高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的：了解高原红细胞增多症（ＨＡＰＣ）骨髓红系组细胞增殖状况。方法：ＨＡＰＣ患者２５例，正常对照２２例身体健康者，应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｅ）增殖能力，ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｅ对红细胞生成素（Ｅｐｏ）的反应能力，结果：ＨＡＰＣ患者骨髓ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｅ集落数分别高于正常对照。Ｅｐｏ对ＨＡＰＣ患者骨髓ＢＦＵ－Ｅ集落数差异显著（Ｐ〈０．０１）。结论：ＨＡＰＣ     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的 了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系组细胞增殖状况。方法 HAPC患者25例,正常对照22例身体健康者,应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞(BFU-E,CFU-E)增殖能力,BFU-E及CFU-E对红细胞生成素(Epo)的反应能力。结果 HAPC患者骨髓BFU-E,CFU-E集落数分别高于正常对照。Epo对HAPC患者骨髓BFU-E,CFU-E刺激明显,与正常对照组比较BFU-E集落数差异显著(P<0.05);CFU-E集落数差异显著(P<0.01)。结论 HAPC骨髓红系祖细胞增殖能力增强,对Epo敏感性增高。     

高原红细胞增多症骨髓前红系祖细胞体外培养动态观察

目的:对高原红细胞增多症(HAPC)骨髓前红系祖细胞(BFU—E)进行动态观察,以探讨其发病机理。方法:应用造血干细胞体外培养技术,取其体系内含单个核细胞2×10~5/ml置于培养液中,在5％CO_2、37℃及饱和湿度条件下培养,以观察其细胞生长情况。结果:红系祖细胞接种及增殖延滞时间为24h后,可见双细胞及少数4～6个细胞组成的细胞团。第4天可见10个左右细胞的细胞团,第6～7天可见较多CFU—E集落,第9天CFU—E集落数量明显减少,第10天可见较大或多中心的集落。呈桔黄色或颜色逐渐加深,以50～100个细胞的爆式集落为多见,联苯胺染色阳性,呈棕褐色,第14天可见较多较大的爆式集落含100～1000个左右细胞,培养至21d,BFU—E集落多数退化或消失。结论:观察中发现HAPC骨髓BFU—E集落产率与正常对照比较有显著差异(P<0.01),集落类型以多中心型,分散型为主。提示,HAPC骨髓BFU—E具有很强的增殖、分化能力,其机理需要进一步探讨。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系组细胞增殖状况。方法 HAPC患者25例，正常对照22例身体健康者，应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞(BFU，CFu-E)增殖能力，BFU-E及CFU-E对红细胞生成素(Ep0)的反应能力。结果HAPc惠老骨髓BFU-E，CFUE集落数分别高于正常对照。Ep0对HAPc患者骨髓BFUE，CFu-E刺激明显，与正常对照组比较BFu-E集落数差异显著(P＜0．05)；CFU-E集落数差异显著(P＜0.01)；结论HAPc骨髓红系祖细胞增殖能力增强，对Epo敏感性增高。     

干扰素γ联合红细胞生成素对多发性骨髓红系祖细胞的体外作用研究

为研究干扰素γ(IFN-γ)联合红细胞生成素(EPO)对多发性骨髓瘤(MM)红系祖细胞(CFU-E)的作用，采用细胞体外培养对10例MM患者进行了CFU-E培养。结果表明，单一IFN-γ对MM患者CFU-E即有明显促增殖作用；与EPO联合时，其促增殖作用更加明显，使MM患者CFU-E接近正常对照。提示IFN-γ联合EPO对MM红系祖细胞具有显著促增殖作用，可能提供可靠的实验依据。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞凋亡异常的研究

目的：了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系祖细胞在细胞凋亡方面是否存在异常；方法：应用造血干细胞体外培养技术对红系祖细胞进行动态观察，培养72小时以后细胞染色观察细胞形态，应用凋亡细胞检测盒了解细胞凋亡发生率；结果：高原红细胞组与正常对照组均发生细胞凋亡，但发生率程度不一，高原红细胞凋亡少于正常对照(P＜0．05)；结论：高原红细胞增多症红系祖细胞存在凋亡异常，需进一步研究是否存在基因表达异常。     

