当归多糖的分离纯化及其部分理化性质的研究

目的　对甘肃岷县产当归中获得的当归多糖 (ASP)进行分离纯化 ,并测定其部分理化参数。方法　采用水煮 -醇沉法从新鲜当归中提取当归粗多糖 ,Sevag法除蛋白 ,冷冻干燥。苯酚 -硫酸法测定总糖含量 ;UV法及IR法检测多糖性质 ;自动旋光仪测定旋光度 ;采用凝胶渗透色谱 -激光光散射联用技术 (SEC -LLS)分析多糖的分子量范围及其分布 ;HPLC鉴定多糖的单糖组分及其相对百分比含量。结果　所得当归多糖为浅米灰色 ,无甜味 ,易溶于水 ,总糖含量为 96 .8% ;192nm处有明显吸收峰 ,2 6 0、2 80nm处均无吸收峰 ,证明被测物为多糖 ,且不含核酸及蛋白质 ;红外吸收光谱分析 ,在 335 2、2 94 0、174 7、16 2 6、14 14、12 37、10 2 1、5 36cm-1处表现为典型的多糖吸收峰 ;旋光度为 +94 .6° ,糖残基间的苷键可能为α -糖苷键 ;分子量在 1× 10 4～1 1× 10 5之间 ,80 %的组分集中在 4 3× 10 4左右 ;当归多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖和木糖组成 ,其摩尔比值为 17.8∶5 .8∶12∶1∶2 .2。结论　所用方法提纯的当归多糖糖含量较高。     

红树林内生真菌Trichodermasp.多糖的化学组成和结构表征

目的 对红树林内生真菌Trichoderma sp.菌丝体多糖进行研究。方法 将菌丝体干燥粉碎后,依次采用冷水、热水和热碱提取粗多糖,并采用离子交换柱层析和凝胶渗透柱层析对粗多糖进行分离纯化;通过高效液相色谱(HPLC)、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、红外光谱(IR)以及气质联用色谱(GC-MS)等方法对多糖进行化学组成分析和结构表征。结果 从菌丝体中分离纯化获得5个多糖LPC2-1、LPC3-1、LPR2-1、LPA2-1和LPA3-1,它们的得率分别为32%、41%、28%、36%和47%,分子量分别为15.3, 74.6, 9.5, 19.4和35.2 kDa;这5种多糖均由不同比例的甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,LPR2-1还含有少量的葡萄糖胺;5种多糖的糖链中均含有末端Man、(1,2)-Man、(1,6)-Man、(1,2,6)-Man、(1,2)-Galf和(1,6)-Galf;此外,每种多糖含有其它不同的糖基连接方式。结论 首次从红树林内生真菌Trichoderma sp.菌丝体中分离纯化获得了5种多糖组分,它们的化学组成和结构特征不同,均含有少见的(1,2)-Galf和(1,6)-Galf的连接方式。     

当归酸性多糖的分析

目的:建立当归酸性多糖的分离方法,对当归酸性多糖的组成进行分析。方法:采用化学分析方法结合高效尺寸排阻色谱、气相色谱等仪器分析方法,对当归酸性多糖的分离、多糖纯度和重均相对分子质量、糖残基组成进行研究。结果:得到重均相对分子质量分别为7.4×10~5,1.1×10~5,5.7×10~5,2.3×10~5,1.4×10~4的5种当归酸性多糖 APS-b1、APS-b2、APS-c1、APS-c2和 APS-c3,糖醛酸含量分别为13.2%,15.2%,33.4%,30.3%,35.7%。结论:当归酸性多糖组分复杂,各组分单糖组成主要为葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖、木糖中的4～6种以不同比例构成。     

