宫腔内人工授精中应用上游法和密度梯度离心法的系统评价

背景:精子体外优选方法很多,最常见的是上游法和密度梯度离心法.采用何种方法来减少体外处理过程对精子的不良刺激,优选出具有良好受精潜能的精子,目前尚无定论.目的:系统评价上游法和密度梯度离心法在宫腔内人工授精中的应用,比较两种精子优选法的优劣.方法:计算机检索PubMed、Cochrane Library、EMBASE等数据库,手工检索专业相关期刊,检索时间为1966-01/2009-02.纳入关于两种精液优选法在宫腔内人工授精中应用的随机对照试验或半随机对照试验,评价纳入研究的方法学质量,并提取有效数据用RevMan 5.0.软件进行Meta分析.结果与结论:纳入6个研究,包括4个随机对照试验和2个半随机对照试验,共486例患者,1099个周期(优选精子的次数).Meta分析结果显示,上游法与梯度离心法相比,周期妊娠率[OR=1.11,95%CI(0.8,1.55)]、流产率[OR=0.31,95%CI(0.09,1.04)]、精子密度[WMD=-0.89,95%CI(14.17,12.38)]、精子活力[WMD=2.31,95%CI-7.27,2.65)],4项测最指标差异均无显著性意义.尽管与其他精子优选法相比,上游法与梯度离心法的周期妊娠率较高,但是该系统评价结果还不能提示这两种方法在宫腔内人工授精应用中何者临床效果更好.建议今后进行更多高质量的随机双盲对照试验为临床提供最佳证据,并且增加处理前后精子的质量对比,包括精子活力、精子密度以及精子功能等指标测量,以全面考察两种方法的优劣.     

密度梯度离心法优选精液22周期宫腔内人工授精的临床分析

目的 探讨密度梯度离心法优选精液行IUI的临床疗效.方法 采用密度梯度离心法制备精液行IUI 22个周期,并对制备前后的精液进行常规分析、改良巴氏染色、混合抗球蛋白反应实验.结果 洗涤后的精子,其密度、活力、精子正常形态比率明显升高,精子畸形指数及精子包被抗体阳性率明显下降.结论 密度梯度离心法优选精液行IUI可增加受孕机率.     

密度梯度离心法处理逆行射精患者尿液内精子用于人工授精的临床效果观察

目的:探讨密度梯度离心法处理逆行射精患者尿液内的精子用于人工授精的可行性.方法:碱化患者尿液,应用两层密度梯度离心法处理尿液内的精子,在配偶排卵期内行宫腔内人工授精.结果:5例逆行射精患者,在经过共18次处理尿液内精子及对配偶实施人工授精术后,有3例成功妊娠并有2例已足月分娩.结论:密度梯度离心法处理逆行射精患者尿液内的精子,方法简单、快捷有效,用于人工授精具有可行性.     

精子DNA损伤与夫精宫腔内人工授精妊娠率的关系

[目的]探讨精子DNA损伤对夫精宫腔内人工授精(IUI)妊娠率的影响.[方法]收集本中心202个夫精宫腔内人工授精周期的临床资料,根据精子DNA碎片指数(DFI)将202个周期分为三组:A组:DFI＞30%,B组:30%≥DFI＞20%,C组:DFI≤20%,比较三组妊娠率.[结果]DFI＞30%的为5周期,妊娠数为0,周期妊娠率为0;30%≥DFI＞20%的为62个周期,妊娠数为6,周期妊娠率为9.68%;20%≥DFI的为135个周期,妊娠数为23,周期妊娠率为17.04% ;B组、C组妊娠率显著高于A组,但C组妊娠率显著高于B组,其差异均有统计学意义(P＜0.05).妊娠组的DFI(14.01±11.28)%显著低于非妊娠组精液DFI为(18.25±13.17)%,其差异有统计学意义.[结论]精子DNA的完整性与IUI结局密切相关;DFI可作为预测IUI结局、评价男性不育的临床指标.     

密度梯度离心法分离脐血单个核细胞方法的优化

目的 对密度梯度离心法分离脐血单个核细胞的方法进行优化,以提高该方法分离脐血单个核细胞的收率.方法 脐血40份,每份40 ml,分为常规组和优化组,每组20份.常规组脐血与NS1∶1混合稀释后,直接通过Ficoll分离液分离单个核细胞;优化组通过先将脐血洗涤一次,加入等量NS充分吹打混匀,200目筛网过滤,保持细胞悬液和Ficoll分离液1:1的体积比进行分离操作.对每份分离得到的脐血单个核细胞通过白细胞稀释液稀释后计数.结果 常规组分离后的白膜层有11份界面不清晰,同时均混有少量的红细胞.优化组分离后的白膜层有1份界面不清晰,仅有极少的红细胞混入.两种方法收集的脐血单个核细胞数比较,优化组多于常规组(P＜0.01).结论 通过对密度梯度离心法的步骤进行优化,可提高脐血单个核细胞的分离效果.     

