长春花及银杏植物细胞悬浮培养对青蒿素的生物转化研究

目的：对抗疟药物青蒿素（Ⅰ）进行了生物转化研究。方法：利用长春花及银杏植物细胞悬浮培养细胞进行生物转化。用硅胶柱色谱进行产物的分离，波谱方法鉴定产物的结构。结果：此两种植物悬浮细胞体系均能将青蒿素转化成3α-羟基去氧青蒿素（Ⅱ）。结论：此两种植物悬浮细胞体系均有有效转化青蒿素。     

人参根培养物使酚类化合物糖基化

用细胞悬浮培养进行生物转化是对有治疗活性的化合物结构改造的一种重要手段。已经完成了大量的用植物细胞培养进行生物转化的研究。植物培养细胞具有能使酚类化合物转化为其葡萄糖甙或龙胆二糖甙的能力。植物培养细胞对于小分子量的和少数取代基(如羟基)的化合物具有转葡萄糖作用的     

桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β介导的bEnd.3 细胞PGE2代谢通路的影响

目的:研究桂枝汤及其生物转化模拟产物对白细胞介素-1β(IL-1β)介导的小鼠脑微血管内皮细胞株(bEnd.3)细胞前列腺素E2(PGE2)代谢通路的影响。方法:制备了桂枝汤及桂枝汤生物转化模拟产物的含药血清(分别设五个浓度组),采用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫印记法(Western blot),观察桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β刺激的bEnd.3细胞磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶p38(p-p38MAPK)、胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)、分泌型磷脂酶A2(sPLA2)、环氧合酶2(COX-2)、前列腺素E合成酶(PGES)、15-羟基前列腺素脱氢酶(15-PGDH)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)以及前列腺素E2(PGE2)分泌及表达的影响。结果:IL-1β作用于细胞10 h后,各项指标均明显上调,与对照组比较,P<0.01。除质量终浓度为2.5%的桂枝汤含药血清对PGES,sPLA2;终浓度为1%的模拟药对PGES;终浓度为2.5%的含药血清对PGES,sPLA2,cPLA2作用不显著外,其他各浓度组与模型组比较均出现显著性差异。结论:桂枝汤及其生物转化模拟产物对IL-1β刺激bEnd.3细胞合成PGE2的代谢酶系统有不同程度的抑制作用,从而降低了前炎症介质和中枢发热介质PGE2的释放和分泌。结果提示,桂枝汤及其生物转化模拟产物对脑微血管内皮细胞分泌PGE2具有相似的药效,为模拟产物的应用和开发提供了实验支持。     

掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统对鬼臼毒素的生物转化研究

目的 对鬼臼毒素的生物转化进行研究.方法 利用掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统进行生物转化.采用色谱技术和波谱手段对转化产物进行分离鉴定.结果 加入鬼臼毒素对掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统的pH值无明显影响;两种组培系统均能转化鬼臼毒素.在本实验条件下,细胞悬浮系统使73.8%的鬼臼毒素发生了转化,根培养系统中使56.3%的鬼臼毒素发生了转化.两种系统对鬼臼毒素的转化产物不同,前者只转化生成鬼臼苦素,后者转化生成表鬼臼毒素等多种化合物.结论 掌叶大黄细胞悬浮系统和根培养系统均能有效转化鬼臼毒素.     

药用活性成分的植物酶生物转化研究进展

利用植物酶进行生物转化已成为药用活性成分研究的重要手段。植物酶的多样性、特异性为药用活性成分生物转化提供了可能,其潜力有待进一步开发,并将在医药产业中得到应用。综述了植物酶生物转化的发展概况,介绍了植物转化酶的提取、纯化及固定化方法,重点归纳了植物酶生物转化的类型及活性产物。     

