雷公藤对哮喘豚鼠IL-5、GM-CSF基因转录的影响及作用机制

探讨雷公藤哮喘ＩＬ－５、ＧＭ－ＣＳＦ基因转录的影响及其机制,方法：采用卵蛋白（ＯＡ）致敏复制哮喘豚鼠模型,用原位杂交就雷公藤甲素对其肺组织和外周血单个核细胞ＩＬ－５、ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达的影响进行检测。并通过凝胶电泳迁移试验（ＥＭＳＡ）检测ＴＰ对伴刀豆蛋白或佛波脂（ＰＭＡ）刺激的人Ｔ细胞活化蛋白－１（ＡＰ－１）的ＤＮＡ结合活性的影响。结果：①哮喘豚鼠肺组织和ＰＢＭＣ－ＩＬ－５、ＧＭ－ＣＳＦｍＲ     

哮喘豚鼠IL-5、IL-3、GM-CSF mRNA表达及雷公藤内酯醇的影响

目的研究ＩＬ－５、ＩＬ－３、ＧＭ－ＣＳＦ在哮喘发病中的作用及雷公藤的干预。方法将实验豚鼠随机分为：①哮喘组（ｎ＝８）：用卵蛋白雾化吸入诱导哮喘模型；②处理组（ｎ＝８）：用雷公藤内酯醇腹腔注射处理哮喘模型；③正常对照组（ｎ＝８）。制备ＩＬ－５、ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦｃＤＮＡ探针，用斑点印迹杂交法检测以上三组豚鼠支气管肺组织ＩＬ－５、ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ的表达。结果哮喘豚鼠支气管肺组织ＩＬ－５、ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达显著高于对照组（Ｐ＜０．０５～０．００１）；雷公藤处理组ＩＬ－５、ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达低于哮喘组（Ｐ＜０．０５～０．００１），与对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论哮喘豚鼠肺组织中有明显的ＩＬ－５、ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ表达增加。雷公藤内酯醇能抑制体内ＩＬ－５、ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦｍＲＮＡ的表达，可能在哮喘抗炎中具有潜在的临床价值。     

哮喘豚鼠IL—5,IL—3,GM—CSF mRNA表达及雷公藤内？…

目的 研究ＩＬ－５、ＩＬ－３、ＧＭ－ＣＳＦ在哮喘发病中的作用及雷公藤的干预。方法 将实验豚鼠随机分为：①哮喘组（ｎ＝８）；用卵蛋白雾化吸入诱导哮喘模型；②处理组（ｎ＝８）：用雷公藤内酯醇腹腔注射处理哮喘模型；③正常对照组（ｎ＝８）。制备ＩＬ－５、ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦ ｃＤＮＡ探针，用斑点印迹杂交法检测以上三组豚鼠支气管肺组织ＩＬ－５、ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ的表达。结果 哮喘豚鼠支气管肺     

雷公藤对哮喘豚鼠外周血淋巴细胞IL-5、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子mRNA及CD4+、CD8+表达的影响

目的：探讨哮喘豚鼠白介素－ ５（ＩＬ－ ５） 、粒细胞－ 巨噬细胞集落刺激因子（ ＧＭ － ＣＳＦ） 及ＣＤ４ ＋ 和ＣＤ８ ＋ Ｔ 细胞在哮喘发病中的作用及雷公藤的干预作用。方法：实验分为哮喘组、雷公藤治疗组（ 处理组） 和对照组,每组各１０ 只豚鼠,采用原位杂交方法检测豚鼠外周血淋巴细胞的ＩＬ－ ５ 、ＧＭ－ ＣＳＦ ｍ ＲＮＡ 表达;应用免疫细胞化学方法检测外周血淋巴细胞ＣＤ４ ＋ 和ＣＤ８ ＋ 的表达。结果：哮喘组外周血淋巴细胞ＩＬ－ ５ 、ＧＭ－ ＣＳＦ－ ｍ ＲＮＡ 表达均明显高于处理组和对照组（ Ｐ＜ ０－０１） ,而处理组和对照组无显著差异。哮喘组外周血淋巴细胞ＣＤ４ ＋ 表达明显高于对照组和处理组（ Ｐ＜０－０１） ,ＣＤ８ ＋ 表达低于对照组和处理组（ Ｐ＜ ０－０５） 。结论：哮喘豚鼠外周血淋巴细胞ＩＬ－ ５ 、ＧＭ － ＣＳＦ ｍ ＲＮＡ 表达增高、ＣＤ４ ＋ 表达增高,ＣＤ８ ＋ 表达降低,而雷公藤甲素可降低外周血淋巴细胞ＩＬ－ ５ 、ＧＭ － ＣＳＦ ｍＲＮＡ 表达,并可提高ＣＤ８ ＋ 表达,降低ＣＤ４ ＋ 表达。表明雷公藤可能在抗哮喘气道炎症中发挥一定作用     

