米非司酮对子宫肌层组织雌激素 孕激素受体的影响研究

子宫肌瘤是卵巢甾体激素依赖性肿瘤,在子宫肌瘤组织中,已发现有雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR),并明显高于子宫肌层组织。40岁以上的妇女患有子宫肌瘤的发生率约占30%左右。米非司酮是一种新型的抗孕激素,无雌激素、孕激素、雄激素以及抗雌激素活性。米非司酮可缩小子宫肌瘤的体积。本研究讨论米非司酮对于宫肌瘤和子     

两种不同剂量米非司酮治疗子宫肌瘤临床观察

目的 探讨不同剂量米非司酮治疗子宫肌瘤对子宫肌瘤体积的影响以及对肌瘤组织中雌、孕激素受体(ER、PR)的影响,进一步了解米非司酮治疗子宫肌瘤的临床效果及可能的治疗机制.方法 将90例临床诊断为子宫肌瘤、有手术指征、无内科合并症的患者随机分为对照组、短期大剂量组(A组)、长期小剂量组(B组).于服药前后B超测量子宫肌瘤的体积,用免疫组织化学方法检测切除的子宫肌瘤标本中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)水平.结果 ①两服药组服药后肌瘤体积较服药前明显缩小, 肌瘤体积变化有统计学意义,B组体积变化更明显;②对照组肌瘤组织中ER、PR均呈高表达,A组肌瘤组织中PR、ER表达均下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);B组肌瘤组织中PR、ER表达下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),两服药组间比较,PR、ER表达差异有统计学意义(P<0.05).结论 ①短期大剂量及长期小剂量米非司酮均可使子宫肌瘤明显缩小,但长期小剂量效果更明显.②降低肌瘤组织中PR、ER表达是米非司酮治疗子宫肌瘤的重要机制之一.     

子宫单发与多发肌瘤雌、孕激素受体表达差异

目的探讨雌激素受体、孕激素受体在子宫多发、单发肌瘤与周围正常肌层在周期性变化中的表达情况。方法采用SP免疫组织化学染色法测定46例子宫单发肌瘤、50例子宫多发肌瘤组织与周围正常肌层组织的ER、PR在周期性变化中的表达水平。结果子宫肌瘤ER、PR表达水平高于其周围正常肌层。子宫多发肌瘤ER、PR表达水平高于单发肌瘤。结论子宫多发肌瘤较单发肌瘤ER、PR表达水平高,对子宫单发、多发肌瘤患者,应用激素类药物或抑制剂时不能统一用量,治疗时尽量减慢或抑制子宫肌瘤生长,从而使患者免受手术之苦。     

妇科再造丸对子宫肌瘤模型大鼠的保护作用研究

目的:研究妇科再造丸(FKW)对子宫肌瘤模型大鼠的保护作用。方法:实验分为6组,即正常对照、模型、桂枝茯苓胶囊(0.3g·kg-1)与FKW高、中、低剂量(1.12、0.56、0.28g·kg-1)组。雌二醇(E2)、孕激素(P)负荷法复制大鼠子宫平滑肌瘤样增生模型,观察子宫组织病理改变,检测子宫组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达与血清中E2、P水平。结果:与正常对照组比较,模型大鼠较正常大鼠子宫明显增大,血清中E2、P水平显著升高,子宫组织中ER、PR的表达显著增强(P<0.01);与模型组比较,FKW高、中、低剂量组血清中E2、P水平显著降低,FKW高剂量组平滑肌细胞ER、PR的表达显著减弱(P<0.05或P<0.01)。结论:FKW有抗大鼠子宫平滑肌瘤样增生的作用,其机制可能与调节血中E2、P水平,抑制子宫平滑肌细胞ER、PR的表达有关。     

雌激素受体、孕激素受体与子宫肌瘤生长的关系

子宫肌瘤是妇科常见的良性肿瘤,肌瘤生长速度和体积与临床症状密切相关,月经过多、并发贫血、腹痛及压迫症状是选择手术最常见的原因。雌激素、孕激素是肌瘤发生、发展中的主要原因。近年来随着深入研究,认识到一些激素与生长因子如雌、孕激素受体（ER、PR）、血管内皮生长因子（WEGF）、胰岛素生长因子受体（IGFIRα）在子宫肌瘤生长中也发挥着重要作用。本文就通过ER、PR在子宫肌瘤中的含量探讨其在子宫肌瘤生长中的影响。     

