干细胞应用在青光眼视神经再生中的研究进展

青光眼以进行性视网膜神经节细胞凋亡为主要病理特征。干细胞的自我复制和多向分化潜能使得人工获得视网膜神经节细胞进行替代治疗成为可能。新近发现的自体睫状上皮干细胞可能成为良好的供体来源，已被证实能向视网膜神经节细胞方向分化，但人工获得的神经元样细胞的功能建立以及神经元轴突的人工导向生长仍有待突破。本文就目前利用干细胞再生视神经，从而治疗青光眼视神经病变的最新研究进展作一综述。     

视神经再生的相关因素研究

作为中枢神经的代表,视神经的损伤与再生机制近年来得到深入而广泛的研究。损伤后视神经再生受诸多因素影响,与其内环境改变、各种因子的作用有重大关系。其中既有促进因素,也有抑制因素。现对这些已知因素加以阐述。     

视神经切断再生实验研究

目的:观察家兔视神经切断后再生改变。方法:采用硫喷妥钠腹腔内注射联合球后20g/L奴夫卡因溶液注射麻醉,剪开球结膜用视神经钳分离视神经,用显微手术剪将视神经2/3切断,30d后手术取出视神经,进行病理染色检查。结果:实验30眼有28眼再生,视神经切断处间隙被再生的视神经纤维长满接通,再生的视神经纤维比正常的粗大,排列不整齐,呈条索状。结论:视神经损伤是可再生的,其再生形式从切口两侧缘开始,而不像周围神经那样从近端开始向远端再生。     

神经干细胞在视神经修复再生中的应用

神经干细胞可持续增生、分化产生神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞。神经干细胞的这种特性为进行视网膜病变和视神经损伤的治疗打下了基础。本文就神经干细胞的来源、分化调控机制及神经干细胞的移植在视神经修复再生中的应用进行综述。     

NCAM在成年大鼠不同视神经再生模型中表达的研究

目的检测神经细胞黏附分子（NCAM）在成年大鼠不同视神经再生模型中的表达，探讨NCAM分布情况与其在视神经再生中的作用。方法选择64只健康成年雄性sD大鼠，随机分成2组，自体视神经一坐骨神经吻合模型32只为实验组，自体视神经一视神经吻合模型32只作对照组。于吻合术后15天、30天、45天、60天处死动物并取出吻合段神经。利用免疫组织化学方法（SP法）和计算机图像分析技术，测定NCAM在不同吻合模型中的表达。结果NCAM在视神经一坐骨神经吻合模型表达水平高于视神经一视神经吻合模型。吻合术后早期表达水平明显高于末期。结论坐骨神经移植有助于增加NCAM表达，促进视神经再生。     

视神经再生的实验研究

成年哺乳动物的视神经受损后不能自发再生,主要受视神经本身因素以及周围环境的影响。许多实验研究致力于促进视神经再生,包括神经保护、轴突延长、与靶组织再联系、功能恢复等,本文对此作一综述。     

大鼠晶状体上皮细胞促进损伤后视神经再生的研究

目的 研究晶状体上皮细胞在晶状体损伤促进视神经轴突再生的过程中所起的作用.方法 144只大鼠随机分为5组:正常组(n=4)、单纯损伤组(n=20)、晶状体损伤组(n=40)、未损伤移植组(n=40)和预损伤移植组(n=40).正常组动物存活4周后处死.其余各组,分别于1周、2周、3周、4周和5周,处死一定数量的动物,通过罗丹明B异硫氰酸盐(rhodamine-B-isothiocyanate, RITC)玻璃体腔内注射顺行标记的方法,观察视神经轴突再生情况.结果 单纯损伤组和未损伤移植组与晶状体损伤组和预损伤移植组之间视神经再生率比较,差异有统计学意义.视神经轴突再生一旦突破视神经断端,就能随着时间的推移再生一定的长度.结论 晶状体损伤能够极大地促进损伤后视神经轴突的再生;损伤后晶状体上皮细胞的变化在晶状体损伤促进视神经再生的过程中起关键性作用.     

