严重烧伤早期心肌线粒体Ca2+转运变化及外源性ATP的影响

目的　探讨严重烧伤早期心肌线粒体Ca2 + 转运变化及外源性ATP的影响。方法　Wistar大鼠 4 8只随机分为正常对照组 (n =8)和烧伤组 (30 %TBSAⅢ°烫伤 ,n =4 0 )。正常对照组大鼠脱毛后 1h活杀取心 ,烧伤组大鼠分别于伤后 1、3、6、12、2 4h活杀取心 ,分离心肌线粒体 ,测定其ATP、ADP、AMP含量及Ca2 + 转运速率 ,同时检测外源性ATP作用后心肌线粒体Ca2 + 转运速率的变化。结果　 (1)大鼠心肌线粒体ATP含量于烧伤后 3、6、12、2 4h显著降低 ;(2 )伤后 1h心肌线粒体Ca2 + 摄取速率明显升高 ,但 3、6、12、2 4h心肌线粒体Ca2 + 摄取速率和释放速率均显著降低 ;(3)外源性ATP作用后 ,3、6h线粒体Ca2 + 摄取速率明显升高 ,3、6、12hCa2 + 释放速率显著升高。结论　 (1)烧伤初始心肌线粒体Ca2 + 摄取加强 ,烧伤后续阶段线粒体Ca2 + 转运紊乱 ;(2 )外源性ATP可部分纠正烧伤后续阶段线粒体Ca2 + 转运紊乱     

Ca2+在严重烧伤早期心肌线粒体呼吸功能损害中的作用及其机制研究

目的 探讨Ca^2 在严重烧伤早期心肌线粒体呼吸功能损害中的作用及其机制。方法 复制30％TBSAⅢ度烧伤大鼠模型，取正常及伤后1、3、6、12、24h大鼠心肌分离线粒体，测其Ca^2 浓度（[Ca^2 ]m）、线粒体PLA2（mPLA2)、一氧化氮合酶(mtNOS）、F0F1－ATPase和细胞色素c氧化酶活性，同时观察心肌线粒体呼吸功能变化。结果 ①伤后1h[Ca^2 ]m与线粒体呼吸控制率（RCR）均明显升高，且RCR与[Ca^2 ]m呈显著正相关；伤后3、6、12、24h心肌[Ca^2 ]m、mtPLA2及mtNOS活性均显著高于正常组，但线粒体呼吸功能反而下降，RCR与[Ca^2 ]m呈明显负相关，mtNOS、mtPLA2活性与[Ca^2 ]m呈明显正相关。②伤后1h线粒体F0F1－ATPase合成活性明显升高，但3、6、12、24h其合成活性与细胞色素c氧化酶活性均显著低于正常组；F0F1－ATPase水解活性除伤后3h显著升高外，其余各时相点均明显低于正常对照组。结论 [Ca^2 ]m改变是烧伤后心肌线粒体呼吸功能变化的重要原因，烧伤初始[Ca^2 ]m适度升高，促进线粒体呼吸功能加强；烧伤后续阶段Ca^2 严重超载激活mtPLA2、mtNOS在线粒体呼吸功能损害中起重要作用。     

大鼠严重烧伤早期心肌线粒体F0F1-ATPase活性变化及其对能量代谢的影响

目的 探讨严重烧伤早期心肌线粒体F0F1－ATPase活性变化及其对能量代谢的影响。方法 复制30％TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,取正常及伤后1、3、6、12、24h大鼠心肌分离线粒体,测定F0F1－ATPase活性、线粒体膜电位及ATP、ADP、AMP含量。结果 ①烧伤后1h线粒体F0F1－ATPase合成活性明显升高,但3、6、12、24h显著降低,分别为对照组的51.4%、44.9%、77.6%和87.4%。F0F1－ATPase水解活性于伤后1h明显降低,但3h显著高于对照组,6、12、24h下降,明显低于正常对照组;②大鼠烧伤后1h心肌线粒体ATP含量及膜电位均无明显变化。但3、6、12、24h线粒体ATP含量及膜电位均显著降低,同时ADP含量升高。结论 烧伤后1h线粒体F0F1－ATPase合成活性明显升高,加速ATP合成以满足细胞对能量的需求;伤后3hF0F1－ATPase水解活性明显升高,水解ATP以维持线粒体膜电位;6hF0F1－ATPase功能紊乱,合成与水解活性均显著降低,失去其对能量代谢的调节作用。12、24hF0F1－ATPase合成与水解活性均有所恢复、线粒体ATP含量及膜电位也呈恢复趋势。     

