茶多酚对缺氧诱导的胆管癌细胞QBC939增殖及凋亡的影响与机制

目的 建立缺氧模型,观察EGCG对缺氧诱导的QBC939胆管癌细胞增殖、凋亡与转移的影响及其与VEGF表达的关系.方法 QBC939低氧培养,MTT观察EGCG对缺氧诱导的胆管癌细胞增殖的影响,过河实验观察EGCG对缺氧诱导的胆管癌细胞迁移的影响,用流式细胞术观察缺氧对细胞周期和细胞凋亡率的影响,利用ELISA观察缺氧诱导对胆管癌细胞VEGF表达的影响.结果 EGCG呈浓度和时间依赖性抑制缺氧诱导的胆管癌增殖;缺氧胆管癌细胞过河时间为(15.2±0.94)h,较常氧组(23.1±2.14)h显著缩短,EGCG(40、80和160μmol/L)使缺氧胆管癌细胞过河时间显著延长[(24.1±2.34)、(36.7±3.27)和(47.8±3.04)h];缺氧胆管癌细胞经EGCG(40、80和160μmol/L)处理后,G1期细胞和凋亡率显著增加,同时伴有S期和G2期细胞减少;缺氧诱导组VEGF表达量为(2 515.2±190.1)Pg/mL,EGCG(40、80和160μ mol/L)处理组,VEGF合成显著下降[(2 419.8±231.7)、(1 736.7±203.2)和(935.7±125.4)Pg/mL].结论 EGCG可抑制胆管癌细胞的增殖与迁移,其机制与下调VEGF表达有关.     

阻断ErbB4受体对人胆管细胞癌QBC939细胞系增殖与转移的影响

目的:通过体外培养人胆管癌QBC939细胞系,阻断ErbB4受体,检测肿瘤生物学行为的改变,从而探讨人类第4表皮生长因子(ErbB4)受体介导人胆管细胞癌肿瘤生物学行为的分子机制.方法:体外培养人胆管癌QBC939细胞系细胞,分别加入终浓度为0μmol/L,1μmol/L,5μmol/L,10μmol/L,25μmol/L,50μmol/L,75μmol/L,100μmol/L的AG1478阻断胆管癌细胞ErbB4受体,使用CCK-8法测量各组胆管癌细胞增殖情况,然后利用SPSS软件计算AG1478对人胆管癌QBC939细胞的半数抑制浓度(IC50值);根据IC50值选择使用0μmol/L,25μmol/L,50μmol/L,75μmol/L AG1478阻断胆管癌细胞ErbB4受体,使用划痕实验检测各组胆管癌细胞迁移能力的变化.分别使用0μmol/L,25μmol/L,50μmol/L,75μmol/L浓度AG1478阻断胆管癌细胞ErbB4受体,使用Transwell小室法实验检测各组胆管癌细胞侵袭能力的变化.结果:AG1478以浓度依赖方式抑制QBC939细胞增殖,其IC50值为:49.14μmol/L;AG1478抑制ErbB4受体后,胆管癌QBC939细胞的迁移、侵袭能力减弱.结论:在体外抑制ErbB4受体能使胆管癌肿瘤细胞生长、迁移、侵袭能力减弱;ErBb4在胆管癌的发生、发展中具有重要的作用,ErbB4可能成为胆管癌分子治疗的新靶点.     

三氧化二砷对胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)对胆管癌癌细胞株QBC939的增殖抑制作用并初步探讨其机制。方法 胆管癌细胞株QBC939用不同浓度As2O3处理，活细胞计数和细胞克隆试验观察As2O3对细胞动力学的影响；丫啶橙荧光染色、透射电镜，TUNEL观察细胞凋亡；流式细胞仪测定细胞凋亡和细胞周期变化；增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2单抗SABC免疫组化染色。结果 在0．75-6μmol/L范围内，As2O3明显抑制QBC939细胞增殖和诱导细胞凋亡，其作用随As2O3浓度增加和作用时间延长而增强；相应地PCNA和bcl-2表达减弱。流式细胞仪检测可见明显的凋亡峰，并阻滞细胞周期的G2-M期。结论 As2O3可明显抑制胆管癌细胞株QBC939的生长、诱导癌细胞凋亡，有临床治疗胆管癌的潜在价值。     

蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939增殖及cyclin E和P27蛋白表达影响的研究

目的 已有诸多研究显示中药蟾蜍灵具有明显抑制肿瘤增殖的作用,观察蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939的cyclin E和P27表达的影响,探讨其调控胆管癌细胞增殖的途径和机制. 方法 MTT比色法观察不同浓度蟾蜍灵(0.1、1、10μmol/L)对人胆管癌细胞QBC939增殖的影响;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)实验检测蟾蜍灵毒性;流式细胞术检测人胆管癌细胞QBC939细胞周期的变化;Western blot法测定cyclin E、P27蛋白水平变化. 结果 MTT比色法结果 表明蟾蜍灵对人胆管癌细胞QBC939生长具有较强的抑制作用,并在一定范围内具有时间和浓度依赖性,流式细胞仪检测细胞周期阻滞在G0/G1期,具有良好的量效关系.Western blot 测定cyclin E蛋白表达量下降,P27蛋白表达量升高. 结论 蟾蜍灵可能是通过阻滞细胞周期,减少cyclinE蛋白表达,增加P27蛋白表达,来达到抗肿瘤作用.     

TRAIL受体在胆管癌组织中的表达及意义

目的 :探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)的受体在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)的表达及其临床意义。 方法 :应用原位杂交组织化学法检测TRAIL受体mRNA在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)中的表达。 结果 :DR4mRNA、DR5mRNA在人胆管癌组织、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)均呈阳性表达。只有 3例DcR1(3/5 2 )和 7例DcR2 (7/5 2 )在人胆管癌组织呈弱阳性表达。DcR1、DcR2 mRNA在癌旁胆管组织呈阳性表达 ,而在胆管癌细胞株 (QBC939)均不表达。 结论 :TRAIL死亡受体和诱捕受体在人胆管癌、癌旁胆管组织和胆管癌细胞株 (QBC939)的表达不同 ,这些受体表达的变化可能在调控人胆管癌凋亡中发挥重要作用。     

17-DMAG对缺氧肿瘤细胞的辐射敏感性影响

目的研究17-DMAG对缺氧模拟剂氯化钴（CoCl2）诱导的人宫颈癌HeLa细胞的辐射敏感性影响。方法首先应用不同浓度的CoCl2处理HeLa细胞24h,采用Western blot技术检测HIF-1α蛋白表达量,然后选取浓度为200μmol/L的CoGl2对Hela细胞进行模拟缺氧处理24 h,应用不同浓度的17-DMAG预处理细胞16h后,接受2、4、6、8Gy不同剂量的射线照射,采用克隆形成实验观察细胞的存活率,应用Western blot技术检测HIF-1α蛋白表达。结果在CoCl_2浓度为200μmol/L时HIF-1a蛋白表达量最强;不同浓度17-DMAG处理组的HeLa细胞在不同照射剂量组间的存活率差异均有高度统计学论（均P〈0.01）;17-DMAG预处理缺氧HeLa细胞后,HIF-1a蛋白表达随药物浓度增加受到显著抑制。结论 17-DMAG预处理可增加缺氧细胞辐射敏感性,其机制可能是通过抑制HIF-1a蛋白表达而发挥作用。     

DHA和NS-398联合对人胆管癌QBC939细胞的抑制作用

目的 研究二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和选择性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂NS-398联合对人胆管癌细胞QBC939的抑制作用。 方法 体外培养人胆管癌QBC939细胞株,分别设立DHA浓度组、NS-398浓度组、二者联合组和空白对照组,即将0、15、30、45、60、75 μg/ml浓度的DHA和0、25、50、100、150、200 μmol/L浓度的NS-398分别联合作用于胆管癌QBC939细胞;应用CCK8法检测其分别对QBC939细胞生长的相对抑制率;采用流式细胞术检测QBC939细胞的凋亡情况;应用Transwell小室检测QBC939细胞的体外侵袭情况。 结果 DHA和NS-398在体外均能够单独抑制QBC939细胞生长,45 μg/ml的DHA联合100 μmol/L的NS-398经24 h作用后,细胞生长抑制率达到90%,实验组与DHA浓度组、NS-398浓度组和空白组差异均有统计学意义(P<0.05),继续增加2种药物浓度,细胞生长抑制率变化不明显;流式细胞术显示DHA和NS-398联合能明显促进QBC939细胞早期凋亡;15 μg/ml的DHA联合50 μmol/L的NS-398经24 h作用后,对胆管癌细胞生长无明显抑制作用,但QBC939的体外侵袭能力明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。 结论 DHA和NS-398联合能明显抑制胆管癌QBC939细胞生长,促进胆管癌细胞早期凋亡,抑制胆管癌细胞的侵袭,二者联合对胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用可能是通过促进细胞早期凋亡实现的。      

