胃癌组织TGF-β1、TGF-βRⅡ、p27^kipl的表达水平及临床意义

目的探讨胃癌组织TGF-βRⅡ及p27kipl表达水平与临床病理因素间的关系。方法采用免疫组化EnVision二步法对胃癌组织、切端胃粘膜组织进行GF-βRⅡ及p27kipl染色,图像分析系统测定癌组织、邻癌粘膜组织及切端粘膜组织的实质细胞数和阳性细胞数,计算阳性细胞比率。结果癌组织TGF-β1表达水平高于切端粘膜组织,p27kipl及GF-βRⅡ的表达水平低于切端粘膜组织。p27kipl与GF-βRⅡ两者间表达水平呈正相关。p27kipl表达水平与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移相关GF-βRⅡ表达水平与肿瘤的浸润深度相关。结论胃癌组织TGF-βRⅡ、p27kipl表达显著降低,并与胃癌的一些临床病理因素相关;TGF-β1表达增高并可能通过GF-βRⅡ、p27kipl等对肿瘤的生物学行为产生影响,对相邻上皮细胞的恶性转化可能也有促进作用。     

直肠癌中Cyclin E、p27kipl和Ki67的表达及病理意义

目的研究细胞周期素E（Cyclin E）、p27kip1和Ki67在大肠癌的表达及临床病理意义。方法应用免疫组化PowerVision两步法检测137例大肠癌及其邻近正常黏膜组织中Cyclin E、p27kip1和Ki67的表达,并分析它们与大肠癌临床病理特征的关系。结果大肠癌组织中Cyclin E及Ki67表达水平显著高于邻近正常黏膜组织,并与原发肿瘤浸润深度、区域淋巴结转移及TNM分期显著正相关。大肠癌组织中p27kip1表达水平显著低于邻近正常黏膜组织,并与原发肿瘤浸润深度、区域淋巴结转移及TNM分期显著负相关。大肠癌组织中Cyclin E与p27kip1表达水平显著负相关;Cyclin E和Ki67表达水平显著正相关;大肠癌组织中p27kip1与Ki67表达水平呈显著负相关。结论Cyclin E和p27kip1是大肠癌的发生及侵袭转移的正性因子和负性因子,联合检测Cyclin E、p27kip1和Ki67有助于判断大肠癌的恶性程度及生物学行为,并判断预后,为大肠癌的个体化治疗提供依据。     

Skp2和p27^kip1在胃癌组织中的表达与临床病理特征的相关性研究

目的探讨Skp2和p27^kip1在胃癌不同发展阶段表达,胃癌中Skp2和p27kip1的表达与患者临床病理特征和预后的关系,以及Skp2和p27蛋白之间表达的相关性。方法用免疫组织化学法检测Skp2和p27^kip1在20例正常胃黏膜、20例慢性萎缩性胃炎伴肠化、20例胃不典型增生、15例早期胃癌、45例进展期中胃癌表达情况。结果Skp2蛋白在20例正常胃黏膜、20例慢性萎缩性胃炎伴肠化、20例胃不典型增生、15例早期胃癌、45例进展期胃癌中阳的性表达率分别为10%（2/20）、20%（4/20）、25%（5/20）、33.3%（5/15）和46.7%（21/45）,Skp2在胃癌中阳性表达率与年龄、性别、肿瘤大小、部位无关（P〉0.05）,而与肿瘤分化程度、淋巴结转移、浆膜浸润、TNM分期有关（P〈0.05）,Skp2在胃癌中的阳性表达率随肿瘤分化程度的降低、浸润深度的加深、淋巴结转移、病理期进展而升高（P〈0.05）;p27kip1在20例正常胃黏膜、20例慢性萎缩性胃炎伴肠化、20例胃不典型增生、15例早期胃癌、45例进展期胃癌中阳的性表达率分别为90%（18/20）、65%（13/20）、50%（10/20）、40%（6/15）和37.8%（17/45）。p27kip1在胃癌中阳性表达率与年龄、性别、肿瘤大小、部位无关（P〉0.05）,p27kip1在胃癌中的阳性表达率随肿瘤分化程度的降低、浸润深度的加深、淋巴结转移、病理期进展而降低（P〈0.05）;Skp2和p27kip1在胃癌组织中的表达呈负相关（r=-0.482）。结论Skp2在胃癌发生过程中,即由正常胃黏膜到进展期胃癌演变,其表达呈升高趋势,说明Skp2参与了胃癌的发生,并且促进胃癌的发生。p27kip1在胃癌的发生中与Skp2相反,起着抑制胃癌发生的作用。Skp2和p27kip1在胃癌中阳性表达率均与年龄、性别、肿瘤大小、部位无关,而与肿瘤分化程度、淋巴结转移、浆膜浸润、TNM分期有关。Skp2和p27kip1在胃癌中表达呈负相关。对Skp2和p27kip1蛋白检测可     

