宫颈癌前病变及宫颈癌组织Survivin和p16INK4A及p53表达的研究

目的:探讨Survivin、p16INK4A和p53与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系及临床病理关系.方法:应用免疫组化EnVision法,检测107例宫颈癌、86例宫颈癌前病变(CIN)及35例宫颈炎组织中Survivin、p16INK4A和p53表达水平,并加以分析.结果:在35例宫颈炎、86例宫颈CIN、107例宫颈癌中,Survivin阳性表达率分别为0、48.8%(42/86)和88.9%(72/81);p53阳性表达率分别为2.8%(1/35)、40.7%(35/86)和83.9%(68/81),两者均呈增高趋势,而p16INK4A 的阳性表达率降低,分别为94.3%(33/35)、59.3%(51/86)和28.4%(23/81),三组间两两比较差异有统计学意义,P＜0.01.Survivin、p16INK4A表达在子宫颈癌的FIGO分期、间质浸润深度及淋巴结是否转移的表达,差异有统计学意义,P＜0.05;p16INK4A还在宫颈癌组织学分级间阳性表达,差异有统计学意义,P＜0.05;p53在组织学类型及分级中其阳性表达,差异有统计学意义,P＜0.05.结论:Survivin、p16INK4A和p53异常表达参与了宫颈癌的发生发展过程,其阳性表达可作为检测宫颈癌前病变的生物标志,并可用于判断宫颈癌患者的预后.     

宫颈癌整合素β1的表达及微血管密度与其侵袭性的关系

目的:探讨整合素β1(INTβ1,)及微血管密度(MVD)在宫颈癌浸润和转移中的作用机制.方法:采用免疫组织化学SP法,分别测定12例正常宫颈、14例宫颈原位癌、56例宫颈浸润癌组织中INTβ1的表达及MVD.结果:宫颈浸润癌INTβ1的阳性表达与原位癌和正常宫颈比较有明显差异(P=0.000).宫颈浸润癌MVD与原位癌和正常宫颈比较有明显差异(P=0.000).宫颈癌Ⅱ期INTβ1的阳性表达和MVD分别与Ⅰ期比较,有统计学差异(P=0.006).组织学分级G3 INTβ1的阳性表达及MVD与G1比较有明显差异(P=0.010;P=0.000).宫颈癌淋巴结转移组INTβ1与无淋巴结转移组比较有明显差异(P=0.018),而MVD比较无差异(P=0.197).结论:在宫颈癌发生、发展中,INTβ1表达增强和微血管密度增高可能发挥了重要作用,有望作为观察宫颈癌进展的重要参考指标.     

EB病毒与子宫颈癌发病的关系及其致癌机理的初步探讨

目的分析子宫颈EB病毒感染对抑癌基因p53及PTEN产物表达的影响,探讨EB病毒的致癌机理.方法采用免疫组织化学S-P法,分别检测58例宫颈鳞癌(0、Ⅰ期39例,Ⅱ、Ⅲ期19例),21例慢性宫颈炎及20例正常宫颈组织的EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)抑癌基因p53和PTEN蛋白的表达情况,并进一步分析宫颈癌组织EBV感染与两种抑癌基因表达的关系.结果 EBV阳性表达率在宫颈癌、慢性宫颈炎及正常宫颈组分别为65.5%(38/58)、90.5%(19/21)及10%(2/20),癌症及炎症组均明显高于正常宫颈组(P＜0.05);在0、Ⅰ期宫颈癌中,EBV的阳性表达率为71.8%(28/39),高于在Ⅱ、Ⅲ期癌中的阳性表达率51.6%(10/19),但差异不显著(P＞0.05).p53在宫颈癌与慢性宫颈炎组织的阳性表达率分别为67.2%(39/58)与19.1%(2/21),两组间差异显著(P＜0.05).PTEN在宫颈癌与慢性宫颈炎组织的阳性表达率分别为56.9%与28.6%,两组间差异显著(P＜0.05).EBV感染与非感染的宫颈癌组织中,p53的阳性表达率分别为68.4%与65.0%,PTEN的阳性表达率分别为及50.0%与70%,两组间二者的表达均无明显差异(P＞0.05).结论 EB病毒感染与宫颈癌的发病密切相关,但其致癌机制可能不只是通过影响抑癌基因p53及PTEN的表达.     

