BD-96C、TB-DNA和痰涂片抗酸染色法检测结核分枝杆菌的价值对比

目的 对比BD分歧杆菌快速培养法(BD-96C)、实时荧光定量PCR法(TB-DNA)和痰涂片抗酸染色法检测结核分枝杆菌的价值。方法 选取就诊的疑似肺结核患者302例,取患者痰液标本并分别采用BD-96C、TB-DNA和痰涂片抗酸染色法进行检测,分析并比较检测结果。结果 检测结果显示,BD-96C、TB-DNA和痰涂片抗酸染色法检测阳性率分别为41.06%、30.79%、28.15%,BD-96C与、TB-DNA和痰涂片抗酸染色法检测阳性率比较,差异显著(P0.05)。BD-96C培养阳性标本中,经TB-DNA检测后阳性率为87.10%,BD-96C培养阴性标本中,经TB-DNA检测后阳性率5.06%。在108例BD-96C(+)TB-DNA(+)中经痰涂片抗酸染色检测阳性率为92.59%,16例BD-96C(+)TBDNA(-)中经痰涂片抗酸染色检测阳性率为68.75%,9例BD-96C(-)TB-DNA(+)中经痰涂片抗酸染色检测阳性率为11.11%,169例BD-96C(-)TB-DNA(-)中经痰涂片抗酸染色检测阳性率为0.00%。结论 BD-96C检测准确率较高,是确诊肺结核的金标准,但临床上为进一步提高准确率,可结合其他检测方式。     

实时荧光聚合酶链反应检测支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌DNA诊断肺结核价值

目的探讨实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)检测支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TBDNA)诊断肺结核的临床价值。方法选取我院收治的115例肺结核患者作为研究对象,所有患者均进行支气管肺泡灌洗液TB-DNA检测、血清结核分枝杆菌特异性抗原(TB-SA)抗体检测、痰涂片抗酸染色镜检等。结果支气管肺泡灌洗液TB-DNA检测、血清TB-SA抗体检测、痰涂片抗酸染色镜检诊断肺结核的敏感度分别为65.2%(75/115)、50.4%(58/115)、20.9%(24/115)。支气管肺泡灌洗液检测TB-DNA诊断肺结核的敏感度显著高于血清TBSA抗体、痰涂片抗酸染色镜检(均P0.05)。结论采用FQ-PCR检测支气管肺泡灌洗液TB-DNA诊断肺结核具有较高的敏感度。     

实时荧光定量PCR在非典型结核患者纤支液TB-DNA检测中的应用

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)在非典型结核患者纤支液结核分支杆菌(TB)-DNA检测中的应用价值。方法收集该院2009年1月至2010年12月期间,526例临床疑似结核或肺部疾病患者纤维支气管镜检查,行支气管肺泡灌洗,取灌洗液进行实时荧光定量PCR法检测TB-DNA,同时采用常规浓集法涂片查找抗酸杆菌,比较两种检测方法在结核病患者标本中的阳性检出率。结果 526例肺泡灌洗液中阳性44例,TB-DNA阳性检出率为8.54%,常规浓集涂片阳性12例,抗酸杆菌阳性检出率2.28%,PCR法检测TB-DNA阳性检出率明显高于常规抗酸涂片法(P<0.05)。结论 TB-DNA定量能显著提高结核杆菌的检出率,优于传统的涂片、培养等方法,可作为结核病病原学诊断的首选项目使用。     

基因芯片法和涂片法在肺部感染分枝杆菌诊断中的应用评价

目的探讨基因芯片法和涂片法检测分枝杆菌的一致性。方法采集肺部感染患者痰标本先进行直接涂片查找抗酸杆菌,然后用基因芯片法平行检测分枝杆菌。对两种方法的结果进行统计,分析两种方法的差异性。结果 136例患者痰标本用基因芯片法共检测出抗酸杆菌69例,阳性率为50.7%,其中结核分枝杆菌56例(81.2%),非结核分枝杆菌13例(18.8%);涂片法共找到抗酸杆菌50例,阳性率为36.8%。结论基因芯片法检测抗酸杆菌的阳性率明显高于涂片法,而且可以检测出抗酸杆菌的种类,其结果明显优于涂片法,为临床鉴别肺部疾病提供了重要依据。     