KLF4在大鼠晶状体损伤促进视神经再生过程中的表达

目的 观察单纯视神经损伤及视神经损伤联合晶状体损伤后视网膜神经节细胞及其轴突中锌指样转录因子4(KLF4) mRNA表达量的变化,探讨晶状体损伤促进视神经再生的相关机制.方法 取54只健康成年Wistar大鼠随机分成对照组(6只)、单纯视神经损伤组(24只)、视神经损伤联合晶状体损伤组(24只).分别于7d、14 d、21 d处死对照组大鼠各2只,单纯视神经损伤组和联合晶状体损伤组大鼠各8只.透射电镜观察损伤后轴突的显微结构变化,荧光定量聚合酶链反应检测不同分组不同时间点视网膜神经节细胞及其轴突上KLF4 mRNA的表达.结果 损伤7d时,透射电镜下见单纯视神经损伤组和联合晶状体损伤组轴突较对照组明显肿胀,轴浆电子密度降低,髓鞘结构混乱,联合晶状体损伤组可见部分簇状排列的无髓鞘包裹的新生神经纤维,损伤14 d和21 d时单纯视神经损伤组和联合晶状体损伤组均少见髓鞘轮廓,见众多胶原纤维.损伤7d时,单纯视神经损伤组(2-△△△为0.561 ±0.045)和联合晶状体损伤组(0.091 ±0.026)KLF4 mRNA相对表达量较对照组(1.003±0.113)均有不同程度降低,联合晶状体损伤组降至最低,差异均有统计学意义(均为P＜0.05);损伤14 d时,单纯视神经损伤组(2-△△Ct为0.333±0.106)和联合晶状体损伤组(0.401±0.169) KLF4 mRNA相对表达量较对照组仍有不同程度降低,差异有统计学意义(均为P＜0.05),但单纯视神经损伤组和联合晶状体损伤组间差异无统计学意义(P＞0.05);损伤21d时,单纯视神经损伤组(2-△△Ct为1.100±0.100)和联合晶状体损伤组(1.166 ±0.115) KLF4 mRNA相对表达量较对照组轻度增高,差异均无统计学意义(均为P＞0.05).结论 晶状体损伤促进视神经再生的机制可能与KLF4表达减少有关,这为基因转录水平靶向治疗视神经病变提供了新的思路.     

层粘连蛋白和纤维粘连蛋白在成年大鼠不同视神经再生模型中的表达

目的测层粘连蛋白(LN)和纤维粘连蛋白(FN)在成年大鼠视神经再生模型中的表达,探讨坐骨神经、LN和FN在视神经再生中的作用.方法选择64只健康成年雄性SD大鼠,随机分成2组,实验组自体视神经-坐骨神经吻合模型32只,对照组自体视神经-视神经吻合模型32只.术后15、30、45、60 d处死动物取吻合神经.利用免疫组化SP法和计算机图像分析,测定LN和FN在各组中的表达.结果实验组LN和FN表达水平高于对照组,差别有统计学意义(P＜0.05).结论LN和FN涉及成年大鼠视神经再生.坐骨神经移植有助于增加两者表达,促进视神经再生.     

癌钙调蛋白在炎症反应促视神经再生作用中的研究进展

癌钙调蛋白(oncomodulin,OM)作为钙结合蛋白的一种,逐渐为我们熟知.近年来有研究证实,OM源于活化的炎症细胞(中性粒细胞),是体内先天免疫系统和神经元之间一种有效的生长促进信号,通过炎症反应诱导的OM是受损视神经轴突再生的关键.OM的促视神经轴突再生作用逐渐成为研究的热点之一.本文就近年来OM作用机制和炎症诱导下OM与视神经再生关系方面的研究和进展做一综述.     

晶状体损伤对视神经损伤后再生影响的研究

视神经损伤是眼科重要的致盲因素之一 ,在眼科临床中尚未找到有效的治疗方法 ,为此寻找促进神经修复与再生的有效手段成为现代神经生物领域的热点。最近研究认为 :损伤晶状体后可以成功地促进视网膜神经节细胞的存活和视神经轴突的再生。我们对该领域迄今为止的主要研究成果做一综述。     

视神经再生和功能重建的实验研究进展

近年来，对于阻碍视神经修复再生的机制有了深入的认识，并就促进其再生的可能途径从外周神经缝接的视神经再生、再生微环境的调控，再生轴突的突触重建和视网膜神经节细胞的再生能力等多方面进行了实验研究。此外，基于视神经的人工视觉重建研究也取得了初步的成功。     