COX-2途径对胆管癌细胞血管内皮生长因子影响的实验研究

目的：研究COX-2与胆管癌血管生成的关系及胆管癌血管生成的可能机制。方法：应用不同浓度的选择性环氧合酶-2抑制剂尼美舒利分别处理胆管癌细胞株QBC939,于作用的不同时间收集细胞,应用酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunoadsordent assay,ELISA）检测药物处理前后培养细胞上清液中分泌的VEGF浓度;应用RT-PCR检测药物处理前后胆管癌细胞株QBC939中COX-2/VEGF基因的表达变化;采用SP免疫组化染色观察药物处理前后胆管癌细胞株QBC939中COX-2/VEGF蛋白的表达情况。结果：（1）ELISA表明随着尼美舒利浓度增加,胆管癌细胞QBC939上清液中分泌的VEGF浓度下降;（2）免疫组化测定显示随着尼美舒利浓度增加,COX-2和VEGF在QBC939细胞浆中表达下调;（3）RT-PCR测定显示随着尼美舒利浓度增加,COX-2和VEGF在QBC939细胞核中表达下调。结论：（1）COX-2在胆管癌中高度表达可能与胆管癌血管发生有密切联系;（2）选择性COX-2抑制剂尼美舒利对体外培养的胆管癌细胞株QBC939的VEGF有抑制作用,呈剂量依赖性和时间依赖性,并且可能通过COX-2途径发挥其抗肿瘤血管生成作用。     

5-氮-2′-脱氧胞苷对胆管癌细胞株生长周期及凋亡的影响

目的 研究甲基化抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷对胆管癌细胞株生长周期及凋亡的影响,初步探讨其应用于临床治疗的可能性。方法 应用MTT法检测不同浓度的5-氮-2’-脱氧胞苷对胆管癌细胞株QBC939存活率的影响,应用流式细胞术检测5-氮-2’-脱氧胞苷对QBC939细胞生长周期及凋亡率的影响。结果 5-氮-2’-脱氧胞苷在浓度为0.5μmol/L时即可以抑制胆管癌细胞QBC939的增殖,24 h半数致死量为5.0 μmol/L,细胞周期中处于G0/G1期的细胞比例增多,凋亡的发生率增高,而且以上作用与药物浓度及作用时间在一定范围内呈正相关。结论 5-氮-2’-脱氧胞苷可能通过消除某些抑癌基因的启动子甲基化状态,使其重新表达而抑制胆管癌细胞的生长,并促进其凋亡。     

西罗莫司对肝癌HepG2细胞中HIF-1α表达影响

目的 研究西罗莫司对氯化钴(CoCl2)诱导的肝癌Hep2细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响.方法 用CoCl2诱导细胞模拟缺氧微环境,并根据CoCl2浓度不同分为0、50、100、200及00 μmol/L组;选择CoCl2浓度为200 μmol/L来模拟肿瘤内缺氧微环境,同时分别联合0、10、20、30、0 nmol/L的西罗莫司作用于细胞2 h.应用逆转录-聚合酶链反应检测HIF-1α mRNA的表达.结果 随CoCl2浓度提高,HIF-1α mRNA的表达升高(F=103.67,q=.83～2.15,P<0.05),其中CoCl2浓度为200和00 μmol/L两组比较差异无显著性(q=0.69,P>0.05);西罗莫司可使Hep2细胞HIF-1α mRNA的表达降低并呈剂量依赖性(F=127.90,q=.2～28.28,P<0.05).结论 缺氧微环境可以促进Hep2细胞中HIF-1α mRNA的表达,HIF-1α可能通过在细胞缺氧调控中起作用而参与了肿瘤的发生发展.西罗莫司可以抑制HIF-1α mRNA的表达,这可能是其抗肿瘤的机制之一.     

