人巨细胞病毒IE1核酸疫苗的免疫效果研究

[目的]用人巨细胞病毒(HCMV)IE1核酸疫苗pcDNA3.1(-)-IE1免疫BALB/c小鼠,初步研究其产生的体液免疫和细胞免疫应答水平。[方法]将pcDNA3.1(-)-IE1通过肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过PCR测定和免疫组化检测其在肌细胞中的表达,细胞因子测定、淋巴细胞转化实验检测免疫效果。[结果]PCR检测到与IE1大小一致的片段,免疫组化结果显示IE1基因在小鼠肌细胞中表达IE1目的蛋白。小鼠脾淋巴细胞经PHA刺激后,实验组IL-4、IL-2、IFN-γ含量以及淋巴细胞转化率显著增高,与对照组比较差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]pcDNA3.1(-)-IE1核酸疫苗能在BALB/c小鼠肌细胞中稳定存在并能表达HCMV IE1蛋白,pcDNA3.1(-)-IE1核酸疫苗可诱导BALB/c小鼠脾细胞分泌IL-4、IL-2、IFN-r并刺激BALB/c小鼠脾细胞增殖。     

重组乙型肝炎疫苗和乙型肝炎表面抗原诱导细胞免疫应答

目的 探讨重组乙型肝炎(乙肝)疫苗和汉逊酵母菌表达的乙肝表面抗原(rHBsAg)诱导动物和人体细胞免疫应答的动态变化.方法 应用不同剂量rHBsAg免疫小鼠(BALB/c,H-2d),酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测小鼠脾单个核细胞(MNC)体外刺激诱生IFN-γ的水平;单剂rHBsAg免疫后不同时间检测MNC、CD8+T淋巴细胞产生IFN-γ水平;同时测定免疫后不同时间细胞毒T淋巴细胞反应(CTL)活性;检测免疫单剂和多剂乙肝疫苗后小鼠MNC分泌IFN-γ、IL-2、IL-5和抗-HBs抗体水平;对乙肝感染标志阴性的4名成年人按0、1、2个月程序接种乙肝疫苗,检测免疫后外周血单个核细胞(PBMC)、CD8+T淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2和IL-4水平以及抗体动态.结果 应用ELISPOT法,汉逊rHBsAg免疫小鼠7 d时,可检测到IFN-γ应答,14 d时达到高峰;CTL在免疫后7 d时可检出,峰值位于28 d.在1～8μg免疫剂量范围内,MNCs IFN-γ免疫应答与剂量呈显著正相关(阳转率:Υ=0.951,P=0.049＜0.05;SFC:Υ=0.996,P=0.000＜0.05),在1～4 μg免疫剂量范围内,CD8+T淋巴细胞的IFN-γ与剂量也呈显著正相关(Υ=0.999,P=0.025＜0.05);三剂乙肝疫苗免疫小鼠诱生细胞免疫和体液免疫应答水平均显著高于单剂(P值均＜0.05);成年人接种汉逊乙肝疫苗后不同个体间细胞免疫和体液免疫应答的模式不同,IL-2、IL-4应答与个体抗体滴度有关.结论 用ELISPOT法成功测定了汉逊HBsAg免疫小鼠后不同淋巴细胞的细胞免疫剂量效应和CTL时间动态变化,并分析了成年人的细胞免疫应答特点,为规范疫苗细胞免疫评价提供了基础.     

骨碎补醇提物对免疫抑制小鼠细胞免疫功能的调节作用

目的研究骨碎补乙醇提取物对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠细胞免疫功能的调节作用。方法 60只昆明种小鼠随机分为6组:空白对照组,低下模型组,阳性对照组(左旋咪唑0.05 g/kg),骨碎补醇提物低、中、高剂量组(2.5、5和10 g/kg),每组10只。4个给药组按10 m L/kg容积灌胃给药20 d,空白对照组和低下模型组给予等体积的生理盐水。除空白对照组外,其余5组小鼠于给药的第11~13天腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺建立免疫抑制模型。实验结束后,检测小鼠脾淋巴细胞增殖能力,迟发型超敏反应,脾组织病理切片,外周血T淋巴细胞亚群CD_4~+、CD_8~+T细胞数,脾组织IFN-γ、IL-4 mRNA的表达等指标。结果 5 g/kg和10 g/kg骨碎补醇提物可以增强小鼠刀豆蛋白A诱导的脾脏T淋巴细胞增殖能力、迟发型超敏反应(DTH),提高外周血CD4+T细胞数、CD_4~+/CD_8~+比值、脾组织IFN-γmRNA的表达以及IFN-γ/IL-4比值;可以降低外周血CD_8~+T细胞数以及脾组织IL-4 mRNA的表达;但对脂多糖诱导的B淋巴细胞增殖反应无明显影响。结论骨碎补醇提物对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的细胞免疫功能有调节作用。     