子宫肌瘤的药物治疗

子宫肌瘤为女性生殖器官中最常见的一种良性肿瘤,主要是由子宫平滑肌细胞增生而成。其中有少量纤维结缔组织。子宫肌瘤多见于30-50岁的妇女,以40～50岁发生率最高。20岁以下少见。绝经后肌瘤逐渐萎缩。子宫肌瘤是激素依赖性的肌瘤,其发生、发展过程与卵巢甾体激素密切相关,尤其是雌、孕激素。此外,生长因子也促进肌瘤生长。研究表明肌瘤中的E2浓度、雌激素受体（ER）浓度、孕激素受体（PR）浓度及ERmRNA＼PRmRNA含量高于周围正常肌组织。基于上述理论,通过应用具有抑制卵巢甾体激素分泌或抑制期作用的制剂,可使肌瘤缩小,达到减轻症状的目的。有可选药物如下。     

米非司酮对子宫肌瘤组织中bcl-2、P53和雌、孕激素受体的影响

目的研究米非司酮对子宫肿瘤细胞内凋亡调控基因bcl-2、P53和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的影响.方法应用免疫组化技术测定12例经米非司酮治疗的子宫肌瘤组织中bcl-2、P53和ER、PR的阳性表达率,并以12例未用药的子宫肌瘤患者作对照.结果服药组子宫肌瘤组织中bcl-2、PR、ER阳性表达率较对照组显著下降(P＜0.01),P53阳性表达率两组差异无显著性(P＞0.05).结论米非司酮可明显降低肌瘤组织中ER、PR,而且可以抑制肌瘤细胞内bcl-2表达,从而诱导子宫肌瘤平滑肌细胞凋亡.     

中药复方联合三苯氧胺对实验大鼠乳腺增生组织及ER、PR表达的影响

目的探讨中药联合三苯氧胺(TAM)周期治疗大鼠乳腺增生的疗效及作用机理。方法将大鼠随机分为空白对照组、疾病模型组、三苯氧胺组、中药复方组、联合用药组5组,经雌二醇及孕酮刺激建立乳腺增生模型。光镜下观察乳腺组织病理学变化,免疫组化法测定雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)阳性表达强度。结果中药联合TAM治疗大鼠乳腺增生,可使乳腺小叶腺泡数明显减少、腺泡腔缩小及腺导管扩张程度减轻,ER、PR的阳性表达强度明显抑制,其疗效优于单纯中药和TAM组(P<0.05或0.01)。结论中药联合TAM治疗可降低实验大鼠乳腺组织中ER、PR含量,使其对雌激素的敏感性下降,对大鼠乳腺增生有明显的抑制作用。     

子宫肌瘤患者雌激素受体与孕激素受体水平变化特点

目的：分析子宫肌瘤患者雌激素受体（ ER）、孕激素受体（ PR）变化特点。方法随机选取子宫肌瘤患者100例作为研究组,另选取体检健康的妇女100例作为对照组。采用放射免疫法和免疫组织化学法测量2组血清和组织中的ER、PR水平。结果2组血清ER、PR水平比较,差异均无统计学意义（P＞0．05）。肌瘤组患者ER、PR在子宫肌瘤组织中的表达比在其正常肌层组织中的表达强,差异有统计学意义（ P＜0．05）。直径＞5cm的肌瘤中ER、PR的表达强度均高于直径≤5cm的肌瘤,差异有统计学意义（P＜0．05）。 ER和PR在不同部位子宫肌瘤中的表达通过Wilcoxon秩和检验,其差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 ER与PR在子宫肌瘤中的表达与其直径有关,其直径对于评价子宫肌瘤内分泌治疗有价值,ER、PR水平有望成为子宫肌瘤病因学治疗的新方向。     

富半胱氨酸蛋白61与雌激素受体、孕激素受体在子宫肌瘤中的表达差异

目的探讨富半胱氨酸蛋白61、雌激素受体与孕激素受体在子宫肌瘤中的各自表达情况和相互关系,为明确子宫肌瘤病因提供科学依据。方法选取入院治疗子宫肌瘤并行全切术的45例患者作为试验组,采用免疫组织化学法,检测CYR61、ER、PR在子宫全切标本肌瘤组织中的表达,对照组为相应样本的非瘤平滑肌正常组织。结果 ER和PR在子宫全切标本肌瘤组织中的表达明显高于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01);PR的表达水平高于ER,差异有显著统计学意义(P<0.01);CYR61在子宫全切标本肌瘤组织中的表达明显低于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论 CYR61、ER和PR表达与子宫肌瘤的发生有密切关系,三者及其相互作用可能是促进子宫肌瘤继续发展的重要因素。     

Measurement of GABAA receptor function in rat cultured cerebellar granule cells by the Cytosensor microphysiometer

