新生牛跟腱胶原蛋白海绵与动物肾、睾丸、皮肤细胞的生物相容性

背景：随着新生牛血清的产业化，新生牛跟腱资源大量积累，使得利用其制备医用胶原蛋白海绵并产业化成为可能。目的：采用新生牛跟腱制备胶原蛋白海绵，观察其与Vero细胞、天祝白牦牛胚胎皮肤细胞和岷县黑紫羔羊睾丸细胞的生物相容性。设计、时间、地点：重复测量观察，于2006-02／05在西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室完成。材料：用出生24h内的新生牛跟腱经冰醋酸、胃蛋白酶等消化，经盐析、透析及冻干等处理后，制成胶原蛋白海绵。天祝白牦牛胚胎皮肤f2代细胞和岷县黑紫羔羊睾丸f2代细胞为自制，Vero细胞为协和医科大学细胞中心提供。方法：在6孔板中，将3种细胞分别接种于经紫外线、臭氧灭菌后的胶原蛋白海绵上，于37℃、体积分数为0．05的CO2恒温箱培养，同时设对照实验。主要观察指标：相差显微镜观察接种5，12，24，72h时3种细胞在胶原蛋白海绵上和6孔板底的生长情况，接种11d对共培养物行考马斯亮蓝、苏木精-伊红染色。结果：接种后5h，在胶原蛋白海绵周围的6孔板底部可看到细胞已贴壁、伸展，个别细胞有分裂现象，在胶原蛋白海绵表面，隐约可见圆形细胞排列。接种后48～72h时，6孔板底部细胞铺满单层。接种后11d，考马斯亮蓝和苏木精-伊红染色显示3种共培养物中均有大量细胞良好生长，胶原海绵外观变得挺拔、透明、有韧性。结论：新生牛跟腱胶原蛋白海绵与上述3种来自不同动物、不同组织的细胞有很好的生物相容性，可做皮肤细胞、肾细胞和睾丸细胞的培养支架。     

海马神经干细胞与胶原蛋白海绵及明胶海绵的生物相容性

背景：在应用组织工程修复周围神经的研究中，载体的选择至关重要。理想的载体应与细胞外基质类似，与活体细胞有良好的生物相容性。目的：评价豚鼠海马神经干细胞与胶原蛋白海绵和明胶海绵的生物相容性，探讨它们作为周围神经组织工程载体材料的可行性。设计：随机对照实验。单位：郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科，郑州大学基础医学院解剖教研室。材料：实验于2005-07／2005—12在郑州大学基础医学院解剖教研室神经生物学研究室完成。健康新生（〈24h）杂色豚鼠12只，清洁级，雌雄不限，体质量50-70g，由郑州大学医学院实验动物中心提供。方法：新生（〈24h）豚鼠，10g／L水合氯醛腹腔麻醉，体积分数为0．75乙醇消毒，无菌操作分离出海马组织。体外无血清培养海马神经干细胞，传至第2代，将浓度调整为1&;#215;10^10L^-1后分别与胶原蛋白海绵、明胶海绵联合体外培养，一周后取材，进行细胞计数，倒置相差显微镜及扫描电镜观察，并测定两种材料与细胞的吸附率。主要观察指标：①观察神经干细胞在胶原蛋白海绵和明胶海绵上的生长、黏附情况，并测定其细胞总数与载体材料的吸附率。②免疫细胞化学染色分化细胞形态观察。结果：①神经干细胞可以在胶原蛋白海绵和明胶海绵上生长，逐渐黏附，胶原蛋白海绵细胞吸附率高于明胶海绵（37．17％和14．87％，r=4．819，P〈0．05）。②对照组、胶原蛋白海绵组、明胶海绵组细胞总数差异无显著性[（53．17&;#177;3．5）&;#215;10^4，（53．25&;#177;2．6）&;#215;10^4，（52．04&;#177;4．05）&;#215;10^4，F=0．233．P〉0．05]。结论：胶原蛋白及明胶两种材料，尤其是胶原蛋白，具有良好的神经干细胞相容性，可以作为周围神经组织工程的支架材料应用于临床。     