白细胞介素10基因转移抑制肾小球系膜细胞诱生炎症细胞因子

目的：通过建立白细胞介素１０（ＩＬ－１０）的重组逆转录病毒载体基因转移系统,观察ＩＬ－１０对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｍｅｓｅｎｇｉａｌｃｅｌ,ＧＭＣ）中细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法：通过构建的重组逆转录病毒载体ｐＬＸ（ＩＬ－１０）ＳＮ将外源基因ＩＬ－１０转移至大鼠ＧＭＣ：（１）应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）,反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ检测ＩＬ－１０基因的整合和表达;（２）以ＲＴ－ＰＣＲ观察ＩＬ－１０基因转移对ＬＰＳ诱导的ＧＭＣ肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）的ｍＲＮＡ表达的影响,以ＥＬＩＳＡ测定白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）和ＴＮＦ－α的蛋白质表达。结果：外源性ＩＬ－１０基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地表达,它能抑制ＬＰＳ诱生ＧＭＣ过度产生ＩＬ－１β,ＴＮＦ－α。结论：外源性ＩＬ－１０基因可以转移到ＧＭＣ并稳定表达,它能抑制ＧＭＣ炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。     

163体外培养的人胸原上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥＣ）的体外培养和传代。使研究人ＴＥＣ的特性和功能成为可能。人ＴＥＣ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的ＴＥＣ除表达角蛋外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原，ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ＿ＣＳＦ，Ｇ＿ＣＳＦ和Ｍ＿ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ     

加味射麻汤对哮喘豚鼠GM-CSF和ET水平的影响

用卵蛋白致敏诱发豚鼠哮喘模型,以放射免疫分析法测定经加味射麻汤治疗的动物肺组织和血浆中粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和内皮素（ＥＴ）含量的变化。结果表明,模型组豚鼠肺组织ＧＭ－ＣＳＦ（Ｐ〈０．０５）、ＥＴ（Ｐ〈０．００１）以及血浆中ＥＴ（Ｐ〈０．００１）含量比对照组显著升高。加味射麻汤和地塞米松均能使哮喘豚鼠肺组织中ＧＭ－ＣＳＦ、ＥＴ和血浆中ＥＴ含量下降。提示ＧＭ－ＣＳＦ和ＥＴ参与了支气管哮喘的发病机制,而加味射麻汤的作用机理与调节ＧＭ－ＣＳＦ和ＥＴ水平有关,表明该方药具有哮喘抗炎治疗的应用价值。     

体外培养的人胸腺上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥｃ）的体外培养和传代，使研究人ＴＥｃ的特性和功能成为可能。人ＴＥｃ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的人ＴＥｃ除表达角蛋白外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原、ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ－ＣＳＦ，Ｇ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＳ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３和ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１共同介导；ＴＥＣ对成熟的胸腺细胞有辅助增殖的作用，对不成熟的胸腺细胞有直接激活作用：胸腺细胞可通过直接作用和分泌细胞因子的间接作用来调节ＴＥＣ的细胞因子分泌和表面抗原表达。     

rhGM—CSF／IL—3融合蛋白对人骨髓造血祖细胞体外培养的研究

研究了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３融合蛋白对人骨髓造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ）集落形成的影响，结果表明ｒｈＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３能显著促进ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成，分别与ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３单独或联合用药比较，差异有显著性（Ｐ〈０．００１），ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ＝ＧＥＭＭ、ＢＦＵ－Ｅ集落的形成对融合蛋白均有剂量依赖性，培养体系浓度在５￣１０ｎ     

雷公藤多甙对格林—巴利综合征患者血清和脑脊液IL—6,sIL—2R的影响研究

格林－巴利综合征（ＧＢＳ）患者血清、脑脊液（ＣＳＦ）白细胞介素６（ＩＬ－６）、ｓＩＬ－２Ｒ的配对研究国内报道不多。我们用双抗体夹心ＥＬＬＳＡ法分别检测了ＧＢＳ患者经雷公藤多甙（ＴＩＩ）治疗前后血清、ＣＳＦ配对标本的ＩＬ－６、ｓＩＬ－２Ｒ水平,探讨这些细胞因子在ＧＢＳ发病中的作用及ＴＩＩ治疗ＧＢＳ的作用机理。     