The Expression and Correlation of Skp2 and p27kip1 in Breast Cancer

目的:检测乳腺癌组织中Skp2和p27kip1 mRNA的表达,探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用及其相关性.方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应法( RT-PCR)检测40例乳腺癌组织,20例乳腺纤维腺瘤组织和20例正常乳腺组织中Skp2 mRNA和p27kip1 mRNA的表达,并分析其在乳腺癌组织中的表达水平与临床病理因素的关系.结果:乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显增高(P＜0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中差异无统计学意义(P＞0.05);而p27kip1 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显降低(P＜ 0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中表达差异无统计学意义(P＞0.05).乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈正相关;p27kip1 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈负相关.2种基因表达均与患者年龄、绝经状况、肿瘤大小及病理学分期无关(P＞0.05).乳腺癌组织中Skp2 mRNA与p27kip1 mRNA表达呈负相关.结论:乳腺癌组织Skp2和p27kip1参与了乳腺癌的发生、发展过程,两指标的联合检测可能有助于预测乳腺癌预后.     

Skp2和p27kip1在乳腺癌组织中的表达及其相关性的研究

目的:检测乳腺癌组织中Skp2和p27kip1 mRNA的表达,探讨其在乳腺癌发生、发展中的作用及其相关性。方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测40例乳腺癌组织,20例乳腺纤维腺瘤组织和20例正常乳腺组织中Skp2 mRNA和p27kip1 mRNA的表达,并分析其在乳腺癌组织中的表达水平与临床病理因素的关系。结果:乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显增高(P0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中差异无统计学意义(P0.05);而p27kip1 mRNA表达较乳腺纤维腺瘤组织及正常乳腺组织明显降低(P0.05),在正常乳腺组织和乳腺纤维腺瘤组织中表达差异无统计学意义(P0.05)。乳腺癌组织中Skp2 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈正相关;p27kip1 mRNA表达水平与组织学分级、淋巴结转移程度呈负相关。2种基因表达均与患者年龄、绝经状况、肿瘤大小及病理学分期无关(P0.05)。乳腺癌组织中Skp2 mRNA与p27kip1 mRNA表达呈负相关。结论:乳腺癌组织Skp2和p27kip1参与了乳腺癌的发生、发展过程,两指标的联合检测可能有助于预测乳腺癌预后。     

Caveolin-1和Survivin在结直肠腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨Caveolin-1和Survivin在结直肠腺癌组织中的表达及其意义,为结直肠癌判断预后及多途径治疗提供有效的试验依据。方法采用免疫组织化学方法,检测116例结直肠腺癌和正常结肠组织Caveolin-1与Survivin的表达,分析与临床病理参数的关系。结果 Caveolin-1在结直肠腺癌中表达降低,与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期相关。Survivin在结直肠腺癌组织表达增多,其阳性表达与肿瘤的不同的分化程度、浸润深度、Dukes分期及有无淋巴结转移相关。结论 Caveolin-1和Survivin的表达可能与结直肠腺癌的发生、发展密切相关,二者可作为评价结直肠腺癌预后的指标,对结直肠腺癌的治疗有重要意义。     

