复方丹参对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡及诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨大鼠脊髓损伤后应用复方丹参对细胞凋亡及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法:成年大鼠随机分为正常组、脊髓损伤后应用复方丹参组(组)和应用生理盐水对照组(组),损伤后不同AB时间点(8h、1d、3d、7d、14d、28d)处死大鼠,用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞,用免疫组化染色检测iNOS阳性细胞。结果:HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变A组明显轻于B组。A、B两组均发现凋亡细胞及iNOS表达,神经细胞凋亡指数及iNOS表达均为B组>A组(P<0.01)。结论:复方丹参能抑制大鼠脊髓损伤后细胞凋亡及iNOS表达。     

大鼠脊髓损伤中的细胞凋亡及甲基强的松龙的干预作用

目的：探讨脊髓损伤（SCI）继发损伤机制,研究损伤脊髓细胞的凋亡及其意义,观察甲基强的松龙（MP）对细胞凋亡的影响。方法：使用改良Allen法制作大鼠急性SCI模型,实验分3组,假损伤（脊髓未受打击）,损伤组及MP治疗组,采用HE,荧光Hoechst 33342,TUNEL(末端脱氧核苷转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸生物素缺口末端标记技术）等技术观察SCI后4h,8h,3d,7d,14d,21d及28d时损伤中心及邻近节段脊髓细胞的凋亡,治疗组损伤后30min给予大剂量MP,比较MP治疗组与损伤组脊髓细胞凋亡的变化,同时平行观察大鼠神经学和组织学恢复情况及两组神经丝蛋白（NF）含量的变化。结果：假损伤组各检测方法未见脊髓细胞凋亡,损伤组大鼠急性SCI后1d开始出现脊髓细胞凋亡,3d达高峰,自损伤中心向头尾端递减分布,持续21d,MP治疗组在伤后3d及7d凋亡脊髓细胞较损伤组显著减少,神经学恢复及组织学评分较损伤组有显著性提高,结论：凋亡是SCI后脊髓神经元死亡的一种重要方式,在继发性损伤中起极为重要的作用。MP的治疗作用可能与其干预SCI后细胞凋亡有关。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠慢性压迫性脊髓损伤后神经细胞凋亡影响的实验研究

目的:观察大剂量甲基强的松龙对大鼠慢性压迫性脊髓损伤后神经细胞凋亡及神经功能恢复的影响。方法:将60只同龄Wistar大鼠,置入后路渐进式压迫装置,制作成中度慢性压迫性脊髓损伤模型。随机分为大剂量甲基强的松龙治疗组(A组,30只)和单纯慢性压迫性脊髓损伤组(B组,30只)。应用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导dUTP标记(TUNEL)技术,分别于慢性压迫性脊髓损伤后1、3、7、14、28d对脊髓损伤区进行细胞凋亡检测。结果:A、B两组均发现细胞凋亡,两组细胞凋亡率比较,差异有显著性(P<0.01和0.05)。治疗组细胞凋亡的减少与神经功能的恢复相一致。结论:慢性压迫性脊髓损伤可导致细胞凋亡,大剂量甲基强的松龙对神经细胞凋亡可起到抑制作用。     

大剂量甲基强地松龙治疗急性脊髓损伤

如果询问医生治疗颅脑或脊髓损伤 (ＳＣＩ)有没有积极有效的方案 ,大多数的回答是损伤的轻重不同 ,重者是不可逆的。急性脊髓损伤后其继发性损伤对神经组织的破坏起着重要作用。直至目前已成功进行了多项临床试验 ,最引人注目的是第二次 (美国 )全国急性脊髓损伤研究(ＮＡＳＣＩＳⅡ )结果的发表 ,这可以说是针对脊髓创伤后继发性损伤进行治疗的二级干预研究的重要里程碑 ,它使得脊髓损伤后神经功能大多预后不良的状况得到了改善。1　脊髓损伤后的组化改变绝大多数的急性ＳＣＩ并不是横断性脊髓损伤 ,而是脊髓组织挫裂伤、出血、水肿及微循…     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤预防保护作用的研究

