癫痫大鼠脑组织内免疫反应特点研究

目的 研究脑“免疫特免性”与癫发病的关系。方法 用免疫细胞化学法观察ＩｇＧ免疫反应阳性（ＩｇＧ－ＩＲ）细胞在两种不同处理程序的正常成年、癫痫及尼莫地平作用下癫痫大鼠脑组织内分布情况。结果 灌注大鼠,除癫痫组个别脑片散在弱ＩｇＧ－ＩＲ细胞外,其余均阴性;未灌注大鼠,各组脑片均散布ＩｇＧ－ＩＲ细胞;癫痫大鼠脑组织ＩｇＧ－ＩＲ细胞分布较正常组增多（Ｐ〈０．０１）。尼莫地平作用下癫痫大鼠离ＩｇＧ－ＩＲ细胞     

癫痫大鼠脑组织内免疫反应特点的研究

目的 研究脑“免疫特免性”与癫痫发病的关系。方法 用免疫细胞化学法观察ＩｇＧ免疫反应阳性（ＩｇＧ－ＩＲ）细胞在两种不同处理程序的正常成年、癫痫及尼莫地平作用下癫痫大鼠脑组织内分布情况。结果 灌注大鼠,除癫痫组个别脑片散在弱ＩｇＧ－ＩＲ细胞外,其余均阴性;未灌注大鼠,各组脑片均散布ＩｇＧ－ＩＲ细胞;癫痫大鼠脑组织内ＩｇＧ－ＩＲ细胞分布较正常组增多（Ｐ〈０．０１）;尼莫地平作用下癫痫大鼠脑组织呐ＩｇＧ     

癫痫大鼠脑组织内免疫反应特点的研究

目的:研究脑“免疫特免性”与癫痫发病的关系。方法:用免疫细胞化学法观察IgG免疫反应阳性(IgG-IR)细胞在两种不同处理程序的正常成年、癫痫及尼莫地平作用下癫痫大鼠脑组织内分布情况。结果:灌注大鼠,除癫痫组个别脑片散在弱IgG-IR细胞外,其余均阴性;未灌注大鼠,各组脑片均散布IgG-IR细胞;癫痫大鼠脑组织内IgG-IR细胞分布较正常组增多(P<0.01);尼莫地平作用下癫痫大鼠脑组织内IgG-IR细胞分布与正常组比较无显著差异。结论:脑“免疫特免性”在癫痫发病中具有一定意义。     

癫痫大鼠脑组织内HSP70表达的免疫组化研究

目的 :探讨热休克蛋白 70 (HSP 70 )在癫痫大鼠脑组织内的表达情况及其意义。方法 :采用戊四氮致痫模型 ,应用免疫组织化学及常规病理检查的方法进行研究。结果 :在正常大鼠脑内未见HSP 70免疫反应 (IR)阳性细胞 ,戊四氮致痫后 12h脑内开始出现HSP 70IR阳性细胞 ,2 4hIR达高峰 ,3d后开始下降 ,7d后消失。HSP 70主要在边缘系统 (尤其是海马的CA1、CA3、CA4区 )、大脑皮质 (尤其是颞叶皮质、梨状皮质 )等区域表达。常规病理检查发现 ,上述区域散在出现受损的异常神经元。结论 :癫痫发作可诱导HSP 70在大鼠脑内广泛表达。HSP 70表达可作为神经元受损的一个早期指标。     

癫痫大鼠脑组织内HSP7O表达的免疫组化研究

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在癫痫大鼠脑组织内的表达情况及其意义。方法采用戊四氮致痫模型,应用免疫组织化学及常规病理检查的方法进行研究。结果在正常大鼠脑内未见HsP70免疫反应(IR)阳性细胞,戊四氮致痫后12h脑内开始出现HSP70IR阳性细胞,24hIR达高峰,3d后开始下降,7d后消失。HSP70主要在边缘系统(尤其是海马的CA1、CA3、CA4区)、大脑皮质(尤其是颞叶皮质、梨状皮质)等区域表达。常规病理检查发现,上述区域散在出现受损的异常神经元。结论癫痫发作可诱导HsP70在大鼠脑内广泛表达。HsP70表达可作为神经元受损的一个早期指标。     