结核杆菌Ag85B-DNA与H37Ra序贯免疫小鼠后细胞免疫的探讨

[目的]探讨用结核分枝杆菌Ag85B—DNA（pTB30m）和结核菌H37Ra序贯免疫小鼠后产生的特异性细胞免疫。[方法]用碱裂解法制备Ag85B成熟蛋白的真核表达质粒（pTB30m），初次免疫小鼠2周后，用H37Ra皮内加强免疫（DNA-85B／H37Ra组），同时设定Ag85B—DNA／BCG组、H37Ra组、BCG组及未免疫组。加强免疫4w和8w后，检测小鼠脾淋巴细胞被PPD刺激指数（SI）及其IFN-γ、IL-2的表达水平。[结果]（1）酶切鉴定pTB30m所含外源基因片段大小正确，纯度较高。（2）DNA-85B／H37Ra组小鼠脾淋巴细胞的SI均显著高于H37Ra组、BCG组和DNA-85B／BCG（P〈0．05）；（3）所有免疫组IFN-γ及IL-2表达与未免疫组比较，差异有统计学意义（P〈0．05），DNA-85B／H37Ra组与DNA-85B／BCG组均高于H37Ra组和BCG组（P〈0．05），DNA-85B／H37Ra略高于DNA-85B／H37Ra,但差异无统计学意义（P〉O．05）。[结论]DNA-85B／H37Ra序贯免疫效果略优于DNA-85B／BCG组，明显优于H37Ra组BCG组。     

2种口服甲型肝炎疫苗免疫应答效果评价

目的 研究甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗口服免疫效果。方法 将甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗口服免疫Balb／c小鼠，并检测免疫后抗甲型肝炎总抗体、IgA和sIgA，外周血淋巴细胞亚群，脾淋巴细胞增殖反应和细胞因子干扰素-γ（IFN-γ），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素2（IL-2）水平。结果 2种疫苗口服免疫后均能诱导体液、细胞和局部免疫应答；但含铝佐剂的甲型肝炎灭活疫苗口服免疫，诱导抗体水平较低，但可诱导较好的细胞免疫应答。结论 口服免疫可以作为甲型肝炎疫苗有效的免疫途径之一。     

活动性肺结核病患者外周血ESAT6、Ag85B水平与细胞因子相关性分析

目的 检测结核病患者外周血血清中结核分枝杆菌特异性分泌蛋白ESAT-6、Ag85B及细胞因子IL-10、TGF-β1、IL-35的水平,探讨分析ESAT-6、Ag85B水平与Treg细胞的增殖之间的相关性。 方法 ELISA方法检测活动性结核病患者和健康志愿者外周血中结核分枝杆菌特异性分泌蛋白ESAT-6、Ag85B及细胞因子IL-10、TGF-β1、IL-35的表达水平,并用统计学方法分析血清中特异性分泌蛋白ESAT-6、Ag85B的浓度与Treg细胞刺激分泌的细胞因子IL-10、TGF-β1、IL-35的水平的相关性。 结果 活动性结核病患者血清中特异性分泌蛋白ESAT-6、Ag85B和细胞因子IL-10、TGF-β1的浓度与正常对照组相比均显著升高(P<0.001),但IL-35的浓度与正常对照组相比却显著降低,差异有统计学意义(P<0.001)。活动性结核病患者血清中结核分枝杆菌特异性分泌蛋白ESAT-6和Ag85B的水平与Treg细胞刺激活化分泌的细胞因子IL-10、TGF-β1、IL-35之间的相关性分析结果显示差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 活动性结核病患者血清中结核分枝杆菌特异性分泌蛋白ESAT-6和Ag85B的水平均明显高于健康对照组,提示活动性结核病患者Treg细胞的高水平表达可能与结核分枝杆菌毒力系统有关。     