一种新型乌贼墨糖胺聚糖的分离纯化、理化性质及其抗氧化活性研究

目的 从金乌贼墨(Sepia esculenta ink)中提取其活性成分乌贼墨多糖。并首次对其理化性质及体外抗氧化活性进行研究。方法 依次用两步酶解法提取乌贼墨粗多糖,用Q Sepharose 4 Fast Flow 阴离子交换层析柱对其进行分离纯化,获得主要组分。通过高效液相(HPLC)、紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、离子色谱法对乌贼墨多糖进行理化性质研究以及初步的结构判定,采用ABTS法对乌贼墨进行总的体外抗氧化活性研究。结果 两步酶解后乌贼墨粗多糖的得率为3%,分离纯化后得到0.05、0.25、0.5 mol/L NaCl三个洗脱组分,分别命名为SE-1、SE-2、SE-3,其中以SE-2为最主要组分,故主要对SE-2进行分析。经过离子交换柱层析,SE-2得率为50%。SE-2主要含有半乳糖胺(GalN)、岩藻糖(Fuc)、葡萄糖胺(GlcN)、乙酰氨基半乳糖(GalNAc)、葡萄糖醛酸(GlcUA)以及甘露糖(Man)等单糖,紫外扫描无蛋白质的特征吸收峰;该多糖为均一性多糖,分子量8.5 kD;SE-2的总糖含量、蛋白质含量、硫酸根含量、氨基己糖含量分别为54.2%、3.92%、7.74%、20.5%;IR光谱进一步证明该糖为SE-2糖胺聚糖,构象为D-吡啶环结构,并有硫酸根的存在;SE-2对ABTS自由基的清除能力较强,其半数清除质量浓度为0.21mg/mL。结论 金乌贼墨多糖SE-2是一种硫酸酯化的新型糖胺聚糖,具有较强的体外抗氧化性活性。     

南瓜多糖的提取与分离工艺的优化

目的 研究南瓜多糖的提取与分离工艺的优化。方法 采用正交实验L9(3^4)对南瓜多糖的水提取工艺进行优化设计，通过单因素实验确定南瓜多糖分离的最佳工艺．结果 南瓜多糖提取工艺各因素的最佳水平为A3B2C1D3(料液比1：3，在70℃下提取3次，每次4小时)。南瓜多糖提取工艺各因素中因素D(提取次数)和因素A(料液比)的差异对多糖得率有显著性影响，而因素B(提取时间)与因素C(提取温度)的差异无显著性影响。以乙醇沉淀多糖(终浓度70％)Sevag试剂去除游离蛋白(多糖溶液与Sevag试剂的体积比2t1，反复脱蛋白7次，每次30min)；H2O2溶液脱色(终浓度4％，50℃保温2h)能达到良好的效果。粗多糖得率为1．92％；总糖含量为79．3％。结论 本文建立的优化工艺可为南瓜多糖的分离制备提供参考．根据正交实验统计分析结果，为了省时节水节能，采用少量短时多次提取工艺(料液比1：2，在70℃下提取3次，每次3小时)较为合理。     

印度楝树皮中多糖类结构的进一步研究

本文报道,在前报分离得GⅠa 与GⅠb 同时得到多糖GⅡa 与GⅢa 的结构及其抗炎活性。将印度楝树皮热水提取物不被透析的组分加乙醇沉淀得粗多糖,经Sephadex G-100柱分离,得多糖GⅠ、GⅡ和GⅢ,冰冻干燥后得率分别为40%,20%和40%。GⅡ经Se-phadex G-50柱进一步纯化,洗脱后得GⅡa、GⅡb 和GⅡc。GⅢ经Seplladex LH-20柱处理,洗脱后得GⅢa、GⅢb 和GⅢc。GⅡa 与GⅢa 在HPLC、凝胶过滤和沉积分析法中均呈现单峰。在玻璃纤维电泳中亦为单个斑点。     

东当归根中果胶多糖的结构鉴定和抗肿瘤活性

东当归(Angelica acutiloba Kitagawa)在日本汉方医药中是熟知的妇科药。已报道从其热水提取物中得到的果胶多糖具有致B-淋巴细胞有丝分裂活性,多克隆B细胞激活剂活性,抗艾氏腹水癌细胞活性,诱导干扰素活性和抗补体活性。用cetavlon(十六烷基三甲基溴化铵)法和DEAE-葡聚糖层析从东当归中得到多糖部位,每个多糖部位都由类似的成分组成,但上述的生物活性却由不同的水溶性多糖部位所致。本文介绍东当归中抗肿瘤多糖的纯化和鉴定。活性成分证实是一种阿拉伯半乳聚糖。东当归根的热水提取物用乙醇沉淀和透     