癫痫鼠脑组织中P物质免疫反应阳性神经元的观察

为进一步探讨神经肽在癫痫发病机理中的作用，采用免疫组织化学方法，观察了青霉素诱导的癫痫大鼠脑组织中Ｐ物质免疫反应阳性神经元的变化。结果发现癫痫鼠ＳＰ能神经元增多，应用钙通道阻滞剂尼莫地平后再注射青霉素，则上述改变不明显，提示ＳＰ和Ｃａ参与癫痫发病过程。     

癫痫大鼠脑组织同HSP70表达的免疫组化研究

目的：探讨热休克蛋白70（HSP70在癫痫大鼠脑组织内的表达情况及其意义,方法：采用戊四氮致痫模型,应用免疫组织化学及常规病理检查的方法进行研究。结果：在正常大鼠内未见HSP70免疫反应（IR）阳性细胞,戊四氮臻痫后12h脑内开始HSP70IR阳性细胞,24hIR达高峰,3d后开始下降,7d后消失。HSP70主要在边缘系统（尤其是海马的CA1、CA3、CA4区）、大脑皮质（尤其是颞叶皮质、梨状皮质）等区域表达。常规病理检查发现,上述区域散在出现受损的异常神经元,结论：癫痫发作可诱导HSP70在大鼠脑内广泛表达,HSP70表达可作为神经元受损的一个早期指标。     

癫痫鼠脑组织中血管活性肠肽免疫反应阳性神经元的观察

为进一步了解血管活性肠肽（ｖａｓｏａｃｔｉｖｅ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ,ＶＩＰ）在癫痫发病中的作用,应用免疫组织化学方法,观察了正常、青霉素诱导的癫痫大鼠,以及双氢吡啶类钙通道阻滞剂尼莫地平（Ｎｉｍｏｄｉｐｉｎｅ,ＮＩＭ）抑制癫痫发作的大鼠大脑皮质,海马、杏仁核的血管活性肠肽能神经元。结果表明,癫痫鼠脑各区的ＶＩＰ免疫反应（ＶＩＰ－ＩＲ）阳性神经元较正常组增多（Ｐ〈０．０１）     

癫痫鼠脑组织中P物质免疫反应阳性神经元的观察

为进一步探讨神经肽在癫痫发病机理中的作用，采用免疫组织化学方法，观察了青霉素诱导的癫痫大鼠脑组织中Ｐ物质（ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ，ＳＰ）免疫反应阳性神经元的变化。结果发现癫痫鼠ＳＰ能神经元增多，应用钙通道阻滞剂尼莫地平后再注射青霉素，则上述改变不明显，提示ＳＰ和Ｃａ２＋参与癫痫发病过程。     

薄芝糖肽抑制大鼠实验性癫痫发作及其机制研究

目的研究薄芝糖肽对大鼠癫痫发作的抑制作用及对免疫指标的影响。方法 30只SD大鼠分为空白组、模型组、薄芝糖肽组,以腹腔注射青霉素的方法制作大鼠癫痫模型,注射前60 min模型组经尾静脉给予生理盐水2 mL,薄芝糖肽组经尾静脉给予薄芝糖肽2 mL(含5 mg多糖,1 mg多肽)。观察各组大鼠行为,描记脑电图,测定T淋巴细胞亚群和血清免疫球蛋白浓度。结果薄芝糖肽组痫性发作程度较模型组明显减轻(p<0.05)。薄芝糖肽组出现痫样波形的潜伏时间延长,频率降慢、幅度降低。模型组致痫后免疫系统出现抑制现象,薄芝糖肽组大鼠的免疫指标较模型组有明显的提升(p<0.05)。结论薄芝糖肽可抑制大鼠癫痫发作,其机制可能与薄芝糖肽可以明显恢复大鼠免疫指标有关。     

GIRK通道开放剂在癫痫大鼠中抗癫痫的研究

目的 探讨GIRK通道开放剂氟吡汀（flupirtine）对癫痫大鼠癫痫发作和脑电图的影响.方法 30只雄性健康成年SD大鼠随机平均分成三组：正常对照组、癫痫＋生理盐水（NS）组和癫痫＋氟吡汀（flupirtine）组.癫痫＋生理盐水（NS）组和癫痫＋氟吡汀（flupirtine）组两组动物复制青霉素诱发癫痫模型,造模成功后分别给予生理盐水和氟吡汀治疗,再观察痫样行为和脑电图.结果 正常对照组行为学和脑电图均正常;癫痫＋生理盐水组有明显痫样行为,脑电图呈现明显的尖波、棘波、尖-慢复合波以及棘-慢复合波的阵发性痫样放电;癫痫＋氟吡汀组大部分大鼠行为正常或是轻度的痫样行为,脑电图恢复正常的基础波放电,只有1例呈少量的痫样放电.结论 GIRK通道开放剂flupirtine对癫痫大鼠痫样行为和异常的脑电图有改善作用.     