宫腔内人工授精患者的心理干预

目的 探讨了女性不孕症患者和正常女性的心理状况,为心理干预和综合治疗不孕症提供依据.方法 采用焦虑自评测量表(SAS)、抑郁自评测量表(SDS)作为测评工具,对40例女性不孕症患者和40例正常已婚生育女性进行对照测评.结果 不孕症女性焦虑自评测量表和抑郁自测评量表均显著高于正常对照组(P＜0.01).结论 不孕女性的总体心理健康程度较差,她们承受着巨大的身体痛苦和心理压力,尤其是年轻患者,在承受医疗带来的痛苦的同时,还承受着家庭及社会和工作压力,建议应重视不孕症患者的心理变化,采取心理疏导纳入医学治疗过程的综合手段进行治疗,使患者得到家庭和社会的关怀,减缓心理压力,提高治疗效果.     

非连续密度梯度离心法分离红细胞的影响因素分析

目的 分析非连续密度梯度分离法分离红细胞效果的影响因素,探讨各因素对分离结果的影响程度.方法 采用正交设计比较不同分离条件(离心力、离心时间、离心温度)的分离效果,应用多元线性回归统计方法分析不同个体参数(红细胞平均体积、细胞浓度、个体年龄)对分离效果的影响.结果 离心力、离心时间、标本红细胞平均体积、红细胞浓度、个体年龄都对分离结果有影响,其中红细胞平均体积起主导作用.结论 不同分离条件以及同一分离条件下不同标本,其分离效果均有差异,通过对影响因素的人为控制,可以得到相对稳定的分离效果.     

密度梯度离心法加上游法处理精液对精子运动参数及形态学的影响——附102份标本分析

目的:了解密度梯度离心法加上游法处理精液对精子各运动参数和形态学的影响.方法:采用密度梯度离心法加上游法处理102份男性精液标本,应用计算机辅助精液分析系统软件分析精子各项运动参数,并运用改良巴氏染色法观察精子形态.结果:经密度梯度离心法加上游法处理后,精子活动率、活动力、曲线速度、直线速度等运动参数值均明显提高(均为P＜0.01).经该法处理后,畸形精子百分率、精子畸形指数均明显降低(均为P＜0.01).结论:密度梯度离心法加上游法可使精子的运动参数及形态学均得到明显改善,是较好的体外处理精液方法.     

Pureception~(TM)密度梯度离心法优选精子在夫精人工授精中的应用评价

目的探讨PureceptionTM密度梯度离心法优选精子在夫精人工授精(AIH)中的应用价值。方法采用PureceptionTM密度梯度离心法优选精子,应用于672对不孕夫妇的1 360个AIH周期治疗。结果经PureceptionTM密度梯度离心法优选精子后,精子浓度由(54.86±26.03)×106/mL提高到(63.89±34.40)×106/mL、前向运动(PR)精子百分比由(32.47±9.31)%提高到(69.78±5.10)%,其差异均具统计学意义(P0.05)。PR精子回收率为(34.08±3.95)%。672对不孕夫妇共进行1 360个AIH周期,周期临床妊娠率16.62%(226/1 360)。优选精子前根据精子浓度分为3组:≥15×106/mL组(Ⅰ组)、(≥10,15)×106/mL组(Ⅱ组)、10×106/mL组(Ⅲ组),临床妊娠率分别为17.13%、16.05%、4.26%,Ⅲ组明显低于其他2组(P0.05);根据PR精子百分比分为3组:≥32%组(A组)、(≥10,32)%组(B组)、10%组(C组),临床妊娠率分别为17.53%、16.55%、4.65%,C组明显低于其他2组(P0.05)。优选精子后根据PR精子总数分为两组:≥10×106组、10×106组,临床妊娠率分别为17.33%、10.22%,两组之间差异具有统计学意义(P0.05)。结论 PureceptionTM密度梯度离心法是一种较好的精子优选方法,应用于AIH可获得较为满意的临床妊娠率。优选精子前精子浓度≥10×106/mL、PR精子≥10%,及优选精子后PR精子总数≥10×106,可获得较理想的临床妊娠率。     