海马神经干细胞与胶原蛋白海绵及明胶海绵的生物相容性

背景:在应用组织工程修复周围神经的研究中,载体的选择至关重要。理想的载体应与细胞外基质类似,与活体细胞有良好的生物相容性。目的:评价豚鼠海马神经干细胞与胶原蛋白海绵和明胶海绵的生物相容性,探讨它们作为周围神经组织工程载体材料的可行性。设计:随机对照实验。单位:郑州大学第一附属医院耳鼻咽喉科,郑州大学基础医学院解剖教研室。材料:实验于2005-07/2005-12在郑州大学基础医学院解剖教研室神经生物学研究室完成。健康新生(<24h)杂色豚鼠12只,清洁级,雌雄不限,体质量50-70g,由郑州大学医学院实验动物中心提供。方法:新生(<24h)豚鼠,10g/L水合氯醛腹腔麻醉,体积分数为0.75乙醇消毒,无菌操作分离出海马组织。体外无血清培养海马神经干细胞,传至第2代,将浓度调整为1×1010L-1后分别与胶原蛋白海绵、明胶海绵联合体外培养,一周后取材,进行细胞计数,倒置相差显微镜及扫描电镜观察,并测定两种材料与细胞的吸附率。主要观察指标:①观察神经干细胞在胶原蛋白海绵和明胶海绵上的生长、黏附情况,并测定其细胞总数与载体材料的吸附率。②免疫细胞化学染色分化细胞形态观察。结果:①神经干细胞可以在胶原蛋白海绵和明胶海绵上生长,逐渐黏附,胶原蛋白海绵细胞吸附率高于明胶海绵(37.17%和14.87%,χ2=4.819,P<0.05)。②对照组、胶原蛋白海绵组、明胶海绵组细胞总数差异无显著性犤(53.17±3.5)×104,(53.25±2.6)×104,(52.04±4.05)×104,F=0.233,P>0.05犦。结论:胶原蛋白及明胶两种材料,尤其是胶原蛋白,具有良好的神经干细胞相容性,可以作为周围神经组织工程的支架材料应用于临床。     

新生牛皮胶原蛋白海绵的制备及其体外细胞相容性

目的:采用新生牛皮提取胶原蛋白、制备生物医用胶原蛋白海绵,观察其生物学活性与细胞相容性。方法:实验于2006-05/2007-02在西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室完成。实验方法:①取出生24h内宰杀的新生尕里巴牛犊皮制备胶原蛋白海绵。②将新生牛皮胶原蛋白海绵与黑裘皮羔羊肾F3代成纤维细胞混悬液共培养,分别设胶原海绵材料组、阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组(橡胶塞浸提液)。实验评估:①应用倒置相差显微镜观察细胞形态。②培养20,35d对细胞与胶原蛋白海绵共培养物进行AO染色观察细胞在胶原海绵中的增殖情况。③培养65d后制石蜡切片,行苏木精-伊红染色观察细胞在胶原海绵中的生长情况。结果:①细胞形态观察结果:阳性对照组细胞培养24h细胞圆缩,不贴壁,3d后全部死亡。胶原海绵材料组与阴性对照组细胞形态均正常,细胞贴壁生长良好。随着培养时间的延长,海绵孔隙逐渐变小,细胞数量增加,形态变小,海绵外观从柔软、混浊变得挺拔、透明。②细胞在胶原海绵中的增殖情况:吖啶橙-AO染色显示培养20,35d胶原海绵-羔羊肾成纤维细胞共培养物中有大量细胞存在,并且在胶原蛋白空隙中有大量细胞成团簇状生长。③细胞在胶原海绵中的生长情况:苏木精-伊红染色显示有大量蓝色细胞核和新生的红色胶原纤维。结论:制备的新生牛皮胶原蛋白海绵对岷县黑裘皮羔羊肾成纤维细胞有良好的生物相容性,无细胞毒性。     

