circUCK2靶向miR-483-5p调控oxLDL诱导的血管内皮细胞氧化应激和细胞凋亡机制研究

目的 探讨circUCK2对oxLDL诱导的血管内皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及分子机制.方法 人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)分为对照(Con)组、氧化低密度脂蛋白(oxLDL)组、oxLDL+pcDNA组、oxLDL+pcDNA-circUCK2组、oxLDL+anti-miR-NC组、oxLDL+anti-m...     

miR-483-3p靶向APPL1对脂多糖诱导的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的影响

目的 探讨miR-483-3p对脂多糖(LPS)诱导的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤的影响及可能机制.方法 LPS诱导小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR-483-3p和磷酸酪氨酸衔接蛋白1(APPL1)mRNA表达水平,酶联免疫吸附法检测细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD...     

芒果苷通过调节miRNA-483-3p减轻良性前列腺增生腺体纤维化

目的 研究芒果苷对良性前列腺增生(BPH)腺体纤维化的改善作用和调节微小RNA(miRNA)-483-3p的作用机制。方法 雄性小鼠随机分为5组：正常对照组、BPH模型对照组、非那雄胺组、芒果苷组和芒果苷+miRNA-483-3p拮抗剂组。通过摘除睾丸和皮下注射丙酸睾酮建立BPH模型。30 d后通过前列腺组织切片行masson和天狼猩红染色,以及检测组织中羟脯氨酸含量评价胶原沉积,实时荧光定量PCR检测前列腺转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、丝裂原活化蛋白激酶2(MK2)和丝裂原活化蛋白激酶6(MKK6)的mRNA水平以及miRNA-483-3p的水平,Western blotting检测前列腺TGF-β₁、MK2、磷酸化MK2(p-MK2)、MKK6和磷酸化MKK6(p-MKK6)的蛋白水平,并采用荧光素酶报告评估miRNA-483-3p与MK2的靶向结合能力。结果 与正常对照组比较,BPH模型对照组小鼠的前列腺胶原沉积明显,且TGF-β₁、MK2和MKK6的mRNA水平,以及TGF-β     

石见穿多糖通过调控DSCAM-AS1/miR-129-5p轴抑制oxLDL诱导的血管平滑肌细胞增殖、迁移和侵袭

摘要：目的:探讨石见穿多糖对氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）诱导的人主动脉血管平滑肌细胞（HASMCs）增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法:体外培养HASMCs,不同剂量(0.25,0.5,1 g·L-1)的石见穿多糖干预oxLDL诱导的HASMCs、或oxLDL诱导转染DSCAM-AS1小干扰RNA的HASMCs、或1 g·L-1的石见穿多糖干预oxLDL诱导的转染DSCAM-AS1过表达载体的HASMCs后,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,划痕实验和Transwell分别检测细胞迁移和侵袭,Western Blot检测细胞中E-cadherin和N-cadherin蛋白表达,RT-qPCR法检测DSCAM-AS1和miR-129-5p表达。双荧光素酶报告基因实验验证DSCAM-AS1和miR-129-5p调控关系。结果:石见穿多糖可降低oxLDL诱导的HASMCs的OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低（P<0.05）,而促进E-cadherin蛋白表达（P<0.05）,且呈剂量依赖性。石见穿多糖可降低oxLDL诱导的HASMCs中DSCAM-AS1表达（P<0.05）,而促进miR-129-5p表达（P<0.05）,DSCAM-AS1靶向结合并负调控miR-129-5p表达。沉默DSCAM-AS1可降低oxLDL诱导的HASMCs的OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及N-cadherin蛋白表达降低（P<0.05）,而促进E-cadherin蛋白表达（P<0.05）。过表达DSCAM-AS1逆转石见穿多糖对oxLDL诱导的HASMCs增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:石见穿多糖可抑制oxLDL诱导的HASMCs增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与调控DSCAM-AS1/miR-129-5p轴有关。     

miR-149-5p对ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的研究

目的 探究miR-149-5p在氧化低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)中的功能及其分子机制.方法 用不同浓度的ox-LDL(0,25,50,100μg·mL-1)处理VSMCs 24h,或用100 mg·mL-1的ox-LDL分别处理VSMCs 0,6,12,24 h,以实时荧光定量逆...     