三种不同来源精子卵胞浆内单精子注射结果比较

目的:比较采用冷冻精子、新鲜精子、睾丸精子进行卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗的结局.方法:女方常规超排卵和经阴道B超引导下取卵,成熟卵子进行ICSI注射,比较采用冷冻精子组(组Ⅰ)、新鲜精子组(组Ⅱ)和睾丸精子组(组Ⅲ)的受精率、卵裂率、临床妊娠率.结果:组Ⅰ(冷冻精子-ICSI)58个周期:受精率为78.3%,卵裂率为92.0%,临床妊娠率为48.2%;组Ⅱ(经皮穿刺睾丸取精-ICSI)88个周期:受精率为 74.5%,卵裂率为93.9%,临床妊娠率为31.7%;组Ⅲ(新鲜精液-ICSI)142个周期: 受精率为71.9%,卵裂率为91.6%,临床妊娠率为29.4%.组Ⅰ临床妊娠率明显高于组Ⅱ与组Ⅲ(P＜0.05);3组的受精率及卵裂率差异无显著意义(P＞0.05).结论:精子冷冻复苏处理不影响ICSI的受精率和妊娠率.睾丸精子与新鲜精子ICSI可取得类似的临床效果.     

The use of density gradient centrifugation for the separation of serum lipoproteins

Flotation through NaBr density gradients is shown to be a convenient method for the analysis of hyperlipoproteinaemic sera in cases where gel electrophoresis gives ambiguous results. It is also demonstrated that flotation through density gradients provides a rapid method for preparing small samples of pure very low density lipoprotein (VLDL) and low-density lipoprotein (LDL). These classes of lipoprotein can be separated simultaneously from up to 2 ml of serum with a centrifugation time of only 2 h. The fractions so prepared are shown to be comparable with fractions separated by stepwise flotation.     

Analytical subcellular fractionation of normal human skeletal muscle by sucrose density gradient centrifugation

The principle organelle marker enzymes and various adenosine triphosphatase (ATPase) activities were studied in human skeletal muscle. The reproducibility of each assay was established under optimal and linear assay conditions. Whole homogenates of normal human quadriceps muscle were fractionated by centrifugation on a continuous sucrose density gradient. Gradient fractions were assayed for organelle marker enzymes and frequency-density histograms were constructed for each enzyme. Good resolution of the principal organelles was obtained. Adenosine triphosphatase (ATPase) was assayed under conditions of maximal stimulation by Ca2+, or Mg2+ or Na2+, K+ + Mg2+. The distribution of these activities was compared with those of the organelle marker enzymes. Both Ca2+-ATPase and Mg2+-ATPase were distributed to both the mitochondrial and myofibrillar fractions but could be distinguished by the inhibition of mitochondrial ATPase with sodium azide. The distribution of Na+, K+-activated, Mg2+-dependent ATPase (Na+, K+ ATPase) activity suggested a sarcolemmal localization. The results of electron microscopy of gradient fractions were consistent with the organelle content of the fractions as determined by enzymic analyses. These studies provide reference information for the subsequent investigation of organelle pathology of human muscle disorders.     

密度梯度离心法体外培养骨髓间充质干细胞的分化能力

背景:骨髓间充质干细胞具有多向分化能力,是目前极具潜力的种子细胞及基因治疗的靶细胞.目的:体外培养兔骨髓来源间充质干细胞,了解其生物学特性.方法:采用密度梯度离心法培养兔骨髓间充质干细胞,对细胞的形态及生长特性进行观察,应用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD34、CD44、CD45、CD166、HLA-DR 表达,并进行相关生物学特性鉴定.结果与结论:密度梯度离心法能分离培养出纯度较高的骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表达CD29、CD44、CD166,不表达CD34、CD45、HLA-DR.在适当的条件下能够诱导分化成为成骨细胞、软骨细胞等.     

密度梯度离心法体外培养骨髓间充质干细胞的分化能力

背景：骨髓间充质干细胞具有多向分化能力,是目前极具潜力的种子细胞及基因治疗的靶细胞。目的：体外培养兔骨髓来源间充质干细胞,了解其生物学特性。方法：采用密度梯度离心法培养兔骨髓间充质干细胞,对细胞的形态及生长特性进行观察,应用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD29、CD34、CD44、CD45、CD166、HLA-DR表达,并进行相关生物学特性鉴定。结果与结论：密度梯度离心法能分离培养出纯度较高的骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表达CD29、CD44、CD166,不表达CD34、CD45、HLA-DR。在适当的条件下能够诱导分化成为成骨细胞、软骨细胞等。