高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞体外培养观察

目的：观察高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞体外增殖情况。方法：采用微量甲基纤维素培养法对１０例高原红细胞增多症（高红组）及１０例高原健康人（对照组）的骨髓细胞进行体外培养。结果：在无促红细胞生成素刺激时,高红组及对照组皆无ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落形成。高红组的ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落数随促红细胞生成素的浓度增加而增加（Ｐ＜０．０１）,当促红细胞生成素浓度达到８ｕ／ｍｌ时,ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ的集落数不再明显增加（Ｐ＞０．０５）,对照组对促红细胞生成素的刺激时反应与高红组相一致。在同一浓度促红细胞生成素刺激时,两组ＣＦＵ－Ｅ及ＢＦＵ－Ｅ集落数无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论：高原红细胞增多症患者骨髓红系祖细胞自身无增殖能力,其增殖必须有促红细胞生成素的刺激,促红细胞生成素的增高是高原红细胞增多症发病的一个因素,但其发病还存在其他机制。     

西宁地区Wistar大鼠粒系,红系造血祖细胞培养观察

本实验通过４９例Ｗｉｓｔａｒ大鼠骨髓粒系祖细胞培养（ＣＦＵ－Ｃ）及１２例Ｗｉｓｔａｒ孕鼠胎肝细胞红系祖细胞培养（ＣＦＵＥ，ＢＦＵ－Ｅ）观察了海拔２２６０ｍ时Ｗｉｓｔａｒ大鼠ＣＦＵ－ＣＣＦＵＥ，ＢＦＵ－Ｅ生长情况，提供了中海拔地区大鼠粒系及红系造务祖细胞体外培养模型，为进一步探讨在不同海拔环境中改变造血刺激因子粒系祖细胞造血时生物学特性，及探讨高原地区红细胞数量异常时红系祖细胞过程中的生物特性变化提     

小鼠巨核系祖细胞的微量培养

本文报道一种用于小鼠巨核系祖细胞的微量甲基纤维素的培养方法。以从再生障碍性贫血病人尿中粗提的红细胞生成素(Epo)制备物作为刺激因子的来源,成功地培养出了巨核细胞集落及单个成熟巨核细胞,巨核细胞可用原位乙酰胆碱脂酶染色的方法鉴别。在培养第7天时,巨核细胞集落及单个巨核细胞的产率与接种的骨髓细胞数呈线性关系。马血清的种类,浓度及2—巯基乙醇和 L—谷氨酰胺的浓度对产率有一定影响。马血清在使用前需要筛选。本方法可用以体外定量测定巨核系祖细胞,也可用以体外观察巨核细胞成熟分化过程。     

平原人进驻高原后红细胞生成素的变化

目的　探讨红细胞生成素在高原低氧适应机制中的作用。方法　对平原进驻海拔 3 70 0m和气 5 3 80m第 7天及半年的健康青年进行血液促红细胞生成素 (EPO)、血红蛋白 (Hb)及血氧饱和度 (SaO2 )检测 ,并与平原健康青年作对照。结果　进驻高原低氧环境EPO、Hb较平原增高显著 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ,SaO2 降低非常显著 (P <0 .0 1 )。进驻高原第 7天和半年 ,3 70 0m较 5 3 80mEPO ,Hb降低非常显著 ,SaO2 增高非常显著 (P <0 .0 1 )。进驻 3 70 0m ,第 7天较半年EPO无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,Hb ,SaO2 差异显著 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ;进驻 5 3 80m ,第 7天较半年EPO ,Hb,SaO2 均有显著性差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1 )。结论　在高原缺氧环境下 ,红细胞生成素调节机制紊乱 ,是导致继发性红细胞增多的一个重要环节。     

