万古霉素耐药基因产物抑制剂的研究开发

耐药基因产物抑制剂是开发抗万古霉素耐药菌感染药物的一个新方向，目前对它的研究也在渐渐深入，并取得了一定的成果。现对产生耐药性的作用机制以及几种耐药基因抑制剂进行简要综述。     

念珠菌对唑类药物耐药机制研究进展

深部念珠菌感染发病率逐年上升及念珠菌耐药现象日益增多引起人们对念珠菌耐药机制的关注。在基因分子水平上，至今已发现念珠菌对唑类药物耐药存在二种机制：药物外排泵基因的过度表达、药物靶酶基因的突变或过度表达。念珠菌对唑类药物高度耐药通常是多种耐药机制共同作用的结果。     

肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药机制研究

目的观察耐大环内酯类肺炎链球菌的耐药表型和基因型。方法用琼脂二倍稀释法测定耐大环内酯类肺炎链球菌对11种抗生素的最低抑菌浓度,耐药表型由红霉素和克林霉素双纸片法初步分型,通过PCR扩增耐药基因ermB和mefA进行基因分型,并测定ermB和mefA基因序列。结果　所有23株肺炎链球菌对大环内酯和克林霉素高度耐药,均表现为内在型耐药,没有发现诱导型耐药和M型耐药。ermB基因在23株肺炎链球菌中均检测到,其中5株同时检测到mefA基因,没有发现仅单一mefA基因阳性的菌株,基因型与耐药表型完全一致。所测ermB和mefA基因序列与基因库收录序列高度一致。 结论ermB基因介导的靶位改变可能是重庆地区肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的主要耐药机制。     

质粒介导的细菌对喹诺酮耐药机制的研究

细菌对喹诺酮类的耐药主要由染色体突变所致,但1998年Martinez-Martinez等发现质粒也可以介导喹诺酮耐药.这一耐药首先是在一株分离自美国阿拉巴马州的肺炎克雷伯菌中发现的,耐药基因命名为qnr.qnr编码的蛋白Qnr属于五肽重复家族,能够保护DNA促旋酶及拓扑异构酶Ⅳ而导致细菌对喹诺酮耐药.     

人体肠道菌群中抗生素耐药基因的水平转移研究

抗生素的广泛使用导致环境中出现了大量耐药菌，其携带的耐药基因会通过水平转移在微生物间传播，加重了耐药基因及耐药菌对环境的污染。由于肠道菌群多样性较高且包含多种抗生素耐药基因，人体肠道逐渐成为抗生素耐药基因发生水平转移的适宜场所。抗生素的过度使用容易改变肠道微生物的组成，影响宿主免疫功能，导致定植抗性的丧失，促使外源耐药菌在肠道定植，对人体健康造成潜在风险。影响人体肠道中耐药基因组成的因素多种多样，包括抗生素的使用，食物，饮水等。本文介绍了肠道菌群耐药基因的组成和传播，总结了肠道菌群中抗生素耐药基因的研究方法，并对未来研究重点进行了展望，以增强对人体肠道抗生素耐药基因的认识，并为减少或控制肠道中抗生素耐药性方法的开发提供新思路。     

甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药基因与耐药性关系

金黄色葡萄球菌对甲氧西林耐药的主要机制之一，是细菌染色体上的一段外源DNA（mecA基因）编码产生对青霉素亲和力极低的青霉素结合蛋白2（PBP2a），mecA基因在葡萄球菌属中分布广泛，它和细菌染色体上的一些辅助基因和调控基因的共同作用下影响细菌胞壁合成，使细胞表现出异质性耐药。而且MRSA是医院内和社区感染的重要致病菌，由于感染后治疗困难，因此成为国内外学者关注与研究的热点。本文主要从mecA基因的来源、传播、结构功能、调控基因和辅助基因（fem或aux基因）等方面进行综述。     

各种抗生素对酿脓链球菌的抗菌活性

世界范围内耐大环内酯的酿脓链球菌的数量不断增加，酿脓链球菌对大环内酯类药物耐药是由各种不同的基因介导，这些基因决定对大环内酯、林克酰胺和链阳菌素的耐药程度。     

万古霉素敏感性减低葡萄球菌筛选及抗生素耐药相关基因检测

目的 了解万古霉素敏感性减低葡萄球菌临床分离株对-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素以及万古霉素耐药相关基因存在状况.方法 采用含61tg/mL万古霉素脑心浸液琼脂从临床分离的葡萄球菌中筛选万古霉素中介葡萄球菌和万古霉素耐药葡萄球菌;采用菌谱分析法筛选异质性万古霉素耐药葡萄球菌:E-test法和琼脂稀释法检测其MIC值;PCR技术扩增mecA,aac(6')/aph(2'),aph(3)-Ⅲ,tetM,vanA.vanB和vanC基因,并对阳性扩增产物进行测序.结果 从100株临床分离葡萄球菌中检出7株异质性万古霉素耐药葡萄球菌,并从部分菌株中检出耐药基因,mecA,aac(6')/aph(2'),aph(3')-川基因检出率分别为85.7%,57.1%和85.7%,没有检出tetM,vanA,vanB和vanC.对PCR阳性扩增产物进行测序,BLASTn比对分析,与已登录基因库的相同基因序列具有高度同源性.结论 同甲氧西林耐药葡萄球菌相似,万古霉素敏感性减低葡萄球菌携带多种耐药基因,耐药表型与基因分析支持该菌株多药耐药,该类菌株的检测对于指导临床合理用药具有积极意义.     

