河北与山西产黄芩药材中主要黄酮类成分的含量比较研究

目的:比较黄芩药材中9种主要黄酮类活性成分在河北与山西省以及不同生长年限、不同采收季节的含量分布情况,为黄芩优质药材的评价提供一定的参考。方法:采用HPLC-DAD方法,以甲醇(A)-乙腈(B)-0.1%甲酸水(C)为流动相进行梯度洗脱,采集色谱数据,获得各成分含量,并对测定结果进行差异显著性检验。结果:河北与山西产黄芩药材中野黄芩苷和千层纸素A的含量存在显著性差异,且前者高于后者;综合两个产地,3年生黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷含量较高,与1年生、2年生和7年生的黄芩存在显著性差异;河北地区春季采收的黄芩药材中野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素的含量高于秋季采收的黄芩,存在显著性差异。结论:本研究表明河北产区与山西产区黄芩药材的质量存在一定的差异性,且两产地均存在质量不均一的现象,提示要规范黄芩种植,以提高黄芩品质。另外,3年生且春季采收的黄芩药材黄酮类化合物含量高,品质较好。本研究基于HPLC采用多组分分析对河北与山西产区的黄芩药材种主要黄酮类成分的比较研究,为黄芩优质药材的评价提供一定的参考。     

黄芩中主要黄酮类成分的含量分析

目的：建立黄芩中主要黄酮类成分的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)含量测定方法,并研究产地、生长年限、采收期、栽培和加工方法等对主要黄酮类成分含量的影响。方法：采用Thermo ODS-2 Hypersil 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-0.1%磷酸水-四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱,检测波长274 nm,流速1.00 mL·min^-1,柱温26 ℃,进样量20 μL。结果：6个主要黄酮,黄芩苷(1)、千层纸素A苷(2)、汉黄芩苷(3)、黄芩素(4)、汉黄芩素(5)和千层纸素 A(6),分别在选定范围内线性关系良好(R²≥0.999 3),平均加样回收率介于96.6%～103.0%,RSD均小于5.0%(n=9)。结果：不同产区黄芩质量差异很大。传统道地和传统非道地黄芩药材中黄酮含量没有显著性差异(P=0.480～1.000),但现在道地与非道地、传统道地与现在道地黄芩药材之间化合物1,2以及6个黄酮含量之和存在较显著差异(P=0.005～0.013);生长年限对药材质量影响不是特别显著(P>0.148～0.966),但一、二年生药材中的黄酮含量稍高;春季采收比秋季采收的黄芩黄酮含量高;野生与栽培药材中的黄酮含量除化合物3(P=0.019)和6(P=0.038)外,其他没有显著性差异(P=0.185～0.635);与药材比较商品饮片中黄酮苷的含量较低,而黄酮苷元的含量则较高。结论：本法简便、准确、重现性好,可作为黄芩药材质量检测的方法。     

黄芩中主要黄酮类成分的含量分析

目的:建立黄芩中主要黄酮类成分的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)含量测定方法,并研究产地、生长年限、采收期、栽培和加工方法等对主要黄酮类成分含量的影响.方法:采用Thermo ODS-2 Hypersil色谱柱(4.6 min×250mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水一四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱,检测波长274 nm,流速1.00 mL·min~(-1),柱温26℃,进样量20μL.结果:6个主要黄酮,黄芩苷(1)、千层纸素A苷(2)、汉黄芩苷(3)、黄芩素(4)、汉黄芩素(5)和千层纸素A(6),分别在选定范围内线性关系良好(R~2≥0.999 3),平均加样回收率介于96.6%～103.0%,RSD均小于5.0%(n=9).结果:不同产区黄芩质量差异很大.传统道地和传统非道地黄芩药材中黄酮含量没有显著性差异,但现在道地与非道地、传统道地与现在道地黄芩药材之间化合物1,2以及6个黄酮含量之和存在较显著差异;生长年限对药材质量影响不是特别显著,但一、二年生药材中的黄酮含量稍高;春季采收比秋季采收的黄芩黄酮含量高;野生与栽培药材中的黄酮含量除化合物3,6外,其他没有显著性差异;与药材比较商品饮片中黄酮苷的含量较低,而黄酮苷元的含量则较高.结论:本法简便、准确、重现性好,可作为黄芩药材质量检测的方法.     