三种方法同时检测艾滋病合并结核分枝杆菌感染

目的 提高艾滋病合并结核病的病原学诊断的阳性率.方法 同时采用萋-尼抗酸染色、BacT/ALERT 3D 360MP 结核分枝杆菌培养和实时荧光定量PCR 方法,对艾滋病合并疑似结核感染患者不同时段的样本进行检测.结果 涂片萋-尼抗酸染色阳性率为11.69%(18/154);样本直接进行TB-DNA PCR 扩增的阳性率为18.18%(28/154);MP 培养阳性经抗酸染色和TB-DNA PCR 确认结核分枝杆菌的阳性率为20.13%(31/154).结论 三种方法同时检测可以提高检测阳性率,实时荧光PCR 扩增TB-DNA 能为临床提供早期病原学诊断依据,而结核分枝杆菌培养在提供病原学诊断"金标准"的同时,可为进一步检测其耐药性准备菌株.鉴于艾滋病患者免疫缺陷的特殊性,需要采用多种方法对多份样本和多种类样本同时检测,提高检测的特异性和敏感性.     

荧光定量聚合酶链反应在淋巴结结核鉴别诊断中的应用

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测结核分枝杆菌(MTB)DNA在淋巴结结核鉴别诊断中的作用。方法选取近4年来74例淋巴结结核病例及24例其他对照病例,同时作细针吸取细胞学(FNAC)、抗酸染色、MTBDNA检测,采用χ2检验比较抗酸染色与FQ-PCR检测阳性率的差异。结果 74例标本中,抗酸染色阳性32例(43.2%),MTBDNA阳性52例(70.3%),抗酸染色与FQ-PCR检测MTB的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论在干酪型淋巴结结核诊断中PCR阳性率达82.3%,与涂片抗酸染色相比诊断率明显提高,有很大优势和应用价值。     

3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染诊断中的对比研究

目的对比3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染中的诊断价值,以期找到最优的检测方法或检测方法组合。方法收集2013年1月至2015年12月确诊为HIV合并结核分枝杆菌感染患者的各类标本115份。每例患者均用相同类型的标本进行直接涂片抗酸染色镜检、罗氏培养和实时荧光定性PCR法检测。结果以任意1种标本检出阳性计算阳性率,115例HIV合并结核分枝杆菌感染患者的标本直接涂片抗酸染色法与罗氏培养法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=19.865,P=0.001);直接涂片抗酸染色法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=0.028,P=0.001);罗氏培养法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异无统计学意义(χ~2=21.261,P=0.868)。应用罗氏培养法来检测脓液、粪便和尿液,其检出率都达到了100.0%。实时荧光定性PCR法检测脑脊液、胸腔积液及腹水等含菌量较少的标本,检出率达到100.0%。罗氏培养法与实时荧光定性PCR法在检测痰液标本时检出率也较高(80.0%)。而从标本类型上来看,脓液标本3种方法均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法检测结核分枝杆菌阳性率均为100.0%。支气管肺泡灌洗液的检出率也较高,均大于70.0%。结论实时荧光定性PCR在检测低排菌量标本如脑脊液、胸腔积液及腹水时具有明显优势;脓液标本3种方法均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法均能100.0%检测出结核分枝杆菌。     

联合检测胸水中TB-Ab和TB-DNA对诊断结核性胸膜炎的应用价值

目的 评价检测胸水中结核抗体(TB-Ab)和TB-DNA对诊断结核性胸膜炎的应用价值.方法 以胸水为标本,用斑点免疫金渗试验检测结核抗体,用荧光探针PCR(TaqManPCR)技术检测TB-DNA,同时对胸水进行涂片抗酸染色、罗氏培养.结果 179例结核性胸膜炎胸水,结核抗体阳性率为60.89%(109/179)、TB-DNA阳性率为63.13%(113/179),TB-Ab阳性及/或TB-DNA阳性共135例(75.4%),涂片抗酸染色阳性率为1.1%(2/179)、罗氏培养阳性率为1.68%(3/179).30例非结核性胸膜炎胸水,结核抗体阳性率为6.67%(2/30),TaqManPCR、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性.结论 结核抗体和TB-DNA均是诊断结核性胸膜炎的较好指标,两者联检可进一步提高检测敏感性.     