登革病毒对人血管内皮细胞产生细胞因子的影响

目的了解登革病毒感染对人血管内皮细胞产生几种细胞因子的影响。方法用登革病毒Ⅱ型（ＤＶ－２）及ＬＰＳ单独作用或联合作用于人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ），于作用后４，２４，４８，７２和９６小时分别收集培养上清液，用ＥＬＩＳＡ法检测ＧＭ－ＣＳＦ，ＩＬ－６和ＴＮＦα的含量。实验数据采用方差分析处理。结果ＤＶ－２感染能使ＨＵＶＥＣ分泌ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６的能力增强。病毒感染后４小时，ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６的水平开始升高，并分别于感染后７２和２４小时达高峰，然后开始下降。然而，ＤＶ－２感染并不能提高ＨＵＶＥＣ分泌ＴＮＦα的能力。ＬＰＳ单独作用或ＤＶ－２与ＬＰＳ联合作用均可提高ＨＵＶＥＣ分泌ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６的能力，但对分泌ＴＮＦα的能力没有明显的促进作用。结论登革病毒感染能提高ＨＵＶＥＣ分泌ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６的能力。细胞因子在登革病毒的致病与免疫过程中可能起重要作用。     

细胞因子移植排斥反应

急性器官移植排斥反应时，多种细胞因子血清水平呈现升高现象，但需要与感染及ＣＭＶ等因素引起的细胞因子变化鉴别。移植物局部以ＩＬ－１，ＴＮＦ及Ｍ－ＣＳＦ升高为明显，ＩＬ－２，ＩＬ－３，ＩＬ－４，ＩＬ－６，Ｇ－ＣＳＦ或ＧＭ－ＣＳＦ未见升高。实体器官排斥时ＩＬ－４ｍＲＮＡ，ＩＬ－２ｍＲＮＡ及ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达可升高。而炎性因子ＩＬ－１βｍＲＮＡ，ＩＬ－６ｍＲＮＡ及ＴＮＦａｍＲＮＡ表达不升高。某些细胞因子     

破骨细胞分化成熟调节的分子机理研究进展

破骨细胞 (ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ ,ＯＣ)来源于骨髓中的粒 -巨噬细胞克隆形成单位 (ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅａｎｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙｆｏｒｍｉｎｇｃｅｌｌｓ ,ＣＦＵ -ＧＭ)。ＯＣ的分化和 /或功能变化所导致的骨再建失衡是多种代谢性骨病 ,如骨质疏松症、骨质硬化症和畸形性骨炎 (Ｐａｇｅｔ骨病 )等形成的病理基础。目前已经证明多种激素和局部细胞因子如活性维生素Ｄ3 (1,2 5 (ＯＨ) 2 Ｄ3 )、糖皮质激素、甲状旁腺素 (ＰＴＨ)、前列腺素 (ＰＧＥ2 )、ＩＬ - 4、ＩＬ -6、ＩＬ - 11、ＩＬ - 12等不仅能调节破骨细胞生成…     

哮喘患者外周血单个核细胞IL-5、IL-3 mRNA表达的研究

嗜酸细胞（ＥＯＳ）是哮喘慢性炎症中的关键效应细胞。ＩＬ５、ＩＬ３能促进ＥＯＳ在骨髓的分化、成熟,使机体的ＥＯＳ产生增多,并促使ＥＯＳ在支气管肺组织的聚集及活化。哮喘患者外周血、支气管粘膜、支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＩＬ５明显升高［１］。ＩＬ３对ＥＯＳ的作用较ＩＬ５弱,它在哮喘发病机理中的作用仍有争议。本文通过对哮喘患者ＰＢＭＣＩＬ５ｍＲＮＡ、ＩＬ３ｍＲＮＡ表达水平的研究,探讨其在哮喘发病中的作用。１　材料与方法１．１　研究对象　哮喘组：哮喘患者１３例,男８例,女５例,平均年龄３…     