P27kip1在胆管癌组织中的表达及意义

目的 探讨细胞周期抑制蛋白P27kip1在胆管癌组织中的表达及与胆管癌各项临床病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学链霉素抗生物素-过氧化物酶复合物法(SP法)检测43例胆管癌组织标本及20例伴慢性胆管炎的胆管壁组织中P27kip1的表达,结合临床病理资料进行分析.结果 P27kip1在胆管癌组织中的阳性表达率为30%(13/43),而伴慢性炎性反应的胆管组织中阳性表达率为80%(16/20),差异有统计学意义(P＜0.05);P27kip1蛋白表达与胆管癌的分化程度、有无淋巴结或远处转移以及临床分期显著相关(P＜0.05).结论 胆管癌中P27kip1蛋白低表达可能与胆管癌的发生发展有关.     

非小细胞肺癌中p27kip1、p16蛋白的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中p27kip1、p16基因蛋白的表达及临床意义.方法采用免疫组化Envision法检测57例非小细胞肺癌(NSCLC)标本p27kip1、p16蛋白的表达.结果 (1)p27kip1、P16在非小细胞肺癌中阳性表达率分别为43.86%、49.12%,在癌旁正常支气管上皮阳性率分别为92.0%、96.0%,其在肺癌和正常组织中表达的差异有显著意义(P<0.005);(2)p27kip1、p16阳性表达者生存期分别较p27kip1、p16阴性表达者延长(P<0.05),且与淋巴结转移呈负相关(P<0.025);(3)p27kip1与p16的表达显著正相关(P<0.05).结论 p27kip1、p16低表达与非小细胞肺癌的发生、进展密切相关,与生存期呈负相关,两者可作为综合判断患者预后的指标.     

CDX2与LI-cadherin在人大肠腺癌中的表达及意义

目的通过研究CDX2、LI-cad在人大肠腺癌中的表达及相关性分析,旨在研究二者在大肠癌发生发展中与肿瘤增殖、恶性程度的关系,用以指导临床诊疗。方法利用免疫组化法检测20例正常大肠黏膜、28例腺瘤和50例腺癌组织CDX2、LI-cad的表达。结果①正常肠黏膜、腺瘤和腺癌组织中CDX2与LI-cad的表达均呈逐渐减低趋势,二者分别在正常黏膜与腺癌组、腺瘤与腺癌组组间比较有差异(P<0.05),而正常黏膜与腺瘤组间比较无统计学差异(P>0.05),且二者在大肠腺癌中表达呈正相关(r=0.412,P<0.05);②大肠腺癌中二者的表达与Dukes分期、组织分化、淋巴结转移有关,而与患者性别,年龄、肿瘤的部位无关。结论①CDX2与LI-cad的表达可作为评估大肠肿瘤恶性程度、临床分期及侵袭转移的参考指标。②二者的联合检测有助于判断大肠腺癌预后。     

