青藤碱对类风湿关节炎患者滑膜细胞与炎性细胞黏附作用的研究

类风湿关节炎（RA）是一种以关节慢性滑膜炎症为特征的全身性自身免疫疾病。缓解疼痛,减轻关节病理损害,延缓关节畸形变是治疗的主要目标。青藤碱（sinomenine）是从中药青风藤中提取的生物碱单体,具有显著的镇痛和消炎作用,其盐酸盐制剂临床上用来治疗类风湿关节炎,并取得较好疗效。     

白藜芦醇体外诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的实验研究

目的探讨白藜芦醇(Res)体外对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测Res对RA滑膜细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞光度分析术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期时相分布,同时进行细胞的形态学观察。结果MTT的检测结果显示药物浓度和细胞增殖抑制率间具有正相直线相关关系(P<0.01),Res体外作用类风湿关节炎滑膜细胞24 h对滑膜细胞的IC50为365μmol.L-1。FCM检测和细胞形态学观察结果显示Res可阻滞滑膜细胞于S期并诱导细胞凋亡,但细胞凋亡率并不完全与药物浓度成正相关。作用24 h时Res诱导类风湿关节炎滑膜细胞发生凋亡的最佳浓度是在200~400μmol.L-1。结论Res对类风湿关节炎滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用,在一定药物浓度范围内,随药物浓度的增加Res可使细胞凋亡率升高,但超过一定作用浓度,药物的细胞毒作用增强,细胞凋亡率则成下降趋势。     

黄连小檗碱对人肠癌Caco-2细胞凋亡和细胞周期的影响

目的探讨黄连小檗碱对人肠癌细胞株Caco-2细胞周期和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT法,检测不同时间点不同浓度黄连小檗碱对Caco-2细胞的增殖抑制作用;应用流式细胞术(Annexin V-FITC/PI双染法),检测不同浓度黄连小檗碱对Caco-2细胞周期和凋亡的影响。结果不同浓度的黄连小檗碱干预肠癌细胞Caco-2不同时间后,均具有一定的增殖抑制作用,在一定浓度范围内,可以剂量和时间依赖性的抑制Caco-2细胞增殖。黄连小檗碱干预细胞24 h后,可使Caco-2细胞停滞在G2/M期,诱导细胞凋亡(P<0.05)。结论黄连小檗碱可以显著抑制Caco-2细胞增殖,其作用机制可能与阻滞细胞周期从而诱导细胞凋亡有关。     

植物药对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的研究

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种常见的致残性风湿性疾病，目前尚无根治的方法。植物药在RA的治疗中发挥了一定作用，多年来许多学者在植物药治疗RA机制方面进行了研究，为临床应用提供了理论依据。     

类风湿关节炎细胞凋亡的研究现状

类风湿关节炎是一种自身免疫病，有关类风湿关节炎细胞凋亡的研究成为近年来的研究热点，本探讨了类风湿关节炎滑膜细胞的凋亡异常和影响其凋亡的因素如凋亡基因和细胞因子等，并简要阐述了与类风湿关节炎滑膜细胞凋亡有关的信号转导途径，了解此方面内容的研究进展必将有助于类风湿关节炎的治疗和新药开发。     

类风湿关节炎滑膜液对体外诱导树突细胞的影响

目的了解树突细胞(DCs)在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用,对RA滑膜液是否能影响DCs的活化状态进行了研究。方法体外诱导外周血单个核细胞转化成为非活化的DCs,用此诱导的DCs再经RA滑膜液培养48h,然后用流式细胞仪对细胞表面表达的人类白细胞抗原(HLA)-DR和共刺激分子CD80进行分析。结果经滑膜液培养的DCs表达CD80为(45±13)%高于对照组的(26±6)%,差异有统计学意义;经滑膜液培养的DCs表达HLA-DR为(67±16)%高于对照组的(60±4)%,差异无统计学意义。结论 RA滑膜液在体外能诱导DCs活化。     

青藤碱对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞因子表达的影响

目的:观察青藤碱对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞核因子 κB(NF κB)活性及TNF α mRNA、IL 1β mRNA、IL 10 mRNA的影响,阐明该药治疗类风湿关节炎的可能机制.方法:以佐剂性关节炎大鼠为模型,收集滑膜细胞,采用电泳迁移率改变分析法检测NF κB的活性,反转录 PCR检测TNF α mRNA、IL 1β mRNA、IL 10 mRNA的表达.结果:佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞内NF κB活性与TNF α mRNA、IL 1β mRNA、IL 10 mRNA的表达均显著升高,青藤碱在一定的浓度范围内呈浓度依赖性抑制NF κB活性与TNF α mRNA 、IL 1β mRNA的表达,而对IL 10 mRNA的抑制效应与浓度无关.结论:青藤碱可能通过抑制NF κB活性而降低滑膜细胞内TNF α mRNA及IL 1β mRNA的表达.     