兔心肌挫伤心功能障碍与心肌细胞内Ca2+和线粒体ATP酶的变化

目的：探讨心肌细胞内游离钙([Ca^2 ]i)和心肌ATP酶变化在心肌挫伤（MC）后心功能障碍发生机制中的意义。方法：随机选取兔36只，分为6组：正常对照、伤后2、4、8、12、24h，每组6只。经右颈总动脉插管至左心室测左室压力。采用BIM-II型生物撞击机致成MC模型。在上述时相点测定左室压力，并测定心肌细胞内[Ca^2 ]i和心肌匀浆组织及线粒体ATP酶活力。结果：心脏收缩/舒张功能受到损害，心肌细胞内[Ca^2 ]i升高，心肌匀浆组织及线粒体ATP酶下降，相关分析表明心功能障碍与心肌细胞内[Ca^2 ]i含量升高呈明显负相关，与ATP酶活性降低呈明显正相关。结论：MC后心脏功能下降，心肌细胞内[Ca^2 ]i含量升高和ATP酶活性下降可能是其原因之一。     

大鼠严重烧伤早期心肌线粒体通透性转换孔状态改变及其机制

目的　探讨大鼠严重烧伤早期心肌线粒体通透性转换孔 (PTP)状态改变及其机制。方法　Wistar大鼠 48只随机分为正常对照组、烧伤 1、3、6、12、2 4h组 ( 3 0 %Ⅲ度烫伤 )。所有大鼠处死前 5min均从颈外静脉推注 0 .5mmol L 2 [3H]去氧葡糖 ( [3H]DOG) ,测定伤后各组大鼠心肌线粒体 [3H]DOG、cytc、MDA含量及 [Ca2 + ] m。结果　①大鼠烧伤后 1h心肌线粒体 [3H]DOG及cytc含量与正常对照组无明显差异 ,但 3、6、12、2 4h心肌线粒体 [3H]DOG含量明显高于正常对照组 ,cytc含量明显低于对照组 ,分别是对照组的 68 8%、5 0 .0 %、77.1%、72 .9%。②大鼠烧伤后 3、6、12、2 4h心肌线粒体MDA含量及 [Ca2 + ] m 显著高于正常对照组。③伤后心肌线粒体 [3H]DOG含量与 [Ca2 + ] m 、MDA均呈显著正相关 ,相关系数分别为 0 .85 47、0 .9117(P <0 .0 1)。结论　烧伤后 1h心肌线粒体PTP状态无明显改变 ,但伤后 3、6、12、2 4hPTP开放明显增加 ,线粒体Ca2 + 超载及自由基增加可能是烧伤后PTP开放的重要原因     

川芎嗪对大鼠心肌缺血损伤的保护作用

目的：探讨川芎对大鼠心肌缺血损伤保护作用。方法：大鼠随机分对照组、缺血组和川芎嗪保护组。采用皮下注射异丙肾上腺素（ISP，5mg/kg),24h后再注射同剂量一次，造成心肌缺血损伤模型。观测心肌线粒体中Ca^2 －ATP酶、Ca^2 -Mg^2 -ATP酶活力，以及心肌组织和线粒体中Ca^2 、Mg^2 含量。结果：川芎嗪保护组心肌线粒体Ca^2 －ATP酶、Ca^2 -Mg^2 －ATP酶活力较缺血组均有显著性升高（P＜0．01），且川芎嗪可稳定心肌组织及线粒体Ca^2 、Mg^2 含量。结论：川芎嗪对大鼠心肌缺血损伤有保护作用，其机理可能与抑制钙超载有关。     