新生牛皮胶原蛋白海绵的制备及其体外细胞相容性

背景：现已证实,人肌腱、牛肌腱、鼠尾、猪皮、新生牛跟腱制备的胶原蛋白海绵有良好的细胞相容性。目的：采用新生牛皮提取胶原蛋白、制备生物医用胶原蛋白海绵,观察其与羔羊肾成纤维细胞的相容性。设计、时间及地点：对比观察实验,于2006-05/2007-02在西北民族大学生命科学与工程学院生物工程与技术国家民委重点实验室完成。材料：出生24h内宰杀的新生尕里巴牛犊皮,岷县黑裘皮羔羊肾原代成纤维细胞。方法：取新生牛犊皮,经脱毛、胃蛋白酶＋冰醋酸联合处理、盐析、透析、冻干后制备胶原蛋白海绵。将海绵与羔羊肾F3代成纤维细胞混悬液共培养,分别设胶原海绵材料组、阴性对照组（生理盐水）、阳性对照组（橡胶塞浸提液）。主要观察指标：应用倒置相差显微镜及JVC数码摄像系统观察、拍摄与记录细胞形态、生长情况。培养20,35d,对共培养物进行AO染色,观察细胞在胶原海绵中的增殖情况。培养65d后制石蜡切片,行苏木精-伊红染色,观察细胞在胶原海绵中的生长情况。结果：阳性对照组细胞培养24h细胞圆缩,不贴壁,3d后全部死亡。胶原海绵材料组与阴性对照组细胞形态均正常,细胞贴壁生长良好。随着培养时间的延长,海绵孔隙逐渐变小,细胞数量增加,形态变小,海绵外观从柔软、混浊变得挺拔、透明。AO染色显示培养20,35d的胶原海绵-羔羊肾成纤维细胞共培养物中有大量细胞存在,并且在胶原蛋白空隙中有大量细胞成团簇状生长。苏木精-伊红染色显示有大量蓝色细胞核和新生的红色胶原纤维。结论：制备的新生牛皮胶原蛋白海绵对岷县黑裘皮羔羊肾成纤维细胞有良好的相容性。     

大鼠胎脑神经细胞与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵生物相容性的研究

目的评价大鼠胎脑神经细胞与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵的细胞相容性,为中枢神经组织工程材料的选择提供实验依据. 方法将大鼠胎脑神经细胞分别与几丁质多孔体、胶原蛋白海绵及明胶海绵联合体外培养,进行光、电镜观察,并测定 3种材料与细胞的吸附率. 结果神经细胞均能在 3种材料上贴附并生长,细胞吸附率分别为 31.54% ,30.58%和 15.54%,并且几丁质有促进细胞生长的作用. 结论几丁质、胶原蛋白及明胶 3种材料,尤其是几丁质,具有良好的神经细胞相容性,有可能作为神经系统组织工程的载体应用于临床.     

新型壳聚糖－胶原支架与牙周膜细胞的生物相容性

背景：目前胶原作为牙周组织工程支架材料仍具有机械强度差、降解速度快等缺点,将其与壳聚糖复合可改善上述问题。 目的：评估新型壳聚糖-胶原支架材料的体外生物相容性。 方法：通过 MTT 法评估100%,75%,50%,25%壳聚糖-胶原支架材料浸提液对人牙周膜细胞的毒性。选择第4-6代生长状态良好的人牙周膜细胞与壳聚糖-胶原支架共培养,观察细胞在支架上的生长情况,并检测与壳聚糖-胶原支架复合培养前后人牙周膜细胞碱性磷酸酶活性的变化。 结果与结论：新型壳聚糖-胶原支架具有双层结构,一侧表面致密,一侧表面疏松多孔。MTT 法检测不同浓度材料浸提液毒性评级为0或1级。扫描电子显微镜及组织学观察可见细胞在壳聚糖-胶原支架上增殖良好,且致密层可起屏障膜作用,阻挡细胞进入支架内部;复合培养24 h后,人牙周膜细胞的碱性磷酸酶活性与复合培养前无明显差异（P 〉0.05）,复合培养48,72 h后人牙周膜细胞的碱性磷酸酶活性高于复合培养前（P 〈0.05）。以上结果提示新型壳聚糖-胶原支架具有良好的生物相容性及屏障功能,可进一步应用于牙周组织工程的研究。     