青藤碱在类风湿关节炎中的作用

<正>传统中药青风藤又名清风藤,为防己科植物青藤和毛青藤的干燥藤茎,味苦,性平,归肝、脾经,具有祛风湿、通经络、镇痛之功效,用于治疗风湿痹痛、关节肿痛等。早在明代,李时珍的《本草纲目》中就有"青风藤治风湿流注,历节鹤膝,麻痹瘙痒,损伤疮肿"的记载。盐酸青藤碱是从中药青风藤中提取的生物碱单体,先前实验证明青藤碱具有肯定的镇痛镇静、抗炎、免疫抑制、抑制软骨破坏等作用,为植     

三氧化二砷诱导人类风湿性关节炎滑膜细胞凋亡研究

目的：研究三氧化二砷（arsenic trioxide，As2O3）对体外培养的人类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）滑膜细胞凋亡诱导作用。方法：酶消化法进行人关节滑膜细胞原代培养，MTT法研究As2O3对RA滑膜细胞活力影响；用光镜、电镜、DNA凝胶电泳等方法检测As2O3诱导RA滑膜细胞凋亡。结果：成功体外培养人关节滑膜细胞。MTF法显示As2O3可抑制RA滑膜细胞活力；光镜、电镜下发现As2O3作用于RA滑膜细胞可出现凋亡表现；DNA凝胶电泳显示有凋亡梯带出现。结论：As2O3可以诱导RA滑膜细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导人宫颈癌细胞凋亡及bcl-2高表达对其影响

采用脂染素（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）介导的ＤＮＡ 转染,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹, ＭＴＴ和克隆形成实验,流式细胞术和细胞凋亡原位检测法探讨Ａｓ２Ｏ３ 对人宫颈癌ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞的生物学效应和ｂｃｌ－２ 高表达对这一效应的影响． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 处理的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞,存活率和克隆形成能力明显降低,细胞周期的Ｇ１ 期前有低于２ 倍体的凋亡峰,细胞被阻滞在Ｇ２／Ｍ 期,有细胞凋亡时出现的ＤＮＡ 断裂． 而Ａｓ２Ｏ３ 处理的ｂｃｌ－２ 高表达的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞存活率和克隆形成能力增加,凋亡率减少,Ｇ２／Ｍ 期阻滞程度显著降低． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 可诱导ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞凋亡,Ｇ２／Ｍ 期阻滞可能是其诱导凋亡的原因之一;ｂｃｌ－２ 高表达可能通过减轻Ｇ２／Ｍ 期阻滞的程度而部分阻止Ａｓ２Ｏ３ 诱导的细胞凋亡．     

大鼠急性肺损伤过程中STAT3的活化对bcl-2 bax表达及细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠急性肺损伤(ALI)过程中,信号转导和转录活化因子-3(STAT3)的活化是否可以起到一定的抗凋亡作用及其可能机制。方法健康雌性大鼠30只分为生理盐水组(NS)组、内毒素(LPS)损伤组、STAT3抑制剂——西罗莫司干预组。采用原位杂交法测定肺组织中STAT3基因的表达,免疫组织化学及细胞凋亡原位末端标记技术(TUNEL)测定肺组织中凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达及肺细胞的凋亡情况。结果以西罗莫司阻断STAT3的基因表达后,肺组织中抗调亡蛋白bcl-2表达下调,凋亡蛋白bax表达则增高,同时肺细胞凋亡数增加。结论急性肺损伤过程中STAT3通路的激活可上调bcl-2且下调bax的表达,从而起到一定的抗凋亡作用。     

甲状腺肿瘤bcl-2和c-myc蛋白表达与细胞凋亡的关系

目的探讨甲状腺肿瘤细胞bcl-2、c-myc蛋白的表达与细胞凋亡的关系以及它们在甲状腺良、恶性肿瘤中的诊断意义。方法应用免疫组化EnVisionMT法检测甲状腺肿瘤细胞bcl-2、c-myc蛋白的表达,用TUNEL法检测甲状腺肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果30例腺瘤中bcl-2、c-myc蛋白阳性表达率分别为90.0%(27例)、50.0%(15例)鸦30例腺癌中分别为63.3%(19例)、93.3%(28例)。二者在腺瘤和腺癌组间比较差异均有显著性(P<0.05)。30例腺瘤中AI为0.12±0.28,30例腺癌中AI为0.39±0.39,组间比较差异有显著性(P<0.05)。在甲状腺癌中,bcl-2阳性组AI低于阴性组(P<0.05),c-myc阳性组AI高于阴性组(P<0.05)。结论bcl-2、c-myc蛋白和AI可作为鉴别甲状腺良恶性肿瘤的参考指标;bcl-2蛋白的丢失可能与甲状腺乳头状癌的形成有关;bcl-2蛋白高表达抑制细胞凋亡,c-myc蛋白高表达促进细胞凋亡。     

