急性期哮喘患儿Th17细胞与T调节细胞平衡的临床研究

全球哮喘防治创议（GINA）使得绝大多数哮喘患者的情况得以很好的控制,但仍有部分患者的症状恶化,究其根本原因就是哮喘的发病机制仍然不明确,早期的研究多集中在Th1/Th2失衡这一理论的问题,但随着研究的不断深入,Th17细胞与T调节细胞相继进入了研究的视野,这两类细胞可以解释一些Th1/Th2失衡理论所不能解释的问题,     

细胞凋亡的概念,调节及与幽门螺杆菌感染

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因,与胃癌的发生亦有密切关系,WHO已将HP列为一种致癌因子,但其确切致病机制尚不清楚。从细胞动力学和分子生物学角度探讨HP感染与胃癌的关系是近年来HP研究的热点之一。较长期以来,细胞异常增殖一直被认为是肿瘤生成的重要环节,但现认为细胞增殖与分化异常并非肿瘤发生的唯一因素,细胞凋亡(apoptosis)在     

Th17/Treg平衡调节与疾病的关系研究进展

机体内初始CD4＋T细胞受到外来抗原刺激后,经过增殖并分化为各种效应T细胞,在IL-12和IFN-γ的诱导下分化为Thl细胞,产生IFN-γ,促进机体细胞免疫,从而发挥抗感染、抗肿瘤作用;在IL-4诱导下分化为Th2细胞,分泌IL-4、IL-5和IL-13,介导机体的体液免疫和超敏反应,     

胃癌患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的免疫抑制调节

目的:研究胃癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞(Treg细胞)对免疫效应细胞以及树突状抗原提呈细胞的抑制调节作用.方法:应用流式细胞术(FACS)测定实验组和对照组患者术前外周血中T淋巴细胞及Treg细胞含量的改变;对外周血中树突状细胞(DC细胞)进行体外培养活化,检测其表面分子CD80和CD83的表达情况;实验组利用免疫磁珠法在培养前去除Treg细胞,以胃癌BGC-823细胞作为靶细胞,效靶比=20:1,应用CCK-8试剂盒观察不同实验组激活的CTL的细胞毒杀伤反应的差异.结果:诱导辅助性T细胞(CD4+T)总数较健康对照组降低(t=2.847,P<0.01),Treg细胞含量高于健康对照组(t=7.431,P<0.01);表面分子CD80和CD83在胃癌患者外周血 DC表面表达较对照组F降(t=16.90,21.43,P<0.01);实验组CTL对胃癌细胞杀伤效率高于对照组(t=2.98,P<0.01).结论:Treg细胞对抑制荷瘤机体内自身抗肿瘤反应有密切关系.     

调节性T细胞与寄生虫感染免疫调节

调节性T细胞参与几乎全部的寄生虫病免疫反应,是寄生虫感染免疫调节的重要环节。本文就天然调节性T细胞在寄生虫感染过程中的免疫调节作用、机制及其临床治疗价值进行了讨论,期望有助于发展控制寄生虫感染的新方法。     

先天性心脏病术后肺部感染与Th17/Treg细胞的相关性

目的探讨Th17/Treg细胞及其细胞因子在先天性心脏病术后肺部感染患儿中的变化及意义。方法选取先天性心脏病行手术治疗的患儿69例,其中术后发生肺部感染47例为肺部感染组,根据严重指数（PSI）分为轻度感染组、重度感染组,无感染组22例。采用流式细胞分析法检测外周血中 Th17 细胞、Treg 细胞占 CD4+T 细胞的比例,酶联免疫吸附法（ELISA）检测所有研究对象血清白细胞介素（IL）-6、IL-10、IL-17、IL-21、转化生长因子-β（TGF-β）含量,检测凝血指标,并记录患者入院第1天血清C反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、红细胞沉降率（ESR）、白细胞（WBC）计数等实验室指标;应用Pearson法分析分析 Th17 细胞与 Treg 细胞的比例与肺部感染指标的相关性;采用logistic回归分析法评估先天性心脏病患者术后肺部感染影响因素。结果与无感染组相比,轻度感染组CD4+Th17细胞比例、Th17/Treg细胞比显著升高（P<0.05）,重度感染组CD4+Th17、CD4+CD25+Treg细胞比例、Th17/Treg细胞比均显著升高（P<0.05）;与轻度感染组相比,重度感染组CD4+Th17、CD4+CD25+Treg细胞比例、Th17/Treg细胞比均显著升高（P<0.05）;与无感染组相比,轻度感染组与重度感染组IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β水平升高 （P<0.05）;与轻度感染组相比,重度感染组IL-17、IL-22、IL-10、TGF-β水平升高（P<0.05）;Pearson分析显示：CD4+Th17比例与CRP、PCT、BNP呈正相关（r=0.570、0.623、0.515,P＜0.05）;CD4+、CD25+Treg比例与BNP呈正相关（r=0.513,P<0.05）,与CRP、PCT呈一般正相关（r=0.315、0.360,P<0.05）;Th17/Treg比例与CRP、PCT、BNP呈显著正相关（r=0.562、0.613、0.596,P<0.05）。结论Th17/Treg 细胞失衡可能直接参与先天性心脏病术后肺部感染,并与病情发展相关。     