胶原聚合物人体植入材料的生物相容性研究

背景：Staar公司将Ⅳ型胶原与水凝胶(HEMA)聚合而成的新型材料Collamer，是研制眼内接触镜的良好材质国内尚无类似材料。目的：评定胶原聚合物为主体的眼内接触镜(intraoeular contact lens，ICL)在动物体内的生物相容性。设计：随机对照实验。单位：上海生物材料研究测试中心。材料：本研究于2000—01／2000—04在上海生物材料研究测试中心完成细胞株。传代48～72h生长旺盛的L—929细胞(小鼠成纤维细胞)；白色豚鼠20只，体质量300～500g，1～3月龄，雌雄均可；健康成年新西兰白兔7只，体质量17～30kg和2．5～3．5kg，雌雄不拘(热原实验，雌免无孕)(实验动物均由上海实验动物中心提供，为普通级)。干预：分别应用胶原材料进行以下生物学测试：①细胞毒性试验(细胞增殖度法)。②致敏试验。③热原试验。④皮下植入试验实验数据根据标准进行分析和评估。主要观察指标：①小鼠成纤维细胞生长和增殖情况。②皮内注射和局部斑贴诱导后，每观察时间和每一激发部位红斑和水肿反应情况。③家兔由耳缘静脉注人材料浸提液后，该兔体温升高情况。④胶原材料植人家兔皮下后4周材科周围组织反应情况。结果：①细胞毒性试验：材料组相对增殖度为99％～106%，毒性分级为0～1级。②过敏试验：材料组各时段每一激发部位均无红斑和水肿反应，结果评定胶原聚合物皮肤反应0级，③热原试验：胶原试品个体升温均在0．6℃以下，升温总值在1.4℃以下g皮下植入试验：材料组和对照组试样周围均为极少量淋巴细胞浸润，炎症细胞反应为Ⅰ级；纤维囊腔形成评定亦为1级。结论：材料生物学测试结果显示胶原聚合物具有高度生物相容性．是设计制造ICL的理想材料。     

壳聚糖支架与BGC-823细胞的体外生物相容性研究

摘要：目的：探讨壳聚糖（chitosan scaffold,CS）支架与细胞的生物相容性,为CS的体内安全应用提供实验依据。 方法：采用细胞形态学和MTT法评价CS支架对人胃腺癌细胞系BGC 823生物学特性的影响。在细胞培养液中分别加入不同浓度的明胶固化CS支架浸提液,倒置显微镜下观察各组细胞形态学变化,计数并绘制生长曲线;用MTT法检测并计算细胞相对增殖率。 结果：不同浓度的CS支架浸提液对体外培养的各组细胞形态无明显影响,对细胞增殖抑制不明显（P均＞0.05）,不同浓度CS支架浸提液的细胞毒性均为0~1级。 结论：CS支架与BGC-823细胞有良好的生物相容性,有望成为理想的医用生物材料。     