人参总皂甙对骨髓抑制模型小鼠促红细胞生成素以及其受体的影响

目的，也察人参总皂甙对放、化疗因素所致骨髓抑制小鼠红系造血所依赖的促红细胞生成素及相应受体的影’向。方法采用Co^60照射、注射环磷酰胺、氯霉素复合造模，建立骨髓抑制模型小鼠，随机分为给药组和莫型对照组，另设正常对照。检测外周血和骨髓有核细胞，并应用造血祖细胞体外培养技术和RT—PCP技术，检测血清Epo和脾脏的EpoRmRNA。结果与正常对照相比，模型小鼠的外周血、骨髓有核细胞和脾EpoRmRNA明显下降，而血清Epo升高（P〈0．01）。TSPG组骨髓抑制小鼠的外周血、BMC、血清Epo水平（P〈0．01）及脾EpoRmRNA的表达显著高于模型对照组（P〈0．05）。结论人参总皂甙可以通过促进机体分泌Epo，并在转录水平调节造血组织相应受体的表达，促进红系造血。     

促红细胞生成素检测的判别分析研究

目的:建立新的检测促红细胞生成素的判别函数,提高EPO血液检测方法的灵敏度和特异性。方法:人体实验采用随机双盲对照设计,将24名受试者分为实验组和对照组,分别注射重组EPO和安慰剂。实验阶段分为注射前(1周)、注射期(4周)和停药期(4周)3个阶段。每名受试者在整个人体实验的3个阶段中共采集血样18次。用Advia120血液分析仪检测24名受试者的红细胞压积(HCT%)、网织红细胞压积(RetHCT)、巨红细胞百分数(Macro%);血清EPO浓度的测定采用免疫化学发光法;可溶性转铁蛋白受体(sTfR)的测定采用酶联免疫吸附分析法。采用Fisher判别分析法,应用人体实验数据中注射期的数据构造判别函数,判别能力用Wilks’Lambda法进行检验;对所建立的判别函数进行回代检验,并对短期使用EPO的效果进行判别,将其结果与第一代判别函数(On_Model)进行比较。结果:两个新的判别函数为:Z_on(男性)=0.988Ln(EPO)+0.253Ln(sTfR)-0.032Ln(Macro%+0.1)+0.547HCT+0.319RetHCT,界值为3.2;Z_on(女性)=0.862Ln(EPO)-0.067Ln(sTfR)+0.103Ln(Macro%+0.1)+0.311HCT+0.439RetHct,界值为2.5。判别力经Wilks’Lambda统计检验有统计学意义(P<0.001)。采用Z_on判定男性和女性各有1例假阴性,而采用On_Model则男性有3例假阴性,女性有8例假阴性。在使用1次和2次EPO后用Z_on能全部进行正确判别,但使用On_Model均有假阴性发生。结论:新的判别函数Z_on对使用EPO的误判率低于第一代判别函数On_Model,并对短期注射EPO的判别效果高于On_Model。     

5Gy60Coγ线照射后小鼠骨髓中红系祖细胞损伤和恢复的动态观察

用体外微量甲基纤维素培养方法观察了LACA小鼠受5Gy⁶⁰Coγ线一次全身照射后0～25灭骨髓中红系祖细胞(CFU—E和BFU—E)损伤和恢复的动态过程。与以往测得的5Gy照射后CFU—E(D), CFU—GM、CFU—S变化的结果进行了比较分析, 结果说明急性照射后CFU.E和CFU—E(D)的变化一致。照后即刻CFU—E明显减少, 照后10天恢复正常。BFU—E变化特点是先下降后上升, 照后20天恢复正常。CFU—E与CFU—GM的变化在时间上一致。CFU—E与CFU—S变化的相关系数为0.8428, BFU—E与CFU—S变化的相关系数为0.9717.     

