2.74±0.38)%、(4.31±0.92)%(均P<0.05),而B组的S期比率与增殖系数也明显高于C组(P<0.05)。A组异倍体峰出现率高达57.14%(16/28),B、C组则无一例出现异倍体峰。相关性分析:35例HCC造影增强持续时间与其S期比率及PI间呈负相关关系,相关系数rs=-0.77,rPI=-0.81,P<0.05。结论肝癌超声造影呈短增强持续时间者,其DNA呈高增殖状态,恶性度高;而呈长增强持续时间者,其DNA呈低增殖状态,恶性度低。     

Fucoidan-induced ID-1 suppression inhibits the in vitro and in vivo invasion of hepatocellular carcinoma cells

Hepatocellular carcinoma (HCC) is a fast growing tumor associated with a high tendency for vascular invasion and distant metastasis. Recently, we reported that fucoidan displays inhibitory effect on proliferation and invasion of HCC cells. In this study, we investigated the anti-metastatic effect of fucoidan on HCC cells and the key signal that modulates metastasis. The anti-metastatic effect of fucoidan was evaluated in vitro using an invasion assay with human HCC cells (Huh-7, SNU-761, and SNU-3085) under both normoxic (20% O₂ and 5% CO₂, at 37 °C) and hypoxic (1% O_2, 5% CO₂, and 94% N_2, at 37 °C) conditions. Complementary DNA (cDNA) microarray analysis was performed to find the molecule which is significantly suppressed by fucoidan. In vivo study using a distant metastasis model by injecting SNU-761 cells into spleen via portal vein was performed to confirm the inhibitory effect by small interfering RNA (siRNA) transfection. Immunoblot analyses were used to investigate the signaling pathway. Fucoidan significantly suppressed the invasion of human HCC cells (Huh-7, SNU-761, and SNU-3085). Using cDNA microarray analysis, we found the molecule, ID-1, which was significantly suppressed by fucoidan treatment. Downregulation of ID-1 by siRNA significantly decreased invasion of HCC cells, both in vitro and in vivo (both P < 0.05) in a NDRG-1/CAP43-dependent manner. In immunoblot assay, downregulation of ID-1 by siRNA decreased the expressions of epithelial-mesenchymal transition markers including CK19, vimentin, MMP2, and fibronectin. Immunofluorescence study also revealed that actin rearrangement was inhibited when ID-1 was down-regulated in HCC cells. Interestingly, in SNU-761 cells, the ID-1 expressions under hypoxic conditions were lower as compared to those under normoxic conditions. Under hypoxic conditions, HIF-1α up-regulated NDRG-1/CAP43, while HIF-2α down-regulated ID-1, which might be a compensatory phenomenon against hypoxia-induced HCC invasion. In conclusion, NDRG-1/CAP43-dependent down-regulation of ID-1 suppressed HCC invasion both in vitro and in vivo, which was modulated by fucoidan treatment. Moreover, the compensatory down-regulation of ID-1 against hypoxia-induced HCC invasion was observed. ID-1 is a novel therapeutic target for the treatment of metastatic HCC.     

Recurrent hepatocellular carcinoma: usefulness of ultrasonography compared with computed tomography and AFP assay.

Follow-up studies using monitoring with alpha1-feto protein (AFP), ultrasonography (US), and computed tomography (CT) were carried out in 75 patients who had prior partial hepatectomy for hepatocellular carcinoma (HCC). Recurrence in the remaining liver was confirmed in 31 patients (41.3%) during the 4 month to 3 years 7 month period. Ultrasonography detected recurrence in 29 cases (sensitivity: 93.5%), CT in 26 (83.9%), and AFP assay in 12 (38.7%). In 4 patients, ultrasonography detected four recurrent nodules that CT missed. In 1 patient, two subphrenic nodules were detected with CT but not with ultrasonography. The specificity of US, CT, and AFP assay was 90.9%, 95.5%, and 93.2% respectively. Frequent follow-up study with ultrasonography in combination with CT and AFP assay should be recommended for the early detection of recurrent HCC. Ultrasonography is mandatory for the follow-up of patients with a prior hepatectomy for HCC.