乙型肝炎疫苗细胞免疫应答检测用参考品的制备和初步应用研究

目的通过研究重组乙型肝炎表面抗原（HBsAg）免疫小鼠诱导细胞免疫应答的特点，制备一批细胞免疫应答检测用参考品，规范乙型肝炎疫苗细胞免疫实验条件和操作。方法背部皮下分别免疫小鼠（BALB／c，H-2^d）0．5、1、2、4和8鹏的HBsAg，于免后7d，检测小鼠脾单个核细胞（MNC）体外刺激诱生IFN-γ的水平。分别免疫小鼠2、4μgHBsAg，免后7d，检测MNC分泌IFN-γ水平。结果1μg组可检测小鼠IFN-μ阳转；免疫剂量与IFN-γ阳转率存在剂量效应关系（r=0．951，P=0．049），IFN-γSFC与免疫剂量也存在剂量效应关系（r=0．996，P=0．000）。2μgHBsAg组IFN-1阳转率在50％-75％之间；4μg组IFN-γ阳转率均为75％。结论制备一批乙肝疫苗细胞免疫参考品，用于规范疫苗诱导细胞免疫应答的方法检测。     

人IL-12基因表达对含信号肽mtb8.4基因疫苗的免疫效应

[目的]观察结核分枝杆菌含信号肽Mtb8.4(MS)基因疫苗与人白细胞介素12(hIL-12)表达质粒联合免疫小鼠所诱导的细胞免疫应答。[方法]15只C57BL/6N小鼠随机分为MS基因疫苗 hIL-12质粒组(联合免疫组)、MS基因疫苗组、卡介苗(BCG)组、空载体组和PBS组,基因疫苗、空载体和PBS经肌内注射法免疫各组小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次,BCG组经尾部皮下注射1×106 CFU BCG免疫1次。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠脾细胞培养上清中细胞因子水平;采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫小鼠细胞毒性T细胞(CTL)杀伤活性。[结果]联合免疫组能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,免疫小鼠脾细胞培养上清液IFN-γ和IL-2水平(分别为(1546.18±36.23)pg/ml、(681.64±40.88)pg/ml),显著高于MS基因疫苗组,与BCG组相当,IL-4分泌减少,特异性CTL杀伤活性增强。[结论]hIL-12表达质粒与MS基因疫苗联合免疫后,能够增强MS基因疫苗所诱导的细胞免疫应答。     

日本血吸虫31/32kDa重组抗原细胞免疫机制

目的探讨细咆免疫在重组日本血吸虫31／32kDa抗原（rSj31／32）保护性免疫机制中的作用。方法采用rSj31／32抗原免疫BALB／c小鼠，ELISA分别检测免疫前后小鼠血清干扰素（IFN-γ）和白细胞介素（IL-4）的含量，攻击感染后以脾细胞培养法检测经刀豆蛋白（ConA）和可溶性虫卵抗原（SEA）刺激后，小鼠睥细胞分泌IFN-γ和IL-4的水平。结果rSi31／32抗原免疫后血清IFN-γ的水平明显增加（P〈0．001），而IL-4的含量无明显变化；经SEA刺激，免疫组脾细胞产生较高水平的IFN-γ，而产生的IL-4水平较其他组低（P〈0．01）。结论细胞免疫在rSj31／32诱导的保护性免疫中起着重要作用。     

表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌的免疫功能研究

目的研究表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌在动物体内的免疫功能。方法用表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞增殖实验检测重组耻垢分枝杆菌的免疫原性,利用流式细胞术分析小鼠T淋巴细胞亚群比例的变化,通过病理学切片观察重组耻垢分枝杆菌在动物体内的毒力。结果重组耻垢分枝杆菌诱导的脾淋巴细胞增殖反应、CD4+T细胞比例均明显高于对照组;重组耻垢分枝杆菌不会导致脏器的器质性病变。结论表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌免疫原性显著增强,且毒力无明显改变,有望成为一种新型的结核病疫苗。     

表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌的免疫功能研究

目的研究表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌在动物体内的免疫功能。方法用表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞增殖实验检测重组耻垢分枝杆菌的免疫原性,利用流式细胞术分析小鼠T淋巴细胞亚群比例的变化,通过病理学切片观察重组耻垢分枝杆菌在动物体内的毒力。结果重组耻垢分枝杆菌诱导的脾淋巴细胞增殖反应、CD4＋T细胞比例均明显高于对照组;重组耻垢分枝杆菌不会导致脏器的器质性病变。结论表达结核杆菌ESAT-6基因重组耻垢分枝杆菌免疫原性显著增强,且毒力无明显改变,有望成为一种新型的结核病疫苗。     