爆发期条浒苔多糖的提取分离及其理化性质研究

目的从爆发期条浒苔中提取、分离多糖并对其理化性质进行研究。方法对干燥后的条浒苔乙醇脱脂后采用热水和热碱提取,得到了两种条浒苔粗多糖ECP1和ECP2,通过Q-Sepharose FF阴离子交换柱进一步分级,分别从ECP1和ECP2中得到ECP1A～F和ECP2A～F共12种多糖组分。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)分析多糖相对分子质量,并用高效离子色谱(HPIC)法分析各组分单糖组成。结果热水和热碱提取粗多糖得率分别为34.87%和14.77%,粗蛋白含量分别为0.39%和1.17%。单糖组成分析表明,多数组分中有高含量的鼠李糖以及不同含量的岩藻糖,葡萄糖,木糖,半乳糖和糖醛酸。ECP1E～F和ECP2E～F中含有较多的葡萄糖醛酸,而ECP1B～D及ECP2D中则含有较多的艾杜糖醛酸。ECP1A、ECP1E和ECP1F以及ECP2A、ECP2E和ECP2F的相对分子质量分别为604、311、45、274、106和277kD;硫酸基含量分别为3.67%、30.39%、17.11%、0.3%、27.63%和15.89%。结论爆发期条浒苔中多糖含量高、蛋白含量低,除了含有鼠李糖和葡萄糖醛酸外,还含有少见的艾杜糖醛酸,尤其不含甘露糖,表明其与常规条浒苔多糖明显不同,是一类值得开发的新多糖资源。     

当归多糖铁的合成

目的：从当归中提取当归多糖，进而合成当归多糖铁。方法：水煎煮法提取当归多糖；在碱性条件下，当归多糖水溶液与三氯化铁溶液反应合成当归多糖铁。结果：得深红棕色，粉末状当归多糖铁，结论：当归多糖铁溶于水，不溶于甲醇，乙醇，乙醚等有机溶剂，熔点大于300℃。     

蓬子菜多糖分离纯化及其性质的研究

目的：从蓬子菜中提取分离水溶性多糖,并分析其理化性质,为板蓝根质量控制与进一步开发利用提供参考。方法：主要采用Sephadex G-100凝胶色谱柱分离纯化,测定各部位中性糖和酸性糖的含量。结果：从蓬子菜水溶性多糖中分离纯化得到2种不同的均一多糖组分TP-1、TP-2,总糖含量均达到90%以上。结论：2种均一多糖首次从蓬子菜中分离得到。     

缢蛏多糖的提取、分离和结构分析

目的从缢蛏中提取和分离纯化多糖,对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法依次采用100℃热水提和碱提方法从缢蛏中提取粗多糖,采用Q Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱层析和Sephacryl S-300凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对其总糖、蛋白含量,相对分子质量和单糖组成进行分析。对多糖纯化组分采用甲基化、气质联用(GC-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振波谱(NMR)进行化学结构解析。结果从缢蛏中经热水提粗多糖(YC-S)和碱提粗多糖(YC-J)均为葡聚糖,进一步分离纯化得到了4种水溶性多糖组分。对其中1种热水提多糖纯化组分YC-S2采用高效液相凝胶色谱法测得其相对分子质量为482kD,且色谱峰单一对称,表明其具有较高的纯度。结构分析表明,YC-S2是1种以α-(1→4)Glc为主链,含有少量的β-(1→3,4)和β-(1→4)分支的D-吡喃型葡聚糖。结论从缢蛏中提取分离得到了4种多糖组分,并初步确定了1种水溶性葡聚糖的结构,为缢蛏多糖结构和活性的深入研究提供了基础。     