腺病毒介导的p16对胆管癌细胞的生长抑制作用

目的 研究p16基因对胆管癌细胞的作用。方法 将重组体腺病毒p16转移到人胆管癌细胞QBC939,对p16基因的表达、细胞的生长抑制及机制进行分析。结果 用Ad-LacZ进行重组体腺病毒转导效率的检测,发现当MOI为100以上时,重组体朱病毒可使90%以上的培养的人胆管癌QBC939细胞被转导,用RT-PCR方法检测,在胆管癌QTBC939细胞系中p16呈低表达,重组体腺病毒能介导外源基因p16在胆管癌QBC939细胞系中高效表达,重组体朱病毒介导的p16在QBC939细胞中表达,能抑制QBC939细胞的生长和集落形成。流式细胞计数和细胞DNALadder,证实p16能诱导QBC939细胞发生凋亡并导致其发生G1期阻滞。结论 p16基因通过诱导肿瘤细胞凋亡及G1期阻滞在肿瘤的基因治疗方面发挥作用。     

塞来昔布对胆管癌细胞株QBC939 VEGF表达的影响

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对胆管癌细胞株QBC939血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响. 方法 体外培养胆管癌细胞株QBC939,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测塞来昔布与胆管癌细胞株QBC939 VEGF表达问的时-效关系和量-效关系. 结果 塞来昔布在一定剂量(20～80 μmol/L)和时间(12～48 h)内显著抑制QBC939细胞VEGF mRNA的表达和培养上清液中VEGF的浓度,与单独培养液对照组比较,差别有统计学意义(P＜0.05). 结论 选择性COX-2抑制剂塞来昔布可在一定时间和剂量范围抑制胆管癌细胞株QBC939 VEGF的表达.     

5-氮-2’-脱氧胞苷对胆管癌细胞株生长周期及凋亡的影响

目的 研究甲基化抑制剂5-氮-2‘-脱氧胞苷对胆管癌细胞株生长周期及凋亡的影响，初步探讨其应用于临床治疗的可能性。方法 应用MTT法检测不同浓度的5-氮-2‘-脱氧胞苷对胆管癌细胞株QBC939存活率的影响，应用流式细胞术检测5-氮-2‘-脱氧胞苷对QBC939细胞生长周期及凋亡率的影响。结果 5-氮-2‘-脱氧胞苷在浓度为0．5μmol／L时即可以抑制胆管癌细胞QBC939的增殖，24h半数致死量为5．0μmol／L，细胞周期中处于G0／G1的细胞比例增多，凋亡的发生率增高，而且以上作用与药物浓度及作用时间在一定范围内呈正相关。结论 5-氮-2‘-脱氧胞苷可能通过消除某些抑癌基因的启动子甲基化状态，使其重新表达而抑制胆管癌细胞的生长，并促进其凋亡。     

塞来昔布对胆管癌细胞株QB0939 VEGF表达的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对胆管癌细胞株QBC939血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法体外培养胆管癌细胞株QBC939,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测塞来昔布与胆管癌细胞株QBC939VEGF表达间的时-效关系和量-效关系。结果塞来昔布在一定剂量（20-80μmol／L）和时间（12-48h）内显著抑制QBC939细胞VEGFmRNA的表达和培养上清液中VEGF的浓度,与单独培养液对照组比较,差别有统计学意义（P〈0．05）。结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布可在一定时间和剂量范围抑制胆管癌细胞株QBC939VEGF的表达。     