细粒棘球蚴重组蛋白GST诱导小鼠脾细胞增殖及对细胞因子水平的影响

目的探讨细粒棘球蚴重组蛋白GST(rEg.GST)诱导小鼠产生免疫保护力的机制。方法将rEg.GST与弗氏佐剂混合免疫小鼠,腹腔注射原头蚴制备包虫感染模型,分离脾淋巴细胞,用rEg.GST和刀豆蛋白A(ConA)诱导后,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测小鼠脾淋巴细胞的增殖情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养上清液中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-10(IL-10)的表达水平。结果重组蛋白免疫组在rEg.GST及Con A刺激状态下脾淋巴细胞增殖水平均高于佐剂组(P=0.003 0;P0.001)和PBS组(P=0.001 4;P=0.006 1)。与PBS组比较,rEg.GST组在免疫后、感染后的IL-2、IFN-γ、与IL-4的水平均增高(P=0.007 7;P=0.041 9;P=0.014 8);rEg.GST组免疫后与免疫前相比,IL-2、IFN-γ、IL-4与IL-10水平均增高(P=0.001 7;P=0.023 1;P=0.003 1;P=0.021 2);感染后与免疫后相比,IL-4与IL-10水平升高,IL-2水平则呈下降趋势(P=0.009 4;P=0.039 3;P=0.0179)。结论 rEg.GST能够促进脾淋巴细胞的增殖并同时活化辅助性T细胞1型(Th1)与2型(Th2)细胞。     

结核分枝杆菌抗原Rv0585c人T细胞抗原表位鉴定及其免疫原性评价

目的 研究结核分枝杆菌抗原Rv0585c的抗原表位及其免疫原性,为结核病特异免疫诊断技术和疫苗的研发提供基础。方法 利用生物信息学TE-predict和IEDB人T细胞抗原表位预测软件进行结核分枝杆菌抗原Rv0585c的人T细胞抗原表位预测,根据预测结果,合成表位多肽,用ELISpot试验检测预测表位在临床结核病患者中的免疫反应性。分别采用高、低剂量（100 μg/只和50 μg/只）的Rv0585c抗原表位多肽、同时以高、低剂量（50 μg/只和20 μg/只）的Ag85B蛋白抗原为对照,对随机分组的BALB/c小鼠进行免疫。利用ELISA方法检测IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10的水平。结果 经生物信息学技术预测到Rv0585c 66个人T细胞抗原表位,选取合成了表位分布集中的抗原表位多肽9条。人群ELISpot试验筛选出3条阳性人T细胞表位多肽：P10110、P10112、P10117,用于肺结核检测的灵敏度分别为14.00%、12.00%和6.00%,特异度分别为100.00%、100.00%和97.96%;联合用于肺结核检测的灵敏度和特异度分别为22.00%和97.96%。动物免疫试验结果显示,P10110多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10,P10112多肽高、低剂量刺激小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-2和IL-10,均高于阴性对照组,差异有统计学意义（P<0.001）。结论 Rv0585c蛋白及其T细胞表位具有较好的免疫原性及免疫反应性,能刺激机体产生较强烈的细胞免疫应答,具有潜在的结核病细胞免疫诊断和新型结核疫苗的应用价值。     

结核亚单位疫苗强化BCG免疫策略对小鼠记忆T细胞维持的影响

目的 探索不同加强免疫策略对长期免疫记忆的影响,为结核疫苗的研究奠定理论基础.方法 将融合蛋白AMM、佐剂DDA和BCG-PSN混合构建AMM亚单位疫苗.选择50只C57BL/6小鼠(SPF级),按随机数字表法分为5组,每组10只,A组给小鼠注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照;B组小鼠仅注射卡介苗(BCG)进行初免;C组小鼠BCG初免后,于第10周用AMM亚单位疫苗加强免疫;D组小鼠BCG初免后,分别于第8周、第10周用AMM亚单位疫苗加强免疫小鼠一次;E组小鼠BCG初免后,分别于第6周、第8周、第10周用AMM亚单位疫苗加强免疫小鼠一次.于第28周取出小鼠脾脏淋巴细胞,加入2.5μg/ml的Ag85B刺激72h后收集脾细胞培养上清,用ELISA测定Ag85B特异性脾淋巴细胞产生IFN-γ水平.结果 脾细胞受抗原Ag85B刺激后,BCG初免小鼠B组血清IFN-γ[(0.008±0.010)pg/ml]水平升高,但低于C组[血清IFN-γ(1.834±1.058)pg/ml]、D组[血清IFN-γ(2.337±0.964)pg/ml]、E组[血清IFN-γ(2.481±0.757) pg/ml],其差异均有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01),而A组血清IFN-γ[(0.005±0.048) pg/ml]水平均低于各免疫组(P ＜0.05或P＜0.01);C组血清IFN-γ水平均低于D、E两组,其差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);D组血清IFN-γ水平与E组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 小鼠加强免疫强化的次数并非越多越好,适当的加强免疫次数可以诱导最持久的免疫记忆,亚单位疫苗加强免疫策略可能是影响免疫记忆的一个重要因素.     

