野生株阪崎肠杆菌的生化分型与耐药性研究

目的:对从婴儿奶粉中分离得到的23株野生株阪崎肠杆菌进行生化分型,对各型阪崎肠杆菌及非阪崎肠杆菌代表株进行耐药性分析.方法:阪崎肠杆菌生化分型使用APl20E鉴定条,定性耐药性分析采用WS/T125-1999标准中纸片法,定量耐药性分析采用细胞培养板梯度稀释法.结果:23株野生株阪崎肠杆菌根据生化实验结果分成了7型,通过耐药性分析筛选出的对阪崎肠杆菌耐药而对其他非阪崎肠杆菌敏感的抗生素有万古霉素、头孢噻吩.结论:通过对野生株阪崎肠杆菌的生化分型与耐药性研究,可对因阪崎肠杆菌引起的婴儿感染的治疗提供帮助,有利于研制新的阪崎肠杆菌选择性培养基,用于食品安全检测.     

婴幼儿配方奶粉中肺炎克雷伯菌与阪崎肠杆菌分离株的药敏分析

目的研究中国婴幼儿配方奶粉中肺炎克雷伯菌及阪崎肠杆菌分离株的药物敏感性。方法采用纸片扩散法测定15株细菌对氨苄西林、头孢唑林、环丙沙星、阿米卡星等8大类共24种抗生素的敏感性。结果 2009年自30份婴幼儿奶粉样品中共分离得到15株肠杆菌科细菌,经生化鉴定,其中肺炎克雷伯菌8株(53.3%),阪崎肠杆菌7株(46.7%)。药敏结果显示:所有菌株对β-内酰胺类抗生素均有不同程度的耐药性,对氟喹诺酮类和氨基糖甙类均敏感。分别有1株肺炎克雷伯菌和1株阪崎肠杆菌几乎对所有头孢类抗生素耐药。结论婴幼儿配方奶粉中肺炎克雷伯菌和阪崎肠杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性较强,其多重耐药性不断的出现对婴幼儿构成了极大的危害。     

应用VITEK 32检验奶粉中阪崎肠杆菌的探讨

目的阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）是乳制品中新发现的引起广泛关注的一种致病菌，加强对该菌的检验，对预防与控制由该菌所致的感染流行十分重要。方法采用中华人民共和国出入境检验检疫行业标准：SN／T1632．1—2005《奶粉中阪崎肠杆菌检验方法》第1部分：奶粉中阪崎肠杆菌的分离与计数方法，应用VITEK32（全自动微生物鉴定和药敏分析仪）进行检验。结果从原产法国的婴幼儿营养配方奶粉中检出阪崎肠杆菌。结论检出菌株与质控菌株的生化特征基本一致，该方法可使样品中极少量的阪崎肠杆菌被检测和定量。     

从酱腌菜中检出一株阪崎肠杆菌

目的 了解我市酱腌菜中阪崎肠杆菌的污染状况.方法 按照GB 4789.40-2010《食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》对30份酱腌菜进行阪崎肠杆菌分离培养.结果 检出1株阪崎肠杆菌,检出率为3.3％.结论 说明阪崎肠杆菌不仅存在于婴幼儿奶粉中,其他食品中也存在,对人体存在较大的安全隐患.     

婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌分子检测方法探讨

目的：对婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的分子检测方法进行探讨。方法：分别用常规PCR方法和实时荧光PCR方法对32份奶粉样品进行阪崎肠杆菌鉴定。结果：32份样品中检出2株阳性株,阳性率为6.25%,两种检测方法结果相符。结论：市售婴幼儿配方奶粉中存在阪崎肠杆菌污染,应尽快制订婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的检测标准,分子检测方法可快速准确检测阪崎肠杆菌。     