木樨草素通过抑制miR-142-3p降低LPS诱导的肺泡巨噬细胞损伤

摘要：目的:探讨木樨草素对脂多糖（LPS）诱导的肺泡巨噬细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法:采用1 mg·L-1的LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR8383建立细胞损伤模型,并用不同剂量(0.025,0.05,0.1,0.2,0.4,0.8,1.6,3.2,6.4μg·ml-1)的木樨草素处理NR8383细胞。实验分为对照组、LPS组(1 mg·L-1)、LPS(1 mg·L-1)+木樨草素低、中、高剂量组(0.1,0.3,0.9μg·ml-1)、LPS(1 mg·L-1)+anti-miR-NC组、LPS(1 mg·L-1)+miR-142-3p inhibor组、LPS(1 mg·L-1)+木樨草素(0.9μg·ml-1)+miR-142-3p mimic组;采用MTT法检测木樨草素对NR8383细胞存活率的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA法检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）的水平;qRT-PCR法检测miR-142-3p的表达量;Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3（Caspase3）、Cleaved-Caspase3蛋白表达量。结果:随着木樨草素浓度的升高,LPS组细胞存活率升高,而对照组细胞存活率无明显变化;与对照组比较,LPS组细胞凋亡率、TNF-α和IL-1β的水平、miR-142-3p的表达量、Caspase3、Cleaved-Caspase3蛋白表达升高（P<0.05）;与LPS组比较,LPS+木樨草素低、中、高剂量组细胞凋亡率、TNF-α和IL-1β的水平、miR-142-3p的表达量、Caspase3、Cleaved-Caspase3蛋白表达降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性（P<0.05）;与LPS+anti-miR-NC组比较,LPS+miR-142-3p inhibor组细胞凋亡率、TNF-α和IL-1β的水平、Caspase3、Cleaved-Caspase3蛋白表达降低（P<0.05）;与LPS+木樨草素组比较,LPS+木樨草素+miR-142-3p mimic组细胞凋亡率、TNF-α和IL-1β的水平、Caspase3、Cleaved-Caspase3蛋白表达升高（P<0.05）。结论:木樨草素通过抑制miR-142-3p表达可抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞凋亡,改善炎症反应。     

天麻素抑制miR-223-3p对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响

目的 探讨天麻素对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞增殖、凋亡、炎症反应的影响及其对miR-223-3p的调控作用.方法 取正常培养的肺泡上皮细胞A549为对照组,采用肺炎链球菌诱导A549建立肺泡上皮细胞损伤模型为模型组,按照天麻素剂量分为天麻素2.5、5.0、10.0 μmol/L组.按照miR-223-3p寡核苷酸抑制...     

LINC00839靶向调控miR-124-3p对膀胱癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨LINC00839靶向调控miR-124-3p对膀胱癌细胞生物学行为的影响。方法 实时荧光定量PCR(qPCR)检测膀胱癌和癌旁正常组织、膀胱癌细胞株(T24、5637、EJ)中LINC00839表达及抑制LINC00839后对miR-124-3p表达的影响。构建3条小干扰RNA-LINC00839(si-LINC00839-1组、si-LINC00839-2组和siLINC00839-3组)序列转染膀胱癌细胞。沉默LINC00839表达后,CCK-8检测LINC00839对细胞增殖的影响;Transwell检测LINC00839对细胞侵袭的影响;流式细胞术检测LINC00839对细胞凋亡的影响;双荧光素酶实验检测LINC00839与miR-124-3p的相互作用;免疫蛋白印迹法检测抑制LINC00839后对内皮素受体B(EDNRB)蛋白表达的影响。结果 q PCR检测结果显示,与癌旁正常组织比较,膀胱癌组织中LINC00839表达增高(P<0.05);LINC00839在膀胱癌细胞5637表达最高。3条siRNA序列中,si-LINC00839-2抑制效率最高。与si...     