肝癌细胞凋亡端粒酶活性和bcl-2基因表达

目的　探讨经肝动脉化疗栓塞 (TACE)后bcl 2蛋白在肝癌细胞凋亡中的作用。方法　应用免疫组织化学法和原位末端标记法 (ISEL)检测 6 5例原发性肝癌患者分组治疗前后bcl 2蛋白表达和肝癌细胞凋亡。结果　肝癌 (HCC)患者不同治疗方法肝细胞凋亡阳性率和bcl 2阳性率均低于对照组 (P <0 0 5～0 0 1) ,端粒酶阳性率高于对照组 (P <0 0 5 ) ;手术 化疗组的有效率和生存率均高于其他两组 ;中晚期肝癌生存率低于早期肝癌 (P <0 0 5～ 0 0 1) ;直径≥ 10cm中晚期肝癌生存率低于直径 <10cm中晚期肝癌 (P <0 0 5～ 0 0 1)。结论　细胞凋亡、端粒酶活性和bcl 2基因表达在肝癌发展过程中有重要作用。     

17β-雌二醇对大鼠局灶性脑缺血bcl-2、bax表达及细胞凋亡的影响

目的 观察雌激素对大鼠局灶性脑缺血皮层bcl—2、bax表达及凋亡的影响。方法 36只SD雌性大鼠分成3组：2h组、24h组、48h组，每组再分成假手术组，卵巢切除组(OVX组)，17β—雌二醇治疗的卵巢切除组(OVX E2组)。利用免疫组化、原位末端标记方法观察三组大鼠永久局灶性脑缺血皮层bcl—2、bax的表达和细胞凋亡情况。结果 缺血2h，很少出现明显的凋亡细胞，但随缺血时间延长逐渐增多，缺血24h、48h，OVX E2组凋亡细胞较OVX组明显减少；bcl—2在各时间点皆有表达，随缺血时间延长表达逐渐降低，OVX E2组bcl—2表达较同时间点OVX组、假手术组高；随缺血时间延长，bax蛋白表达逐渐增多，OVX E2组bax表达较同时间点OVX组、假手术组降低。结论 脑缺血后雌激素促进bcl—2表达，抑制bax表达，减少细胞凋亡。可能是其脑保护作用的机制之一。     

青蒿琥酯对人肝癌HEPG-2细胞株凋亡、周期的体外作用

目的研究青蒿琥酯(Art)对肿瘤细胞凋亡、周期的影响。方法采用MTT法测定Art与5-FU联用对人肝癌细胞系HEPG-2的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布。结果Art能明显抑制HEPG-2细胞的生长,并呈明显的时间-剂量效应。24、48、72 h的IC50分别为103.1±8.6、75.3±4.1、65.7±6.0μg.ml-1。当10、20μg.ml-1Art与2.5、5.0μg.ml-15-Fu联合使用时,表现出明显的协同作用,并可诱导细胞凋亡,影响细胞周期的分布。结论Art对人肝癌细胞系HEPG-2的增殖有显著抑制作用。与5-FU联合使用有协同作用,其机制可能是诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期。     

周期联合甲氨蝶呤 环磷酰胺对类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞周期及凋亡的影响

目的探讨甲氨蝶呤(MTX)和环磷酰胺(CTX)及两者联合治疗对类风湿关节炎(RA)患者外周血淋巴细胞(PBL)周期及凋亡的影响。方法入选活动期RA患者30例,随机分为3组(MTX组、CTX组及MTX+CTX联合组),应用流式细胞术检测MTX、CTX及联合治疗前后PBL周期及凋亡的变化,同时对10名健康志愿者PBL的周期及凋亡情况进行检测。结果活动期RA患者基线PBL各期细胞比例与正常人相比,G0/G1期细胞比例低于正常对照组,S期细胞比例高于正常对照组,差异均有统计学意义;基线早期凋亡率与正常人相比差异无统计学意义。MTX组患者用药后较用药前G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,PBL早期凋亡率明显增加,差异均有统计学意义。CTX组患者用药前后PBL各期细胞比例差异无统计学意义;用药后较用药前PBL早期凋亡率明显增加,差异有统计学意义。MTX+CTX联合组用药后较用药前PBLG0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,早期凋亡率较MTX组、CTX组明显增加,差异均有统计学意义。MTX组及MTX+CTX联合组用药前后外周血淋巴细胞G0/G1期细胞比例变化与早期凋亡率变化之间呈显著正相关。结论MTX+CTX联合治疗能更加有效地诱导阻滞于G0/G1期的PBL发生凋亡。     