目的：探讨大剂量甲基强的松龙对急性脊髓损伤大鼠神经功能的预防保护作用。方法：采用Allen‘s重物打击模型，大鼠随机分为对照组、脊髓损伤组、预防使用大剂量甲基强的松龙组。在脊髓损伤后24h和72h对大鼠进行神经功能评分(Tarlov评分)，对损伤部位脊髓行病理形态学、超微结构及神经细胞凋亡观察结果：与脊髓损伤组相比，预防使用大剂量甲基强的松龙组大鼠损伤脊髓的病理形态及超微结构改善：Tarlov评分明显提高；神经细胞凋亡明显减少。结论：预先使用大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤有预防性保护作用。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠损伤脊髓中神经生长因子的影响

神经生长因子是神经系统最重要的生物活性分子之一，其作用广泛，效应细胞多达十余种。用新和素－生物素化酶联免疫吸附测定术检测大鼠正常脊髓、损伤脊髓以及大剂量甲基强的松龙治疗的损伤脊髓中神经生长因子的变化。     

脑源性神经生长因子转基因细胞移植和大剂量甲基强的松龙对脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的：探讨大鼠脊髓损伤后腺病毒介导的脑源性神经生长因子（AxCA-BDNF）体外转基因成肌细胞移植和静脉内注射大剂量甲基强的松龙（MP）对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响。方法：120只Wistar大鼠分为：脊髓挫伤组（A组），脊髓挫伤后AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植组（B组），脊髓挫伤后静脉内注射大剂量MP治疗组（C组），脊髓挫伤后同时应用AxCA-BDNF和MP组（D组）。手术后1、3、7、14、28d用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况，并用计算机图像分析技术对脊髓损伤区细胞凋亡（TUNEL法）和Bcl-2蛋白表达（免疫组化法）进行定量分析。结果：四组中均发现凋亡细胞及Bcl-2蛋白阳性表达细胞．图像分析发现四组凋亡细胞核数为A组〉B组〉C组〉D组；Bcl-2免疫反应阳性细胞表达顺序为D组〉C组〉B组〉A组。大鼠后肢功能恢复和电生理检查也有类似的变化趋势。结论：体外转基因成肌细胞移植和大剂量MP都能抑制大鼠脊髓损伤后的细胞凋亡，促进大鼠后肢功能恢复，两者联合应用具有协同作用。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

脊髓损伤后功能恢复不良的主要原因是原发损伤后一系列进行性继发损害导致了神经元不可逆的结构改变。甲基强的松龙（MP）具有多方面的神经保护作用，对急性脊髓损伤的疗效已被大量研究证实，不仅可以减轻脊髓水肿，而且能阻止或减轻脊髓神经细胞凋亡。我们应用大鼠急性脊髓损伤（SCI）动物模型，观察大剂量甲基强的松龙对损伤脊髓神经细胞凋亡的影响，并比较不同时间窗用药效果的差异。     

大剂量甲基强的松龙冲击疗法治疗急性脊髓损伤

Youg[1](1982)应用大剂量甲基强的松龙(Methyl-prednisolone)静脉内注射治疗实验性动物急性脊髓损伤发现,该药可改善损伤后脊髓血流和微血管灌注。Hall[2]用大剂量可的松动物实验性治疗得出类似结果。Bracken等[3]在近期病人随机对比研究中证明,在急性脊髓损伤8h内给予大剂量甲基强的松龙可使神经功能得到改善,但随访时间短。国内尚未见有关报道。本院从1989年1月～1991年12月,3年间共应用大剂量甲基强的松龙治疗伤后48h内入院的急性脊髓不全损伤20例,收到较好效果。本文着重分析给药时间与疗效的关系。1临床资料 本组20例,男15例,女5例;…     

甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A表达的影响

目的：探讨大剂量甲基强的松龙（MP）对急性脊髓损伤（SCI）大鼠脊髓组织中Nogo-A蛋白表达的影响。方法：将56只成年SD大鼠分为正常对照组（A组,n=8）、急性脊髓损伤组（B组,n=24）和急性脊髓损伤后大剂量MP治疗组（C组,n=24）,C组在损伤后早期从尾静脉注射大剂量MP治疗。分别在术后3、7、14d对B、C组大鼠后肢运动功能行BBB评分,再在各时间点处死动物,取受损节段脊髓行HE染色及免疫组化染色观察形态学变化和Nogo-A在脊髓组织中的分布特点;同时应用Western-blot方法测定各组相应时间点Nogo-A表达量,并与A组比较。结果：B、C组大鼠在损伤后各个时间点后肢运动功能均有一定程度的恢复,Nogo-A蛋白在各组大鼠脊髓组织中均呈阳性表达,分布于神经细胞的细胞浆和脊髓神经纤维周围呈包裹神经纤维的状态。B、C组各个时间点Nogo-A表达均显著高于A组（P〈0.05）,7d时最高,14d时的表达量仍高于正常组;C组在各个时间点的表达量显著低于B组,差异有显著性（P〈0.05）。结论：大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A显著升高,早期应用大剂量MP对Nogo-A的表达具有明显的抑制作用。     

大鼠急性脊髓损伤后细胞凋亡的时空分布特点

目的：研究急性脊髓损伤后神经细胞凋亡的分布特别及其意义。方法：Wistar雌性大白鼠54只，使用改良Alien法制作急性脊髓损伤模型，分别于术后l、4、8、24、72h、7、14及2ld处死取材(每时间点n=6)。应用HE染色及凋亡细胞原位末端标记法(TUNEL)对脊髓组织进行标记。结果：损伤后4h，在损伤段及邻近段可见末端标记的阳性神经细胞，损伤段灰质中阳性细胞数24h达高峰，72h白质中阳性胶质细胞数量达高峰。相邻节段阳性细胞数量在72h达高峰。灰质中神经元及胶质细胞均有阳性表达，但以胶质细胞为主。结论：脊髓损伤后神经细胞凋亡是继发损伤期的重要病理变化，并有其时相和空间分布特点.     

bFGF对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

目的 :探讨大鼠脊髓损伤后应用碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)对脊髓损伤区细胞凋亡的影响。方法 :利用Allen氏WD(weightdrop ,WD)技术 ,以 10 g× 2 .5cm致伤力造成SD大白鼠T8脊髓损伤模型 ,并于损伤平面以下蛛网膜下腔置细塑料导管。bFGF治疗组 (A组 )分别于术后即刻 1、2、4、8、12、2 4及 48h经导管注入bFGF溶液 2 0 μl(含bFGF10 0 u) ,以后每周经导管注入 2 0 μlbFGF ;对照组 (B组 )则在同时间注入等量生理盐水。损伤后 1、3、7、14、2 8d对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测 (TUNEL) ,采用计算机图像分析技术进行定量分析。结果 :A、B两组中均发现凋亡细胞 ,B组细胞凋亡率大于A组。结论 :bFGF能抑制脊髓损伤后脊髓损伤区的细胞凋亡。     

脊髓损伤后凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达及意义

目的 :观察探讨大白鼠脊髓损伤后细胞凋亡及调控基因Bcl -2、Bax的表达及意义。方法 :2 8只SD大鼠随机分为 7组 ,Allen′s法致伤脊髓 ,于术后 4、 8、 2 4、 48、 72、 168h采集脊髓标本 ,1组作为对照组 ,分别行HE染色、TUNEL染色和免疫组化技术检测Bcl -2、Bax的表达。结果 :TUNEL染色显示有神经元和胶质细胞凋亡。Bcl-2在术后 4h开始出现阳性表达 ,2 4h达高峰。Bax术后 4h出现阳性表达 ,8h时达高峰。结论 :脊髓损伤后存在神经元和胶质细胞的凋亡 ,Bcl-2、Bax基因对调控细胞凋亡可能具有重要作用。     

bFGF对大鼠脊髓损伤后c-fos mRNA表达的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF)对大鼠脊髓损伤后c-fosmRNA表达的影响。方法：采用Allen's法造成大鼠Ts脊髓损伤模型,用原位杂交方法检测神经元c-fosmRNA的表达。结果：脊髓损伤后神经元c-fosmRNA表达较正常末损伤神经元显著增加,表达高峰出现在损伤后1h,bFGF能显著抑制损伤后神经元c-fosmRNA的异常表达。结论：应用外源性bFGF抑制了脊髓损伤后的c-fos基因表达,保护了神经元并抑制了继发性损害的发生,是bFGF保护脊髓损伤可能的作用机理。     