宫颈癌组织PAR-2和MMP-2表达及其与侵袭转移关系的研究

目的:探讨蛋白酶激活受体-2(PAR-2)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在正常宫颈组织、宫颈原位癌、宫颈浸润癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法分别检测PAR-2、MMP-2在15例正常宫颈组织,20例宫颈原位癌组织,70例宫颈浸润癌组织中的表达。结果:PAR-2及MMP-2在宫颈浸润癌组织中阳性表达率分别为45.71%及71.43%,明显高于宫颈原位癌及正常宫颈组织(P<0.01),PAR-2在宫颈癌盆腔淋巴结转移组和未转移组中的阳性表达率分别为72.41%和26.83%,MMP-2的阳性表达率分别为93.10%和56.10%,两组比较差异有统计学意义,P<0.01。结论:PAR-2及MMP-2与宫颈癌的侵袭和淋巴结转移密切相关。     

抑癌基因PTEN在宫颈癌变过程中的表达及意义

[目的]探讨PTEN在宫颈癌变中的作用.[方法]应用免疫组织化学技术（SP法）检测抑癌基因PTEN在32例正常子宫颈上皮、158例宫颈上皮内瘤变及64例宫颈浸润癌组织中的表达.[结果]32例正常宫颈组织中,PTEN阳性表达率为93.8%,56例CIN Ⅰ、102例CIN Ⅱ和CIN Ⅲ及64例宫颈浸润癌,其PTEN阳性表达率分别为75%、58.8%和40.6%.在从正常宫颈上皮到上皮内瘤变、宫颈癌的癌变过程中,其组织中PTEN的表达呈进行性降低（P＜0.05）.[结论]PTEN表达降低是宫颈癌变过程中的早期事件,也是宫颈组织恶变的信号.检测PTEN有助于了解宫颈癌变的生物学行为.     

P16INK4A在宫颈上皮内瘤变中的表达及与HPV感染的关系

目的 探讨抑癌基因P16INK4A在宫颈上皮内瘤变中的表达情况及其与HPV感染的相关性.方法 采用免疫组化染色法,对59例宫颈上皮瘤变(CIN)标本、30例病理检查为正常宫颈组织的标本进行检测.结果 CIN Ⅰ级组织中ILK表达阳性率62.50％、CIN Ⅱ～Ⅲ级为65.71％,均显著高于正常宫颈组织(23.33％),且差异均具有统计学意义(x2=8.472,P=0.004＜0.05;x2=11.675,P=0.001 ＜0.05);CIN Ⅰ级组织中ILK表达阳性率与CIN Ⅱ～Ⅲ级比较差异无统计学意义(x2=0.064,P =0.800 ＞0.05).P16INK4A在HPV16、HPV18 2种高危型宫颈HPV感染中的表达显著高于其他高危型或者低危型(HPV53、HPV58、HPV6).结论 P16INK4A在宫颈上皮内瘤变(CIN)中显著高表达,同时P16INK4A高表达可能与HPV16、HPV18的阳性表达具有协同作用.     