miR-149-3p调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎性反应的影响

目的 探讨miR-149-3p通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎症反应的影响。方法 体外分离大鼠髓核细胞,用IL-1β浓度为10 ng/ml建立模型组,细胞分为Con组(空白对照)、IL-1β组(IL-1β处理)、IL-1β+miR-NC组(IL-1β处理,转染miR-NC)、IL-1β+miR-149-3p组(IL-1β处理,转染miR-149-3p)、IL-1β+miR-149-3p+Anisomycin组(IL-1β和通路激活剂Anisomycin处理,转染miR-149-3p)。采用qRT-PCR检测miR-149-3p相对表达水平;MTT、流式细胞术实验检测细胞增殖和凋亡;Western blot检测Bax、Bcl-2、Beclin 1、LC3II/LC3I、JNK/p38 MAPK信号通路相关蛋白表达;ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-8表达水平。结果 IL-1β组内miR-149-3p相对表达量、细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显低于Con组,凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3II/LC3I蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-8...     

miR-3177-3p通过TLR4对香烟烟雾提取物诱导支气管上皮细胞凋亡的影响

目的 研究miR-3177-3p通过TLR4对香烟烟雾提取物(CSE)诱导的支气管上皮细胞凋亡的影响.方法 支气管上皮细胞16HBE分成Control组、CSE组(CSE处理)、CSE+miR-NC组(转染mimics control,CSE处理)、CSE+miR-3177-3p组(转染miR-3177-3p mimi...     

五味子苷B 调控miR-370-3p/CCL3轴对幼年肺炎小鼠免疫炎症因子水平的影响

目的:探讨五味子苷B(Sch B)在幼年肺炎小鼠的作用机制。方法:将90 只幼年雄性小鼠随机分为对照组、模型组、Sch B 低剂量组(Sch BL组)、Sch B 高剂量组(Sch BH组)、Sch BH+antagomir-NC 组、Sch BH+miR-370-3p antagomir组各15 只。Sch BL 组和Sch BH 组小鼠分别灌胃20、60 mg/ kg 的Sch B;Sch BH+antagomir-NC 组和Sch BH+miR-370-3p antagomir组,先将1 nmol 的 miR-370-3p antagomir、antagomir-NC 用20 μL 的磷酸盐缓冲液(PBS)溶解,在Sch B 灌胃后将miR-370-3p antagomir、antagomir-NC 质粒分别经尾静脉注射到小鼠体内;对照组和模型组给予等量生理盐水。每天1 次,持续给药7 d。测定各组小鼠肺组织的湿 干质量比;采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠肺组织的病理形态;检测各组小鼠肺组织中炎症因子水平;流式细胞术检 测外周血T 淋巴细胞亚群;实时定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测肺组织中miR-370-3p 和CCL3 的mRNA 水平;双荧 光素酶实验验证miR-370-3p 与CCL3 的靶向关系。结果:与对照组相比,模型组幼鼠肺组织结构紊乱,肺泡壁变厚,出现大量炎 性细胞浸润,组织受损严重,肺组织湿干质量比、CD8+ 、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素( IL)-6、CCL3 mRNA 水平均升高, CD4+ 、CD4+/CD8+ 、miR-370-3p 水平均降低(P 均<0.05)。与模型组相比,Sch BL 组和Sch BH 组幼鼠肺组织中肺泡壁变薄,炎 性细胞浸润明显减少,损伤减轻,肺组织湿干质量比、CD8+、TNF-α、IL-6、CCL3 mRNA 水平均降低,CD4+、CD4+ / CD8+、miR-370-3p 水平均升高(P 均<0. 05)。加入miR-370-3p antagomir 进行回补实验,结果显示Sch B 对肺炎幼鼠免疫功能和炎症保护作用被 逆转,且CCL3 mRNA 水平升高(P<0. 05);双荧光素酶报告基因实验验证了miR-370-3p 与CCL3 存在靶向关系。结论:Sch B 能 够通过靶向调节miR-370-3p/ CCL3 轴来增强幼年肺炎小鼠免疫功能,并抑制炎症反应。     