碱性成纤维细胞生长因子对牵张性脊髓损伤后一氧化氮合酶活性的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对牵张性脊髓损伤后一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,探讨其对脊髓损伤的保护作用。方法大鼠脊髓T13~L2经牵张损伤,皮层体感诱发电位监测P1-N1波幅下降至术前波幅70%后,于损伤平面以下经蛛网膜下腔置细导管,治疗组分别于术后即刻0·5、1、2、3、4h经细导管注入bFGF溶液20μl(含bFGF20μg),对照组在相同时间注入等量生理盐水,采用放射强度测定法测定一氧化氮合酶(NOS)含量。结果正常组NOS活性为3·92±1·31,脊髓损伤后各时相点生理盐水组较正常组NOS活性显著增加,而bFGF治疗组NOS活性明显下降,与生理盐水组比较差异有显著性意义(P<0·01)。结论bFGF能够抑制脊髓损伤后NOS的活性,减轻脊髓继发性损害,从而保护脊髓组织。     

体外转基因成肌细胞移植对大鼠损伤脊髓细胞凋亡的影响

目的：探讨大鼠脊髓损伤后胚胎脊髓和腺病毒介导的脑源性神经生长因子（AxCA-BDNF)体外转基因成肌细胞移植对大鼠脊髓细胞凋亡的影响。方法：将动物分为：大鼠脊髓半切洞损伤明胶海绵填充组（A组）,大鼠脊髓半切洞损伤应用胚胎脊髓移植组（B组）,脊髓半切洞损伤损伤AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植组（C组）大鼠脊髓半切洞损伤后应用胚胎脊髓和AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植组（D组）。手术后1、3、7、14、28d应用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况,对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测（TUNEL）以及Bcl-2蛋白表达的测定（免疫组化法）。采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果：A、B、C、D四组中均发现凋亡细胞及Bcl-2蛋白阳性表达细胞,图像分析发现,各组凋亡细胞核为A＞B＞C＞D;Bcl-2免疫反应阳性细胞表达顺序为D＞C＞B＞A,Bcl-2免疫反应阳性细胞的表达与大鼠后肢功能恢复有同样的变化趋势。结论：大鼠胚胎脊髓和体外转基因成肌细胞移植能抑制脊髓损伤后的细胞凋亡。     

腺苷在继发性脊髓损伤中的作用及其机制

目的 通过观察大鼠脊髓损伤后内源性腺苷含量的变化,以及外源性腺苷地脊髓损伤后神经功能的影响,探讨腺苷在髓继发性损伤中的作用。方法 采用大鼠Ｔ１３脊髓腹侧压迫模型,用微透析技术每２０分钟连续收集脊髓损伤后脊髓组织细胞上液,用高效液相色谱仪紫外检测法检测细胞外液腺式的含量;伤前１４分钟蛛网膜下腔给予非特异性腺苷受体激动剂２－氯腺苷,观察伤后神经功能评分、倾斜平面临界角和组织学变化。结果 脊髓损伤后腺苷     

脊髓损损后一氧化氮合酶活性变化的动态观察及其基因表达

目的：观察一氧化氮合酶在脊髓损伤中的变化及其机制。方法：用液压致伤装置造成大鼠脊髓中、重度损伤，伤后不同时间分别测量损伤区NOS活性。结果：显示脊髓损伤后早期NOS活性一过性升高，而后又迅速降低，其升高、降低幅度与损伤严重程度相一致，提示一氧化氮参与继发性脊损伤病理过程NOSmRNA原位杂交法，发现脊髓中度损伤后30minNOSmRNA的表达水平没有明显变化。结论：提示脊髓损伤早期NOS活性增高主要由于刺激因素如钙离子等使没有发挥活性的NOS激活，使酶蛋白总量增加引起的。