甲型副伤寒沙门氏菌主动外排多重耐药基因与表达研究

目的 调查临床分离甲型副伤寒沙门氏菌对常用抗生素的耐药情况与多重耐药主动外排基因acrB的检测、序列分析及其表达水平。方法 用琼脂二倍稀释法测定7种抗生素对甲型副伤寒沙门氏菌的抗菌活性。以基因库序列为参考设计引物PCR扩增acrB、测序并用RT-PCR方法检测其表达。结果 12株甲型副伤寒沙门氏菌对氧氟沙星、环丙沙星、头孢噻肟、哌拉西林、氯霉素、四环素、庆大霉素的耐药率除氯霉素为0外。其余均为8．33％。对三类不同种类抗菌药物多种耐药者l株。所有细菌均检测到多重耐药外排基因acrB．测序结果与参考沙门氏菌序列(No．AL627267)比较，有l处碱基差异。与大肠埃希氏菌(No．ECU00734)比较，碱基同源性为84．4l％(70／449)，提示其碱基序列同源性均极高。分别选取对两类抗菌药物耐药及敏感甲型副伤寒沙门氏菌各一株进行RT-PCR检测，结果 两株细菌均检测到多重耐药外排基因acrB的表达。结论甲型副伤寒沙门氏菌对喹诺酮类、第三代头孢菌素类等药物耐药率低，但有多重耐药。甲型副伤寒沙门氏菌中均存在acrAB主动外排系统。与大肠埃希氏菌同源性高，可检测到其表达。主动外排机制可能是甲型副伤寒沙门氏菌形成多重耐药的主要原因之一。     

链霉菌的抗生素耐药基因

链霉菌的抗生素耐药基因在抗生素生物合成调控过程中起着重要的作用。同时又是细菌产生耐药性的最根本原因之一，在抗生素的链霉菌中，耐药基因一般与抗生素合成基因紧密连锁，可能是合成基因簇的一部分，在抗生素合成过程中起调节作用。耐药基因可以通过垂直进化（自身突变和选择）和水平进化（基因交换：转化，转导，接合转移）而获得，通过与染色体DNA重组而整合入受体染色体DNA中，或定殖于质粒中，耐药基因一般早于抗生素合成基因表达，诱导耐药性的表达受相应抗生素的诱导，对耐药基因的研究有助于阐明抗生素合成调控途径，筛选抗生素高产菌株，设计更有效的药物。     

基因盒-整合子系统介导细菌多重耐药的研究进展

基因盒-整合子系统是一种可移动基因元件，可捕获表达耐药基因，并通过质粒或转座子在细菌中水平传播。现就整合子的发现、结构、分类；整合子对基因盒的捕获、表达；整合子与细菌耐药性的关系以及整合子的检测等方面进行综述。     

细菌整合子研究进展

整合子是近年来在细菌中发现的一种可移动性基因元件，通过位点特异性重组捕获并表达外源性基因盒，是导致耐药基因在细菌间水平播散的重要原因。本文就整合子的发现、结构、分类；基因盒的结构、来源；整合子对基因盒的捕获、剪切与表达；整合子与细菌耐药性的关系以及整合子的检测等方面进行综述。     

大环内酯类外排基因的研究进展

大环内酯外排基因(mef)是目前大环内酯类抗生素耐药机制的研究热点之一。目前检测到的mef基因出现在M型耐药球菌,包括mefA,mefE和mefI这3个亚型。mefA定位于转座子Tn1207.1或Tn1207.3,可以在不同球菌属间水平传递;mefE基因定位于大环内酯外排基因集合体(macrolide efflux genetic assembly,mega),亦可在球菌属间水平传递,并可整合到细菌Tn2009中;携带mefI的遗传成分长30505 bp,左端是Tn5252和Tn916,右端为15115 bp未命名的新基因,目前还未发现mefI基因具有传递性。这3个基因亚型介导的耐药具有不同特点,目前已经研发出多种mef基因的检测方法。     

肠球菌对大环内酯类抗生素的耐药机制

肠球菌是重要的条件致病菌。常对多种抗生素耐药，在院内感染的病原菌中居重要地位。大环内酯类，林可酰胺类和链阳菌素B是结构无关但功能相近的三类抗生素（MLSB），可以作为治疗肠球菌感染的替代药物，近年来新的大环内酯类抗生素大量用于临床，在药物选择压力下，肠球菌对大环内酯类抗生素耐药较为严重。耐药机制包括erm基因介导的药物靶位的改变和mef基因及msrC基因介导的抗生素的主动外排等。     