痰消化集菌法用于结核分枝杆菌检测的可行性研究

目的探讨痰消化集菌法进行痰标本结核分枝杆菌检测的临床价值。方法收集2012年3—10月门诊和住院疑似肺结核225例的痰标本,分别采用直接涂片法和消化集菌法检测结核分枝杆菌并比较。结果 225例痰标本采用消化集菌法检测结核分枝杆菌阳性率为38.67%,直接涂片法25.78%,消化集菌法检出阳性率高于直接涂片法(P0.05)。镜下检出痰液标本结核分枝杆菌不同数量时的阳性率消化集菌法明显高于直接涂片法,尤以结核分枝杆菌在(++++)时最明显,此时消化集菌法阳性率35.63%,直接涂片法12.07%,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论痰消化集菌法用于痰标本结核分枝杆菌检测具有操作简便、检出阳性率高及实验室安全等优点。     

基因芯片在分枝杆菌菌种鉴定及结核耐药基因检测的诊断价值

目的探讨基因芯片检测系统在分枝杆菌菌种鉴定及耐药基因检测中的临床应用价值。方法应用基因芯片技术对疑似结核病和非结核分枝杆菌病患者的痰液、尿液、胸腹腔积液、脑脊液和穿刺液等标本进行核酸检测;并对分枝杆菌阳性样本进行利福平及异烟肼的耐药基因检测。结果 91例标本中共检出结核分枝杆菌复合群16例,非结核分枝杆菌2例（戈登分枝杆菌1例、偶然分枝杆菌1例）,分枝杆菌检出总阳性率为19.8%（18/91）,其中结核分枝杆菌占17.6%（16/91）,非结核分枝杆菌占2.2%（2/91）;不同标本类型检出阳性率有差别,由高到低依次为穿刺脓液（33.3%）、痰液（24.0%）、胸腹腔积液（18.8%）、脑脊液（16.7%）和尿液（15.8%）。有57例患者同时进行了基因芯片法和涂片抗酸染色法检测,其中芯片法有16例阳性,阳性率为28.1%（16/57）,涂片法有3例阳性,阳性率为5.3%（3/57）,两种方法比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。18例分枝杆菌阳性标本进一步进行耐药基因检测,有4例发生耐药基因突变,其中2例（1例戈登分枝杆菌）为利福平耐药相关基因,ropB基因526位点发生C→G突变,1例为ropB基因531位点发生C→T突变,还有1例为异烟肼耐药相关基因,inhA基因启动子-15位点发生C→T突变;没有检测到多重耐药株。结论基因芯片技术适用于不同标本类型的分枝杆菌菌种鉴定及耐药基因检测,操作简便快速,灵敏度高,特异性好。     

结核感染T淋巴细胞斑点实验临床检测分析

目的探讨结核感染T淋巴细胞斑点实验(T-SPOT.TB)在临床检测结核病中的应用价值。方法利用T-SPOT.TB方法检测结核疑似患者,进行科室分布分析,同时与抗酸杆菌涂片、结核抗体实验、结核分枝杆菌DNA检测进行对比。结果 317例结核疑似患者中,76例T-SPOT.TB阳性,阳性率24.0%。潜伏性结核筛查科室阳性率为9.1%～25%;肺结核及肺外结核检测诊断中,阳性率为20.7%～66.7%。与其它实验室检测方法对比,T-SPOT.TB方法具有明显优势。结论 T-SPOT.TB是灵敏和特异的快速检测结核分枝杆菌感染的方法,在结核疑似患者筛查与诊断中具有较大临床应用价值。     

3种方法检测结核分枝杆菌的评价

目的评价荧光定量基因扩增法(FQ-PCR法)、胶体金法、痰涂片萋-纳氏抗酸染色法检测结核分枝杆菌情况,寻求结核分枝杆菌的快速、准确和特异性检测手段。方法选择经临床确诊96例肺结核患者痰液,采用3种方法进行检测。以临床确诊结核组为"真阳性",以对照组为"真阴性",分别计算3种方法的灵敏度、特异度、符合率、正确诊断指数、阴性及阳性预测值。结果 3种方法检测结核分枝杆菌的阳性率分别为:FQ-PCR法42.7%,胶体金法48.9%,痰涂片萋-纳氏抗酸染色法12.5%,FQ-PCR法联合胶体金法66.7%。经χ2检验,FQ-PCR法、胶体金法对结核分枝杆菌的检出率优于痰涂片萋-纳氏抗酸染色法;FQ-PCR法联合胶体金法对结核分枝杆菌的检出率优于单独采用FQ-PCR法、胶体金法的检出率;FQ-PCR法具有高度灵敏性和特异性,结果的可信度优于其他两种方法,联合胶体金法诊断可在保持高灵敏性、高特异性的同时,进一步提高结核分枝杆菌检出率。结论对早期诊断可获得较好治疗效果的肺结核患者应该选择灵敏度高的诊断方法,FQ-PCR法联合胶体金法检测有一定优势。     