严重烧伤大鼠早期心肌组织超微结构的变化

目的 严重烧伤后早期可发生心脏功能紊乱，观察严重烧伤早期大鼠心肌组织超微结构的变化。方法 SD大鼠，造成30％体表面积的Ⅲ度烧伤模型，分别在烧伤后0．5、1、2、6、12h取材，透射电镜下观察超微结构的变化。结果 烧伤后心肌细胞超微结构变化主要发生在细胞器，而细胞膜、心肌纤维和闰盘等未见明显异常。伤后0.5h可见较多线粒体收缩，部分线粒体肿胀；伤后1h肌浆网扩张，心肌细胞线粒体肿胀，部分线粒体嵴弯曲，基质颗粒消失；伤后2、6、12h未见明显加重。内皮细胞在伤后0．5h即有明显变化。结论 严重烧伤后早期心肌组织细胞超微结构的变化主要表现在心肌细胞线粒体和内皮细胞上，多为可逆性变化。     

二氮嗪对严重烧伤大鼠心肌损害的保护作用及其机制

目的 探讨二氮嗪对严重烧伤早期心肌损害的保护作用及其机制。方法 健康成年Wistar大鼠24只，随机分为正常对照组、烧伤组和烧伤二氮嗪处理组(n=8)。烧伤组、烧伤二氮嗪处理组大鼠造成30％TBS AⅢ度烧伤，伤后30min经腹腔补液，烧伤二氮嗪处理组同时于颈外静脉推注二氮嗪(剂量10mg／kg)。烧伤组和烧伤二氮嗪处理组动物于伤后6h抽血并活杀，测定线粒体K^ 内流、呼吸功能、Ca^2 浓度([Ca^2 ]m)、MDA及血清LDH、CK。结果 二氮嗪处理组线粒体K^ 内流速率明显高于正常组与烧伤组，且线粒体呼吸控制率(RCR)、Ⅲ态呼吸速率(ST3)明显高于烧伤组，而[Ca^2 ]m、MDA含量显著低于烧伤组，Ⅳ态呼吸速率(ST4)与正常对照组无显著差异；同时二氮嗪处理组血清CK、LDH显著低于烧伤组，分别是烧伤组的63．7％和52．0％。结论 二氮嗪可减轻严重烧伤早期心肌细胞损害，其机制可能与开放线粒体K^ 通道，抑制线粒体Ca^2 超载及减少自由基产生有关。     

巨细胞病毒感染对神经细胞[Ca^2＋]i/钙调素及线粒体膜电位的影响

目的观察巨细胞病毒感染组和正常对照组小鼠海马神经细胞[Ca^2＋]iCaMmRNA及线粒体膜电位。方法将BALB／C乳鼠同母鼠随机分为实验对照组（18只）和病毒感染组（35只），感染后56天检测两组小鼠海马神经细胞的[Ca^2＋]iCaMmRNA及线粒体膜电位。结果病毒感染组小鼠海马[Ca^2＋]iCaMmRNA增高及线粒体膜电位明显下降（P〈0．01），与正常对照组比较差异有显著性。结论巨细胞病毒感染所引起的小鼠海马[Ca^2＋]iCaMmRNA及线粒体膜电位的改变可能是其导致神经系统功能紊乱的机制之一。     