T细胞的分子免疫负调节机制

免疫系统作为机体防御系统的核心，具有极其完善的调节机制，可识别各种抗原，诱发免疫应答，并最终将之清除。在一系列正性应答同时，免疫系统的负调节机制也在发挥作用，两者之间的平衡推动着机体免疫反应的继续运作。免疫系统的负调节机制，一方面可调节活化信号传导的方向、状态；另一方面，伴随免疫应答防止超敏反应的发生。前者是细胞内活化信号不同功能的体现，或者是诱导针对变应原无反应性，也可以有不同活化信号参与的调节；     

γδT细胞与抗结核感染免疫

γδT细胞是T细胞的一种,在机体抗结核杆菌感染中发挥重要的作用。本文通过介绍γδT细胞的发生、发育和分布、抗原识别和活化、信号传导和其所具有的功能,阐述该细胞在抗结核分枝杆菌感染免疫反应中的具体作用。     

干扰素调节因子4与T细胞分化及免疫性疾病的研究进展

干扰素调节因子4(IRF4)是IRFs家族一员,经一系列信号转导作用发挥转录激活或阻遏,调节干扰素的表达、淋巴细胞的分化发育及活性,参与免疫调控。IRF4与白细胞介素、信号转导及转录激活因子、活化T细胞核因子等细胞因子相互作用调节T细胞分化,形成复杂的平衡网络调控系统,平衡网络遭到破坏则免疫功能紊乱,并诱发免疫性疾病,如哮喘、炎症性肠病、关节炎、自身免疫性疾病,其与复发性流产的关系正在探索之中。     

成体细胞逆向分化的调控因子

目前成体细胞逆向分化的研究比较热。其中利用逆转录病毒载体携带诱导因子Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4或Oct4、SOX2、Nanog、Lin28可以启动成纤维细胞发生重排逆向分化为胚胎样干细胞。成纤维细胞的逆向分化是一个很复杂的过程,这些诱导因子有的是促进成纤维细胞逆向分化的,有的是抑制成纤维细胞逆向分化的。总之在不同的时期这些诱导因子各自发挥着不同的作用,从而使成纤维细胞逆向分化。本文就成体细胞逆向分化的调控因子研究现状及展望作一综述。     

成体细胞逆向分化的调控因子

目前成体细胞逆向分化的研究比较热。其中利用逆转录病毒载体携带诱导因子Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4或Oct4、SOX2、Nanog、Lin28可以启动成纤维细胞发生重排逆向分化为胚胎样干细胞。成纤维细胞的逆向分化是一个很复杂的过程,这些诱导因子有的是促进成纤维细胞逆向分化的,有的是抑制成纤维细胞逆向分化的。总之在不同的时期这些诱导因子各自发挥着不同的作用,从而使成纤维细胞逆向分化。本文就成体细胞逆向分化的调控因子研究现状及展望作一综述。     

膀胱癌T-24细胞系中细胞角蛋白20的分离纯化及鉴定

目的分离纯化细胞角蛋白20(Cytokeratin20,CK20)并加以鉴定,为进一步研制抗CK20单克隆抗体奠定基础。方法培养人膀胱肿瘤T-24细胞系并用免疫组化检测CK20表达,然后大量培养并收集细胞,超声波细胞粉碎后,先用萃取、高速离心、透析等方式进行蛋白初分离,然后利用以DE52为介质的阴离子交换层析分离纯化CK20蛋白,以电泳示踪,最后采用SDS-PAGE、HLPC和Western-blotting加以鉴定。结果在阴离子交换层析时出现3组洗脱峰,CK20主要存在第二组峰中,该峰在SDS-PAGE和Western—blotting上均呈现单一条带,HLPC分析显示CK20蛋白主峰呈正态分布,仅处一个较低峰度的蛋白质杂峰。结论该纯化方法简便、可行、效果好、获得的蛋白纯度高,提取的蛋白可确认为CK20并且具有较高的免疫生物活性。     

HO-1通过调节T细胞发挥对移植器官的保护作用

器官移植是器官疾病终末期治疗的有效途径,为患者提供再次生存的机会,但移植后免疫排斥又成为治疗成功的最大障碍,是移植界面临的首要难题。血红素氧化酶1(HO-1)是体内血红素代谢分解的限速酶,其在移植后的器官保护作用已被普遍认知。通过诱导HO-1在体内过度表达,促进Foxp3基因的表达,刺激scurfin蛋白表达,增加脾脏及外周血中Foxp3+T调节细胞(Foxp3+Treg)数量,增加CD4+CD25+T细胞,抑制CD4+、CD8+T细胞,从而达到抑制器官移植免疫排斥的目的,同时还能减轻移植物缺血/再灌注损伤、缓解细胞损伤,提高移植器官存活率,改善患者生活质量。     

慢病毒的超滤浓缩及细胞感染效应

目的 构建pLVX-CD63-mNeptune-Puro重组质粒,使用HEK293T细胞包装慢病毒,探讨慢病毒经超滤浓缩后的纯化效果极其对MGC-803细胞的转染效应.方法 使用重叠PCR方法构建CD63-mNeptune融合基因,并插入pLVX-Puro载体构建转移质粒.转移质粒、包装质粒和外膜蛋白质粒共转染HEK2...     