雷帕霉素对健康人外周血T淋巴细胞的免疫抑制作用

目的探讨体外雷帕霉素（Rapa）对健康人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用及可能机制。方法分离健康人外周血T淋巴细胞,在植物血凝素（PHA）刺激下,用不同浓度的Rapa与T淋巴细胞作用。采用MTT法检测T淋巴细胞增殖,FCM检测T淋巴细胞CD152＋和CD28＋的表达,RT-PCR测定IFN-γ和IL-10 mRNA的表达水平。结果 Rapa可明显抑制健康人的T淋巴细胞增殖（P〈0.05）,对健康人的CD3＋CD152＋细胞以及CD3＋CD28＋细胞无显著影响,Rapa可抑制健康人T淋巴细胞IFN-γ和IL-10 mRNA表达（P〈0.05）,并且随着Rapa浓度增加其免疫抑制作用也增强。结论 Rapa对健康人T淋巴细胞有免疫抑制作用,可能与抑制T淋巴细胞增殖和相关的细胞因子的mRNA有关。     

褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞Th1/Th2细胞因子谱影响的体内外研究

目的研究褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞Th1/Th2细胞因子谱的影响。方法体内实验:分别设阴性对照组和两个褐藻胶组(0.50g/kgbw和1.50g/kgbw),每组各5只C57BL/6小鼠,分别经口给予纯净水和褐藻胶,30天后分离脾淋巴细胞,培养48h后取上清采用流式微球分析术(CBA)方法分析白细胞介素(IL-2、IL-4、IL-5)、肿瘤坏死因子(TNF)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。体外实验:分离C57BL/6种小鼠脾淋巴细胞,与褐藻胶(25mg/ml和50mg/ml)培养48h后取上清采用CBA方法分析IL-2、IL-4、IL-5、TNF和IFN-γ水平。结果体内实验:0.5g/kgbw和1.5g/kgbw褐藻胶组IFN-γ表达水平明显高于阴性对照组(P<0.01),而IL-2和IL-4表达水平下降(P<0.01,P<0.05)。体外实验:25mg/ml和50mg/ml褐藻胶组TNF、IL-2和IL-4表达均明显高于阴性对照组(P<0.05,P<0.01),50mg/ml褐藻胶组IL-5表达水平明显高于阴性对照组(P<0.01)。结论无论是在体内还是体外实验条件下,褐藻胶对小鼠脾淋巴细胞分泌的Th1/Th2细胞因子谱均有影响。     

重组乙型肝炎表面抗原(汉逊酵母菌表达)免疫小鼠后不同细胞免疫测定方法的比较研究

目的 探讨不同细胞免疫测定方法 对小鼠免疫乙型肝炎表面抗原 (HBsAg) 后细胞免疫应答测定的影响.方法 小鼠皮下接种 HBsAg,于免疫后 4、7、10、14 和 25 d 分离脾单个核细胞(MNC),应用酶联斑点法(ELISPOT) 测定 MNC 细胞体外刺激后所产生的细胞因子 IFN-γ斑点形成细胞计数(SFC),其中刺激物选择多肽和 HBsAg;流式荧光检测技术(Luminex)测定 MNC 体外经 HBsAg 刺激后所产生的细胞因子 IFN-γ、IL-4、IL-5 和 IL-10 含量;小鼠血清检测抗-HBs.结果 小鼠接种 HBsAg 后,应用 ELISPOT 法测定, 7 d 和 14 d 小鼠 IFN-γ阳转率分别为 60% 和 80%;而应用 Luminex 方法 测定,7 d 和 14 d 小鼠 IFN-γ阳转率均为 80%;IL-4、IL-5、IL-10 阳转率分别为 60%,80%;100%,100%;80%,100%;25d 时,IFN-γ与 14 d 比较统计学上差异有统计学意义( P25,14 d=0.030,＜0.05),而 IL-5、IL-10 和 IL-4 与 14 d 比较差异均无统计学意义 ( P＞0.05 ).抗-HBs 水平随时间而呈上升趋势.结论 Elispot 和 Luminex 法测定小鼠 IFN-γ应答符合率高,小鼠接种单针 HBsAg 后细胞免疫应答高峰为免疫后 7～14 d.25 d 时 IFN-γ分泌水平随抗-HBs 抗体水平升高而下降,而 IL-4、IL-5、IL-10 分泌继续保持较高水平.     