烧伤早期大鼠心肌线粒体DNA 4.8 kb大片段缺失的检测及其意义

目的观察严重烧伤早期大鼠心肌组织线粒体DNA(mtDNA)4．8kb大片段缺失的规律,探讨线粒体参与烧伤后“休克心”形成的基本机制。方法Sprague Dawley(SD)大鼠36只随机分为假烫伤组、30％TBSA Ⅲ度烫伤1、3、6、12、24h组,半定量PCR法检测烧伤前后心肌线粒体DNA缺失率,并测定各组大鼠心肌线粒体中ATP、ADP、AMP以及血清中肌钙蛋白I(Tn I)含量变化。结果①大鼠烧伤后1、3、24h分别发生了线粒体DNA(mtDNA)的部分或全部4．8kb大片段缺失。②大鼠烧伤后1、3、6、24h时心肌线粒体中ATP含量下降,结果有显著性意义(P＜0．05,P＜0．01)。、③大鼠烫伤后血清中Tn I含量急剧上升,至伤后6h达最高峰,变化有显著性意义(P＜0．05,P＜0．01)。结论烧伤早期心肌mtDNA发生了严重缺失,可能诱发线粒体氧化磷酸化障碍,促进了烧伤早期心肌损伤。     

吗啡预处理对大鼠缺血再灌注损伤 心肌线粒体通透性转换孔的影响

目的：探讨吗啡预处理对大鼠缺血再灌注损伤心肌保护作用及对线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore,MPTP）的影响。方法：40只SD成年雄性大鼠,体质量220~280 g,随机分为S组（假手术组,仅穿线,不结扎冠状动脉前降支）,IR组（缺血再灌注组）,Mp+IR组（吗啡预处理缺血再灌注组),CsA+IR组 (环孢霉素A预处理缺血再灌注组), 每组10只。除S组外,其余大鼠心脏都经历30 min缺血和180 min再灌注,再灌注180 min时抽?庋逯辛姿峒∷嵬っ福╟reatine kinase-Mb,CK-Mb）和心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）,分离心肌线粒体,测定缺血再灌注心肌线粒体2-3［H］DOG,Cyt C,［Ca2+］m 和Ca2+摄取速率及MPTP t1/2（MPTP达到50%开放所需时间）并比较4组之间的差异。结果：Mp+IR组和CsA+IR组CK-Mb与cTnI明显较IR组降低（P＜0.01）。IR组心肌细胞线粒体2-3［H］DOG和［Ca2+］m 明显增加,高于S组,Cyt C含量明显低于S组,Mp+IR组较IR组2-3［H］DOG和［Ca2+］m下降,Cyt C 含量增加（P＜0.01）。2-3［H］DOG与［Ca2+］m呈正相关（r=0.797,P＜0.01), Cyt C与2-3［H］DOG呈负相关（r=-0.805,P＜0.01),Cyt C与［Ca2+］m呈负相关（r=-0.648,P＜0.01)。缺血再灌注后MPTP t1/2明显缩短,用吗啡和CsA干预使MPTP t1/2明显延长。结论：用吗啡预处理可以起到保护心肌的作用,其机制可能与降低钙超载,延长MPTPt1/2有关。     

大鼠烧伤后立即切痂对心肌损伤的保护作用

目的：探讨烧伤后即行切痂对心肌损伤的防治作用。方法：建立３０％ＴＢＳＡⅢ°烧伤大鼠伤后立即一次性切痂模型，动物随机分为对照组（ｎ＝１０），未切痂组（ｎ＝５０）和切痂组（ｎ＝５０），于伤后１、３、６、１２和２４ｈ检测血浆肌球蛋白轻链１（ＭＬＣ１）、血浆及心肌组织ＴＮＦ等指标。结果：烧伤后６ｈ血浆ＭＬＣ１、ＴＮＦ即显著升高，心肌组织中ＴＮＦ也在伤后１２ｈ显著升高。未切痂组与切痂组比较，伤后１～６ｈ未切痂组ＭＬＣ１略低于切痂组，至伤后１２ｈ，未切痂组ＭＬＣ１、ＴＮＦ显著高于切痂组。ＭＬＣ１与ＴＮＦ存在显著正相关。结论：伤后即行一次性切痂可以降低血浆ＭＬＣ１和ＴＮＦ水平，提示其对烧伤后心肌损伤具有一定防治作用     

