HHLA2过表达胃癌细胞株构建及细胞功能的初步研究

目的 使用慢病毒载体构建稳定过表达人内源性逆转录病毒H-长末端重复关联蛋白2(HHLA2)的胃癌细胞系,探讨细胞发生的生物学功能改变。方法 由目的基因以及Lipo2000转染试剂构建重组质粒,将该质粒转染293T细胞,浓缩其细胞上清液并测定浓度,再将浓缩液转染胃癌细胞株BGC-823和MGC80-3,利用流式细胞术分选并验证GFP+稳定过表达的细胞株。开展细胞功能实验(含迁移试验和增殖试验等)以分析过表达HHLA2胃癌细胞株的生物学功能。结果 酶切及测序结果示,重组慢病毒载体成功构建。流式分选及验证示,HHLA2过表达胃癌稳转株。过表达HHLA2可使胃癌细胞株MGC80-3和BGC-823加快增殖,其24 h、48 h、72 h吸光度值均较对照细胞株升高(P<0.05)。过表达HHLA2可增强胃癌细胞株BGC-823的迁移能力,其24 h、48 h迁移率均较对照细胞株升高(P<0.05);MGC80-3细胞迁移距离未明显变长(P>0.05)。结论 HHLA2过表达能够提高胃癌细胞的增殖和迁移能力。     

结直肠癌组织中EZH2、NF-E1b表达与临床病理特征及预后的关系

目的 研究结直肠癌组织中Zeste同源物增强子2(EZH2)、NF-E1b表达与临床病理特征及预后的关系,以便促进结直肠癌的治疗和预后。方法 回顾性选取云南省肿瘤医院2012年1月至2015年8月收治的86例结直肠癌患者资料,采用免疫组织化学方法检测纳入标本中EZH2、NF-E1b的表达情况,分析和研究EZH2、NF-E1b表达在结直肠癌患者的表达情况、与结直肠癌临床病理特征的关系、与生存率的关系,同时采用生存COX回归分析影响结直肠癌患者预后生存的影响因素。结果 EZH2阳性、阴性表达为52例(60.5%)、34例(39.5%),NF-E1b阳性、阴性表达为53例(61.6%)、33例(38.4%)。低分化直肠癌患者EZH2阳性率显著高于中、高分化患者;淋巴转移患者EZH2阳性率显著高于淋巴未转移患者;年龄≥60岁直肠癌患者EZH2阳性率显著高于<60岁患者,差异具有统计学意义(P <0.05)。低分化直肠癌患者NF-E1b阳性率显著高于中、高分化患者;糖尿病患者NF-E1b阳性率显著高于非糖尿病患者,差异具有统计学意义(P <0.05)。NF-E1b阳性、阴性表达...     

EphA2与B7-H3在结直肠癌组织中表达及其与临床病理和预后的相关性

目的 探讨促红细胞生成素肝细胞A2 (Erythropoietin-producing hepatocellular A2, EphA2)与免疫调节分子B7-H3在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)中的表达及其临床预后价值。方法 收集行手术治疗的110例CRC患者的石蜡包埋组织,通过免疫组织化学染色检测CRC组织中EphA2与B7-H3的表达,分析两者与CRC临床病理参数的关系。此外,通过Kaplan-Meier生存曲线和Cox风险比例模型评估EphA2与B7-H3表达在CRC患者中的预后意义。结果 在所分析的110例CRC样本中,65.5%(72/110)呈现EphA2高表达,而61.8%(68/110)有B7-H3高表达。EphA2高表达者肿瘤直径更大(P=0.043)、淋巴结转移(P=0.034)和淋巴血管侵犯较低表达者更为频繁(P=0.026)。此外,与低表达组相比,B7-H3高表达者具有更为进展的T分期(P=0.024)和更高的淋巴结转移率(P=0.045)。生存分析显示,EphA2高表达与低表达患者的5年总体生存(overall survival, O...     

基质金属蛋白酶在结直肠癌组织中的表达及其临床病理意义

结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,其侵蚀和转移是一个相当复杂的过程.大量的研究表明,结直肠癌侵蚀转移能力与其诱导产生蛋白酶降解细胞外基质的能力有关.此文简单综述基质金属蛋白酶在结直肠癌组织中的表达与意义,初步探讨基质金属蛋白酶与结直肠癌的侵袭与转移的关系.     