广州市售国产婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染调查

目的:了解广州市售国产婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌的污染状况。方法:对市售111份国产婴幼儿配方粉进行阪崎肠杆菌分离培养,对分离株进行生化鉴定,荧光PCR检测及17种抗生素的药敏分析。结果:共检出6株阪崎肠杆菌(检出率5.41%),其中配方牛奶粉3株(检出率4.41%),配方羊奶粉1株(检出率11.11%),配方米粉2株(检出率5.88%);6株阪崎肠杆菌对头孢噻吩耐药率100%,对头孢唑啉耐药率66.67%,对其余抗生素普遍敏感。结论:广州市售国产婴幼儿配方粉中存在阪崎肠杆菌污染,食用安全隐患不容忽视。     

国产婴幼儿配方奶粉及婴幼儿米粉中阪崎肠杆菌分离株的药敏分析

目的:了解北京地区市售国产婴幼儿配方奶粉及婴幼儿米粉中阪崎肠杆菌分离株的药物敏感性及耐药性。方法:采用纸片扩散法对11株分离自婴幼儿配方奶粉及婴幼儿米粉中的阪崎肠杆菌进行8大类17种药敏实验。结果:11株阪崎肠杆菌对苯唑西林和一代头孢菌素(头孢噻吩)100%耐药,对替卡西林、亚胺培南、头孢他定、头孢吡肟、阿莫西林/克拉维酸、环丙沙星高度敏感。结论:针对性使用抗生素,减少阪崎肠杆菌耐药,为临床提供合理用药依据。     

奶粉中阪崎肠杆菌PCR检测方法的建立

[目的]建立奶粉中阪崎肠杆菌的PCR检测方法。[方法]根据阪崎肠杆菌zpx基因设计引物建立PCR检测方法,进行方法的特异性验证和灵敏度检测,并对模拟样品和实际奶粉样品进行检测。[结果]所建立的阪崎肠杆菌PCR检测方法的纯菌检测灵敏度达102cfu/ml,6株阪崎肠杆菌菌株PCR扩增均可扩增出180bp的目的条带,而31株非阪崎肠杆菌则无目的条带出现;模拟阪崎肠杆菌污染样品经前增菌后均可检出;对实际样品的检测显示该方法与传统的分离培养方法具有较好的一致性。[结论]该方法灵敏度高,特异性强,快速、简便,易于推广,可很好地应用于奶粉中阪崎肠杆菌的检测和鉴定。     

食品及环境分离的阪崎肠杆菌药敏分析

目的了解分离自配方奶粉和婴幼儿食品及奶粉生产环境的阪崎肠杆菌的药物敏感性和耐药性。方法采用纸片扩散法对19株分离自配方奶粉和婴幼儿食品及奶粉生产环境的阪崎肠杆菌进行11大类29种抗生素的药敏实验。结果 19株阪崎肠杆菌对青霉素G、苯唑西林、万古霉素等3种抗生素耐药,对临床常用针对肠杆菌科的抗生素敏感。结论临床中应加强该菌的监测,同时加强对预防用药和临床用药的重视,以减少阪崎肠杆菌多重耐药性的产生。     

被抑制的阪崎肠杆菌快速复苏的研究

目的:本实验旨在探索婴儿配方奶粉中被抑制的阪崎肠杆菌快速复苏的方法,提高奶粉中阪崎肠杆菌的阳性检出率.方法:通过冷热处理预知浓度的阪崎肠杆菌,人为造成菌细胞受损,生化反应特性改变,再用修复培养基使菌细胞复原.结果:通过热处理,阪崎肠杆菌死亡率为99.90%,细菌生化反应改变17.2%,细菌名称改变58.3%;通过冷处理,阪崎肠杆菌死亡率18.90%,细菌生化反应改变6.1%,细菌名称改变33%;变异的阪崎肠杆菌经丙酮酸盐修复后,细菌生化反应特性恢复69.7%,阪崎肠杆菌恢复63.6%.结论:推荐使用丙酮酸盐修复培养基作为奶粉预增菌液,能提高婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的阳性检出率.     