EGB对缺血心肌线粒体膜脂质过氧化与ATP酶活性的影响

目的　探讨银杏叶提取物 (EGB)对缺血心肌的细胞保护机制。方法　用垂体后叶素 (2 0U/kg,腹腔内注射 )复制小鼠急性心肌缺血模型 ,观察不同剂量 (10 0mg/kg ,2 0 0mg/kg)EGB对心肌缺血 6 0min线粒体获得率 ,膜磷脂含量 ,Ca2 + ATP酶 ,Mg2 + ATP酶活性 ,MDA及胞浆SOD活性变化的影响。结果　预先给予EGB可有效抑制缺血所致线粒体膜磷脂含量减少 ,MDA水平增高 ,提高线粒体Ca2 + ATP酶及胞浆SOD酶活性 ,其部分作用表现为剂量依赖性。结论　EGB对缺血心肌的保护作用可能与其增加胞液SOD活性 ,防止线粒体膜脂质过氧化 ,维持线粒体膜Ca2 + ATP酶活性 ,改善缺血心肌细胞Ca2 + 转运有关。     

大鼠严重烧伤后甲状腺的病理变化及其发生机制的实验研究

本研究采用光镜、电镜、过氧化物酶组织化学,观察了大鼠凝固汽油体表烧伤(30％Ⅲ°)后15d内甲状腺的病理变化。并对T_3、T_4水平作了相应的动态观察,发现主要病理变化可分为3期:①损伤抑制期(伤后2h～24h),以滤泡上皮明显损伤为特征;②结构与功能恢复期(伤后3d～6d),表现为损伤减轻、结构趋向恢复;③功能活跃期(伤后10d～15d),反映激素合成与释放反应的细胞器发达。各期均有相平行的T_4变化,而T_3的持续抑制在早期与T_4水平低、脱碘代谢障碍及甲状腺分泌抑制有关,中后期则主要是T_4脱碘代谢障碍所致;早期过氧化物酶抑制是甲状腺功能抑制的一个重要原因。     

A study of pathological changes and their mechanisms of the thyroid after severe burns in rats

Full thickness burns of 30% TBSA by napalm was inflicted to rats and the pathologi-cal changes of the thyroid were observed with optical and electron microscopy and with peroxi-dase histoehemistry for 15 days postburn.Dynamic changes of the serum level of T_3 and T_4 wereobserved concomitantly.It was found that the postburn pathological changes of the thyroid couldbe distinguished into 3 phases as follows:The phase of injury inhibition.This lasted from the 2nd to the 24th hour postburn and wascharacterized by marked damage of the follicular epithelium.The phase of structural and functional recovery.This lasted from the 3rd to 6th day post-burn and was characterized by abated damage of the thyroid and a tendency to recover.The phase of active function.This lasted from the 10th to the 15th day postburn.The syn-thesizing and releasing organellae of the thyroid were well-restored.The changes of T_4 were parallel to the pathological changes of the thyroid in all the stages,while T_3 level was continously inhibited because of the low serum level of T_4,the metabolic dis-turbance of T_4 deiodination,and the inhibition of thyroid secretion in the early postburn stage andthe metabolic disturbance of T_4 deiodination in the middle and late postburn stages.In the earlypostburn stage,the inhibition on thyroid peroxidase was an important factor to inhibit the func-tion of the thyroid.     