结直肠癌组织中EGFR表达及意义

表皮生长因子受体是与HER2／neu同家族的跨膜受体糖蛋白。国外研究表明，EGFR基因可以作为结直肠癌的一个有效的预后判断指标。2003年3月-2006年8月，我们用免疫组化染色方法检测了108例结直肠癌石蜡标本中并分析了其与肿瘤临床病理特征的关系。现报告如下。     

结直肠癌组织中LGR5、CSF1R蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨富含亮氨酸重复单位的G蛋白耦联受体5 (LGR5)与集落刺激因子1受体(CSF1R)在结直肠癌样本中的表达及其预后价值。方法 回顾性选取2016年2月至2019年1月南通大学附属如皋医院初诊并行手术治疗的114例结直肠癌患者,通过免疫组化染色检测配对组织样本中LGR5、CSF1R蛋白的表达水平,分析它们与结直肠癌患者临床病理资料及总生存期(OS)的关系。采用多因素Cox分析明确LGR5、CSF1R在结直肠癌患者中的预后意义。结果 LGR5、CSF1R蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为61.4%(70/114)和63.2%(72/114),均显著高于癌旁组织(P <0.05)。LGR5阳性表达与肿瘤直径、淋巴血管浸润、浆膜侵犯及远处转移显著相关(P均<0.05)。CSF1R阳性表达者浆膜侵犯、淋巴结转移及淋巴血管浸润风险显著高于阴性表达者(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示LGR5(中位OS:45.1 vs 56.1)、CSF1R(中位OS:42.3 vs 59.2)阳性表达与结直肠患者不良预后显著相关。LGR5表达(HR=2.385,...     

结直肠癌组织中PLOD2、ZEB1表达变化及意义

目的 探讨结直肠癌患者癌组织中赖氨酸羟化酶2(PLOD2)、转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)表达变化及意义.方法 选择结直肠癌患者82例,采用免疫组化法检测其癌组织及癌旁正常组织中PLOD2、ZEB1表达,分析二者相关性及其表达与患者临床病理参数间的关系.随访并比较不同PLOD2、ZEB1表达与患者5年总体生存率...     

SKP2在大肠癌组织中的表达及预后意义

目的:探讨SKP2在大肠癌中的表达和预后作用．方法:采用SP免疫组化法检测68例大肠癌手术切除组织标本中SKP2和P27的表达,用Kaplan-Meier和Cox回归分析法进行生存分析．结果:在68例大肠癌组织中,SKP2和P27的阳性表达率分别为41．2％(n=28)和52．9％(n= 36)．SKP2的表达与组织分级显著相关(X2= 14．073,P=0．001)．SKP2表达与年龄、性别和AJCC分期无关(P>0．05)．SKP2和P27负相关(r=-0．528,P=0．0001)．SKP2高表达组的总生存期较SKP2低表达组短(31．5±4．0 mo vs 54．5±2．1 mo,P<0．01)．多因素Cox回归分析表明,SKP2表达是大肠癌的独立预后因素(RR= 6．227．P=0．033)．结论:SKP2表达可以作为大肠癌患者预后的指标．     

Expression of cyclooxygenase-2 in colorectal cancer and its clinical significance

AIM: To clarify the clinicopathologic significance of COX-2 expression in human colorectal cancer. METHODS: A total of 128 surgically resected colorectal cancer specimens were immunohistochemically analyzed with the use of anti-COX-2, anti-VEGF and anti-MMP-2 antibodies. The relationship between the cyclooxygenase-2 expression in primary lesions of colorectal cancer and clinicopathoiogic parameters was evaluated by chi-square test. RESULTS: Among 128 cases of colorectal cancer, 87 (67.9%) were positive for cyclooxygenase-2. The expression of cyclooxygenase-2 was significantly correlated with the depth of invasion, stage of disease, and metastasis (lymph node and liver). Patients in T3-T4, stages Ⅲ-Ⅳand with metastasis had much higher expression of cyclooxygenase-2 than ones in T1-T2, stages Ⅰ-Ⅱ and without metastasis (P<0.05). Among 45 cases of colorectal cancer with lymph node metastasis, the COX-2-positive rate was 86.7% (39/45) for primary lesions and diffuse cytoplasmic staining for COX-2 protein was detected in cancer cells in 100% of metastatic lesions of the lymph nodes. VEGF expression was detected in 49 tumors (38.3%), and VEGF expression was closely correlated with COX-2 expression. The positive expression rate of VEGF (81.6%) in the cyclooxygenase-2-positive group was higher than that in the cyclooxygenase-2-negative group (18.4%, P<0.05). MMP-2 expression was detected in 88 tumors (68.8%), and MMP-2 expression was closely correlated with COX-2 expression. The positive expression rate of MMP-2 (79.6%) in the positive COX-2 group was higher than that in the negative COX-2 group (20.4%, P<0.05). CONCLUSION: Cyclooxygenase-2 may be associated with tumor progression by modulating the angiogenesis and cancer cell motility and invasive potential in colorectal cancer and it can be used as a possible biomarker.     