DOC-2基因对卵巢癌细胞周期的影响

目的 :探讨DOC 2基因对卵巢癌细胞周期的影响。方法 :将卵巢癌细胞 (TC 1)和转染空载体的卵巢癌细胞 (TC pcDNA3 1)作为对照组 ,与转染DOC 2的卵巢癌细胞 (TC p93 )同时进行消化收集后 ,经流式细胞仪检测 ,对比各组间细胞周期的改变。结果 :TC 1细胞经DOC 2转染后 ,其受阻于G1期的细胞增多 ,同时S期细胞相应减少 ,而单纯转染空载体对细胞周期并不产生明显影响。结论 :DOC 2基因可改变卵巢癌细胞TC 1的细胞周期 ,它可能会成治疗卵巢癌的目的基因之一     

宫颈癌中端粒酶与bcl-2表达的相关性研究

目的探讨端粒酶与bcl-2在宫颈癌中的表达及其相关性,为宫颈癌的早期诊断、治疗和预后判断提供一定的理论基础。方法采用免疫组织化学染色和原位杂交法检测51例宫颈标本端粒酶和bcl-2活性的表达。结果bcl-2在正常宫颈组织中没有表达,在不典型增生、原位癌及三级鳞癌中的表达阳性率分别为50％、80％、100％、55％、33％;宫颈上皮内瘤样病变中端粒酶的阳性表达率37％,原位癌为90％,宫颈癌为100％。结论bcl-2蛋白与端粒酶在宫颈癌中的表达没有显著相关性,端粒酶与bcl-2在子宫颈癌的发生中不仅表现出各自的作用,而且是肿瘤发生的同一途径中的不同环节。     

BAG-1 Bcl-2 在子宫内膜癌发生 发展中的作用研究

目的探讨BAG-1、Bcl-2在子宫内膜癌中的表达情况。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶连接法检测正常子宫内膜组、子宫内膜增生过长组、子宫内膜不典型增生组和子宫内膜癌组组织中BAG．1和Bcl．2蛋白的表达情况。结果BAG-1在子宫内膜癌中呈高表达,其阳性率为64．0％,明显高于正常子宫内膜组、子宫内膜增生过长组和子宫内膜不典型增生组（9．5％、26．7％和30．8％）,差异均有统计学意义（P〈0．05）。Bcl-2在子宫内膜癌中表达阳性率（46．0％）明显低于子宫内膜增生过长组（73．3％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论BAG-1在子宫内膜癌的发生、发展及转移中起重要作用。BAG-1表达越高,子宫内膜癌的组织学分化程度越低,临床分期越晚,癌组织越容易浸润,提示其恶性程度越高．患者预后不良。Bcl-2的表达参与子宫内膜癌的发生、发展过程并且与肌层浸润相关,但是与组织学分化无相关性。因此缺乏预测预后的证据。     

胎盘bcl-2、Fasl的表达与母血、羊水中EGFET关系的探讨

目的 探讨分娩状态下胎盘滋养层细胞bcl-2、Fasl的蛋白表达变化及其与母血、羊水中表皮生长因子(EGF)、内皮素(ET)的变化之间的关系。方法 应用免疫组化法测定53例足月妊娠产妇胎盘滋养层细胞bcl-2、Fasl的蛋白表达,用放射免疫法测定产妇母血、羊水中EGF、ET的含量。其中临产组28例;未临产组25例。结果 (1)临产组胎盘滋养层细胞bcl-2、Fasl的蛋白表达明显低于未临产组,两组平均灰度及阳性细胞率比较,差异有显著意义(P<0.05)。(2)两组母血、羊水中EGF、ET水平均高于正常值,且临产组高于未临产组,差异有显著意义(P<0.05)。(3)母血、羊水中EGF、ET的变化与bcl-2的蛋白表达呈负相关,而与Fasl的表达不相关。EGF、ET浓度与bcl-2的平均灰度及阳性细胞率均呈负相关,相关系数r检验差异有显著意义(P<0.05)。结论 胎盘凋亡基因bel-2、Fasl介导的滋养层细胞凋亡在启动分娩发动过程中具有重要作用;bcl-2的作用可能受EGF、ET等细胞因子的调控。