蝙蝠葛碱对人膀胱癌T-24细胞株生长增殖的抑制作用

目的 探讨中药北豆根提取物蝙蝠葛碱(dauricine,Dau)对人膀胱癌T-24细胞株的增殖抑制作用及其作用机制.方法 应用MTT法测定了蝙蝠葛碱对泌尿系肿瘤细胞增殖反应的影响;采用流式细胞技术、荧光染色法、琼脂糖凝胶电泳等技术测定和观察了蝙蝠葛碱对诱导肿瘤细胞凋亡的影响.结果 蝙蝠葛碱对膀胱癌T-24细胞株的增殖有较强的抑制作用,具有浓度依赖性特点.T-24细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡特征性梯形条带.流式细胞分析,浓度为5～30μg/ml的蝙蝠葛碱具有诱导人膀胱癌细胞凋亡的作用,且随着药物作用时间延长凋亡率逐渐增加,随药物浓度的增高细胞周期被阻滞在G0/G1期.T-24细胞的bcl-2基因表达受抑,而bax基因的表达上调.结论 蝙蝠葛碱可有效抑制人膀胱癌T-24细胞株的生长增殖,阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡可能起重要作用.     

造血干细胞移植后人巨细胞病毒感染的相关性研究

目的:探讨分析造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)后人巨细胞病毒(HCMV)感染与更昔洛韦(ganciclovir,GCV)耐药的发生及与移植类型、移植物抗宿主病(GVHD)等的相关性。方法:2012年3月~2014年4月在我院接受HSCT的患者18例,采用FQ-PCR法监测HCMV-DNA水平。HCMV-DNA阳性患者给予GCV抢先治疗。结果:8例患者发生HCMV感染(44.4%),其中7例为不全相合无关供体脐血造血干细胞移植(UCBT)者。发生HCMV感染的8例患者中有7人出现GVHD,其中出现Ⅲ度及以上GVHD有5例(71.4%),均为UCBT者。GCV耐药2例,均为UCBT后。结论:UCBT患者HCMV感染及GCV耐药高,GVHD与HCMV感染有关。     

T- and B-cell distribution in pregnancy.

We established the percentage of thymus-derived lymphocytes associated with cellular immune responses and bone marrow-derived, antibody-producing cells in maternal blood throughout normal gestation. The data are in conflict with a recent proposal that reversal ot the T:B cell ratio associated with the serum human chorionic gonadotrophin peak of early pregnancy assists in fetoplacental allograft acceptance. Moreover, variability on lymphocyte dynamics in four women followed up serially throughout pregnancy, as well as T- and B-cell determinations in 15 patients whose pregnancy complications are potentially related to maternal-fetal immunologic aberrations, suggests that more sensitive immunologic methods of monitoring the host immune response are necessary to be clinically useful in obstetrics.     

胃癌形成中Hp感染与其细胞凋亡和增殖的关系

目的 研究胃癌（gastriccancer，GC）形成中胃幽门螺杆菌（Helicobacterpylori，Hp）感染规律与其细胞凋亡、增殖的关系，探讨Hp在GC形成中的可能作用机制。方法 采用免疫组织化学染色法（SABC法）和末端脱氧核苷酸转移酶（TDT）介导的dUTP缺口标记法（TUNEL）检测15例正常胃黏膜（normalgastricmucosa，NGM）、30例胃黏膜肠上皮化生（intesunal metaplasia，IM）、30例异型增生（Dysplasia，Dys）和40例GC组织中增殖细胞核抗原（proliferating cellnuclear antigen，PCNA）阳性袁达和细胞凋亡情况，用Warthin—Starry染色方法、快速尿素酶试纸检测组织中Hp感染率。结果在NGM→IM→Dy→Gc的形成过程中，Hp感染随着GC形成中病变恶性程度的加重而明显上升，Hp感染率在IM（66．7％）、Dys（83．3％）、GC（60．0％）中显著高于NGM（20．0％）。IM组Hp阳性者AI、PI均明显高于Hp阴性者（p〈0．01），其余3组差异无显著性（P〉0．05）。结论 Hp感染可能参与胃癌癌前病变乃至胃癌的发生，Hp感染促进胃黏膜细胞凋亡、增殖作用主要发生在胃癌癌前病变早期阶段。