结直肠癌中Bcl-2、Bag-1蛋白的表达及其意义

目的探讨抗凋亡基因Bcl-2、Bag-1在正常结肠黏膜、结肠腺瘤和结直肠癌中的表达变化及与结直肠癌发生、发展和转移的关系.方法采用免疫组化S-P法,分别检测20例正常结肠黏膜、35例结肠腺瘤和82例结直肠癌组织中Bcl-2、Bag-1 蛋白表达情况.结果 Bcl-2蛋白在正常结肠黏膜、结肠腺瘤和结直肠癌组织中阳性表达率分别为25.0%,80.0%和65.0%.结肠腺瘤和结直肠癌组织中Bcl-2蛋白表达阳性率均显著高于正常结肠黏膜组织（P＜0.05）,而结肠腺瘤与结直肠癌相比,前者高于后者（P＜0.05）.Bcl-2蛋白表达水平与结直肠癌患者的年龄、性别、肿瘤分化程度、Duke＇s分期及淋巴结转移无关（P＞0.05）.Bag-1蛋白在正常结肠黏膜、结肠腺瘤和结直肠癌组织中阳性表达率分别为10.0%,60.0%和81.0%,阳性表达率呈上升趋势,差异有显著性（P＜0.05）,Bag-1蛋白表达水平与结直肠癌患者的年龄、性别无关（P＞0.05）,而与肿瘤分化程度、Duke＇s分期及淋巴结转移有关（P＜0.05）.其中结直肠癌组织中Bcl-2蛋白表达与Bag-1蛋白表达呈正相关（P＜0.05）.结论 Bcl-2、Bag-1蛋白高表达在结直肠癌的发病过程中均发挥十分重要作用,而Bag-1表达水平与结直肠癌的恶性程度有关,可作为预测结直肠癌浸润转移潜能的新的生物学指标.     

细胞周期素E P27~(KIP1)多参数测定在胃癌早期诊断中的应用

目的探讨细胞周期素E(cyclinE)、P27KIP1的表达在胃癌早期诊断中的价值。方法本研究共选取34例胃癌、10例癌前病变及10例正常胃黏膜,机械法或胶原酶和透明质酸酶混合消化法制备单细胞悬液。异硫氰酸荧光素(FITC)标记的二抗和藻红蛋白(PE)标记的单抗经多参数流式细胞术的方法分别检测cyclinE、P27KIP1的表达。结果胃癌cyclinE和P27KIP1的表达率分别为(32±15)%、(6±5)%,与正常胃黏膜及癌前病变相比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CyclinE过表达和P27KIP1低表达使G1/S转换点调节失控,与胃癌的发生、进展密切相关。二者的联合测定有利于胃癌的早期诊断。     

小鼠p27~(kip1)真核表达载体的构建及其对单个核细胞周期的影响

目的构建小鼠p27kip1真核表达载体,探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响,为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础。方法将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上,并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中,应用MTT法和流式细胞仪分析转染细胞生长情况和细胞周期。结果经酶切分析和测序鉴定,成功构建了小鼠pcDNA3.0/p27kip1重组质粒;经pcDNA3.0/p27kip1转染的单个核细胞中p27蛋白表达增多,其生长增殖不仅受到明显抑制,而且处于G1/G0期的细胞明显增加,处于S期的细胞明显减少。结论构建的pcDNA3.0/p27kip1真核表达载体能够在单个核细胞中表达,且高表达的pcD-NA3.0/p27kip1可以通过抑制细胞周期的方式抑制单个核细胞的生长。     

5-Aza-CdR对胃癌细胞系p27kip1基因异常甲基化的影响

目的探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对胃癌细胞系SGC7901的p27kip1基因异常甲基化及表达的影响。方法选择不同浓度的5-Aza-CdR处理体外培养的SGC7901细胞后,用MSP法检测用药前后细胞中p27kip1基因的甲基化状态;RT-PCR法检测用药前后细胞中p27kip1的mRNA及蛋白表达的变化。结果 p27kip1基因的甲基化状态得到了逆转,p27kip1基因的mRNA和蛋白表达得到增加。结论 SGC7901细胞中p27kip1基因的表达情况与其甲基化状态的改变有关。     