ETS2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨转录因子ETS2（E-twenty six 2）在结直肠癌组织中的表达情况,分析其与结直肠癌患者临床病理参数之间的关系,并评估其临床预后价值。 方法收集新鲜的结直肠癌、癌旁和相应正常组织,以及结直肠癌和癌旁组织的石蜡标本,采用实时荧光定量PCR法检测组织中ETS2 mRNA的表达,免疫组化检测石蜡切片中ETS2蛋白的表达。 结果结直肠癌组织中ETS2 mRNA的表达明显高于癌旁组织和正常组织（P<0.001）,而癌旁组织和正常组织中的ETS2 mRNA表达量差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组化结果显示ETS2在52.07%（63/121）的结直肠癌中表达,而仅在13.04%（6/46）的癌旁组织中表达,两者比较差异有统计学意义（P<0.05）。ETS2表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及MMR状态有关（P<0.05）。ETS2表达与结直肠癌患者术后无进展生存有关（P<0.001）。采用COX多因素回归分析发现,ETS2表达（HR：0.461,95%CI：0.271~0.683,P=0.003）和浸润深度（HR：0.352,95%CI：0.113~0.769,P=0.015）是结直肠癌患者术后无进展生存的独立预后因子。 结论与癌旁组织相比,ETS2在结直肠癌组织中的转录和翻译水平都过表达,ETS2是预测结直肠癌患者术后无进展生存的潜在标记物。     

14例转移性结直肠癌合并消化道穿孔临床病理特征及预后的回顾性系列分析

目的分析转移性结直肠癌合并消化道穿孔病例临床病理特征及预后。方法采用描述性病例系列研究方法回顾性分析2019年11月至2020年11月北京大学肿瘤医院消化内科收治的转移性结直肠癌合并消化道穿孔的14例患者临床病理及穿孔前后CT影像特征。并将14例患者中穿孔后积极手术干预的12例患者分为2组:术后继续抗肿瘤治疗组和术后最佳支持治疗组,随访两组患者的生存状态,绘制生存曲线,采用Log-rank法比较两组患者生存曲线的差异。结果14例转移性结直肠癌合并消化道穿孔患者中,男性9例(64.3%)、年龄≥60岁10例(71.4%)、左半结肠癌10例(71.4%)、RAS/BRAF突变型10例(71.4%)、一线治疗11例(78.6%)、肠梗阻同时合并消化道穿孔8例(57.1%);14例晚期结直癌合并消化道穿孔的患者中有10例在抗肿瘤治疗中出现穿孔,其中使用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)抑制剂7例,治疗有效8例。穿孔术后继续抗肿瘤组总生存期显著优于穿孔术后最佳支持治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论转移性结直肠癌合并消化道穿孔临床特征包括老年、男性、左半、RAS/BRAF突变、肠梗阻、影像学显示局部分期T_4a~T_4b、憩室等。另外,晚期肠癌治疗中使用血管生成抑制剂及抗肿瘤治疗有效时也需高度警惕消化道穿孔风险。转移性结直肠癌合并消化道穿孔积极手术干预后继续进行抗肿瘤治疗生存获益。     

散发性结直肠癌微卫星不稳定性及其与临床病理生物学的关系

目的:探讨分析中国人散发性结直肠癌微卫星不稳定的变异及其与临床病理生物学特征的关系.方法:应用荧光多重PCR方法检测105例散发性结直肠癌初诊患者微卫星状态,分析MSI结直肠癌潜在的相关临床病理生物学特征.结果:105结直肠癌中,MSI检出率24.7%,其中MSI-H 14例(13.3%),MSI-L 12例(11.4%);队列中各位点突变率分别是D5S346(5.7%),BAT26(8.6%),BAT25(10.5%),D17S250(8.6%),D2S123(10.5%);MSI结直肠癌的组织分化程度与淋巴结转移情况与MSS结直肠癌有显著的统计学差异(P=0.047,P=0.029),但在患者年龄、肿瘤位置、病理性质无显著临床意义(P＞0.05).结论:MSI结直肠癌具有低分化癌多见,淋巴结转移少等特点,淋巴结转移少可能是MSI结直肠癌具有生存优势的原因之一.     

