三磷酸腺苷生物发光法在卵巢癌体外化疗药物敏感试验中的应用

为探讨新鲜卵巢癌标本化疗药物敏感试验结果与临床疗效的相关性,采用三磷酸腺苷生物发光法(ATP-CVA),用液闪计数仪对25份新鲜卵巢癌组织标本进行药敏检测.结果显示:在ATP浓度为10-9～10-5mol/ml时,ATP标准品与发光计数值呈一线性关系,Y=1.48X+15.03,相关系数为0.9963;所检测的25份标本中成功22份,试验的可评价率为88% ,其敏感性为85.7%(12/14),特异性为83.3%(5/6),阳性预测值为92.3%(12/13),阴性预测值为71.4%(5/7),总的预测准确率为85%(17/20).上述结果表明,本药敏试验结果的预测准确性较高,与临床疗效之间具有很好的相关性,值得进行更深入的研究.     

ATP体外药敏试验指导的卵巢癌预见性化疗

目的　探讨ATP体外药敏试验指导临床卵巢癌化疗的价值。方法　 86例卵巢癌患者中 ,5 7例在化疗前接受了ATP体外药敏试验。其中ATP敏感组 49例 ,根据药敏结果指导化疗 ;ATP耐药组 8例和对照组 2 9例则凭经验化疗。结果　ATP敏感组有效率为 75 5 % (3 7/4 9) ,ATP耐药组和对照组有效率分别为 0 (0 /8)及 5 5 2 % (16/2 9) ,差异有显著意义(P <0 .0 1)。本研究体外药敏和体内疗效的总符合率为 78 9%〔(3 7+ 8) /5 7〕。结论　ATP体外药敏试验指导临床卵巢癌化疗是可行的 ,疗效也是满意的     

贲门癌细胞原代培养体外药敏试验研究

目的　探讨 (MTT)法体外药敏试验对贲门癌术后化疗的指导价值。方法　采用MTT法检测 31例贲门癌标本对临床常用的 5种化疗药物单独及联合应用的体外敏感性。结果　 5种抗癌药物单用时最敏感的药物为CPT和MMC ,χ2 值为 1 .35 ,P >0 .0 5 ,二者无统计学意义 ;联合用药组的总体敏感率明显高于单一用药组 (χ2 =2 9.0 5 3,P <0 .0 0 1 )。结论　MTT法体外药敏试验对指导贲门癌术后的化疗具有一定的指导意义     

ATP生物荧光法在卵巢癌体外药物敏感性试验中的应用

目的:探讨ATP生物荧光法在卵巢癌体外药敏试验(ATP-TCA)中应用的可行性.方法:采用ATP-TCA法对卵巢癌手术标本25例进行化疗药物敏感性试验.结果:ATP-TCA的可评估率为92.00%;25例卵巢癌患者对8种化疗药物的敏感率分别为:足叶乙甙17.39%,阿霉素26.09%,健择34.78%,丝裂霉素39.13%,5-氟脲嘧啶43.48%,草酸铂56.52%,顺铂65.22%,紫杉醇69.57%.结论:ATP-TCA法是一种敏感的化疗药物试验,在卵巢癌化疗药物敏感性预测方面的临床应用值得进一步研究.     