lncRNA OSER1-AS1和miR-373-3p在动脉粥样硬化患者中的表达及对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)氧化应激反应丝氨酸丰富1反义RNA 1(OSER1-AS1)和miR-373-3p在动脉粥样硬化(AS)患者血清、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)中的表达及其对AngⅡ诱导HASMCs增殖与迁移的影响。方法 以41例体检健康者为对照,采用RT-qPCR法测定41例AS血清中OSER1-AS1、miR-373-3p表达。体外培养HASMCs,经1×10^-7 mol/L AngⅡ干预24 h后,采用RT-qPCR法测定细胞中OSER1-AS1、miR-373-3p表达。分别转染OSER1-AS1小干扰RNA、miR-373-3p模拟物或共转染OSER1-AS1小干扰RNA与miR-373-3p抑制剂至HASMCs,再用1×10^-7 mol/L AngⅡ干预24 h,采用CCK-8法、Transwell小室实验分别测定细胞增殖活性和迁移情况,采用Western blot法测定增殖、迁移相关蛋白表达。采用双荧光素酶报告基因实验测定OSER1-AS1与miR-373-3p的靶向...     

瑞舒伐他汀抑制miR-122-5p减轻LPS诱导的神经细胞损伤

目的 探讨瑞舒伐他汀(rosuvastatin)对脂多糖(LPS)诱导的神经细胞损伤的作用和可能机制.方法 体外培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12,采用LPS诱导PC-12细胞建立脊髓损伤模型.不同浓度(0.01、0.1、1.0μmol/L)的瑞舒伐他汀作用于LPS诱导的PC-12细胞24 h或1.0μmol/L的瑞舒...     

黄芩苷通过上调miR-485-5p的表达抑制前列腺癌细胞的增殖

目的：从miRNAs的角度研究黄芩苷对前列腺癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法：将不同浓度的黄芩苷作用22RV1细胞,应用MTT检测细胞的增殖情况,筛选最佳药物浓度;应用Real-Time PCR检测不同细胞系中miR-485-5p的表达量;检测黄芩苷处理22RV1细胞后miR-485-5p及JAK3 mRNA的表达;应用Western blot检测JAK3蛋白的表达;应用双荧光素酶基因系统验证miR-485-5p与JAK3的靶向作用关系;应用MTT法检测细胞的生存率。结果：筛选出最佳药物浓度为100 μmol·L^-1;22RV1细胞中miR-485-5p的表达量明显低于正常前列腺细胞;黄芩苷刺激细胞后miR-485-5p的表达上调;黄芩苷或miR-485-5p mimics可抑制前列腺癌细胞的JAK3 mRNA和蛋白的表达,miR-485-5p inhibitor可使JAK3 mRNA及蛋白的表达水平上调;黄芩苷或miR-485-5p均可抑制前列腺癌细胞的增殖。结论：黄芩苷通过上调miR-485-5p的表达,抑制前列腺癌细胞的增殖。     

毛蕊花苷通过miR-708-3p抑制乳腺癌MCF-7细胞的恶性表型

目的 探究毛蕊花苷对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 人乳腺癌MCF-7细胞随机分为对照组(生理盐水)以及实验组(毛蕊花苷50μmol·L-1).给药24 h后,CCK-8法检测各组细胞存活率;Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测EMT...     

雌激素对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 :观察雌激素对血管平滑肌细胞 (SMC)凋亡的影响。方法 :以大鼠为对象 ,观察正常对照组、去卵巢组及去卵巢 +雌二醇治疗组大鼠血管平滑肌细胞凋亡的关系。结果 :雌二醇治疗组血管平滑肌细胞凋亡较去卵巢组相比明显减少(P>0 .0 5 ) ,与正常对照组比较差别无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :雌二醇对血管平滑肌细胞的凋亡有抑制作用 ,可能是其预防动脉粥样硬化的机制     