Bcl?2与Bax基因在结直肠癌合并血吸虫病患者体内表达及临床病理意义

目的　探讨Bcl?2和Bax基因在结直肠癌（CRC）合并血吸虫病患者体内的表达水平及其临床病理意义。方法　以2016年6月—2020年6月在大理大学第一附属医院接受手术治疗的CRC患者作为研究对象,采用随机数字表法从单纯CRC患者和CRC合并血吸虫病患者中各随机抽取30例作为CRC组和CRC?S组。收集两组患者癌组织和CRC组患者癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法和免疫组织化学法检测样本中Bcl?2和Bax mRNA和蛋白表达水平,应用HE染色法观察并比较两组患者癌组织细胞凋亡率。结果　共纳入研究对象60例,其中CRC组和CRC?S组均30例,两组患者性别构成（[χ2] = 0.271,P＞0.05）、平均年龄（t = -0.596,P＞0.05）、结直肠肿瘤生长方式（[χ2] = 0.275,P＞0.05）、肿瘤部位（[χ2] = 4.008,P＞0.05）、肿瘤浸润深度（[χ2] = 0.608,P＞0.05）、肿瘤分化程度（[χ2] = 0.364,P＞0.05）及肿瘤是否脉管转移（[χ2] = 1.111,P＞0.05）差异均无统计学意义,但肿瘤组织学类型、肿瘤是否淋巴结转移和TMN分期差异均有统计学意义（[χ2] = 5.963、8.297、5.711,P均＜0.05）。与CRC组患者癌旁组织相比,CRC组和CRC?S组患者癌组织中Bcl?2、Bax mRNA和蛋白表达水平均升高（P均＜0.05）;与CRC组相比,CRC?S组患者癌组织中Bcl?2 mRNA和蛋白表达水平均升高（P均＜0.05）,Bax mRNA和蛋白水平均降低（P均＜0.05）。CRC组和CRC?S组患者肿瘤组织细胞凋亡率分别为42.00%和25.35%,差异有统计学意义（[χ2] = 41.500,P = 0.000）。结论　血吸虫病可能通过影响细胞凋亡信号通路中Bcl?2和Bax基因表达而参与CRC发生与进展。     

15-LOX-1蛋白在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨15-LOX-1蛋白表达与大肠癌临床病理因素和患者预后的关系,并探索其可能的作用机制。方法采用免疫组化SP法,检测15-LOX-1蛋白在103例大肠癌组织、56例大肠癌癌旁正常组织中的表达,结合患者的临床病理因素、预后情况及大肠癌组织中其他与侵袭转移相关的指标进行分析。结果 15-LOX-1蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率显著低于大肠癌癌旁正常组织(P<0.05);15-LOX-1蛋白的表达与大肠癌的组织病理类型、淋巴结转移、其他器官侵袭转移以及Dukes分期密切相关(P<0.05),病理分化程度低、Dukes分期晚以及有淋巴结或其他器官侵袭转移者肠癌组织中15-LOX-1蛋白表达水平降低;大肠癌组织中15-LOX-1阳性表达患者1年、3年、5年生存率及中位生存时间明显高于15-LOX-1阴性表达患者(P<0.05),多因素COX回归分析结果提示15-LOX-1表达水平、患者年龄及手术时有无淋巴结转移可以作为评估大肠癌患者预后的独立因素(P<0.05);大肠癌中15-LOX-1与VEGF、MMP-2、MMP-7的表达均呈负相关(P<0.05)。结论 15-LOX-1对大肠癌具有抑癌作用,对反映大肠癌生物学行为和判断预后有重要意义。     