几种肿瘤转移基因变化与卵巢癌转移的相关性

目的　研究 MTA1、nm2 3H1 及 E- Cadherin(E- cad)的表达及突变与卵巢癌转移的相关性。方法　应用 RT- PCR、RT- PCR- SSCP和免疫组化技术 ,对正常卵巢、卵巢癌及其配对淋巴结组织进行 MTA1、nm2 3H1m RNA表达和突变及 E- cad蛋白表达的检测。结果　有转移的卵巢癌原发灶 MTA1m RNA高表达率为 10 0 % (7/7) ,无转移为 38.5 % (5 / 13) ,P=0 .0 10 3。有癌转移淋巴结高表达率为 87.5 % (6 / 7) ,而无癌转移为 2 3% (3/ 13) ,P=0 .0 118。有转移卵巢癌原发灶 nm2 3H1 m RNA低表达率为 10 0 % (7/ 7) ,无转移为 30 % (4/ 13) ,P=0 .0 0 43。有癌转移淋巴结低表达率为 10 0 % (7/ 7) ,无癌转移为 38.5 % (5 / 13) ,P=0 .0 10 2。无转移卵巢癌原发灶 E- cad蛋白表达阳性率为 46 .2 % (6 / 13) ,而有转移者 7例均无阳性表达 ,表达率为 0 ,P=0 .0 44。三基因表达相关性分析表明 ,MTA1与 nm2 3H1 、C- cad呈负相关 (r=- 0 .90 3、- 0 .80 2 ) ,nm2 3H1 与 E- cad呈正相关 (r=0 .72 4)。SSCP分析未发现 MTA1和 nm2 3H1 基因突变。结论　 MTA1及 nm2 3H1 、E- cad的表达与卵巢癌转移呈正、负相关关系 ,起着正、负调控的重要作用。这三个基因的异常表达是卵巢癌转移中的频发事件而与基因突变无关     

细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验及其与ATP法的比较

目的　探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性。方法　采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等 6种化疗药物诱导 4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果 ,并与三磷酸腺苷生物发光法 (ATP法 )检测结果进行对比。结果　同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同 ,与 ATP法比较二者的检测结果存在一致性 (P0 =0 .75 )。结论　上述结果提示 ,细胞凋亡检测能直接用于了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度 ,若作为一种药物敏感性试验方法与 ATP法组合应用 ,将有可能提高临床应用效果     

ATP生物发光法与MTT法检测卵巢癌体外化疗敏感性的比较

目的比较ATh法与MTT（四唑蓝）法对卵巢癌细胞体外化疗敏感性的预测价值。方法分别以ATP法和MTF法检测5种化疗药物对卵巢癌3AO细胞株的抑制作用。结果（1）ATP法与MTT法相关性良好（r＝0．9031）。（2）ATP法更加灵敏、稳定。ATP法在80个细胞时即可测出发光强度的改变;而MTT法细胞数达300时才能测出OD值变化。试验所需细胞浓度,ATP法与MTT法分别为1×104－5×104个／ml和1×106-5×106个／ml,ATP法比MTT法低得多。结论ATP法作为检测卵巢癌细胞体外化疗敏感性的手段优于MTT法。     

同时检测脑积水脑组织中多种高能磷酸化合物的反相高效液相色谱法的建立

目的　建立能同时测定狗脑积水不同时期脑组织中肌酸 (Cr)、磷酸肌酸 (Crp)、磷酸腺苷酸 (ATP、ADP、AMP)含量的方法 ,了解脑积水不同时期脑组织的能量代谢受损状况。方法　采用反相高效液相色谱法同时测定狗脑积水脑组织中 Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量。色谱柱为 Inertsil ODS- 3C18(2 5 0 mm× 4 .6 mm i.d. 5μm )分析柱 ,流动相为 :KH2 PO4 缓冲液 (330 mmol/ L ) -乙腈 - TBA(4 5 mm ol/ L ) (94 :5 .5 :0 .5 ) (p H=6 .2 7) ,检测波长为 2 10 nm。结果　最低检测限为 3.5 5～ 5 .84μmol/ L ,Cr在 5 .6 9～ 36 4 0 .5 0μm ol/ L (r=0 .9993) ,Crp 3.4 7～5 5 5 .5 0μmol/ L (r=0 .9999) ,AMP在 2 .6 9～ 172 3.0 0μmol/ L (r=0 .9993) ,ADP在 2 .6 6～ 170 4 .0 0μm ol/ L (r=0 . 9999) ,ATP在 2 .94～ 1883.5 0μ mol/ L (r=0 .9999)范围内均具有良好的线性关系。回收率为 90 .10 %～10 7.0 0 % ,日内精密度为 1.5 8%～ 3.88% ,日间精密度为 1.99%～ 4 .2 4 %。应用该方法测定了 16只狗脑积水不同时期脑组织中 Cr、Crp、ATP、ADP、AMP的含量 ,获得了良好的结果。结论　该方法准确、灵敏、快速 ,适合于脑积水脑组织中高能磷酸化合物的测定。     