转基因何首乌毛状根生物转化青蒿酸的研究

目的利用转基因何首乌Polygonum multiflorum毛状根对青蒿酸进行生物转化研究,分离鉴定其转化产物。方法何首乌毛状根预培养7 d,投入青蒿酸,培养2 d,终止反应,利用TLC和GC-MS对转化产物进行检测,利用硅胶柱、ODS反相柱和Sephadex LH-20柱色谱对转化产物进行分离纯化,并根据理化数据和波谱技术鉴定转化产物的化学结构。结果青蒿酸在何首乌毛状根中发生了转化反应,经GC-MS检测可生成多种青蒿素类化合物。分离鉴定了2个转化产物:异青蒿内酯(1)和3β-羟基青蒿酸(2),利用GC-MS鉴定了另外2个转化产物:去氧青蒿素B(3)和青蒿内酯(4)。结论本实验首次利用转基因植物器官对青蒿酸进行生物转化研究,得到3个青蒿素类化合物和1个羟基化产物。该研究一方面填补了转基因植物器官对青蒿素类化合物生物转化的空白,另一方面也丰富了转基因何首乌毛状根的化合物转化类型。     

灵芝菌对茯苓药材的生物转化研究

目的：利用灵芝菌对中药材茯苓药材进行固态生物转化,研究转化产物中总多糖和总三萜量的变化情况。方法：采用微波法提取茯苓及转化产物中的总多糖并采用苯酚-硫酸法进行含量测定;采用超声法提取茯苓及转化产物中总三萜并用香草醛-高氯酸法进行含量测定。结果：经生物转化后产物中的总多糖含量明显高于未经转化的茯苓药材（P<0.01）,而总三萜含量明显升高（P<0.01）,说明灵芝菌的生物转化过程改变了茯苓药材的原始特性;茯苓对灵芝生长具有促进作用,表现为灵芝菌丝生长旺盛未受抑制、转化产物中总多糖及总三萜含量显著高于茯苓原药材。结论：利用灵芝菌对中药茯苓进行生物转化来提高总多糖和总三萜含量,具有方法简单、成本低等优点,在中药现代化中有较高的应用价值。     

蟾毒它灵对人胃癌BGC-823细胞的促凋亡作用

目的考察蟾蜍甾烯类化合物的生物转化产物蟾毒它灵(bufotalin)对BGC-823细胞的促凋亡作用,初步探讨其作用机理。方法MTT法检测细胞毒作用、Hoechst染色法和Annexin Ⅴ染色法检测细胞凋亡,免疫印迹杂交法检测裂解形式的caspase-3。结果蟾毒它灵在1μmol/L时对BGC-823细胞的毒性作用达到50%以上,形态学观察和流式细胞仪检测结果显示蟾毒它灵可明显促进BGC-823细胞的凋亡,上调caspase-3的表达。结论蟾毒它灵对BGC-823细胞有明显的促凋亡作用,其作用机理可能通过caspase-3凋亡途径实现。     

玉屏风散生物转化液对免疫抑制小鼠体液免疫功能的影响

目的：利用米曲霉菌株对玉屏风散进行生物转化,探讨玉屏风散生物转化液对免疫抑制小鼠体液免疫功能的影响。方法：用环磷酰胺制备免疫抑制小鼠模型,分别用玉屏风散煎剂和玉屏风散生物转化液灌胃,剂量为9.375g/kg,空白对照组和环磷酰胺组用生理盐水灌胃每天1次,连续给药7d,眼球取血并取脾脏,定量溶血测定法（QHS法）和分光光度法分别检测小鼠脾脏抗体形成细胞和血清溶血素水平;用ELISA法测定小鼠外周血中IL-4和IFN-γ的含量。结果：与环磷酰胺组相比,玉屏风散煎剂组和玉屏风散生物转化液组小鼠抗体形成细胞OD值、血清溶血素HC50升高（P〈0.05）,血清IFN-γ的含量明显升高（P〈0.01）,而IL-4含量无明显差异（P〉0.05）;与玉屏风散煎剂组相比,玉屏风散生物转化液组小鼠抗体形成细胞OD值、血清溶血素HC50及IFN-γ的含量明显升高（P〈0.01）,IL-4含量无明显差异（P〉0.05）。结论：经米曲霉（AS3.951）生物转化的玉屏风散生物转化液比玉屏风散煎剂更能提高免疫抑制小鼠的体液免疫功能。     

药用植物组织和细胞培养技术研究进展(续)