用免疫学方法判断重组人红细胞生成素滥用的研究

给6名健康青年男性受试者皮下注射重组人红细胞生成素（rhEPO），剂量为30IU/kg体重，每周3次，注射持续4周。同时给4名对照受试者注射安慰剂。采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行指标测定。结果表明注射rhEPO能提高血清EPO浓度和转铁蛋白可溶性受体（TfR）浓度；在停药后1个星期左右的时间内，TfR浓度仍保持在较高的水平；而血浆总纤维蛋白和纤维蛋白原降解产物（TDP）含量未发现规律性的变化。结果提示血清EPO和TfR浓度有可能作为rhEPO滥用检测的指标。     

重组人铜锌超氧化物歧化酶对小鼠骨髓造血粒─巨系祖细胞的辐射防护作用

目的：探讨重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ）的辐射防护作用及其机理。方法：通过γ线辐射损伤小鼠的体内和体外实验，观察了ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ和聚乙二醇修饰的ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ（ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ）对小鼠骨髓造血粒－巨系祖细胞克隆产生率（ＣＦＵ－ＧＭ）的影响。结果：体内实验，小鼠整体照射，静脉给药，以上两种酶（２５`０～３００ｍｇ／ｋｇ）均能非常显著地提高ＣＦＵ－ＧＭ的数量。其中以照射前后联合给药效果最好。而单纯照射前给药，ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ仅在照前１小时给药效果较好；ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ则在照前３小时或照前１小时给药都有较好的效果。体外实验，小鼠离体细胞照射并给药，未见ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ对ＣＦＵ－ＧＭ的影响。结论：以上两种酶对小鼠骨髓ＣＦＵ－ＧＭ有良好的辐射防护作用，其机理可能是通过机体防御系统作用的间接途径实现的。ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ的生物半衰期较长，可增加给药时机，因而具有更大的实用价值。     

红细胞生成素及其受体与肿瘤组织乏氧的关系及对治疗的影响

红细胞生成素及其受体的表达与组织乏氧关系密切.在各种实体肿瘤组织内,有大量的红细胞生成素及其受体的表达,其表达与肿瘤细胞对放射治疗和化学药物治疗抗性有关,并增加肿瘤的局部侵袭能力和转移能力,临床上,实体肿瘤患者中约有一半在肿瘤的发展和治疗过程中会出现各种程度的贫血,在贫血的肿瘤患者中使用红细胞生成素的问题还有待进一步研究.     

小鼠多向祖细胞的体外培养

本文介绍小鼠多向祖细胞(CFU-mix)的测定方法,培养体系包括IM-DM,2-ME,转铁蛋白-铁,牛血清白蛋白V,PWM-SCM及EPO。在36.5℃,7%CO_2,饱和湿度下培养10～14天。本文用实验数据表明培养体系中EPO量不能少于0.5U/皿,PWM-SCM占10%为宜,转铁蛋白则应加300μg,植入的骨髓细胞量与CFU-mix集落数有线性正比关系。     

海拔梯度对健康男性促红细胞生成素的影响

目的:探讨高原慢性缺氧对促红细胞生成素(EPO)的影响。方法:用双抗体夹心ABC—ELISA法对不同海拔高度健康男性血清EPO水平进行测定,同时对受试人群的血氧饱和度(SaO2)、红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)进行测定。结果:随着海拔高度增加,低氧程度加重,血清EPO的水平增加(P<0.01)。结论:高原慢性缺氧可使健康人血清EPO水平增加,而且EPO的水平随海拔高度的增加而增加。     

重组红细胞生成素在围手术期的应用

红细胞生成素(Erythropoietin, EPO)是由肾脏分泌的一种调节红系祖细胞生长的细胞因子。它既可以作为分裂原始红系祖细胞池扩大,又可作为分化原始祖细胞向幼红细胞,乃至成熟红细胞方向分化和成熟。因此,EPO已作     

辐射后骨髓造血基质细胞对粒系造血祖细胞生长的影响

本文观察了骨髓造血基质细胞贴壁层及细胞悬液对 GM-CFU-C 生长的影响及照射后的变化。实验结果表明,骨髓基质细胞贴壁层及细胞悬液均有增高 GM-CFU-C 产率的作用。这种刺激性影响与基质细胞贴壁层的细胞密度和细胞悬液的浓度没有依赖关系。1～5Gyγ线照射的骨髓基质细胞贴壁层和细胞悬液支持 GM-CFU-C 集落生成的作用明显削弱。文中讨论了造血基质细胞的辐射损伤在放射病骨髓综合征发病机理中的意义。