p16INK4A 和bcl-2 蛋白在CIN 和宫颈鳞癌中的表达

 目的 探讨p16INK4A和bcl-2在宫颈上皮内瘤（CIN）和宫颈鳞癌的表达状态及其在病理诊断中的意义。方法 采用免疫组化SP法对39例CIN、24例浸润性宫颈鳞癌和20例正常官颈组织进行p16INK4A和bck2检测。结果 正常宫颈组织不表达p16INK4A，CINⅠ阳性表达率很低并为局灶表达，但几乎所有的CINⅡ／Ⅲ和浸润性宫颈鳞癌均弥漫大量表达p16INK4A。正常宫颈组织只有基底细胞层表达bcl-2蛋白，CINⅢ和Ⅰ～Ⅱ期浸润癌bcl-2阳性细胞弥漫分布，阳性袁达率分别为53．8％和57．1％。Ⅲ～Ⅳ期浸润癌bcl-2阳性率下降，阳性细胞局限。结论 p16INK4A过表达与宫颈鳞癌恶性特性密切相关，检测p16INK4A有助于及时发现高级别CIN和宫颈鳞癌。     

EB病毒与P16基因蛋白在子宫颈鳞癌中的表达

目的:分析子宫颈EBV感染对抑癌基因P16蛋白表达的影响,探讨EBV的致癌机理。方法:采用组织芯片技术和免疫组织化学S-P法,检测13例正常宫颈、39例宫颈上皮内瘤变和28例宫颈鳞癌组织中EBV及P16蛋白的表达。结果:EBV阳性表达率在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌组分别为15%(2/13)、51%(20/39)和68%(19/28),癌及上皮内瘤变组均明显高于正常宫颈组(P<0·05)。P16在正常宫颈组织与上皮内瘤变及宫颈癌中的阳性表达率分别为7·7%(1/13)、64%(25/39)和79%(22/28),三组间差异有显著性(P<0·05)。EBV感染与非感染的宫颈癌组织中,P16的阳性表达率分别为79%和78%,两组间无显著性差异(P>0·05)。结论:EBV感染与宫颈癌的发病密切相关,但其致癌机制可能不是通过影响抑癌基因P16的表达而引起的。     

宫颈上皮癌变过程中细胞分化的研究

背景与目的:分化障碍是肿瘤的一个重要生物学特性,但迄今为止,对肿瘤分化的研究远不如对肿瘤增殖的研究深入。本实验的目的是研究宫颈上皮癌变过程中细胞分化及其相关调节因素的改变。方法:实验分为宫颈正常鳞状上皮组(normal squamous epithelium,NSE)20例、非典型增生组(dysplasia squamous epithelial hyperplasia,DSEH)19例、原位癌组(squamou scarcinomainsitu,SCIS)39例和浸润癌组(invasivesquamousepithelialcarcinoma,ISEC)20例。用免疫组化SP法检测复层鳞状上皮细胞分化标记物Keratin(KT)10,14,19在各组组织的表达,并用免疫组化SP法及原位杂交分别检测!1整合素(!1-integrin)及!-连环素(!-catenin)的表达。结果:(1)KT10在正常宫颈组、非典型增生组、原位癌组和浸润癌组的强阳性率分别是85.0%、52.6%、18.0%和0%,呈逐渐降低趋势。原位癌组和浸润癌组明显低于正常组和非典型增生组(χ2=11.28,P<0.05;χ2=8.53,P<0.05)。(2)原位癌组和浸润癌组KT14和KT19二者均在部分病例中不表达;而在阳性表达的病例,其阳性细胞数明显多于正常组或非典型增生组,并且阳性表达细胞的空间位置上移,在原位癌病例常弥漫于上皮全层。(3)"1-integrin在正常组、非典型增生组、原位癌组和浸润癌组中的蛋白表达呈逐渐下降趋势,浸润癌组与正常组和非典型增生组两两比较有显著性差异(χ2=7.62,P<0.05,确切概率值0.014,P<0.05);"1-integrin在各组中的mRNA表达虽无显著性差异,但表达下降的趋势与其蛋白表达一致。(4)"-catenin在原位癌组和浸润癌组表达于细胞浆或核内,阳性病例表达细胞明显增多并上移。结论:在宫颈上皮癌变过程中,细胞终末分化受阻,"1-integrin和Wnt信号通路对上皮分化调节的紊乱,与上皮癌变过程中细胞分化的异常有关;原位癌细胞与浸润癌细胞在KT10和"1-integrin表达方面已无本质的区别。     