细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验及其与ATP法的比较

目的 探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性。方法 采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等6种化疗药物诱导4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果。并与三磷酸腺苷生物发光法（ATP法）检测结果进行对比。结果 同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同，与ATP法比较二者的检测结果存在一致性（P0=0.75)。结论 上述结果提示，细胞凋亡检测能直接用于 了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度，若作为一种药物敏感性试验方法与ATP法组合应用，将有可能提高临床应用效果。     

ATB FUNGUS与微量法测定酵母菌体外抗真菌药物敏感性比较

目的　了解临床分离的酵母菌对 5 -氟胞嘧啶、两性霉素B、酮康唑及咪康唑的体外敏感性 ,评价ATBFUNGUS药敏试验与微量稀释法试验的符合性。方法　采用微量稀释法测定上述药物对临床分离的念珠菌的最低抑菌浓度(MIC) ,同时进行ATBFUNGUS试验。结果　 1 59株念珠菌的MIC范围 ,微量法分别为 :5 -氟胞嘧啶 0 .1 2 5～ 1 2 8μg/ml,中介度 6 .3 % ,耐药率 1 .9% ;两性霉素B 0 .0 1 5～ 4μg/ml,酮康唑 0 .0 1 5～ 8μg/ml,咪康唑 0 .0 1 5～ 4μg/ml。ATBFUNGUS试验 1 59株念珠菌对 5 -氟胞嘧啶的耐药率为 2 .5 % ,中介度 5 .7% ;两性霉素B、酮康唑及咪康唑未发现耐药株 ,中介度分别为 3 .4%、5 .7%和 4 .4%。两法对四种药物敏感性测定结果的总符合率为 94.3 %。结论　采用ATBFUNGUS进行酵母菌体外抗真菌药物敏感性测定与微量稀释法同样具有可重复性和结果的一致性 ,操作更简便     

ATP生物发光法检测卵巢癌细胞对化疗药物的敏感性

目的 探讨ＡＴＰ生物发光法药物敏感试验在卵巢癌中的应用的可行性。方法 以ＡＴＰ生物发光法检测卵巢癌ＨＯ－８９１０细胞对１１种常用化疗药物的敏感性,并与ＭＴＴ法相比较。结果 ＡＴＰ浓度、细胞浓度的对数与发光强度（ＲＬＵ）的对数值之间有较好的线性关系,并存在直线回归关系。两种方法测定的抑制率基本符合,但ＡＴＰ法测定的抑制率数值大,变异系数小,结果稳定。结论 ＡＴＰ生物发光法是一种高度敏感的化疗药物敏感     

MTT法检测卵巢癌化疗敏感性

目的 应用噻唑蓝（MTT）法检测卵巢癌对常用抗癌药物的敏感性，并分析其临床意义。方法卵巢癌标本52例。用MTT法将癌细胞悬液与17种抗癌药反应，计算各种抗癌药抑制率，推断药物敏感性，同时就其相关因素进行分析。结景卵巢癌的不同个体和类型对化疗药物的敏感性各不相同。药物敏感性与肿瘤分期和分级有关。本组患者的生存率较以往无药敏试验的患者明显提高。结论采用MTT法进行抗癌药物敏感性试验，可以选择有活性的化疗药物对卵巢癌患者进行有效的个体化治疗。     

Estrogen replacement therapy and ovarian cancer mortality in a large prospective study of US women