新型细菌耐药元件——整合子系统

已有证据表明整合子系统是微生物中主要的耐药机制,由其介导的细菌耐药是细菌发生水平基因转移和产生耐药机制的主要的途径。目前知道的整合子可分为两类:传统的整合子和超级整合子;前者的基因盒可编码一种或多种耐抗生素和消毒剂,存在于转座子、质粒和细菌染色体;而后者的基因盒编码了很多不同的功能,它们只在细菌的染色体上存在,有的可以同时携带一百多个基因盒;目前只在特定菌株中发现超级整合子。研究表明,整合子上的基因盒可能最初都来之于超级整合子。本文就整合子的结构、分布、起源及它对基因进化产生的影响等几个方面的研究进展进行讨论。     

MDR1基因与脑胶质瘤

多药耐药 (ＭＤＲ)是脑胶质瘤化疗失败的主要原因[1] ,而ＭＤＲ1基因是介导多药耐药的重要内在原因之一。它包括原发性和获得性多药耐药。前者指肿瘤细胞固有对化疗药物不敏感 ;后者是指接触抗癌药物后所产生的对该药物和该类药物结构和机理完全不同的另些药物的耐药。本文就近年来ＭＤＲ1基因在脑胶质瘤方面的研究作一综述。1　ＭＤＲ1基因及其表达产物1.1　ＭＤＲ1基因　人类基因中ＭＤＲ含有两个基因ＭＤＲ1和ＭＤＲ2 ,后者也被称为ＭＤＲ3,其中ＭＤＲ1基因被认为与一些肿瘤耐药有关。ＭＤＲ1基因位于 7号染色体上 (7ｑ2 1.1) ,已克隆出…     

肠球菌中糖肽类耐药基因及其调控

肠球菌对糖肽类的耐药表型分ＶａｎＡ，ＶａｎＢ和ＶａｎＣ为三种。ＶａｎＡ型最常见，耐药质粒携带转座子Ｔｎ１５４６。Ｔｎ１５４６带有一系列耐药基因，它们的基因产物共同作用，导致菌株对糖肽类药物耐药。     

庆大霉素耐药基因的分子克隆

利用基因工程技术,从一株流行的致病性大肠杆菌的65Md的可传递的多重耐药质粒pEFM2出发,克隆获得一重组质粒pBY101,它仅表达庆大霉素和四环素抗性,其庆大霉素耐药基因在8.9kb的Pst Ⅰ片段上。再由EcoRⅠ酶解pBY101,亚克隆获得一重组质粒pBY 102,其庆大霉素耐药基因在4.9kb的Pst Ⅰ-EcoRⅠ片段上。经氨基糖苷类抗生素底物谱分析和用生物素标记的2″-O-腺苷转移酶[ANT(2″)]基因探针,以Southern印迹杂交法检测,证明庆大霉素耐药基因不是编码ANT(2″)的。     

海洋病原细菌的氯霉素耐药菌株筛选鉴定及质粒消除

目的 从污染海域筛选非临床氯霉素耐药株，研究耐药基因定位及耐药机制多样性。方法 TCBS和EMB选择平板筛选，结合16S rDNA序列分析鉴定耐药株。MIC测定、基因组DNA．RAPD分型和质粒消除评估多样性。结果 评估187株氯霉素耐药株的MIC值分布、属种分布、耐药基因定位及耐药机制。发现80株耐药MIC 25-128μg／ml是CLSI／NCCLS（1995年）定义临床标准（MIC 12．5μg／m1）的2-10倍，分布在弧菌科和肠杆菌科主要属种；58株MIC〉25μg／ml基因组DNA-RAPD分型与菌落表型分组结果吻合，显示多样性丰富。采用多轮高温（-43℃）和高浓度（-1％）SDS双重处理和交替培养，77株MIC〉25μg／m1分离株的质粒消除效率为28．6％；55株不能消除耐药表型，暗示染色体编码耐药基因；22株可消除氯霉素耐药表型，其中16株完全消除，暗示质粒独立编码耐药基因，6株部分消除，暗示质粒和染色体分别编码耐药基因。结论 来自污染海域环境的非临床氯霉素耐药株可作为新模型，提供耐药基因定位及耐药机制多样性的新视野。     

femABX家族一抗生素开发的新靶位

femABX家族是一大类结构和功能相似的基因的统称，主要见于葡萄球菌和链球菌。迄今已发现20种，主要与细菌细胞壁肽聚糖合成有关。转座子插入失活该类基因的葡萄球菌(敏感菌株和耐药株)表现出对甲氧西林及其他非β-内酰胺类抗生素敏感性的上升。该类基因可作为新的作用靶位，开发既可克服葡萄球菌属现有耐药又具特异杀菌作用的抗菌药物。MRSA对β-内酰胺类抗生素耐药是因为后者能诱导产生一种新的PBP2a所致。万古霉素则作用于肽聚糖D-Ala-D-Ala从而阻遏细胞壁形成，可用于治疗MRSA感染。但自报道万古霉素中介的金黄色葡萄球菌后，治疗形势日渐严峻，寻找新的作用靶位开发全新的抗菌药就显得尤为重要。就近年来发现的一些可能的新靶位基因的结构、功能、应用等方面做一综述。