胶原聚合物人体植入材料的生物相容性研究

背景Staar公司将Ⅳ型胶原与水凝胶(HEMA)聚合而成的新型材料Collamer,是研制眼内接触镜的良好材质.国内尚无类似材料.目的评定胶原聚合物为主体的眼内接触镜(intraocular contactlens,ICL)在动物体内的生物相容性.设计随机对照实验.单位上海生物材料研究测试中心.材料本研究于2000-01/2000-04在上海生物材料研究测试中心完成.细胞株传代48～72 h生长旺盛的L-929细胞(小鼠成纤维细胞);白色豚鼠20只,体质量300～500 g,1～3月龄,雌雄均可;健康成年新西兰白兔7只,体质量1.7～3.0kg和2.5～3.5 kg,雌雄不拘(热原实验,雌兔无孕)(实验动物均由上海实验动物中心提供,为普通级).干预分别应用胶原材料进行以下生物学测试①细胞毒性试验(细胞增殖度法).②致敏试验.③热原试验.④皮下植入试验.实验数据根据标准进行分析和评估.主要观察指标①小鼠成纤维细胞生长和增殖情况.②皮内注射和局部斑贴诱导后,每一观察时间和每一激发部位红斑和水肿反应情况.③家兔由耳缘静脉注入材料浸提液后,该兔体温升高情况.④胶原材料植入家兔皮下后4周材料周围组织反应情况.结果①细胞毒性试验材料组相对增殖度为99%～106%,毒性分级为0～1级.②过敏试验材料组各时段每一激发部位均无红斑和水肿反应,结果评定胶原聚合物皮肤反应0级.③热原试验胶原试品个体升温均在0 6℃以下,升温总值在1.4℃以下.④皮下植入试验材料组和对照组试样周围均为极少量淋巴细胞浸润,炎症细胞反应为Ⅰ级;纤维囊腔形成评定亦为1级.结论材料生物学测试结果显示胶原聚合物具有高度生物相容性,是设计制造ICL的理想材料.     

胶原海绵和温敏型Ⅰ型胶原细胞相容性比较

背景:因心脏结构高度复杂、心肌组织有很高的机械顺应性,心肌组织工程对材料的要求高.以往研究表明Ⅰ型胶原和胶原海绵材料均适宜心肌细胞生长及分化.目的:拟进一步对比观察胶原海绵和温敏型Ⅰ型胶原与骨髓间充质干细胞的相容性,为心肌组织工程选择更理想的载体材料.设计、时间及地点:在解放军第四军医大学西京医院心血管内科实验室2007-03/10完成对比观察设计的实验.材料:胶原海绵由上海其胜制剂有限公司提供;温敏型Ⅰ型胶原由第四军医大学组织工程中心提供.方法:将体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞分别复合于胶原海绵和温敏型l型胶原材料,共同培养7 d,分别于培养第1,3,5和7天取材.主要观察指标:扫描电镜和苏木精.伊红染色观察骨髓间充质干细胞细胞形态及附着情况;MTT检测骨髓间充质干细胞细胞增殖情况.结果:①扫描电镜检测显示温敏型Ⅰ型胶原材料中骨髓间充质干细胞细胞黏附优于胶原海绵材料,细胞在Ⅰ型胶原材料中生长连接成片,表面有大量分泌颗粒.②MTT检测表明在培养第1,3,5,7天温敏型Ⅰ型胶原材料中骨髓间充质干细胞细胞活性(吸光度值)及细胞分裂增殖速度均高于胶原海绵材料(P＜0.01).结论:温敏型Ⅰ型胶原体外与骨髓间充质干细胞的相容性优于胶原海绵.     

不同材料制成尿道支架的生物相容性

背景:利用各种生物材料进行泌尿系统的修复和重建,一直是重建医学研究的重点.目的:评价不同材料制成尿道支架在治疗泌尿系统疾病的临床效果、并发症和应用情况及不同置入方法对避免术后并发症所起的作用.方法:采用电子检索的方式在万方数据库中检索1990-01/2010-12有关尿道支架置入的研究,关键词为尿道支架材料,生物相容性.排除重复研究、普通综述或Meta分析类文章,筛选纳入19篇文献进行评价.结果与结论:目前不同材料制成的尿道支架主要有镍钛记忆合金网状支架、镍钛记忆合金螺旋支架、钛丝螺旋支架和硅胶支架等.镍钛记忆合金螺旋支架虽然具有良好的柔韧性和生物相容性,其管壁具有良好的通透性,引流确实可靠,但支架易发生倒伏或套叠,不宜长期放置.镍钛记忆合金网状支架明显优于螺旋支架,有足够大的直径和支撑力,近期疗效显著.钛丝螺旋尿道支架治疗老年下尿道梗阻临床疗效肯定,这可能与支架特殊的中央凹型构形,在尿道内不易移位和滑脱有关.多侧孔硅胶支架管有利于尿道成形的成功,减少创伤,并不影响手术效果.用于制作尿道支架的材料选择很多,置入方法各异,在实际操作中,应根据患者实际情况采取相应的措施,以达到最满意的效果.     