泛素-蛋白酶体抑制剂对血管平滑肌细胞凋亡的影响

血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle,VSMC)是构成血管壁的重要成分。在动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)病变中,VSMC在病理状态下凋亡失平衡引起血管重塑,导致动脉粥样硬化的发生。目前研究发现,细胞凋亡在动脉粥样硬化形成的发病和治疗中具有重要意义,而泛素-蛋白酶体抑制剂(The ubiquitinproteasome inhibitor,UPI)能够促进VSM C凋亡进而影响动脉粥样硬化。本文对泛素-蛋白酶体抑制剂影响VSM C凋亡的机制进行了综述。     

术前血清miR-483-5p水平在肝内胆管细胞癌诊断及预后中的价值

目的:探讨术前血清miR-483-5p水平在肝内胆管细胞癌(ICC)早期诊断及预后评估中的价值。方法:选择2015年12月—2017年12月收治的91例ICC患者为ICC组,选择同期40例健康体检者为对照组,统计一般临床资料并检测血清miR-483-5p水平,采用受试者工作特征曲线,分析miR-483-5p对ICC的诊断效能。根据miR-483-5p中位值将ICC患者分为低表达组和高表达组,分析比较两组患者病理特征的差异,应用Kaplan-Meier法进行生存分析,并对生存期进行单因素和多因素Cox回归分析。结果:ICC组患者血清miR-483-5p水平明显高于对照组(P<0.05);miR-483-5p诊断ICC的曲线下面积为0.758,敏感性55.00%,特异性86.81%。高表达组和低表达组之间的肿瘤分化程度和淋巴结转移比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,高表达组患者的整体生存期明显低于低表达组(P<0.05)。单因素及多因素Cox回归分析发现,血清miR-483-5p水平与ICC患者术后生存期有关,但不是生存期的独立影响因素。结论:血清miR-483-5p水平对ICC具有一定诊断价值,且高miR-483-5p水平ICC患者的术后生存期相对较短,可作为ICC早期诊断及预后评估辅助评价指标。     

姬松茸多糖上调miR-382-3p表达保护IL-1β诱导的软骨细胞损伤

摘要：目的:探讨姬松茸多糖（ABP）对白细胞介素1β（IL-1β）诱导软骨细胞CHON-001损伤的保护作用和分子机制。方法:以10 ng·ml-1的IL-1β处理CHON-001细胞建立软骨细胞炎症模型。将CHON-001细胞分为对照（Con）组、IL-1β组、IL-1β+ABP低剂量(ABP-L,10 mg·L-1)组、IL-1β+ABP中剂量(ABP-M,20 mg·L-1)组、IL-1β+ABP高剂量(ABP-H, 40 mg·L-1)组、IL-1β+miR-NC组、IL-1β+miR-382-3p组、IL-1β+ABP+anti-miR-NC组和IL-1β+ABP+anti-miR-382-3p组。采用流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附法检测CHON-001细胞培养液中白细胞介素6（IL-6）、γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的水平;Western blot检测B细胞淋巴瘤（Bcl-2）和Bcl相关x蛋白（Bax）水平;实时定量PCR检测miR-382-3p表达。结果:与Con组比较,IL-1β组IL-6、IFN-γ、TNF-α水平以及细胞凋亡率、Bax蛋白水平显著升高（P<0.05）,miR-382-3p表达及Bcl蛋白水平显著降低（P<0.05）。与IL-1β组比较,IL-1β+ABP-L组、IL-1β+ABP-M组、IL-1β+ABP-H组IL-6、IFN-γ、TNF-α水平以及细胞凋亡率、Bax蛋白水平显著降低（P<0.05）,miR-382-3p表达及Bcl蛋白水平显著升高（P<0.05）。与IL-1β+miR-NC组比较,IL-1β+miR-382-3p组IL-6、IFN-γ、TNF-α水平以及细胞凋亡率、Bax蛋白水平显著降低（P<0.05）,Bcl蛋白水平显著升高（P<0.05）。与IL-1β+ABP+anti-miR-NC组比较,IL-1β+ABP+anti-miR-382-3p组IL-6、IFN-γ、TNF-α水平以及细胞凋亡率、Bax蛋白水平显著升高（P<0.05）,Bcl蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论:姬松茸多糖通过上调miR-382-3p表达来抑制IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应和凋亡。