2011年-2014年泰安市婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的检测及耐药性和毒力基因研究

目的了解泰安市婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的污染及耐药性和毒力状况,为婴幼儿食品安全管理及食源性疾病预警和临床用药提供科学依据。方法依据GB 4789—2010检测程序,连续4年(2011年-2014年)对泰安市4类婴幼儿食品(包括奶粉、米粉、营养饼干、面制品)中的阪崎肠杆菌进行分离培养及鉴定,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法检测药物敏感性,采用PCR技术检测毒力基因,采用血清凝集法进行血清分型。结果 2011年-2014年共检出7株阪崎肠杆菌,4类婴幼儿食品检出率差异无统计学意义(χ2=3.172,P=0.366)。7株阪崎肠杆菌人溶菌酶(hly)毒力基因检测全部阳性。血清分型结果 O1型5株,O6型2株。7株阪崎肠杆菌对头孢西丁的耐药率为100%,除四环素外,对测定的其他抗生素全部敏感。结论奶粉中阪崎肠杆菌的检出率较高,其血清型主要集中在O1型和O6型,全部携带hly毒力基因,对头孢西丁耐药情况较严重,对测定的其他抗生素敏感。     

奶粉中一株阪崎肠杆菌的分离鉴定

[目的]报道1株多项生化反应与标准菌株有不同之处的阪崎肠杆菌.[方法]对该菌株进行生化鉴定及毒力试验.[结果]该菌株多项生化反应与标准菌株及国内已报道菌株不同,并有较强的毒力和侵袭力.[结论]菌株经北京药品生物制品捡定所鉴定,确认阪崎肠杆菌.     

2012年平凉市市售婴幼儿食品中阪崎肠杆菌污染调查分析

目的了解平凉市市售婴幼儿食品中阪崎肠杆菌的污染状况,为本市婴幼儿食品的安全监管提供有效的科学依据,降低或避免对婴幼儿的健康危害。方法参照GB 4789.40—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验》及《2012年全国食源性致病菌监测工作手册》中的阪崎肠杆菌检验标准操作程序,对45份平凉市市售的婴幼儿食品进行阪崎肠杆菌的分离鉴定和定量分析。结果 45份样品中共检出8株阪崎肠杆菌,总检出率为17.78%。其中婴幼儿配方奶粉中检出1株,检出率为5.88%;婴幼儿辅助食品中检出7株,检出率为25.00%,并强调有6株阪崎肠杆菌来自同一品牌。结论平凉市市售婴幼儿食品,尤其是婴幼儿辅助食品,存在着严重的阪崎肠杆菌污染状况,对婴幼儿的健康构成严重的潜在危害。     

市售国产婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌污染情况调查

目的了解成都市市售国产婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌污染情况,为制定婴幼儿配方奶粉阪崎肠杆菌的限量标准提供科学依据。方法对2006-09/2007-03采集的80份市售婴幼儿配方奶粉进行菌落总数、大肠菌群及阪崎肠杆菌的检测,并对分离的阪崎肠杆菌进行药敏试验。结果所有检测样品中,有5份样品检出阪崎肠杆菌,阳性率为6.25%,且其中4份样品的菌落总数、大肠菌群均合格。分离的阪崎肠杆菌对常用抗生素普遍敏感。结论市售国产婴幼儿配方奶粉中存在少量阪崎肠杆菌污染,应尽快制定婴幼儿配方奶粉中适宜的阪崎肠杆菌微生物限量标准和相应检验方法。     

深圳乳制品和环境中阪崎肠杆菌污染状况调查

目的 了解深圳市乳制品中阪崎肠杆菌的污染状况,分析其可能的污染途径.方法 对抽取的195份乳制品及41份环境样品进行阪崎肠杆菌荧光定量PCR检测,同时参照GB/T4789.40-2008进行分离培养和鉴定.结果 共8份乳制品和12份环境样品经荧光PCR检测,为阪崎肠杆菌阳性;其中1份婴幼儿进口配方奶粉、2份新鲜挤出牛奶和4份环境样品分离出菌株.结论 深圳市售进口婴幼儿配方粉中存在阪崎肠杆菌污染隐患.医院婴儿养育环境中存在阪崎肠杆菌污染;生奶及奶场环境阪崎肠杆菌污染风险很高.     