不同产地栽培银杏叶中黄酮类成分的含量测定

目的 :比较不同产地银杏叶样品中黄酮类成分含量。方法 :HPLC法测定 35个产地银杏叶中 3种主要黄酮甙元即槲皮素、山奈酚、异鼠李素的含量 ,并以此换算出总黄酮含量。结果与结论 :各产地银杏叶中黄酮类成分含量差异较大 ,其中产量大的江苏邳州、广西兴安、贵州正安、湖北安陆等地的银杏叶总黄酮含量较高。     

不同产地、不同部位黄芩的黄芩甙含量测定

采用HPLC技术对不同产地、不同部位的黄芩的黄芩甙含量进行分析测定。结果表明：枯芩和条芩中黄芩甙的含量相差较大,后者约为前者的4倍;条芩中皮部和木质部中的黄芩甙含量也有明显区别,后者约为前者的2倍。提示在中药生产和临床应用时应当严格区别黄芩的质地。     

UPLC法比较黄芩不同炮制品中5种黄酮类成分

目的 建立UPLC法比较生黄芩、酒黄芩、黄芩炭中5种黄酮类成分的含量.方法 各样品溶液的分析采用Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.8 μm);流动相乙腈-0.5％甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长280 nm.结果 5种黄酮类成分在各自范围内线性关系良好...     

黄芩根系中黄酮类成分测定与综合利用研究

目的:测定黄芩根系(根茎、主根、支根和毛根)中的黄酮类成分,了解在不同根系中的分布,为综合利用提出依据。方法:建立HPLC法同时测定黄芩中四种黄酮类成分的测定方法,甲醇和0.1%磷酸为流动相,进行梯度洗脱。结果:根茎、主根、支根和毛根中的黄芩苷含量分别4.26%~7.20%、12.19%~14.49%、11.12%~15.79%和8.71%~11.34%,汉黄芩苷和汉黄芩素主要分布在根茎和主根中,黄芩素各部位相近。结论:黄芩根系中含有多种黄酮类成分,应该分别加以利用。     

不同采收期黄芩中六种黄酮类成分的动态研究

目的:以黄芩中6种黄酮类成分为指标,考察不同采收期黄芩药材中黄酮类成分的动态变化,以确定药材的最佳采收期。方法:采用Phenomenex Prodigy ODS3-C18色谱柱(4.60 mm×250 mm,5μm)进行分离,Agilent光电二极管阵列检测器进行检测波长的优选和检测,H2O-MEOH-H3PO4溶剂系统梯度洗脱,检测波长为276 nm,流速1.0 ml.min-1,柱温35℃,进样体积5μl。结果:以9月17日采收的黄芩样品中黄芩苷、汉黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩素含量为最高,6种黄酮类成分总含量也最高。结论:黄芩药材的最佳采收期在9月。     

不同干燥方法对黄芩叶中黄酮类成分的影响研究

目的:比较不同干燥方法对黄芩叶有效成分含量的影响,优选黄芩叶的最佳干燥方式。方法:以比色法测定总黄酮含量,HPLC法测定6种主要黄酮成分:野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、芹菜素、黄芩素和汉黄芩素的含量,比较自然晾晒、室内通风阴干、烘箱鼓风干燥、真空干燥和微波干燥等5种干燥方法处理黄芩叶的优劣。结果:采用微波干燥的方式黄芩叶总黄酮含量最高,含量23.00%;野黄芩苷在黄芩叶中含量较高,其中以微波干燥最高(3.62%),真空干燥最低(2.77%);微波连续加热会导致总黄酮和野黄芩苷含量下降。结论:从成本、有效成分含量和实际操作综合分析,黄芩叶应采用自然晒干或自然晾干的方法。     

黄芩药材中主要黄酮类成分含量测定及指纹图谱研究

目的:建立不同产地黄芩药材指纹图谱,并测定主要黄酮类成分的含量来评价药材质量。方法:采用岛津SHIMADZU VP-ODS柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.1%枸橼酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长为276nm及200nm-400nm,应用二极管阵列检测器检测。所得不同样品的指纹图谱用相似度评价软件进行分析。结果:确定了17个共有峰,建立了黄芩药材的指纹图谱。但各主要成分的含量有较大的差异,其中沂源县的扦插黄芩中的黄芩苷含量最高,高达18.32%;东北野生黄芩中的黄芩素和汉黄芩素含量最高,分别为2.31%和0.73%。结论:此方法简单、准确、重复性好,峰的分离度较好,可作为黄芩质量控制的方法。     