1. γ-Aminobutyric acid (GABA), acting via the GABA_A receptor, increased the extracellular acidification rate of rat primary cultured cerebellar granule cells, measured by the Cytosensor microphysiometer.
2. The optimal conditions for the measurement of GABA_A receptor function in cerebellar granule cells by microphysiometry were: cells seeded at 9–12×10⁵ cells/transwell cup and maintained in vitro for 8 days, GABA stimulation performed at 25°C, with a stimulation time of 33 s.
3. GABA stimulated a concentration-dependent increase in the extracellular acidification rate with an EC₅₀ of 2.0±0.2 μM (mean±s.e.mean, n=7 experiments) and maximal increase (E_max) over basal response of 15.4±1.2%.
4. The sub-maximal GABA-stimulated increase in acidification rate could be potentiated by the 1,4-benzodiazepine, flunitrazepam (100 nM). The 10 nM GABA response showed the maximal benzodiazepine facilitation (GABA alone, 1.4 μV s⁻¹, GABA+flunitrazepam, 3.8 μV s⁻¹, mean increment over basal, n=7).
5. The GABA-stimulated increase in acidification rate was inhibited by the GABA_A antagonist, bicuculline (100 μM) (90% inhibition at 1 mM GABA).
6. The results of this study show that activation of GABA_A receptors in rat cerebellar granule cells caused an increase in the extracellular acidification rate; an effect which was potentiated by benzodiazepines and inhibited by a GABA_A receptor antagonist. This paper defines the conditions and confirms the feasibility of using microphysiometry to investigate GABA_A receptor function in primary cultured CNS neurones. The microphysiometer provides a rapid and sensitive technique to investigate the regulation of the GABA_A receptor in populations of neurones.

     

经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑

目的:研究经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑中雌二醇α受体和孕酮受体表达的影响。方法:以情志刺激多因素法复制经前期综合征肝气逆证大鼠模型,经前平颗粒预防给药(10 g.kg-1,灌胃给药,连续5 d),采用免疫荧光细胞化学技术结合流式细胞仪检测大鼠下丘脑中雌二醇α受体和孕酮受体的蛋白表达量。结果:模型组大鼠下丘脑中雌二醇α受体和孕酮受体蛋白表达量与正常组相比显著降低(P<0.01),经前平颗粒组下丘脑中雌二醇α受体和孕酮受体蛋白表达量较模型组显著升高,接近于正常水平。结论:经前平颗粒可以上调下丘脑雌二醇α受体和孕酮受体蛋白表达水平,这可能是其治疗经前期综合征肝气逆证的作用机制之一。     

枳术健胃颗粒的制备及HPLC法测定辛弗林的含量

目的:建立枳术健胃颗粒的制备方法及制剂中辛弗林的HPLC含量测定方法。方法:正交试验设计优化制备工艺,样品以55%的乙醇回流提取,采用Zobax-C18(4.6mm×200mm)色谱柱,甲醇-水(0.02%磷酸及0.1%十二烷基磺酸钠)(55:45)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为224nm。结果:枳术健胃颗粒中辛弗林的标准曲线方程为y=36.0756+226.5055x,r=0.9998,线性范围为0.24～0.96mg,平均回收率99.9%。结论:制备工艺可行,HPLC方法可用于枳实中辛弗林的质量控制。     

NAAG fails to antagonize synaptic and extrasynaptic NMDA receptors in cerebellar granule neurons

The peptide transmitter N-acetylaspartylglutamate (NAAG) selectively activates the group II metabotropic glutamate receptors. Several reports also suggest that this peptide acts as a partial agonist at N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors but its putative antagonist effects have not been directly tested. To do this, we used whole cell recordings from cerebellar granule cells (CGC) in culture that allow the highest possible resolution of NMDA channel activation. When CGC were activated with equimolar concentrations of NMDA and NAAG, the peptide failed to alter the peak current elicited by NMDA. Very high concentrations of NAAG (100-200 microM) did not significantly reduce the current elicited by 10 microM NMDA or 0.1 microM glutamate, while 400 microM NAAG produced only a very small (less than 15%) reduction in these whole cell currents. Similarly, NAAG (400 microM) failed to significantly alter the average decay time constant or the peak amplitude of NMDA receptor-mediated miniature excitatory post-synaptic currents (mEPSCs). We conclude that high concentrations of the peptide do not exert physiologically relevant antagonist actions on synaptic NMDA receptor activation following vesicular release of glutamate. As an agonist, purified NAAG was found to be at least 10,000-fold less potent than glutamate in increasing "background" current via NMDA receptors on CGC. Inasmuch as it is difficult to confirm that NAAG preparations are completely free from contamination with glutamate at the 0.01% level, the peptide itself appears unlikely to have a direct agonist activity at the NMDA receptor subtypes found in CGC. Recent reports indicate that enhancing the activity of endogenous NAAG may be an important therapeutic approach to excitotoxicity and chronic pain perception. These effects are likely mediated by group II mGluRs, not NMDA receptors.     