氯化钴对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响及其机制

目的研究氯化钴(CoCl2)诱导的低氧对甲状腺乳头状癌NPA细胞上皮间质转化的影响,初步探讨HIF-1α在其中的机制。方法 MTT检测CoCl2(50、100、150、200、250μmol/L)对细胞活力的影响,倒置显微镜观察低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、12、24、48 h)对细胞形态的影响,Western blot检测低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、3、6、12、24 h)对HIF-1α、E-cadherin和Vimentin表达的影响,Transwell法检测低氧(150μmol/L的CoCl2分别作用0、6 h)对细胞侵袭、转移的影响,用免疫荧光对HIF-1α蛋白进行亚细胞定位。结果低氧模拟剂CoCl2可抑制NPA细胞活力。随着CoCl2低氧处理时间的延长,NPA细胞逐渐获得间质细胞的形态特征,HIF-1α、Vimentin表达在0～6 h逐渐增加,随后开始下降,E-cadherin表达持续降低,低氧0 h与6 h相比各蛋白表达均具有统计学差异(P<0.01)。低氧组侵袭、转移细胞数目较对照组明显增加(P<0.01),同时低氧组细胞HIF-1α发生核转位。结论 CoCl2模拟化学性低氧可促进NPA细胞上皮间质转化及侵袭、转移,其分子机制可能涉及HIF-1α介导的信号通路对E-cadherin、Vimentin基因表达的调控。     

冬凌草甲素对胆管癌QBC939细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响

目的 探讨冬凌草甲素对胆管癌细胞系QBC939细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响.方法 采用不同浓度冬凌草甲素(0、10、20、40、80、100μmol/L)处理QBC939细胞24、48、72 h,MTT法测定QBC939细胞活力并计算增殖抑制率;不同浓度冬凌草甲素(0、20、40、80 μmol/L)处理QBC939细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,Western Blot法检测QBC939细胞B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达,端粒酶重复序列扩增法检测QBC939细胞的端粒酶活性.结果 QBC939细胞增殖抑制率随冬凌草甲素的药物浓度升高、作用时间延长而升高;与0μmol/L冬凌草甲素组相比,其他浓度冬凌草甲素组的S期细胞比例降低;0、20、40、80 μmol/L冬凌草甲素组QBC939细胞的凋亡率分别为0.5％、14.8％、25.8％及37.7％;Western Blot结果显示随着药物浓度的升高,QBC939细胞的Bax表达量逐渐升高,Bcl-2表达量逐渐降低;其他浓度冬凌草甲素组QBC939的端粒酶活性均低于0μmoL/L冬凌草甲素组,且QBC939细胞的端粒酶活性随冬凌草甲素浓度的升高而降低(P＜0.05).结论 冬凌草甲素可抑制QBC939细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制Bel-2表达以降低端粒酶活性有关.     

烯脂酰辅酶A水合酶短链1对胆管癌细胞Warburg效应的影响

【摘要】 目的 研究烯脂酰辅酶A水合酶短链1（Enoyl coenzyme A hydratase short chain 1，ECHS1）对胆管癌细胞Warburg效应的影响以及对人胆管癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法 本研究分为实验组及对照组，实验组：干扰ECHS1基因；对照组：ECHS1未干扰；采用酶标仪测定ECHS1对胆管癌QBC939糖酵解代谢的影响；采用免疫组化法检测糖酵解代谢关键酶PKM2表达水平变化，分析ECHS1对胆管癌Warburg效应的影响；同时将构建的含siECHS1 siRNA的质粒转染人胆管癌细胞QBC939，建立裸鼠皮下移植瘤模型。观察siRNA干扰ECHS1表达对胆管癌细胞QBC939裸鼠移植瘤生长的影响。结果 酶标仪测定显示，实验组胆管癌细胞QBC939对葡萄糖的吸收较对照组明显减少，实验组胆管癌细胞QBC939乳酸生成降低，差异均有统计学意义（P＜005）；免疫组化法检测结果表明，较对照组而言，干扰ECHS1可降低实验组胆管癌QBC939细胞中PKM2的表达，差异有统计学意义（P＜005）。抑制ECHS1表达可减小实验组裸鼠皮下肿瘤大小(P＜005)。结论 ECHS1通过调控PKM2蛋白表达影响胆管癌QBC939细胞Warburg效应，同时抑制胆管癌的增殖。     