中药苦参提取物对MDR-TB感染小鼠细胞免疫的调节作用

目的探讨苦参提取物对耐多药结核分枝杆菌(multiple drugs resistant bacillus tuberculosis,MDR-TB)感染小鼠免疫功能的调节作用。方法采用静脉注射建立小鼠MDR-TB感染模型,将30只健康雄性小鼠随机分为3组(正常组、模型组和苦参提取物组),每组10只,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清中与结核免疫密切相关的细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)和白介素-12(IL-12)含量的变化,同时分离出单个核细胞(PBMC),抽提全部核糖核酸(RNA),采用逆转录PCR(RT-PCR)法检测PBMC中IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-12及颗粒裂解肽(GLS)的信使核糖核酸(mRNA)变化。结果苦参提取物组与模型组比较,小鼠血清中的IFN-γ、IL-12含量明显升高,IL-4、IL-10含量明显下降,差异有统计学意义(P0.05);与正常组比较,IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-12的含量差异无统计学意义(P0.05)。在mRNA表达水平上,苦参提取物组小鼠PBMC中IFN-γ、IL-12、GLS表达明显升高,IL-4、IL-10mRNA表达明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论苦参提取物可以通过上调基因转录水平增强小鼠的细胞免疫功能,具有较明显的抗MDR-TB作用,为临床治疗尘肺合并结核患者感染的MDR-TB提供了理论依据。     

重组耻垢分枝杆菌-Sj26GST疫苗的免疫保护作用研究

目的初步研究重组耻垢分枝杆菌疫苗rMc-Sj26GST(recombinant M.smegmatis mc2155-Sj26GST)对小鼠的免疫保护作用.方法用耻垢分枝杆菌重组疫苗rMc-Sj26GST免疫雄性BALB/c小鼠,检测小鼠淋巴细胞刺激指数(SI),腹腔巨噬细胞培养上清释放NO量,小鼠血清IFN-γ、IL-2的含量,并计数小鼠肝、肺活细菌数.结果小鼠脾淋巴细胞刺激指数(SI)为2.64±1.37,与Mc组(载体组)1.28±0.41相比,差异具有显著性;小鼠血清IFN-γ为196.43 pg*ml-1,与Mc组112.57 pg*ml-1相比,差异有显著性,较对照组高41%;小鼠血清中IL-2的浓度较对照组高.经rMc-Sj26GST疫苗免疫的小鼠受结核杆菌攻击后其肺、肝脏结核杆菌数较对照组少.结论耻垢分枝杆菌重组疫苗rMc-Sj26GST增强了小鼠细胞免疫功能,并使小鼠能抵抗结核杆菌的攻击.     

镉对小鼠淋巴细胞增殖功能、IL-2影响与cAMP的关系

目的：观察镉对小鼠脾T淋巴细胞增殖功能、cAMP(环磷酸腺苷)、IL-2(白细胞介素-2)等的影响，探讨它们在镉的免疫毒性中作用和关系。方法：对BALB／C小鼠体外、体内染镉后，测定脾T淋巴细胞增殖功能、IL-2活性、cAMP含量等。结果：体内、体外染镉均引起了小鼠脾T淋巴细胞增殖功能、IL-2水平有剂量一效应关系的降低，两者的变化呈正直线相关。体内染镉引起IL-2水平对数的降低与cAMP水平的升高呈负直线相关。体外染镉引起T淋巴细胞增殖功能、IL-2水平的降低与cAMP水平升高呈负直线相关。结论：镉有抑制小鼠脾T淋巴细胞IL-2活性的免疫毒性作用；IL-2在镉抑制T淋巴细胞增殖活性中有重要作用；cAMP信使系统可能参与介导了镉对脾T淋巴细胞增殖功能、IL-2.