氧化苦参碱对青霉素致痫大鼠海马神经递质的影响

目的观察氧化苦参碱（Oxy）对青霉素（PEN）致痫大鼠大脑海马谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）神经递质的影响。方法腹腔注射PEN制备癫痫动物模型,采用免疫组化SABC法测定腹腔内注射Oxy后癫痫大鼠海马Glu和GABA阳性细胞数目。结果腹腔注射Oxy的实验组癫痫大鼠海马Glu平均阳性细胞数低于未注射Oxy的模型组,而实验组GABA平均阳性细胞数高于模型组（P〈0．05）。结论Oxy抗癫痫作用机制与兴奋性神经递质Glu和抑制性神经递质GABA的作用有关。     

听源性癫痫发作对大鼠学习记忆的影响及机制探讨

目的探讨癫痫发作对大鼠学习记忆的影响及机制。方法以100dB铃声刺激60s诱发遗传性听源性癫痫大鼠癫痫发作,采用光辨别学习和放射免疫分析相结合的方法,研究大鼠癫痫发作对光辨别学习的影响及脑组织中生长抑素含量的改变。结果癫痫发作后,大鼠光辨别学习能力明显减弱,表现为达到学会标准所需的时间明显延长(6.20±0.97vs3.90±0.57,P<0.01);癫痫发作后,大鼠下丘脑、海马、颞叶皮层组织中生长抑素含量明显增高(下丘脑:551.28±68.21vs273.41±53.51,P<0.05;海马:246.71±43.26vs135.74±36.60,P<0.01;颞叶皮层:235.88±42.14vs150.01±37.71,P<0.01)。结论癫痫发作对大鼠光辨别学习有明显的抑制作用,该作用可能与下丘脑、海马及颞叶皮层组织中生长抑素含量的改变有关。     

肿瘤来源的IgG抑制脐带血中T细胞的增殖

目的 探究肿瘤来源的IgG是否对T细胞活化具有抑制作用。方法 首先从卵巢癌肿瘤组织纯化了肿瘤来源的IgG(tumor derived IgG, tIgG),并从脐带血中分离出单个核细胞(cord blood mononuclear cells,CBMC)及淋巴细胞(cord blood lymphocyte,CBL),用植物血球凝集素(phytohaemagg lutinin,PHA)刺激单个核细胞和淋巴细胞,使单个核细胞与淋巴细胞处于增殖状态,用荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl amino ester,CFSE)染色,CFSE对细胞无毒性,可以穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白结合,其荧光强度会随着细胞的分裂增殖而逐级递减,从而可以检测细胞增殖的情况。把从卵巢癌肿瘤组织中纯化得到的tIgG分为1 mg/L、10 mg/L和100 mg/L组,分别加入到单个核细胞和淋巴细胞中,静脉注射用免疫球蛋白(intravenous immunoglo-bulin,IVIG)作为阳性对照,也分为1 mg/L、10 mg/L和100 mg/L组,磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)作为阴性对照,用细胞流式术检测CD4⁺及CD8⁺ T细胞的增殖能力,并分别在64 h和86 h两个时间点检测细胞的增殖情况。结果 在CBMC体系中加入的tIgG可以明显地抑制CBMC中T细胞的增殖,发挥免疫抑制作用;同样,在CBL体系中加入的tIgG对T细胞也有抑制作用,且加入tIgG刺激的T细胞比加入IVIG刺激的T细胞的抑制增殖作用更强;在CBL体系中,tIgG的1 mg/L组和10 mg/L组对T细胞发挥的抑制增殖作用比100 mg/L组弱。结论 tIgG可以抑制T细胞的增殖,促使肿瘤发挥肿瘤免疫逃逸效应。     