栀子果实中1新的香草酸苷和5个新的奎尼酸衍生物

作者从番茄变种L.esculentum var.San Marzano的悬浮细胞培养液中分离到3个外多糖:EPS(1)、EPS(2)和EPS(3),通过分光光度法确定了它们基本结构,并利用海虾致死生物试验检测了EPS(2)和EPS(3)的抗细胞毒活性。该植物细胞在含有3%蔗糖的MS培养液中悬浮培养4周后,高黏稠性培养液中含多种多糖组分。培养液经过滤、乙醇沉淀后得到的外多糖部位,再经凝胶色谱分离、精制得到3种外多糖EPS(1)、EPS(2)、EPS(3),其产率分别为9%、60%和31%。这些外多糖中均含微量蛋白与核酸。EPS(1)用水洗脱,为中性部位。EPS(2)和EPS(3)分别用不同浓度盐…     

白蔹多糖PAJM-Ⅰ的分离纯化和结构分析

目的从白蔹中提取分离白蔹多糖,并研究其结构性质。方法经热水提取、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白后得到粗多糖PAJM,进一步用DEAE-Sapharose Fast Flow,Sephadex G-200分离纯化得到PAJM-Ⅰ,对分离到的主要多糖应用高碘酸氧化、高效凝胶渗透色谱(HPGPC),GC,GC-MS,IR等方法进行结构分析。结果提取纯化的白蔹多糖(PAJM-Ⅰ)是均一的多糖,相对分子量为3.25×104,鼠李糖,木糖,甘露糖和半乳糖组成摩尔比为:12.98∶23.52∶45.06∶18.44。分子中1→3,1→2,1→6连接的糖苷键数比为51%∶26%:23%。结论首次从白蔹中分离得到PAJM-Ⅰ均一多糖,且PAJM-Ⅰ含有α-D-葡萄吡喃糖。     

扁玉螺多糖的提取、分离和结构分析

目的从扁玉螺(Neverita didyma)中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法依次采用水提和碱提方法从扁玉螺中提取粗多糖,采用DEAE Sepharose FF阴离子交换和Sephacryl S-300凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对其总糖、蛋白、氨基糖、糖醛酸和硫酸根含量,相对分子质量和单糖组成进行分析。对多糖纯化组分采用甲基化、气质联用(GC-MS)、红外光谱(IR)、电喷雾质谱(ESI-MS)和核磁共振波谱(NMR)对其化学结构进行分析。结果扁玉螺水提粗多糖(BYL-S)中不含有糖醛酸和硫酸基,其单糖组成只含Glc,进一步分离得到了4种水溶性多糖组分。碱提粗多糖(BYL-J)单糖组成相对复杂,除含有Glc外,还含有Man、GlcN、GalN、Gal和Fuc,其摩尔比为Glc∶Man∶GlcN∶GalN∶Gal∶Fuc=78.9∶1.7∶3.4∶2.2∶5.2∶5.6,进一步分离得到了3种多糖组分。对水提多糖纯化组分BYL-S2的结构分析表明其是以α-(1→4)为主链,含有少量β-(1→3,4)和β-(1→3)分支的D-吡喃型葡聚糖。结论从扁玉螺中提取分离得到了7种多糖组分,并确定了一种水溶性葡聚糖的结构,为扁玉螺多糖结构和活性的深入研究提供了基础。     

白蔹多糖PAJM-I的分离纯化和结构分析

目的 从白蔹中提取分离白蔹多糖,并研究其结构性质.方法 经热水提取、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白后得到粗多糖PAJM,进一步用DEAE-Sapharose Fast Flow, Sephadex G-200分离纯化得到PAJM-I,对分离到的主要多糖应用高碘酸氧化、高效凝胶渗透色谱(HPGPC),GC,GC-MS,IR等方法进行结构分析.结果 提取纯化的白蔹多糖(PAJM-I)是均一的多糖,相对分子量为3.25×104,鼠李糖,木糖,甘露糖和丰乳糖组成摩尔比为:12.98:23.52:45.06:18.44.分子中1??3,1??2,1??6连接的糖苷键数比为51%:26%:23%.结论 首次从白蔹中分离得到PAJM-I均一多糖,且PAJM-I含有α-D-葡萄吡喃糖.     