结核杆菌三种实验方法的应用评估

目的比较痰涂片法、实时荧光定量PCR法和免疫结核抗体(金标法)检测对结核病的诊断意义。方法选取2015年7月至2015年10月在我院诊疗疑似或确诊患者172例,进行涂片抗酸染色、实时荧光定量PCR法检测和采集血样进行免疫结核抗体检测。结果 172例检测样本中,抗酸染色痰液标本阳性例数只有20例,阳性率为11.6%。实时荧光定量PCR法阳性例数55例,阳性率31.2%。免疫结核抗体(金标法)阳性例数为87例,阳性率为50.6%。结论三种方法中,以结核抗体阳性率最高,实时荧光定量PCR法次之,抗酸染色法阳性率最低。如果三种方法联合运用,相互佐证,可提高准确性。     

结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应对结核性脑膜炎的早期诊断价值

目的:探讨荧光定量聚合酶链反应(荧光定量PCR)检测技术对诊断结核性脑膜炎的应用价值。方法:对165例确诊为结核性脑膜炎患者和38例非结核性脑膜炎患者行腰椎穿刺术,标本送检结核分枝杆菌的荧光定量PCR、结核分枝杆菌培养、涂片找抗酸杆菌,比较各种检测方法的敏感性和特异性。结果:荧光定量PCR反应检测阳性率52.7%,明显高于脑脊液涂片找抗酸菌(1.2%)及结核分枝杆菌培养(11.5%)。荧光定量PCR与抗酸杆菌培养方法对比,P<0.01,差异有统计学意义,PCR检测明显优于细菌学培养。结论:结核分枝杆菌的荧光定量PCR对结核性脑膜炎诊断特异性高,分析周期短,在早期诊断结核性脑膜炎方面有重要的参考价值。     

FQ-PCR法和染色涂片法检测脑脊液结核杆菌结果对比分析及意义

目的通过荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)法和染色涂片法检测脑脊液(CSF)结核杆菌,结果与临床确诊结果进行对比分析,探寻提高抗酸杆菌(AFB)的检出率的检验方法。方法近年来怀疑结核性脑膜炎患者62例,取脑脊液用两种方法检测结核杆菌。结果 FQ-PCR和染色涂片阳性率分别为14.52%和4.84%。结论 FQ-PCR技术是一种快速、敏感、特异性较强的结核分枝杆菌辅助诊断方法。在检测脑脊液结核杆菌有其应用价值和意义。     

涂阳肺结核患者TB-DNA定量、γ干扰素释放试验、结核抗体检测的价值

目的探讨肺结核(TB)-DNA定量、γ干扰素释放试验(T-SPOT.TB)、结核抗体检测对活动性肺结核辅助诊断的价值。方法回顾性分析2013年7月至2014年6月入院确诊为肺结核且抗酸杆菌痰涂片阳性51例患者的TB-DNA定量、TSPOT.TB、结核抗体检测指标。结果 T-SPOT.TB检测阳性率为90.2%,灵敏度最高;其次为TB-DNA定量,阳性率为74.5%;结核抗体检测阳性率仅为37.3%,灵敏度最低。结论 T-SPOT.TB检测不受标本采集的影响,灵敏度高,对活动性肺结核的辅助诊断具有较高价值。     