重组人GM-CSF／IL-3融合蛋白(G3)的分离纯化

Ｇ３是由基因工程技术构建、在大肠杆菌中高效表达获得的由ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３组成的融合蛋白,能刺激造血细胞的增殖、分化和调节免疫应答。Ｇ３的生物学活性与ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－３相比有明显提高［１］。本文用抗Ｇ３单抗（ＭＧ３１）分别与ＣＮ－Ｂｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ和ｒＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ偶联制备免疫亲和色谱（ＩＡＣ）柱,对Ｇ３进行纯化,取得了满意的结果。１　材料和方法１．１　ＭＧ３１单抗［２］的纯化　饱和硫酸铵溶液沉淀法。１．２　ＭＧ３１－ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱（…     

雷公藤甲素抑制IL—5介导的人嗜酸性粒细胞存活延长作？…

目的：探讨雷公藤甲素（ＴＰ）对体外ＩＬ－５介导的人嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）存活延长作用的时间。方法：在不同浓度ＩＬ－５和ＴＰ的条件下体外培养Ｅｏｓ，台盼蓝拒染法观察细胞活力的变化，结合原位末端标记和ＤＮＡ电泳检测Ｅｏｓ凋亡的变化。免疫组化检测ＴＰ刺激后Ｅｏｓ凋亡基因Ｆａｓ表达的变化。结果：ＩＬ－５显著延长Ｅｏｓ体外存活的时间，ＴＰ呈浓度和时间依赖性抑制ＩＬ－５介导的Ｅｏｓ存活延长作用，ＴＰ（１０＾－     

结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的制备

ＣＦＰ10和ＥＳＡＴ6都是结核分枝杆菌(Ｍ .ｔｂ)特有的、有良好抗原性的分泌性蛋白 ,将其编码基因 1ｈｐ和ｅｓａｔ6用ＧｅｎｅＳＯＥｉｎｇ法通过Ｌｉｎｋｅｒ (Ｇｌｙ4 Ｓｅｒ) 3构建成融合基因 ,并克隆入ｐＱＥ30质粒 ,表达、纯化、鉴定ｒＣＦＰ10 ＥＳＡＴ6 ,为其应用于Ｍ .ｔｂ感染的诊断和预防奠定基础。1 1ｈｐ ｅｓａｔ6基因的构建 :以已构建的ｐＱＥ30 ＣＦＰ10质粒为模板 ,用引物(Ｐ1) 5′ ＣＣＧＧＡＴＣＣＡＴＧＧＣＡＧＡＧＡＴＧＡＡＧＡＣ 3′和 (Ｐ2 ) 5′ ＧＣＴＧＣＣＧＣＣＡＣＣＧＣＣＧＣＴＴＣＣＧＣＣＡＣＣＧＣ…     

环胞素A治疗哮喘豚鼠的抗炎机制探讨

环胞素Ａ（ＣｓＡ）能强力抑制Ｔ－淋巴细胞的增殖和淋巴因子的产生和释放,抑制肥大细胞白细胞介素－５（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－５,ＩＬ－５）等细胞因子的表达,抑制酸性粒细胞（ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ,Ｅｏｓ）的增生,并已有ＣｓＡ治疗哮喘的临床报道,但其具体的...     

TPA及细胞因子对U937细胞中IL—1β mRNA表达的影响

本文利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交法，检测了几种细胞因子及ＴＰＡ对人单核细胞白血病传代细胞系Ｕ９３７细胞中ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达的影响。结果显示，ＴＮＦ－α，ＩＬ－６，ＩＦＮ－γ，ＩＬ－２，ＩＬ－３，ＩＬ－８，ＩＬ－９和ＧＭ－ＣＳＦ对ＩＬ－１βＲＮＡ的表达，均有不同程度的刺激作用，尤以ＴＮＦ－α和ＩＬ－６最为明显，ＴＰＡ刺激Ｕ９３７细胞表达ＩＬ－１β ｍＲＮＡ的时间效应显示，１２ｈ表达量较高；９ｈ表达     

抗人重组IL—1单克隆抗体的制备及初步鉴定

以重组人ＩＬ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞６５３融合，得到一组分泌抗人重组ＩＬ－１单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的３株 ＹＡ１３３、ＹＡ１４０和ＹＡ１６３进行了初步鉴定，抗体类别为ＩｇＧ，亚类均为ＩｇＧ１，免疫转印显示，３株抗体均能特异性地识别分子量为１７．５ｋＤ的ＩＬ－１蛋白条带，ＥＬＩＳＡ法证明与其它细胞因子如：ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＴＮＤ－α，ＩＦＮ－γ和ＧＭ－ＣＳＦ均无