P16INK4A、Brn-3a、C-myc及端粒酶在宫颈癌中的诊断价值研究

目的 探讨P16INK4A、Brn-3a及C-myc基因表达及端粒酶活性在宫颈癌诊断中的价值。方法 选取2012年3月至2014年5月接受手术治疗的宫颈癌患者40例,检测宫颈癌组织中P16INK4A、Brn-3a、C-myc的表达情况及端粒酶活性水平。同时选取40例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织和28例正常宫颈组织作对比。采用受试者工作特征曲线（ROC）评价组织中P16INK4A、Brn-3a、原癌基因C-myc及端粒酶活性水平在宫颈癌诊断中的价值。结果 宫颈癌组织中P16INK4A、Brn-3a和C-myc的阳性表达率分别为100.0％、95.0％和100.0％,均高于正常宫颈和CIN组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;CIN Ⅱ和CIN Ⅲ组织的P16INK4A阳性表达率高于正常宫颈和CINⅠ组织（P＜0.05）;正常宫颈组织中Brn-3a和C-myc阳性表达率均为7.14％,明显低于其他组织（P＜0.05）;宫颈癌组织中端粒酶活性水平为（44.38±3.82）U／g,高于其余各组,差异有统计学意义（P＜0.05）。Brn-3a、C-myc诊断宫颈癌的曲线下面积Az＞0.8,且灵敏度和特异度均在80.0％以上,而P16INK4A及端粒酶活性水平的诊断效能相对较低,但4个指标联合检测的诊断效能获提高,灵敏度和特异度分别为89.5％和83.4%,曲线下面积Az为0.879。结论 宫颈癌组织中P16INK4A、Brn-3a、C-myc表达水平和端粒酶活性异常,可能与宫颈癌的发生发展有密切关系,可作为宫颈癌诊断的参考指标。     

卫生资源匮乏地区绝经后妇女宫颈癌筛查方法的探讨

目的:探讨适合于卫生资源匮乏地区绝经后妇女的宫颈癌筛查策略.方法:选择已绝经女性405例,所有筛查对象均进行宫颈薄层液基细胞学检测(liquid-based cytology test,LBC)、高危型人乳头瘤病毒DNA检测(high-risk human papilloma virus test,HR-HPV)及P1...     

乳头瘤病毒L1衣壳蛋白及p16INK4A基因在子宫颈病变中的表达及其相关性

 目的　研究乳头瘤病毒衣壳蛋白（HPVL1）及p16INK4A基因在子宫颈病变患者中的表达与相关性。方法　采用免疫组织化学Max-Vision法检测210例HPV阳性液基细胞学标本及组织中HPV L1蛋白及p16INK4A的表达。结果　在各级液基细胞学标本中,HPVL1蛋白阳性率各组比较差异有统计学意义（χ2＝70.50、P＜0.005）,其中低度鳞状上皮内病变（LSIL）组最高[68 %（34／50）];p16INK4A表达阳性率随着病变级别的增高逐渐增高（13 %、28 %、52 %、100 %、100 %）,在子宫颈癌（SCC）组最高[100 %（30／30）]。HPVL1+p16INK4A -率在LSIL组中最高[32 %（16／50）];HPVL1-p16INK4A +率在SCC组最高[100 %（30／30）]。在各级别病理组织中,HPVL1蛋白表达阳性率不同,差异有统计学意义（χ2＝54.37、P＜0.005）,其中,CINⅠ级中最高[60.4 %（32／53）];p16INK4A表达阳性率随着病变级别的增高逐渐增高,在子宫颈癌组最高[100 %（28／28）]。HPVL1+p16-率在CINⅠ级中最高[45.3 %（24／53）];HPVL1-p16+率在子宫颈癌中最高[100 %（28／28）]。结论　HPVL1蛋白与p16INK4A联合检测可以区分不同的子宫颈病变,将有潜在发展与有自愈可能的病例分开,避免漏诊与过度治疗。     