亨氏马尾藻多糖的分离、纯化和鉴定

目的：研究南澳岛海域亨氏马尾藻多糖的提取工艺,并对其进行纯化和鉴定。方法：用热水提取多糖,乙醇沉淀,并用正交实验确定提取的最佳条件,Sevage法去蛋白,用CTAB结合不同浓度盐离子溶液对多糖进行分级。SephadexG200柱层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。硅胶薄层层析分析多糖中单糖组分。结果：最佳提取条件：100℃,pH7,提取4h,得率可达22．7％,分级沉淀后得四组分F1、F2、F3、P,纯度鉴定证明其中F1、F2、P为均一级分,薄层层析发现其中含有岩藻糖。结论：亨氏马尾藻多糖的分离、纯化和鉴定能够为该多糖的进一步开发利用提供一定的理论依据。     

何首乌多糖提取方法的比较研究

目的:比较不同提取方法对生何首乌多糖的影响,同时初步探索了热水提取生何首乌和制何首乌多糖的差异。方法:以何首乌为原料,分别通过热水提取法、超声提取法、微波提取法制得多糖,并对不同提取工艺下多糖的得率、总糖含量、蛋白含量、重均分子量(M_w)、单糖组成和2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)自由基清除能力进行比较和研究。结果:不同提取方法所得何首乌多糖得率依次为：微波提取法[微波提取何首乌粗多糖(M-PMP)]>热水提取法[热水浸提何首乌粗多糖(H-PMP)]>超声提取法[超声提取何首乌粗多糖(U-PMP)]; U-PMP的蛋白含量最高,M_w与其他多糖也有明显差别;单糖组成结果显示,不同提取方法的何首乌多糖中单糖组成相同,主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,但单糖组成的摩尔比有所不同。结论:3种提取方法所得的多糖成分存在一定差异,且不同提取方法得率差异明显,其中M-PMP得率最高;同时发现生何首乌和制何首乌中多糖成分可能存在一定差异,有待进一步验证。     

当归化学成分的研究

目的研究当归的化学成分,以了解该药药理作用的物质基础,并为其临床用药和进一步开发利用提供依据.方法利用多种色谱方法分离纯化,通过理化常数和波谱分析鉴定其化学结构.结果从当归根乙醇提取物中分离7个化合物并鉴定了结构,分别为:(1)阿魏酸,(2)阿魏酸松伯醇酯,(3)邻苯二甲酸-2-乙基己酯,(4)邻苯二甲酸二丁酯,(5)木蜡酸,(6)棕榈酸,(7)Z-6,7-顺式-二羟基藁苯内酯.结论邻苯二甲酸-2-乙基己酯和邻苯二甲酸二丁酯为首次从当归中获得.     

2种银杏外种皮多糖的成分及药效学比较研究

目的:比较2种银杏外种皮多糖的成分及对肿瘤细胞的影响.方法:从新鲜和晒干的银杏外种皮中提取多糖,对二者进行理化测定及纸层析比较,并测得多糖粗制品的得率、总糖含量及多糖含量.同时,比较2种多糖对肿瘤细胞的影响.结果:2种外种皮多糖的提取方法及关键技术基本相同;均为肽多糖;二者粗制品的得率、总糖含量及多糖含量均较高;体外对S1 80细胞的抑制作用在10～160μg*mL-1剂量下呈现量效关系,抑制率分别为41%～8 2%和45%～86%.结论:新鲜和晒干的2种银杏外种皮中皆含有丰富的肽多糖,其多糖的理化性质相似,多糖的含量及对S180细胞的直接杀伤效果相当.     

当归多糖质控中糖含量测定方法的建立与评价

目的建立一种简便、快速检测当归多糖中糖含量的方法，用于当归多糖生产中的质量控制。方法采用紫外一可见分光光度法，经苯酚一硫酸显色。测定当归多糖及其各组分的总糖含量，并对影响显色反应的主要因素进行了考查；同时，采用间羟基联苯法和考马斯亮兰法，分别测定了当归多糖及其各组分的糖醛酸含量和蛋白含量。结果当归粗多糖(ASPS)及其ASPS1、ASPS2和ASPS3各组分中糖含量分别为62．8%、80.5％、77.7％、70.1%；糖醛酸含量分别为29.3％、28.4％、39.2％、34.6％。精密度、回收率试验结果理想。结论该方法简便、快速、准确，灵敏度高，可作为当归多糖生产的质量控制标准。