(3) 混合培养技术: 将植物细胞与藻类或细菌等其它生物细胞混合培养,以促进生长,增加产物。例如:Bradley.P将植物细胞和能固氮的绿色海藻共同培养,Zett.W将诱导植物杀菌素的细菌和植物细胞共同培养等。(4) 生物反应器: 植物细胞悬浮培养的最要重问题之一是如何提高生物反应器的效率。当植物细胞干重超过20g/l时,通气和搅拌便是个大问题。同时,植物细胞比微生动物细胞对剪切应力更敏感。例如:鸡叶柠檬藤在发酵生产期间,其临界剪切应力达到800～2000dyn/cm~2。因此需要开发一种合适的生物反应器,既能保证充足供氧,又能将剪切应力减少到最低限度。     

雷公藤固态生物转化产物化学成分的初步研究

目的:对卫矛科植物雷公藤Tripterygium wilfordii Hook.F的干燥根茎进行固态生物转化后的化学成分进行了初步研究。方法:雷公藤生物转化产物用甲醇提取,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取,对氯仿部分采用各种柱色谱进行分离纯化,纯化物通过波谱数据分析进行结构鉴定。结果:从具有药理活性的氯仿部分分离到5个化合物,分别鉴定为:Caffeine(1),82-dienabieta-ll,14-dione-19-acid(2),β-Sitosterol(3),Stigmastero1(4),3β-Hydroxy-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-diene(5),而雷公藤的主要毒性二萜成分雷公藤甲素和雷公藤内酯却没有被发现。结论:雷公藤的主要毒性二萜成分雷公藤甲素和雷公藤内酯却没有从活性部位氯仿萃取物中分到,证明转化脱毒是有意义的。     

龙胆苦苷和龙胆碱的生物转化和药理活性研究进展

龙胆苦苷是重要的环烯醚萜类成分之一,是龙胆属植物的主要活性成分,具有促进胃排空和肠蠕动,还有保肝、镇痛、抗炎等作用。龙胆碱具有抗炎、解热、镇静催眠、抗惊厥等作用。龙胆苦苷等环烯醚萜类化合物在植物内生真菌、人体肠内菌等生物转化作用下可以转化成龙胆碱和新的活性成分。笔者将龙胆苦苷和龙胆碱近年在药理活性、生物转化和体内代谢研究进行综述,为进一步开发利用环烯醚萜类成分及其代谢产物提供一定的理论依据。     

雷公藤固态生物转化产物的初步药理研究

目的:对3种雷公藤生药整体固态生物转化后的分段提取物进行抗炎、免疫药理作用比较,初步判断生物转化产物对药效的影响。方法:二甲苯致小鼠耳廓肿胀、免疫器官重量测定、2,4-二硝基氟苯(DNFB)致小鼠迟发性超敏反应实验。结果:转化后的甲醇总提物抗炎作用比未转化者强,尤其是3#菌种转化总提物的作用最强;TW2和TW3的醋酸乙酯部分对小鼠胸腺系数呈增加趋势;TW3的石油醚和氯仿部分对免疫器官、醋酸乙酯部分对细胞免疫的抑制作用增强。结论:转化后样品与未转化的对照品在抗炎、免疫作用上发生了一定变化,提示转化产物中的活性物质基础可能有所改变。     

植物细胞培养用于药物生产的潜力

高等植物是一个重要的、并且仍然被利用的药物来源。而新的植物细胞培养技术为那些有药用意义的植物的有控制的生产,从而免去大规模的植物培植和收获提供了可能性。各个实验室迄今所得的结果表明植物细胞培养有下述优点: 1.化合物的产量比之能从天然植物分离的要高; 2.加入适当的前体能生物合成具有更好药理性质的类似物; 3.能够获得通常在植物中含量极低的有重要药理作用的化合物; 4.能将容易得到的天然产物经生物转换成更有价值的药物; 5.能开发出含固相植物细胞或固相植物酶的生物反应器。为了用植物细胞悬浮培养来达到上述目的,必须选择和处理适当的细胞品系,以使它们能以最佳的速度进行所需的反应。这里     

皂苷类微生物转化研究进展

人参、三七等五加科植物不仅具有营养神经、保护心肌、抗衰老、抗氧化、保肝等良好的保健作用,更重要的是大量现代研究已经证实其所含的稀有皂苷成分还有明显的抑制肿瘤生长的作用.现代科学尝试用更加温和,操作简便,试验成本低的微生物转化方法提高稀有皂苷的含量.文章对含有皂苷类成分植物的微生物转化进行了综述.     