PTEN抑癌基因在人胃癌组织中的表达及意义

目的探讨抑癌基因PTEN在胃癌组织中的表达水平及与其生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学EnVision法检测116例胃癌组织,35例癌旁异型组织,56例癌旁正常黏膜组织中的PTEN蛋白表达情况。结果胃癌组织中PTEN阳性率为53.4 %(62/116),显著低于异型增生、癌旁正常黏膜组织中的阳性率71.4 %(25/35)、100 %(56/56)(P<0.001)。在各组织学类型中,高中分化腺癌PTEN蛋白阳性表达率最高(72.7 %,32/44),显著高于印戒细胞癌(29.2 %,7/24),P<0.001。PTEN蛋白的表达与淋巴结转移、侵袭程度密切相关(P<0.05)。结论PTEN基因的异常改变与胃癌的发生发展密切相关,可能是胃癌进一步恶化的标志之一,可作为胃癌生物学行为的参考指标,为胃癌的基因治疗提供参考依据。     

p16INK4A表达与宫颈癌患者临床病理特征及预后的关系

目的 探讨p16INK4A(p16)蛋白在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)中的表达及其与临床病理特征和预后的相关性.方法 选取宫颈活检和手术切除的宫颈癌患者的宫颈标本100例,CIN组织80例以及正常宫颈组织50例,采用免疫组织化学法对p16蛋白的表达进行检测,并对所得结果进行统计分析.结果 p16在宫颈癌组织、CIN组织与正常宫颈组织中的阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05);p16蛋白的表达强度和阳性表达率与宫颈病变程度呈正相关(r=0.545,P<0.05);p16蛋白阳性表达与宫颈癌的分化程度及淋巴结转移情况有关(P<0.05);p16阳性表达患者的3年生存率低于p16阴性表达患者(P<0.05).结论 p16蛋白表达与宫颈癌的发生、发展及不良预后有关,可以作为判断宫颈癌生物学行为和预后评价的指标.     

Up-regulation of expression and lack of 5' CpG island hypermethylation of <Emphasis Type="Italic">p16 INK4a</Emphasis>in HPV-positive cervical carcinomas

Background  

High risk type human papilloma viruses (HR-HPV) induce carcinomas of the uterine cervix by expressing viral oncogenes E6 and E7. Oncogene E7 of HR-HPV disrupts the pRb/E2F interaction, which negatively regulates the S phase entry. Expression of tumor suppressor p16^ink4a drastically increases in majority of HR-HPV associated carcinomas due to removal of pRb repression. The p16^ink4a overexpression is an indicator of an aberrant expression of viral oncogenes and may serve as a marker for early diagnostic of cervical cancer. On the other hand, in 25–57% of cervical carcinomas hypermethylation of the p16 INK4a promoter has been demonstrated using a methylation-specific PCR, MSP. To evaluate a potential usage of the p16 INK4a 5' CpG island hypermethylation as an indicator of tumor cell along with p16^ink4a overexpression, we analyzed the methylation status of p16 INK4a in cervical carcinomas     

Expression of p16(INK4a) in relation to histopathology and viral load of 'high-risk' HPV types in cervical neoplastic lesions

A total of 91 cervical archival biopsy series were analysed for the presence and viral load of 'high-risk' types of human papillomavirus (HR-HPV), and p16(INK4a) expression. The women had various degrees of CIN (cervical intraepithelial neoplasia). HPV 16 was the most prevalent type found, at 47% frequency. The frequency of HPV 16 increased with increasing immunoreactivity to p16(INK4a), from 39% to 44% at cases scored low to medium, to 65% at high reactivity. Thirty (33%) of the samples had negative p16(INK4a) analysis results, but were positive for HR-HPV. There was no significant correlation between viral load and the level of p16(INK4a) expression, while the grade of CIN correlated to such expressions. Thus, p16(INK4a) expression analysis yielded information which is consistent with results from the histopathology and might complement the HPV analysis in a clinical prognostic procedure in order to find women at risk for cervical cancer.     