结直肠癌中SCC-S2的表达及意义

目的SCC-S2是近期发现的一种在多种癌症中过表达,并且与癌细胞的恶性生物学行为关系密切的物质。但是在结直肠癌中,SCC-S2的表达和生物学作用未见报道。本研究目的是探索SCC-S2在结直肠癌及其癌旁正常组织中的表达水平,探讨SCC-S2与结直肠癌患者临床病理特征的关系。 方法本研究应用免疫组化分析了SCC-S2在136例结直肠癌组织中的表达情况,使用SPSS 18.0软件进行统计分析。 结果67例(49.26%)结直肠癌标本SCC-S2过表达。SCC-S2的过表达与结直肠癌的TNM分期显著相关(P<0.01);与淋巴结转移显著相关(P<0.05);与细胞增殖指数显著相关(P>0.01)。 结论SCC-S2在结直肠癌中表达升高,并与结直肠癌侵袭和淋巴结转移密切相关。SCC-S2在结直肠癌的发生发展中可能发挥着重要作用。     

大肠癌中IGF-2蛋白的表达及相关性研究

目的:观察结肠直肠癌中IGF-2、Survivin、c-Myc蛋白的表达情况,探讨IGF-2、Survivin、c-Myc蛋白表达的相关性,阐明IGF-2在大肠癌发生、发展中的作用.方法:应用免疫组化SP法分别检测大肠癌及其癌瘤手术切除的切缘组织中IGF-2、Survivin、c-Myc蛋白的单一及联合表达情况.结果:IGF-2在大肠癌组织中的表达阳性率为27.3%,在切缘组织中的表达阳性率为5.0%,两者相比有显著性差异(P<0.05).IGF-2表达阳性与Dukes分期(AB:16.67%vsCD83.32%)、淋巴转移(无16.67%vs有83.33%)有关(P<0.01),与患者年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、部位无明显相关性(P>0.05);Survivin、c-Myc表达阳性与IGF-2表达无明显相关(P>0.05).结论:IGF-2可成为预后判断的指标;IGF-2的过表达促进了结肠直肠癌的发生、发展、浸润和转移.     

EZH2和VEGF在结直肠癌中的表达其与患者预后关系生物信学分析及验证

背景结直肠癌(colorectal carcinoma, CRC)是临床上常见的消化系统恶性肿瘤.但其确切发病机制和预后独立因素仍未阐明.本研究通过生物信息学方法分析了zeste基因增强子同源物2(enhancerofzestehomolog2,EZH2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)基因在CRC中的表达情况及其和患者预后的感谢.并采用免疫组化检测了EZHE2和VEGF蛋白的表达情况及其与患者临床特征的关系.目的探讨EZH2和VEGF在CRC中的表达、突变情况及其与患者临床病理特征和预后的关系.方法首先在TCGA数据库中比较EZH2和VEGF基因mRNA在肠癌患者癌和癌旁组织中的表达,同时分析EZH2和VEGF基因的突变情况;采用STRING数据库建立EZH2和VEGF基因表达网络并筛选网络中的关键基因.根据EZH2和VEGF在肿瘤组织中的表达分为高低表达组, Cox回归模型Log-rank检验比较高低表达组患者总生存和无疾病进展生存是否存在差异.同时选取80例肠癌手术患者,留取患者癌组织和癌旁组织,采用免疫组织化学法检测上述组织中EZH2和VEGF蛋白表达水平.结果 TCGA数据库显示EZH2和VEGF基因在CRC组织中的表达水平显著高于对应的正常肠上皮组织(P <0.05),而与肠癌患者的临床分期并无明显相关性(P>0.05);EZH2和VEGF基因在人肠癌中的突变率分别为1.5%和1.9%,且EZH2和VEGF不同突变组织中mRNA表达水平存在明显差异.网络中共有22个蛋白,各蛋白平均相互作用指数为10.5,区域聚集指数为0.8,各蛋白富集明显(P<0.01). Cytohubb软件筛选出EZH2, DNMT1, HDAC2, YY1和SUZ12为网络中的关键基因;EZH2和VEGF高低表达与患者总生存期均无相关性(P>0.05),而VEGF高表达组患者无疾病进展生存期显著低于低表达组(HR=1.8, P<0.05).免疫组化显示, EZH2和VEGF在肠癌组织中的阳性表达率均显著高于癌旁组织(P<0.01).EZH2阳性表达与肠癌肿瘤直径、分化程度和Duke分期有关(P<0.05).而VEGF阳性表达与肠癌患者分化程度和Duke分期存在相关性(P<0.05).结论 EZH2和VEGF在肠癌组织中呈现明显上调表达和突变,其高表达与肿瘤大小、分会程度和Duke分期有关,并可作为肠癌预后的潜在分子标志物.