黄芩中黄酮类成分活性作用的虚拟评价

目的利用理论对接方法研究黄芩中黄酮类化合物的潜在作用机制。方法选取黄芩中8个黄酮类化合物(包括苷元及其苷),收集现有靶标的晶体结构,利用Schrdinger软件进行计算,以分级标准评价选择性。结果文献报道黄芩黄酮类化合物药理作用共26种,其中与苷元及其苷类化合物对接结果相符的个数分别为9个和25个。表明苷元及其苷类化合物的靶标选择性与虚拟评价有差异,苷类化合物的结果与文献更接近。结论说明虚拟评价技术对于中药复杂作用系统的研究具有较大的实用性,苷元与苷类化合物体内作用效果相似,而体内代谢是药物虚拟评价过程中非常重要的影响因素。     

苦荞麦黄酮对人食管癌细胞EC9706增殖的影响

目的研究苦荞麦黄酮在体外对EC9706细胞增殖的影响。方法 MTT法观察苦荞麦黄酮对EC9706细胞的毒性,荧光染色法观察细胞核的改变,流式细胞术观察细胞周期和细胞内活性氧水平,Western blotting分析凋亡蛋白表达。结果苦荞麦黄酮明显抑制EC9706细胞的增殖,其抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关。经DAPI染色,电镜观察细胞核,可见多个凋亡小体的形成。流式细胞仪检测发现,苦荞麦黄酮使细胞发生G2/M期周期停滞,细胞内活性氧水平明显增加,且呈浓度依赖效应。Western blotting分析表明,苦荞麦黄酮能上调细胞内的促凋亡蛋白Bax,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量。结论苦荞麦黄酮对人食管癌细胞株EC9706增殖具有明显的抑制作用,使细胞发生周期阻滞,并能通过调节活性氧水平及改变凋亡蛋白的表达量诱导其发生凋亡。     

不同产地黄芩药材HPLC指纹图谱的研究

目的建立河北道地药材热河黄芩的HPLC指纹图谱，并与不同产地黄芩药材指纹特征相比较，为科学评价与有效控制黄芩质量提供新方法。方法采用HPLC法测定了热河黄芩等11个不同产地黄芩样品。色谱条件：C18柱，乙腈-0．25％磷酸-四氢呋喃为流动相进行梯度洗脱，检测波长274nm，体积流量1．0mL／min，柱温30℃。结果建立了HPLC指纹图谱共有模式，并对不同产地药材进行了相似度比较。结论色谱指纹图谱分析法能简便、快速地鉴别和区分不同来源的黄芩药材，为全面控制黄芩药材的质量提供了依据。     

Main flavonoids in the root of Scutellaria baicalensis cultivated in Europe and their comparative antiradical properties

The content of the main flavonoids in the root of Scutellaria baicalensis Georgi cultivated in Central Europe was evaluated using the new simple RP-HPLC method with gradient of acetonitrile in mobile phase. The main components of the roots were baicalin (8.12% of dry root mass) and wogonin glucuronide (2.52%). The content of flavonoids was comparable with the content in plants cultivated in natural localities. Five main flavonoids were evaluated for their scavenging ability with DPPH radical-generating system and due to limited solubility only two flavonoids were investigated for their ability to scavenge hydroxyl radical by the aromatic hydroxylation method. The total extract was also tested in both the experimental arrangements. In experiments with DPPH, only baicalin and baicalein displayed a significant scavenging effect, while the production of OH radicals generated by UV photolysis of H(2)O(2) was considerable decreased in the presence of baicalin and wogonin glucuronide. After comparison with results obtained for the total extract, it was concluded, that the scavenging activity of the extract against DPPH is mainly derived from baicalin. On the other hand, baicalin, wogonin glucuronide and probably other flavonoids participate in scavenging OH radical.     