结核分枝杆菌DNA实时定量PCR技术在临床病理诊断中的应用

目的探讨实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)检测结核分枝杆菌(Mycobaeterium tuberculosis,MTB)在临床组织病理学诊断中的应用价值。方法收集我院2013年5月-2015年2月临床确诊的144例结核病(tuberculosis,TB)患者,对其石蜡包埋组织标本行组织病理学检查,并同时采用组织切片抗酸染色及FQ-PCR技术检测MTB-DNA,并对这三种方法的阳性检出率进行比较。结果在144例临床诊断TB患者的石蜡包埋组织中,FQ-PCR法检测MTB阳性68例,阳性率为47.22%,抗酸染色法检测阳性22例,阳性率为15.28%,组织病理学法检测阳性74例,阳性率为51.39%,三者阳性率比较差异有统计学意义(P0.01)。FQ-PCR法对肺活检标本、肺叶切除标本和胸膜活检标本MTB的阳性检出率均高于组织病理学法和抗酸染色法;对淋巴结活检标本和其他组织标本的阳性检出率高于抗酸染色法,但低于组织病理学法。结论 FQ-PCR技术简便、快捷,敏感性明显好于传统抗酸染色法,可作为TB分子病理诊断的重要检测方法,为组织病理学诊断提供可靠的依据,具有较高的临床应用价值。     

T-SPOT.TB在肺部疾病结核感染筛查中的应用

目的 评价结核分枝杆菌(后简称结核杆菌)感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)诊断肺部疾病感染结核的价值。方法回顾性分析405例肺部疾病患者资料,所有患者均行外周血T-SPOT.TB,血清结核抗体(TB-Ab)、痰液涂片抗酸菌检测,结核DNA检测,并对其检测结果进行分析,比较各指标的阳性率。结果T-SPOT.TB阳性率为39.26%,远高于TB-Ab(10.86%)、痰液涂片(1.23%)、TB-DNA(3.95%)的阳性率。结论 T-SPOT.TB在结核病中具有较好的辅助诊断价值,其敏感性显著高于其他检测方法,可有效检出结核潜伏感染,帮助临床鉴别诊治疾病,具有较高推广应用价值。     

快速诊断技术在活动性肺结核的临床应用价值

目的探讨联合应用痰抗酸涂片、γ-干扰素体外释放试验(TB-IGRA)、TB-DNA在活动性肺结核诊断的临床应用价值。方法选取苏州第五人民医院肺结核患者803例,以肺部非结核疾病患者216例作对照,采用以上3种快速诊断技术进行检测,研究其在活动性肺结核的诊断效能。结果单一检测指标曲线下面积(AUC)两两比较,痰抗酸涂片检测AUC(0.675)最小,诊断效能最差,其敏感性及特异性分别为35.87%、99.07%;TB-IGRA检测AUC(0.771)最大,诊断效能最好,其敏感性及特异性分别为88.54%、65.74%。二联或三联组合检测两两比较,痰抗酸涂片+TB-IGRA、TB-IGRA+TB-DNA及痰涂片+TB-IGRA+TB-DNA的AUC较大,均大于痰抗酸涂片+TB-DNA,差异有统计学意义(P0.05),而痰抗酸涂片+TB-IGRA、TB-IGRA+TB-DNA及痰涂片+TB-IGRA+TB-DNA间差异无统计学意义(P0.05)。结论与单一指标诊断比较,多项指标联合诊断可提高其肺结核诊断的敏感性,从成本效益学角度考虑,痰抗酸涂片+TB-IGRA、TB-IGRA+TB-DNA联合检测AUC较大,检验效能较好。     

联合检测胸水中TB-Ab和TB-DNA对诊断结核性胸膜炎的应用价值

目的 评价检测胸水中结核抗体（TB-Ab）和TB-DNA对诊断结核性胸膜炎的应用价值。方法 以胸水为标本，用斑点免疫金渗试验检测结核抗体，用荧光探针PCR（TaqManPCR）技术检测TB-DNA，同时对胸水进行涂片抗酸染色、罗氏培养。结果 179例结核性胸膜炎胸水．结核抗体阳性率为60．89％（109／179）、TB-DNA阳性率为63．13%（113／179），TB-Ab阳性及，或TB-DNA阳性共135例（75．4％）．涂片抗酸染色阳性率为1．1%（2／179）、罗氏培养阳性率为1．68％（3／179）。30例非结核性胸膜炎胸水，结核抗体阳性率为6．67％（2／30），TaqManPCR、涂片抗酸染色、罗氏培养都未检出阳性。结论 结核抗体和TB-DNA均是诊断结核性胸膜炎的较好指标．两者联检可进一步提高检测敏感性。