CONTEXT: Postmenopausal estrogen use is associated with increased risk of endometrial and breast cancer, 2 hormone-related cancers. The effect of postmenopausal estrogen use on ovarian cancer is not established. OBJECTIVES: To examine the association between postmenopausal estrogen use and ovarian cancer mortality and to determine whether the association differs according to duration and recency of use. DESIGN AND SETTING: The American Cancer Society's Cancer Prevention Study II, a prospective US cohort study with mortality follow-up from 1982 to 1996. PARTICIPANTS: A total of 211 581 postmenopausal women who completed a baseline questionnaire in 1982 and had no history of cancer, hysterectomy, or ovarian surgery at enrollment. MAIN OUTCOME MEASURE: Ovarian cancer mortality, compared among never users, users at baseline, and former users as well as by total years of use of estrogen replacement therapy (ERT). RESULTS: A total of 944 ovarian cancer deaths were recorded in 14 years of follow-up. Women who were using ERT at baseline had higher death rates from ovarian cancer than never users (rate ratio [RR], 1.51; 95% confidence interval [CI], 1.16-1.96). Risk was slightly but not significantly increased among former estrogen users (RR, 1.16; 95% CI, 0.99-1.37). Duration of use was associated with increased risk in both baseline and former users. Baseline users with 10 or more years of use had an RR of 2.20 (95% CI, 1.53-3.17), while former users with 10 or more years of use had an RR of 1.59 (95% CI, 1.13-2.25). Annual age-adjusted ovarian cancer death rates per 100 000 women were 64.4 for baseline users with 10 or more years of use, 38.3 for former users with 10 or more years of use, and 26.4 for never users. Among former users with 10 or more years of use, risk decreased with time since last use reported at study entry (RR for last use <15 years ago, 2.05; 95% CI, 1.29-3.25; RR for last use >/=15 years ago, 1.31; 95% CI, 0.79-2.17). CONCLUSIONS: In this population, postmenopausal estrogen use for 10 or more years was associated with increased risk of ovarian cancer mortality that persisted up to 29 years after cessation of use.     

米非司酮对卵巢癌细胞2的增敏作用及其机制的研究

OBJECTIVE: To observe the effect of mifepristone in enhancing chemosensitivity of drug-resistant ovarian cancer cell line to cisplatin and investigate its mechanism. METHODS: Human ovarian cancer cell lines COC1 (DDP-sensitive) and COC1/DDP (DDP-resistant) were incubated with or without mifepristone. The proliferation rate of the cells was determined by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay and positive expression of apoptosis-associated proteins Bcl-2 and Bax were observed by means of flow cytometry. RESULTS: It was observed that mifepristone at the dose of 1.25 micromol/L reversed the resistance of COC1/DDP cells to cisplatin, and Bcl-2 protein expression was deceased from (23.8067+/-0.4382)% to (19.3967+/-0.6866)% (P=0.000) while Bax protein expression increased from (12.75+/-0.2524)% to (25.5967+/-0.8834)% (P=0.000). CONCLUSION: Mifepristone may act to enhance the sensitivity of COC1/DDP cells to cisplatin, possibly through regulating Bcl-2 and Bax protein expressions.     