成都市市售国产婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌污染情况调查

目的了解成都市市售的国产婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的污染情况。方法对2006年9月至2007年3月采集的80份市售婴幼儿配方奶粉进行菌落总数、大肠菌群及阪崎肠杆菌的检测,并对分离的阪崎肠杆菌进行药敏试验。结果所有检测样品中,有5份样品检出阪崎肠杆菌,阳性率为6.25%,且其中4份样品的菌落总数、大肠菌群均合格。分离的阪崎肠杆菌对常用抗生素普遍敏感。结论中国市售的国产婴幼儿配方奶粉中存在少量的阪崎肠杆菌污染。     

批发市场销售国产配方奶粉及婴幼儿食品中阪崎肠杆菌污染情况调查

目的了解批发市场销售的国产配方奶粉及婴幼儿食品中阪崎肠杜菌污染情况。方法参照GB/T4789.40-2008规定的阪崎肠杆菌的检验方法对69份样品进行检测。对检出的阪崎肠杆菌进行药敏检测。结果 69份国产配方奶粉及婴幼儿食品中共检出16株阪崎肠杆菌。16株菌均对临床常用的针对G-菌的抗生素普遍敏感。结论批发市场销售的国产配方奶粉及婴幼儿食品中阪崎肠杆菌污染严重,应引起有关部门的重视。     

环介导等温扩增法检测进口宠物乳粉中阪崎肠杆菌

目的:建立并验证一种能够简单,准确和快速检测进口宠物乳粉中阪崎肠杆菌的方法。方法:应用环介导等温扩增技术(LAMP)建立宠物乳粉中阪崎肠杆菌检测方法,并通过常规方法对其结果进行验证。结果:LAMP方法从5种进口宠物乳粉中检出两份阪崎肠杆菌阳性,与VITEK 2生化鉴定结果一致。结论:该方法特异性好、灵敏度高,检测时间短,适用于奶粉及其他食品中阪崎肠杆菌检测。     

奶粉中阪崎肠杆菌分离鉴别方法研究

阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）可引发婴儿、早产儿脑膜炎、败血症及坏死性结肠炎，散发和暴发病例在全球范围均有报道。国际相关组织认为，奶粉中的阪崎肠杆菌与沙门菌一样。是导致幼儿感染、死亡的主要原因，已有报道从婴幼儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌。因此，有效地从奶粉中分离阪崎肠杆菌，准确鉴别尤为重要，本根据所有阪崎肠杆菌菌株均产生α-葡萄苷酶的原理，在营养琼脂中添加5-溴-4-氯3-吲哚-α-葡萄苷作为底物，月桂基硫酸盐作为抑制剂，制成改良显色培养基，检测80份市售奶粉，同时使用肠杆菌科细菌生化鉴定试剂（AP120E），对可疑菌株进行鉴别并分析遇到的问题。现报告如下。     

食品和环境阪崎肠杆菌分离株的多位点序列分型研究

目的:阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)是肠杆菌科肠杆菌属一种革兰阴性菌,是一种条件致病菌,可通过污染婴幼儿配方食品导致严重的婴儿(特别是新生儿)的脑膜炎、坏死性小肠结肠炎和菌血症。对其进行分型研究对阪崎肠杆菌所致疾病的流行病学调查、跟踪和阻断传播途径具有重要的意义。方法:本研究选择7个管家基因atpD、fusA、glnS、gltB、gyrB、infB和pps作为目的基因,对分离自石家庄市售配方米粉、奶粉、婴幼儿食品和环境中分离到的19株阪崎肠杆菌和1株标准株ATCC51329进行了MLST分型检测。结果:20株阪崎肠杆菌可分为12个序列型,分辨率达0.9263,发现9个新ST型。结论:MLST作为阪崎肠杆菌的分型方法,结果准确,分辨率高,对研究该菌的进化趋势和溯源具有重要意义。