严重烧伤早期大鼠肾脏内皮素受体mRNA变化的研究

动态观察大鼠烧伤早期肾脏各时相点内皮素受体Ａ（ＥＴＡ），内皮素受体Ｂ（ＥＴＢ）ｍＲＮＡ定量和分布的变化规律，发现肾脏ＥＴＡ，ＥＴＢｍＲＮＡ百分占有率在烧伤后１ｈ已明显升高，前者３ｈ达高峰，后者６ｈ达高峰，皮质以ＥＴＡ为主，髓质以ＥＴＢ为主，提示烧伤后内皮素受体改变参与了肾功能损害。     

钙稳态失衡在1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡中的作用

目的研究钙稳态失衡在1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP+）诱导SH-SY5Y细胞凋亡中的作用。方法MTT法检测细胞存活
率;Hoechst 33342 和Annexin V+PI 染色检测MPP+诱导人神经神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的凋亡作用;Western blot 检测
PARP蛋白表达的变化;罗丹明123 染色检测MPP+对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响;激光共聚焦显微镜检测MPP+对
SH-SY5Y细胞胞质钙、线粒体钙和内质网钙浓度的影响以及线粒体钙通道抑制剂钌红与MPP+联合应用对线粒体游离钙浓度、
胞质游离钙浓度的影响。结果MPP+导致SH-SY5Y细胞存活率下降且具有剂量-反应关系、MPP+能导致SH-SY5Y细胞凋亡、
MPP+导致SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降、MPP+使SH-SY5Y细胞胞质和内质网游离钙离子浓度下降而使线粒体游离钙离子
浓度上升。钌红可对抗MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡、阻止线粒体膜电位下降,减少PARP的切割片段以及阻断线粒体游离
钙浓度的上升。结论线粒体钙超载在MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡中起重要作用。MPP+诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细
胞的凋亡可能与细胞质、线粒体及内质网的钙稳态失衡有关。
     

烧伤大鼠脂质过氧化物含量的研究——Ⅰ.血浆、焦痂、肝组织脂质过氧化物及维生素E含量的动态变化

以5KW溴钨灯照射大鼠背部造成20％TBSAⅢ度烧伤。伤后1、2、3、5、7、9天活杀取血、焦痂及肝组织,以荧光分光光度计测定血浆、焦痂、肝匀浆、线粒体、微粒体、可溶部分中脂质过氧化物(MDA)以及维生素E。伤后血浆、焦痂、脂质过氧化物(LPO)含量升高。焦痂LPO含量有两个高峰:第一峰在伤后第二天(血浆LPO滞后一天),第二峰在伤后7～9天,与创面感染出现同时,在相当时相点可见肝匀浆、线粒体与微粒体亦出现类似的两个高峰,可溶部分LPO含量无明显改变。伤者见上述结构维生素E含量迅即下降,伤后3～5天达最低点,此后多维持在低水平。对烧伤后脂质过氧化的原因、对亚细胞结构的破坏作用作了简要讨论。     

Mechanism of changes in gap junctional intercellular communication in myocardial cells after burns

Ourpreviousstudieshaveshownthatunevenlesionsoccurredinthemyocardiumafterburnsll].Thisisanimportantcontributortoincoordinatecontractionandrelaxationofthemyocardium,contradictionofventricularwallmotionandinternaldisturbanceofthemyocardialmechanics.Thegapjunctionalintercellularcommunication(GJIC)isaformofintercellularadjacentcommunicationthatmainlytransmitsgeneticmessagesintissuesandcells.Itplaysavitalroleinmodulationofnormalproliferation,differentiationandmetabolicfunctionofthecellsandhomeosta…     

烧伤后心肌细胞间隙连接通讯变化的机制研究

目的：探讨烧伤后心肌细胞间隙连接通讯功能变化的病理生理机制。方法：采用缺氧,烧伤血清损伤培养心肌细胞模型,用划痕标记染料示踪技术检测ＣＪＩＣ功能,同时测定心肌细胞活力、胞浆游离钙及跨膜钙内流的变化。结果：缺氧及烧伤血清损伤后,心肌细胞活力明显降低,跨膜钙内流明显增加,同时伴胞浆游离钙浓度明显增加,正常心肌细胞培养后具有ＣＪＩＣ功能,ＬＹ荧光传递达划痕标记附近４例细胞,缺氧,缺氧加烧伤血清损伤后１ｈ