不同材料制成尿道支架的生物相容性

背景：利用各种生物材料进行泌尿系统的修复和重建,一直是重建医学研究的重点。目的：评价不同材料制成尿道支架在治疗泌尿系统疾病的临床效果、并发症和应用情况及不同置入方法对避免术后并发症所起的作用。方法：采用电子检索的方式在万方数据库中检索1990-01/2010-12有关尿道支架置入的研究,关键词为＂尿道支架材料,生物相容性＂。排除重复研究、普通综述或Meta分析类文章,筛选纳入19篇文献进行评价。结果与结论：目前不同材料制成的尿道支架主要有镍钛记忆合金网状支架、镍钛记忆合金螺旋支架、钛丝螺旋支架和硅胶支架等。镍钛记忆合金螺旋支架虽然具有良好的柔韧性和生物相容性,其管壁具有良好的通透性,引流确实可靠,但支架易发生倒伏或套叠,不宜长期放置。镍钛记忆合金网状支架明显优于螺旋支架,有足够大的直径和支撑力,近期疗效显著。钛丝螺旋尿道支架治疗老年下尿道梗阻临床疗效肯定,这可能与支架特殊的中央凹型构形,在尿道内不易移位和滑脱有关。多侧孔硅胶支架管有利于尿道成形的成功,减少创伤,并不影响手术效果。用于制作尿道支架的材料选择很多,置入方法各异,在实际操作中,应根据患者实际情况采取相应的措施,以达到最满意的效果。     

胶原蛋白海绵的性质及其临床应用

背景:胶原蛋白海绵具有良好的功能和特性,及其易于加工、灭菌和保存等独特的优势,被视为最有用途的生物材料,具有广泛的科研和临床应用价值.目的:介绍胶原蛋白海绵的性质,对近年来胶原蛋白海绵在临床应用上的研究成果进行综述.方法:由第一作者应用计算机检索2000-01/ 2010-08 Pubmed数据库和Elsevier数据库,在标题和摘要中以 "collagen,collagen sponge,clinical application"为检索词进行检索.检索1993-01/2010-08 CNKI数据库,在标题和摘要中以"胶原,胶原蛋白海绵,临床应用"为检索词进行检索.纳入38篇文献进行综合分析.结果与结论:胶原蛋白海绵作为一种新型生物材料,越来越广泛地被应用于止血、创面愈合、抗感染、软骨修复、神经修复等相关方面的组织工程与临床研究.但目前所使用的胶原几乎都是来源于动物,无法彻底消除免疫原性.国外已有人利用生物反应器和转基因技术合成了重组人胶原,其在临床应用上的有效性和安全性等问题仍有待进一步的探索和研究.     

胶原蛋白海绵的性质及其临床应用（英文）

背景：胶原蛋白海绵具有良好的功能和特性,及其易于加工、灭菌和保存等独特的优势,被视为最有用途的生物材料,具有广泛的科研和临床应用价值。目的：介绍胶原蛋白海绵的性质,对近年来胶原蛋白海绵在临床应用上的研究成果进行综述。方法：由第一作者应用计算机检索2000-01/2010-08 Pubmed数据库和Elsevier数据库,在标题和摘要中以＂collagen,collagen sponge,clinical application＂为检索词进行检索。检索1993-01/2010-08CNKI数据库,在标题和摘要中以＂胶原,胶原蛋白海绵,临床应用＂为检索词进行检索。纳入38篇文献进行综合分析。结果与结论：胶原蛋白海绵作为一种新型生物材料,越来越广泛地被应用于止血、创面愈合、抗感染、软骨修复、神经修复等相关方面的组织工程与临床研究。但目前所使用的胶原几乎都是来源于动物,无法彻底消除免疫原性。国外已有人利用生物反应器和转基因技术合成了重组人胶原,其在临床应用上的有效性和安全性等问题仍有待进一步的探索和研究。