OCT4 和P27kip1 蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其相关性

目的研究OCT4 和P27kip1 蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其相关性。方法采用免疫组织化学方法对 24 例肾透明细胞癌标本OCT4 和P27kip1 的表达进行检测。观察OCT4 和P27kip1 在肾癌组织中的阳性表达百分比及细胞分布情况。考察OCT4 和P27kip1 在性别、年龄（＜60 岁和≥60 岁）及癌细胞有无转移间的表达水平差异。对两者进行相关性分析。结果肾透明细胞癌标本OCT4 和P27kip1 蛋白阳性表达分别为16 例（66.7%）和18 例（75%）, OCT4 蛋白高、中及低表达分别为8 例（33.3%）、5 例（20.5%）及3 例（12.5%）,主要在细胞质和细胞核中表达,另有少部分在胞膜中表达。P27kip1 高、中及低表达分别为3 例（12.5%）、6 例（25%）、9 例（37.5%）,阳性着色在胞浆和胞膜,少部分细胞核可表达。OCT4 和P27kip1 的表达水平在年龄、性别间差异无统计学意义,在肿瘤有无转移间差异有统计学意义（P < 0.05)。OCT4 和P27kip1 在肾癌中的表达呈负相关(rs=-0.408,P < 0.05)。结论OCT4 和P27kip1 呈负相关,采用抑制OCT4 表达或P27kip1 的降解,尤其是降低胞质中P27kip1 的表达,可作为基因治疗肾癌的一个新的的作用靶点。     

大肠癌中hsp27和p14ARF的表达及意义

目的:研究hsp27和p14ARF在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法:利用S-P法检测48例大肠癌和10例大肠腺瘤以及15正常大肠黏膜组织中hsp27和p14ARF的蛋白表达。结果:①大肠癌组织中hsp27和p14ARF表达阳性率分别为79.2%、58.4%,大肠腺瘤组织中分别为40%、70%,正常大肠粘膜组织中分别为33.3%、80%;②p14ARF在高、中分化腺癌组的表达率为64.1%,显著高于低分化组22.2%(P<0.05);③两者在大肠癌组织中的表达无明显相关性。结论:hsp27和p14ARF可能与大肠癌的发生有关,同时,p14ARF的表达与大肠癌的临床病理分级有关,其低表达可能参与了大肠癌的去分化过程。     

PTTG和11p27Kipl在肝癌中的表达及其临床意义

目的分析垂体肿瘤转化基因（PTTG）和p27Kipl基因在原发性肝细胞性肝癌（HCC）中的表达及其,临床意义。方法应用免疫组化S—P法检测48例HCC及癌旁肝癌组织中PTTG蛋白、p27Kipl蛋白的表达情况。结果HCC、癌旁和正常肝组织的PTTG蛋白阳性表达率分别是70．8％（34／48）、91．7％（44／48）,二者之间的差异有统计学意义（P〈0．05）,且PTTG蛋白在癌旁中的表达明显高于在HCC中的表达（P〈0．05）;HCC、癌旁组织的p27kipl蛋白阳性表达率分别是20．8％（10／48）83．3％（40／48）,二者之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。34例PTTG表达阳性组织中有10例见p27kipl表达阳性,而14例PTTG表达阴性组织中有9例见p27kip1阳性表达,二者比较差异有显著性意义（P〈0．05）．结论PTTG和D27Kipl鼻常表达与HCC的发展密切相关,在HCC的发展过程中起重要的作用。     

Ceramide produces apoptosis through induction of p27(kip1) by protein phosphatase 2A-dependent Akt dephosphorylation in PC-3 prostate cancer cells

Ceramide induces cell cycle arrest and apoptotic cell death associated with increased levels of p27(kip1). The aim of this study was to examine the effects of ceramide on p27(kip1) protein levels as a measure of cell cycle arrest and apoptosis. Results showed that ceramide increased p27(kip1) protein levels through activation of protein phosphatase 2A (PP2A) in PC-3 prostate cancer cells. Treatment of cells with the PP2A inhibitor okadaic acid or with PP2A-Cα siRNA inhibited ceramide-induced enhanced p27(kip1) protein expression and Akt dephosphorylation, and prevented Skp2 downregulation. Overexpression of constitutively active Akt attenuated ceramide-induced Skp2 downregulation and p27(kip1) upregulation. In addition, ceramide stimulated binding of the PP2A catalytic subunit PP2A-Cαβ to Akt as assessed by immunoprecipitation experiments, indicating that PP2A is involved in the induction of p27(kip1) via inhibition of Akt pathway. Finally, whether PP2A can regulate p27(kip1) expression independently of Akt pathway was determined. Knockdown of PP2A-Cα with siRNA reduced p27(kip1) levels in the presence of Akt inhibitor. These data reveal that PP2A is a regulator of ceramide-induced p27(kip1) expression via Akt-dependent and Akt-independent pathways.     