尼美舒利对氯化钴诱导的BGC-823细胞HIF-1α及VEGF表达的影响

目的:研究选择性COX-2抑制剂尼美舒利对低氧模拟剂氯化钴诱导的胃癌细胞株BGC-823 HIF-1α、VEGF表达的影响.方法:分别应用150μmol/L氯化钴单独或联合10μmol/L、40 μmol/L、80μmol/L的尼美舒利作用于BGC-823细胞24 h,收集细胞,应用RT-PCR和Western blot技术检测HIF-1 α及VEGF的表达.以胎牛血清加RPMI 1640培养基培养细胞作正常对照.结果:与正常对照组比较,150μmol/L氯化钴刺激24 h,可显著提高细胞HIF-1 α蛋白、VEGF mRNA和蛋白的表达(P＜0.01),但对HIF-1α mRNA表达无影响.与氯化钴单独作用比较,尼美舒利和氯化钴联合作用24 h,细胞HIF-1 α蛋白、VEGF mRNA和蛋白表达降低(P＜0.01),并呈剂量依赖性,但对HIF-1α mRNA表达无影响.结论:COX-2抑制剂尼美舒利可抑制氯化钴诱导的HIF-1α、VEGF表达,这可能是其抗肿瘤血管生成的机制之一.     

低氧对人白血病细胞株HL-60细胞增殖及HIF-1α表达的影响

目的探讨模拟低氧环境对人白血病细胞株HL-60细胞增殖及低氧诱导因子表达的影响。方法常规方法复苏、传代培养细胞,待细胞进入对数生长期后用于实验。将细胞分为低氧处理组和常氧对照组,常氧对照组采取常规培养,低氧处理组分别用50、200、400、800μmol/L二氯化钴(CoC12)处理,并于24、48、72 h收集细胞进行以下指标检测:≧倒置相差显微镜观察细胞形态变化;≧MTT比色法检测细胞增殖抑制率;≧实时荧光定量PCR检测HIF-1α在转录水平的表达。结果 1:低氧模拟环境下,细胞在形态上呈较明显变化,并随CoCl2浓度和处理时间的延长变化显著;2:MTT实验结果显示,与常氧对照组比较,CoCl2处理组均产生明显抑制作用,抑制率随着药物浓度增加而增大;3:实时荧光定量PCR结果表明,与对照组(24 h)相比,50μmol/L CoCl2和200μmol/L CoCl2低浓度处理组HIF-1αmRNA的表达均有上调,且上调呈剂量和时间依赖关系。结论 1:CoCl2模拟低氧后,细胞生长明显受抑;2:低浓度(50~200μmol/L)CoCl2组HIF-1αmRNA表达上调并呈现时间、浓度依赖性;3:本研究涉及的低氧模拟环境对HL-60细胞未引起明显的诱导分化现象。     

化学乏氧人肝癌细胞SMMC-7721中HIF-1α和miR-210的表达

目的探讨不同浓度CoCl2对人肝癌细胞SMMC-7721乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）和miR-210表达的影响以及RNA干扰HIF-1α基因对miR-210表达的影响。方法采用Western blot法检测不同浓度CoCl2培养24 h后SMMC-7721细胞HIF-1α蛋白表达变化,实时定量PCR检测miR-210相对表达量。脂质体介导靶向HIF-1α基因的RNA干扰质粒pGenesil-HIF转染SMMC-7721细胞后,乏氧培养24、48和72 h,分别采用Western blot法和实时定量PCR检测细胞HIF-1α蛋白表达变化和miR-210相对表达量。结果 50和100μmol/L CoCl2培养24 h后细胞HIF-1α蛋白表达和miR-210相对表达量与0μmol/L组相比,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;150和200μmol/L CoCl2培养24 h后细胞HIF-1α蛋白表达和miR-210相对表达量均显著高于0μmol/L组（P〈0.05或P〈0.01）。转染质粒pGenesil-HIF后乏氧培养24、48和72 h,细胞HIF-1α蛋白表达和miR-210相对表达量显著低于阴性干扰组（均P〈0.01）。结论化学乏氧人肝癌细胞SMMC-7721中HIF-1α和miR-210表达明显上调,RNA干扰HIF-1α基因可明显下调乏氧细胞miR-210表达。