果胶酶PectinexBEXXL对Dichotomin的生物转化

目的：运用生物转化技术,对甾体皂苷进行结构修饰。方法：利用果胶酶PBX,对DichotominC-3位的糖链进行结构修饰,并利用HL-60细胞系对转化产物进行了活性筛选。结果：得到9个转化产物。总转化产物以及4个次生的螺甾皂苷具有细胞毒性,其中末端为a-1,2连接的鼠李糖基的产物P5、P6、P7显示出了较强的细胞毒性,产物P8为末端a-1,4连接的鼠李糖基的产物,其细胞毒性相对较弱;而底物与5个次生的呋甾皂苷均没有细胞毒性。结论：PBX具有多种水解活性,得到的9个产物丰富了甾体皂苷化合物库,同时活性筛选为进一步的药理研究提供了支持。     

蛇根木根对免疫细胞抗肿瘤活性的增强作用

作者对蛇根木 Rauvolfia serpentinaBenth.根进行了下述试验:1)用 ELISA 法和蛋白质印迹法测定了该植物煎剂对经抗CD3抗体包被和 IL-2激活的 T-细胞在热休克后的 HSP70表达的作用;2)以乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定该植物煎剂对激活的T-细胞对恶性胶质瘤细胞株 T98G 和淋巴母     

洋地黄毒苷元、异羟基洋地黄毒苷元和各种强心苷在洋地黄幼苗培养过程中对强心甾合成的影响

目前强心苷主要从毛茛科植物毛花洋地黄 Digitalis lanata 中提取,该植物可以生产重要的地高辛类强心甾。但是用毛花洋地黄及其它产生强心甾植物的各种器官进行细胞悬浮培养时,其产生强心甾的能力均丧失,然     

用洋地黄的固定细胞进行洋地黄毒甙和β—甲基洋地黄毒甙的生物转化

洋地黄细胞悬浮培养物使强心甙12β-羟基化是植物组织培养生物工艺应用的一个有意义的实例。采用固定化酶或完整细胞进行这种生物转化因有种种优点而愈益引人注意。本文介绍用藻朊胶包埋的洋地黄287T株的固定化细胞进行洋地黄毒甙和β—甲基洋地黄毒甙的生物转化。在自由悬浮细胞和固定化细胞的振动培养中,每种底物的生物     

走马胎生物转化产物S1的抗肿瘤活性及对Bel-7402肝癌细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:研究走马胎中的生物转化产物S1对不同肿瘤细胞株增殖的影响,并检测S1对肝癌细胞Bel-7402凋亡及周期的影响。方法:利用燕麦曲霉对走马胎中的化合物Ag3进行生物转化,得到新的化合物S1。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT比色法)检测S1的抗肿瘤活性;筛选对S1较敏感的细胞株,观察细胞形态学变化、检测细胞凋亡和细胞周期。结果:S1作用于Bel-7402、MCF-7、A549等6株肿瘤细胞后的半数抑制浓度(IC50)范围为12.8~27.3μmol/L,其中Bel-7402细胞株对S1最为敏感。含S1培养基(终浓度为0、5、10、20μmol/L)干预Bel-7402细胞24h后,早期凋亡较明显,凋亡率分别为0.91%、3.13%、43.26%、71.34%,中、高剂量组凋亡最为明显,凋亡率具有明显的浓度依赖性,各剂量组与阴性对照组比较均有显著差异;S1将细胞阻滞于G2/M期,该期细胞明显增多,S期细胞明显减少,通过抑制细胞增殖达到抗肿瘤活性。结论:S1对6种肿瘤细胞株均有一定的抑制作用,对Bel-7402细胞的抑制作用较强,诱导Bel-7402细胞的凋亡机制可能与阻滞细胞周期相关。