2β(3羟丙氧基)骨化三醇对人肝癌细胞周期阻滞及P~(27kip1)蛋白的诱导表达

目的探讨2β(3羟丙氧基)骨化三醇(ED-71)诱导人肝癌细胞HepG2生长抑制和细胞周期G1阻滞,及对抑癌基因P27kip1表达的影响。方法培养HepG2,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察ED-71对HepG2的生长抑制作用,流式细胞术分析细胞周期,以Western-blot检测HepG2细胞中P27kip1蛋白的表达水平。结果ED-71处理后HepG2的生长缓慢,细胞生长受到明显抑制。细胞阻滞于G1期(80.6±2.6,48.7±3.0,P<0.05),P27kip1蛋白表达水平增强(0.11±0.06,0.67±0.08,P<0.05)。结论ED-71抑制人肝癌细胞株HepG2的生长,诱导人肝癌细胞分化,使细胞阻滞于G1期,可能与ED-71诱导人肝癌细胞中抑癌基因P27kip1蛋白的表达有关。     

p21、p27和bcl-2在大肠癌、大肠腺瘤及正常大肠黏膜中表达的意义及相关性研究

目的：探讨p21、p27、bcl-2蛋白在大肠癌、大肠腺瘤及正常大肠黏膜中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化方法,分别检测20例正常大肠黏膜、22例大肠腺瘤和69例大肠癌中p21、p27、bcl-2蛋白表达情况。结果：p21、p27、bcl-2蛋白总阳性表达率分别为44．93％、50．72％、52．17％,各种蛋白的阳性表达率在大肠癌组织与对照组间存在的差异有统计学意义（p〈0．05）。其中发生淋巴结转移的大肠癌组织中p21阳性表达率高于无淋巴结转移的大肠癌组织中的阳性表达率,差异具有统计学意义（P〈0．05）;p27蛋白的表达与肿瘤分化程度呈负相关（P〈0．05）;在发生淋巴结转移的大肠癌组织中bcl-2阳性表达率低于无淋巴结转移的大肠癌组织中的阳性表达率,差异具有统计学意义（P〈0．05）,高分化、中分化腺癌与低分化腺癌相比,差异均有统计学意义（P〈0．05）,TNMⅣ期bcl-2表达率显著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期（P〈0．05）。结论：p21、p27、bcl-2蛋白与大肠癌的发生、发展有密切关系,联合检测p21、p27、bcl-2对于临床诊断大肠癌及判断病情、预后有重要意义。     

实时荧光定量RT-PCR检测大肠腺癌中WT1基因表达

目的探讨大肠腺癌标本中WT1基因的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法建立实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测了27例大肠腺癌标本和11份正常大肠黏膜组织中WT1基因及内参照β-actin基因的表达水平。结果大肠腺癌标本中WT1基因表达水平的范围5.4×10-5～8.9×10-1,在11份正常肠黏膜中有5份存在WT1的低表达,范围从7.6×10-5～7.2×10-4,其余6份未检出表达,81%(22/27)的患者癌组织中WT1 mRNA表达水平高于正常肠黏膜组织,另外,研究表明WT1 mRNA表达水平与病理分级,淋巴结转移,Duke′s分期无明显相关性。结论WT1基因在大肠腺癌中高表达,可作为诊断和治疗大肠癌新的分子指标。