不同宫颈组织中PIK3CA、PTEN和p16蛋白表达及其与HPV16/18感染的关系

 目的 探讨PIK3CA、PTEN和p16蛋白在人正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN） 和宫颈鳞癌组织中的表达,以及PIK3CA、PTEN和p16蛋白表达与人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）感染 之间的关系。方法采用免疫组织化学二步法在22例健康者宫颈组织、72例宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）和30例宫颈鳞癌组织中检测PIK3CA、PTEN和p16蛋白的表达,显色原位杂交方 法检测高危型HPV16/18的感染。结果PIK3CA和p16蛋白表达阳性率和HPV16/18的感染率均随着宫颈上皮逐渐恶变而 上升,PTEN蛋白表达却 呈现相反的结果。PIK3CA、PTEN、p16蛋白和 HPV16/18的感染率在宫颈鳞癌和CIN Ⅱ～Ⅲ组中的表达分别与对照组和CIN Ⅰ组相比,差异均有统计学意义（P＜ 0.05）。在宫颈上皮内瘤变组织中,39例（76.47%）CIN Ⅱ～Ⅲ 中显示PIK3CA阳性,仅有9例 （42.86%）CIN Ⅰ中显示 PIK3CA阳性,两组间差异有统计学意义（P=0.006）,而PTEN和p16蛋白在宫颈上皮内瘤 变不同组别中相比差异均无统计学意义。在81例CIN Ⅱ～Ⅲ和鳞癌组织中,PIK3CA和p16蛋白呈显著正相关关系 （P=0.000,r=0.544）。PIK3CA、p16蛋白与PTEN蛋白表达之间,两者均呈显著负相关（P＜0.05）。 HPV16/18阳性的47例标本中,PIK3CA和p16蛋白几乎均呈阳性表达,呈显著正相关（P<0.01）,但PTEN蛋白却有37例呈阴性表达,无显著相关（P=0.116）。结论PIK3CA、PTEN、p16蛋白表达以及高危型HPV感染与宫颈癌的发生发展均密切相关。PIK3CA、PTEN、p16蛋白和高危型HPV感染联合检测,可作为宫颈癌早期癌变的分子标志物。高危型HPV感染可能有助于PIK3CA和p16蛋白的高表达。     

P16INK4a及Ki-67免疫细胞化学检测对ASC-US中高级别病变检出的意义

目的：探讨液基细胞学剩余细胞标本P16INK4a、Ki-67免疫细胞化学染色检测宫颈癌前病变的价值。方法：选取2010年1月至2012年6月因宫颈疾病于北京大学第三医院妇产科就诊患者液基细胞学剩余标本50例。所有患者行高危型HPVDNA杂交捕获II代（HCII）检测,P16INK4a、Ki-67免疫细胞化学检测,同时行阴道镜检查及组织病理学活检。结果：以病理诊断将患者分为CIN2以下组和CIN2及以上组。CIN2及以上组P16INK4a及Ki-67表达量高于CIN2以下组,差异均具有统计学意义（P〈0．05）;P16INK4a或Ki-67检测对高级别病变预测的准确性在ASC—US组中优于异常细胞学组;在ASC—US中,P16INK4a或Ki-67检测对高级别病变预测的准确性优于高危型HPV检测。结论：宫颈脱落细胞中P16INK4a或Ki-67免疫细胞化学检测相比于高危型HPV检测可以提高对ASC—US中高级别病变的检出作用。