晶状体损伤对视神经损伤后再生影响的研究

目的观察单纯视神经损伤及视神经损伤联合晶状体损伤后视神经中Nogo-A mRNA及Nogo-A的表达,探讨晶状体损伤促进视神经损伤后再生的机制。方法 66只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,6只)、单纯视神经损伤组(B组,30只)和视神经损伤联合晶状体损伤组(C组,30只)。分别于造模后7d、14d、21d处死大鼠2只(A组)、10只(B组)、10只(C组),光镜下观察视神经的病理变化,免疫组织化学染色检测Nogo-A表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、半定量分析不同组视神经Nogo-A mRNA的表达。结果大鼠正常视神经中表达Nogo-A mRNA及Nogo-A,但表达量较低;损伤视神经后7d Nogo-A mRNA的表达量显著升高,至伤后21d B组及C组均维持较高的水平。B组损伤后7d Nogo-A表达阳性的细胞数开始增多(136.80±3.94),与A组比较差异有统计学意义(P<0.05),并保持高表达;C组损伤后21d Nogo-A的表达较B组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论视神经损伤后髓鞘相关抑制因子Nogo-A表达增高,晶状体损伤促进视神经再生的机制可能与Nogo-A有关。     

斑马鱼视觉损伤和视神经再生的研究进展

斑马鱼因其视觉系统与人类的相似性和其视网膜再生的巨大潜能,成为目前研究眼变性疾病的热门模型。眼变性疾病特别是视网膜变性、视神经变性会严重影响视力,并且病变后再生修复十分有限,严重者甚至导致失明。与哺乳动物相反,斑马鱼能修复视神经轴突损伤,刺激视网膜Müller胶质细胞去分化为多能祖细胞,从而实现视网膜神经元及神经轴突再生,恢复正常视功能。本文主要从斑马鱼模型在眼病方面的应用,斑马鱼视网膜神经元和Müller胶质细胞响应损伤启动再生修复的关键信号通路方面作一综述。     

大鼠视神经再生的组织病理学机制

目的探讨大鼠视神经再生的组织病理学机制。方法 40只Wistar大鼠按随机数字表法随机分为正常组（n=8）、单纯视神经损伤组（n=16）和视神经损伤联合晶状体损伤组（n=16）3组。单纯视神经损伤组：单纯的视神经完全性横断性损伤并保存中央血管完好;视神经损伤联合晶状体损伤组：视神经的完全性横断性损伤并保存中央血管完好,同时损伤晶状体形成白内障。4周后处死动物,处死前3d,用毛细玻璃管注入大鼠玻璃体内4～5μL质量分数2.5%的罗丹明B异硫氰酸盐（RITC）。大鼠视神经和视网膜行常规组织病理学检查并计数视网膜神经节细胞（RGCs）的数量。结果正常视神经可以观察到神经纤维及神经胶质细胞。单纯视神经损伤组视神经断端可见呈团块状的胶质瘢痕,细胞较密集,排列紊乱。视神经损伤联合晶状体损伤组视神经断端无胶质瘢痕,且细胞排列较疏松,并有纵向排列的趋势,伴有大量巨噬细胞浸润。视神经损伤联合晶状体损伤组周边部RGCs的数量为4.06±1.45,单纯视神经损伤组为4.06±1.45,2组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论视神经再生的关键是克服视神经断端作为物理性屏障的胶质瘢痕和提高RGCs的存活数量。     

视神经损伤再生修复的视觉诱发电位研究

目的探讨视神经损伤后不同时期视觉诱发电位检查的刺激模式空间频率、P100波幅变化与视神经损伤再生修复之间的联系,探讨将视觉诱发电位技术应用于视神经损伤再生修复评估的可行性。方法分析因眼外伤致视神经受损23例（29眼）的视觉诱发电位资料,实验确定刺激模式空间频率及P100波幅作为检测指标,以受检者的视力表视力为参照,记录全部受检眼的检测结果,在此基础上,分析视神经损伤后不同时期视觉诱发电位变化与视神经再生修复之间的关系。结果一定的视觉刺激模式空间频率大小与视神经损伤再生修复表现出一致性,P100波幅与视力水平呈正相关。视神经损伤后前3个月,再生修复眼视觉诱发电位检测结果呈现动态变化,如视力恢复、刺激模式空间频率减小及P100波幅增大预示视神经损伤再生修复;若视力减退、刺激模式空间频率增大（或无变化）及P100波幅减小（或无变化）则提示视神经损伤严重,无明显再生修复。结论视觉诱发电位技术可用于视神经损伤再生修复的客观评估。