黄芩不同极性溶剂提取物抗氧化活性研究

目的比较黄芩不同溶剂提取物的抗氧化活性,并测定其黄酮含量。方法利用比色法测定黄芩不同溶剂提取物中的总黄酮含量,利用1,1-二苯基-2-苦苯肼(DPPH)自由基体系对黄芩不同溶剂提取物的抗氧化活性进行评价。结果黄芩不同溶剂提取物均具有一定的抗氧化活性,其中乙醇提取物清除DPPH自由基的能力最强,且总黄酮含量最高。结论黄芩的抗氧化活性受到不同溶剂的影响,并且与其含的黄酮含量成正相关。     

HPLC法同时测定灌胃黄芩水煎剂后大鼠血浆中黄芩苷和汉黄芩苷的质量浓度及药动学研究

目的建立大鼠ig黄芩水煎剂后血浆中黄芩苷和汉黄芩苷的HPLC测定方法及药动学研究。方法大鼠ig黄芩水煎剂后,不同时间眼底静脉丛取血,制备血浆。血浆样品经甲醇沉淀蛋白,HPLC-UV测定血药浓度。色谱柱为Shim-packODS(250mm×4.6mm,5μm);流动相采用梯度洗脱,体积流量:1.5mL/min;检测波长:276nm。结果黄芩苷的线性范围为0.156~10μg/mL,汉黄芩苷的线性范围为0.109~7μg/mL,定量下限(LLOQ)分别为0.156和0.109μg/mL,日内和日间精密度(RSD)均小于15%,准确度(RE)为-6.82%~3.26%。大鼠ig黄芩水煎剂后,血浆中黄芩苷和汉黄芩苷血药浓度-时间曲线均存在双峰:黄芩苷的tmax1和tmax2分别为(12.0±4.5)min和(7.2±1.79)h;Cmax1和Cmax2分别为(5.29±1.96)和(4.49±2.12)μg/mL,汉黄芩苷的tmax1和tmax2分别为(14.0±9.0)min和(6.8±1.1)h;Cmax1和Cmax2分别为(1.38±0.16)和(1.62±0.71)μg/mL;黄芩苷的CL/F为(4.72±1.68)L/h,汉黄芩苷的CL/F为(3.04±0.98)L/h。结论该方法经考察符合生物样品的测定要求,可应用于大鼠体内黄芩苷和汉黄芩苷血药浓度的测定和药动学研究。大鼠ig黄芩水煎剂后血浆中黄芩苷和汉黄芩苷质量浓度存在双峰现象,黄芩苷的口服清除率大于汉黄芩苷。     

黄芩总黄酮的分离纯化工艺研究

目的：考察10种型号的大孔吸附树脂对黄芩总黄酮的吸附性,优选出分离黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的大孔吸附树脂。方法：用HPLC法,分别以黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量为考察指标,采用静态吸附和动态吸附相结合的方法进行筛选。结果：树脂型号不同,上样条件不同,对黄芩中4种黄酮类化合物的吸附力和解析率也不同。结论：综合考虑静态吸附和动态吸附的结果,以SP-825为最佳。     

不同产地半枝莲药材及其混淆品HPLC指纹图谱研究

目的:研究并建立半枝莲药材的指纹图谱。方法:采用反相高效液相色谱法,C18柱,甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液进行梯度洗脱,检测波长280 nm,流速1.0 mL/min,柱温35°C,对30个不同来源的药材进行了检测。结果:建立了半枝莲药材HPLC-UV指纹图谱共有模式,14个共有峰被标定。并对30批半枝莲及其混淆品的进行了相似度比较。24批半枝莲药材的相似度均在0.7以上,6批混淆品均在0.4以下。结论:HPLC指纹图谱鉴别半枝莲及其混淆品具有重复性好、特征性强、方法简便等特点,可作为半枝莲药材的鉴别方法。     

HPCE-DAD同时测定地耳草中6种黄酮的含量

目的:建立高效毛细管电泳二极管阵列检测法(HPCE-DAD)同时测定地耳草中芦丁、异槲皮苷、金丝桃苷、槲皮苷、山柰酚及槲皮素含量的方法.方法:选择毛细管区带电泳分离模式,以40 mmol·L-1硼砂缓冲液(pH 8.62)为电泳介质,未涂渍标准熔融石英毛细管(75 μm ×64.5 cm,有效长度56 cm)为分离通道,分离电压为25 kV,检测波长为206nm,毛细管温度为25℃,压力进样为5 kPa,8 s.结果:6种黄酮的峰面积与浓度的线性关系良好(r＞0.995 3);加样回收率为98.8％ ～103％.结论:该方法简单、准确,重现性较好,可用于地耳草药材质量的评价和控制.