p-Akt-mTOR-p70S6K信号通路蛋白与卵巢癌临床病理特征及化疗耐药的相关性

目的：研究磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路中 的p-Akt,mTOR和p70S6K 3种蛋白与卵巢癌临床病理特征及化学药物治疗(简称化疗)耐药的关系。方法：采用免疫组 织化学方法检测18例卵巢癌化疗耐药和25例化疗敏感组织中p-Akt,mTOR和p70S6K蛋白的表达,分析这些蛋白与卵 巢癌临床病理特征及化疗耐药的相关性。结果：p-Akt蛋白在卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别 为77.14%,50.00%和66.67%,三者比较差异无统计学意义(P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为73.33% 和75.00%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);在I~II期和III~IV期中的表达分别为18.18%和93.75%,差异有统计学 意义(P<0.05)。mTOR蛋白在卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别为77.14%,100.00%和83.33%,三 者比较差异无统计学意义(P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为80.00%和78.57%,两者比较差异无统 计学意义(P>0.05);在I~II期和III~IV期中的表达分别为27.27%和96.88%,差异有统计学意义(P<0.05)。p70S6K蛋白在 卵巢浆液性癌、黏液性癌和子宫内膜样癌中的表达分别为80.00%,100.00%和100.00%,三者比较差异无统计学意义 (P>0.05);在高、中分化和低分化癌中的表达分别为93.33%和78.57%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);在I~II期 和III~IV期中的表达分别为45.45%和96.88%,差异有统计学意义(P<0.05)。p-Akt蛋白在卵巢癌化疗耐药和敏感组织中 的表达率分别为88.89%及64.00%;mTOR蛋白在耐药和敏感组织中的表达率分别为94.44%及68.00%;p70S6K蛋白在耐 药和敏感组织中的表达率分别为100.00%及72.00%,3种蛋白在耐药组中的表达均高于敏感组(P<0.05)。结论：p-Akt- mTOR-p70S6K信号通路中的3种蛋白可能参与卵巢癌的侵袭和转移,这3种蛋白的表达上调可能与卵巢癌化疗耐药有 关,在临床上可作为预测卵巢癌化疗耐药的标志。     

RNAi抑制EGFR基因增强卵巢癌细胞对泰素敏感性的研究

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)基因在卵巢癌细胞对泰素敏感性的增强作用.方法 构建针对EGFR基因序列特异性shRNA的表达载体,用脂质体转染卵巢癌SKOV3细胞及G418筛选阳性克隆.采用RT-PCR、Western blot检测EGFR基因的抑制情况,用MTT法检测卵巢癌细胞对泰素的敏感性.结果 靶向EGFR的序列特异性shRNA可明显抑制EGFR基因的表达,EGFR mRNA和蛋白的抑制率分别为77.5%和76.1%;序列特异性shRNA-EGFR可明显提高卵巢癌细胞对泰素的敏感性,差异有统计学意义(P<0.01).结论 体外实验证实抑制EGFR基因的表达可提高卵巢癌细胞的化疗敏感性.     

基于IVIM的MR扩散加权成像(DWI)对卵巢癌分型的诊断价值

目的探讨基于体素内不相干运动(IVIM)的磁共振扩散加权成像(MR-DWI)对卵巢上皮癌分型的诊断价值。方法将201 6年1月至201 8年7月我院收治的经手术病理检查确诊为卵巢上皮癌的5 4例患者作为研究对象,所有患者术前均进行过MR-DWI检查,根据二元分型理论将患者分为Ⅰ型(低级别)和Ⅱ型(高级别),通过单、双指数模型获得其表观扩散系数(ADC)、单纯水分子扩散系数(D)、灌注相关扩散系数(D*)和灌注分数(f),比较两种分型差异,并绘制ROC曲线,探讨各参数对卵巢上皮癌分型的诊断价值。结果病理检查结果显示,Ⅰ型卵巢上皮癌患者23例,Ⅱ型卵巢上皮癌患者31例。Ⅱ型患者ADC、D、f值均低于Ⅰ型(P<0.05),D~*值与Ⅰ型无显著差异(P> 0.05)。以病理结果为标准,ADC、D、f值的ROC曲线下面积分别为0.885、0.8 92、0.740,ADC值=1.172×10~3mm^2/S、D值=0.8 19×10~3mm^2/s、f值=27.6 8%时,其对应约登指数最大。ADC值对卵巢上皮癌分型诊断灵敏度和特异度为87.10%和82.61%;D值对卵巢上皮癌分型诊断灵敏度和特异度为93.55%和86.96%;f值对卵巢上皮癌分型诊断灵敏度和特异度为74.19%和73.91%。结论IVIM参数D值对卵巢上皮癌分型诊断效能较好。