Anti-apoptotic effect of memantine against staurosporine- and low-potassium-induced cell death in cerebellar granule cells: a development-dependent effect

Memantine, a NMDA receptor antagonist used in several experimental models of neuronal cell injury, is a neuroprotective agent that can attenuate neuronal apoptosis connected with over-stimulation of NMDA receptors. In the present study, we evaluated the impact of memantine on apoptosis in primary cerebellar granule cell (CGC) cultures at 7 and 12 day in vitro (DIV). Cell death was induced by staurosporine (St, 0.5 μM) or by decreasing the level of potassium in the culture medium (LP, 5 mM KCl). Both treatments induced cell death in CGC with higher cell-damaging effects at 12 DIV and 7 DIV neurons for St and LP, respectively._Memantine (0.1–2 μM) partially attenuated St-induced apoptosis only in 7 DIV CGC as assessed by DNA fragmentation and LDH release, but not caspase-3 activity. During LP-induced apoptosis, memantine decreased LDH release and DNA fragmentation, but not affected caspase-3 activity in 7 and 12 DIV CGC. Interestingly, we found no beneficial effects of other NMDA antagonists, including a competitive antagonist such as AP-5 (100 μM) and an uncompetitive antagonist such as MK-801, (1 μM). In conclusion, our data suggest that the anti-apoptotic effects of memantine in CGC are developmentally regulated and its neuroprotective action occurs through an NMDAR-independent mechanism.     

正交试验优选咽炎宁颗粒提取工艺

目的优选咽炎宁颗粒的提取工艺。方法应用高效液相法测定射干苷的含量;采用正交设计法考察煎煮次数、煎煮时间、加水量三因素对水提工艺提取成分提取率的影响;考察醇沉浓度、醇沉前水提液相对密度、醇沉时间三因素对醇沉工艺有效成分含量的影响。结果加水量对水提工艺有显著影响(P<0.05);醇沉浓度对醇沉工艺有显著影响(P<0.05)。结论最佳水提醇沉工艺为药材加10倍量水,煎煮2次,每次1.5 h;水提液浓缩至相对密度为1.15,加入乙醇使含醇量至60%,静置48 h。     

尿塞通颗粒质量标准研究

目的 建立尿塞通颗粒的质量标准.方法 采用TLC法鉴别方中黄柏、陈皮、赤芍.用HPLC法测定丹参酮ⅡA的含量,采用Waters C18柱,以甲醇水(85∶15)为流动相,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为270 nm.结果 TLC鉴别:斑点清晰,空白对照无干扰.HPLC测定:丹参酮ⅡA在0.048～1.92 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.73%,RSD=1.37%(n＝5).结论 该研究建立的TLC和HPLC方法专属性强、灵敏度高、重现性好,可用于尿塞通颗粒的质量控制.     

胃康宁颗粒质量控制方法研究

目的制定胃康宁颗粒的质量标准.方法采用TLC对胃康宁颗粒中黄芪、黄连、陈皮、白及进行定性鉴别;并应用TLCS对胃康宁颗粒中黄芪甲苷进行了含量测定.测定波长λs=530nm,参比波长λR=700nm,展开剂为氯仿-甲醇-水(13:6:2).结果黄芪甲苷在0.5～5.2μg内线性关系良好,平均回收率为97.09%,RSD=1.42%.结论该法简便、灵敏、重现性好.可用于胃康宁颗粒的质量控制.     

感冒止咳颗粒质量标准研究

目的建立感冒止咳颗粒质量标准。方法采用TLC法对制剂中黄芩、金银花、葛根、连翘进行薄层色谱鉴别;采用HPLC法测定制剂中黄芩苷的含量。结果TLC可检出黄芩、金银花、葛根、连翘;黄芩苷含量在1.49μg.mL-1~149.00μg.mL-1范围内线性良好,Y=3372.4X-2.8342(r=1.0000),平均回收率为101.3%,RSD为0.68%。结论本法简便、准确、可靠、重复性好,可用于感冒止咳颗粒的质量控制和评价。     

榛苓颗粒质量标准研究

目的为榛苓颗粒建立质量标准。方法薄层色谱法对榛苓颗粒中的大黄、人参、陈皮、穿山甲四味药材进行定性分析;高效液相色谱法测定大黄中大黄素和大黄酚的含量。填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶;流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(85∶15);检测波长254 nm。理论塔板数按大黄素峰计算应高于3 000。流速:1 m L/min。结果大黄、人参、陈皮、穿山甲四味药的薄层色谱图斑点清楚可见,有很好的分离效果。当大黄素浓度在0.321 6~25.728μg/m L范围内,大黄酚浓度在0.303 2~24.256 0μg/m L范围内时,线性关系良好。精密度、稳定性、重现性试验的RSD<3%。大黄素的加样回收率为101.17%,RSD值为1.39%;大黄酚的加样回收率为101.39%,RSD值为1.30%。加样回收率良好。结论此方法简单可行,重现性好,针对性强,可以很好地控制榛苓颗粒的质量。