多药耐药相关蛋白1 mRNA在慢性癫痫大鼠脑中的表达

目的难治性癫痫（refractory epilepsy,RE）的发生机制尚不明确。现已明确多药耐药相关蛋白（multidrug resistance associated protein,MRP）1与某些肿瘤耐药有关。为了探讨该蛋白是否与癫痫的多药耐药相关,本研究利用大鼠癫痫模型观察癫痫发作对大鼠脑MRP1 mRNA表达的影响及左乙拉西坦（Levetiracetam,LEV）和托吡酯（Topiramate,TPM）的作用。方法通过脑立体定向技术,将海人酸（kainic acid,KA）1．5μg（3μl）注射至SD大鼠海马,制作癫痫模型。对照组大鼠海马注射3μl等渗盐水。建立模型3d后,将癫痫组和对照组大鼠各15只随机分为LEV、TPM和Ns亚组分别给予LEV（50mg／kg）、TPM（40mg／kg）和等体积NS灌胃,1次／d,共30d。用荧光定量RT—PCR测定大鼠颞叶、海马MRP1 mRNA表达水平,并进行定量分析。结果各组癫痫大鼠颞叶、海马MRP1 mRNA表达与相应非癫痫组相比呈增高趋势,但差异无统计学意义。非癫痫或癫痫大鼠各处理组间颞叶或海马MRP1 mRNA表达水平总体差异均无统计学意义。结论病程为1个月的慢性癫痫大鼠脑内MRP1 mRNA表达无明显增加,TPM、LEV不影响正常和癫痫大鼠脑MRP1 mRNA的表达。     

癫痫病人撤换苯妥英钠和苯巴比妥的临床研究

目的探讨在癫痫病人中用卡马西平、托吡酯替换苯妥英钠、苯巴比妥的临床效果。方法将62例原先使用苯妥英钠、苯巴比妥的癫痫病人,采用首选卡马西平或托吡酯进行渐进缓慢先添加新药、后撤退原用药的方法,对苯妥英钠、苯巴比妥进行替换。结果30例病人完全由卡马西平单药替换,11例病人完全由托吡酯单药替换。撤换时间为3～6个月的复发率为38％,而撤换时间为7～12个月的复发率为18％,两者差异有显著性（P〈0．05）。结论卡马西平、托吡酯均可推荐作为选择的药物对苯妥英钠、苯巴比妥进行替换。     

免疫球蛋白对癫痫大鼠γ-氨基丁酸受体及谷氨酸脱羧酶表达的影响

目的探讨免疫球蛋白对癫痫大鼠脑内γ-氨基丁酸（GABA）受体数量、谷氨酸脱羧酶（GAD）表达和细胞凋亡的影响。方法健康SD大鼠10只为空白对照组,其余30只采用印防已毒素（PTX）腹腔注射制做大鼠癫痫模型,模型组大鼠分为癫痫模型对照组、生理盐水（NS）干预组和免疫球蛋白干预组,每组10只。第8天断头取脑分别测定大鼠脑内GABA、GAD和神经细胞凋亡数量。结果致痫大鼠发作后,脑组织GABA受体数量较对照组数量增加,GAD表达增强,凋亡细胞出现。经免疫球蛋白干预后,GABA受体数量增加明显,GAD表达也有所增强,而神经细胞凋亡数量与对照组比较明显减少。结论免疫球蛋白可通过提高GABA的数量,增强GAD的表达和阻止神经细胞凋亡来控制癫痫的发作。     

实验性癫痫大鼠齿状回中微管相关蛋白-2的变化及其在癫痫中的意义

目的：探讨实验性癫痫大鼠齿状回中微管相关蛋白-2(MAP-2)的变化及其在癫痫MFs出芽和突触重建中的意义。方法：建立海马快速电点燃模型,运用免疫组化方法研究齿状回中MAP-2在点燃不同阶段的动态变化，并结合尼氏染色和电镜观察阐明MAP-2的变化特点，探讨其原因及意义。结果：齿状回分子层颗粒细胞树突的MAP-2的免疫反应性于点燃后3天明显增强，至14天达到高峰(P<0.01)，20～30天降至对照水平（P<0.01） 。MAP-2的增加与齿门神经元的变性之间存在指数曲线相关关系（R2=0.9362）。电镜下，分子层神经元树突内的微管于点燃后3天增多，14天明显增多，至30天已有崩解。还可见轴突分支出芽，神经末梢与树突形成多个突触。结论：MAP-2的过度表达在癫痫大鼠苔纤维出芽和突触重建过程中发挥了重要作用，而大量受损的齿门神经元对抑制性细胞广泛的去神经支配可能是其过度表达的启动因素。