人凝血酶原复合物(PCC)效价测定中几种影响因素的探讨

<正> 作为PCC活性检测,国际上通常直接测定其所含Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ四种因子的活性,但目前国内尚不具备分别缺Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的基质血浆,所以难以实现。1990年版《中国生物制品规程》收载了冻干人凝血酶原复合物效价测定法,即血浆当量法(PE法)。该方法是限量法,其测定结果只能表示PCC中所含凝血因子的总活性,大体上能纠正基质血浆的凝血缺陷,使之恢复至与标准血浆的凝血活性“相当”而已。因此,PE法测PCC效价存在着一些问题。为此,我们比较了含肝素样品的中和法和稀释法、不同来源的凝血活酶和不同样品稀释液对效价测定的影响,现报告如下。     

S/D法灭活病毒后凝血酶原复合物的生物活性及S/D残留量的分析

考察了6批经S/D(solvent/detergent)灭活病毒后的凝血酶原复合物(PCC)的生物活性回收率及S/D(磷酸三丁酯/吐温80)残留量,PCC的PE效价活性平均回收率为87.83％,吐温80残留量<40μg/ml,磷酸三丁酯(TNBP)<10μg/ml;并着重探讨了TNBP的气相色谱法,建立了以正十八烷为内标、测定PCC中TNBP残留量的方法,浓度在(2～70)μg/ml范围内线性关系良好,最低检测浓度为0.5μg/ml,回收率为92.6％～95.5％,方法准确可靠。     

孕妇IgG抗A(B)效价检测中红细胞的选择分析

对ABO血型不合的夫妇，产前测定IgG抗A（B）效价对新生儿溶血病的预防和诊断有一定的临床意义。一般要求用丈夫的红细胞作为已知抗原检测孕妇血清IgG抗A（B）水平，但现实中常有得不到丈夫红细胞的情况，那么能不能用其他健康人红细胞来代替呢？我们从2004年10月-2005年10月，对来我院做IgG抗A（B）效价的O型孕妇抽取其丈夫红细胞与其他健康人红细胞进行对比实验，现报道如下。     

三种方法测定人血清IgG抗A、抗B效价的比较

目前国内测定血清 Ig G抗 A、抗 B效价的方法多为间接抗人球蛋白法 ,虽然其被公认为一种可靠的方法 ,但亦存在操作繁琐、费时的缺点 ,不利于提高工作效率。为此 ,笔者分别应用凝聚胺技术和微柱凝胶技术测定血清 Ig G抗 A、抗 B效价 ,并与间接抗人球法的结果进行比较研究 ,现报告如下。材料与方法1　检测样本　用间接抗人球蛋白法测定的 Ig G抗 A、抗 B效价的 O型血清各 5 0份 (抗体筛选均阴性 ) ,Ig G抗 A效价分布依次为 8( 2例 )、1 6( 4例 )、32 ( 6例 )、64( 1 2例 )、1 2 8( 1 2例 )、2 5 6( 8例 )、5 1 2 ( 4例 )、1 0 2 4 ( 2…     

人凝血酶原复合物的病毒灭活与验证

由于制备血液制品的原料系源自大批混合的人血浆，故会混入少量人血中可能携带的各种病原体，其中能通过血液途径传播的病毒感染威胁更大。鉴于目前所采用的ＨＩＶ、ＨＣＶ抗体检测与病毒存在与否的不一致性，病毒感染到抗体产生之间“窗口期”的存在，受检测方法灵敏度的...     

凝血酶原复合物潜在致血栓性的实验研究

凝血酶原复合物潜在致血栓性的实验研究＊６１００８１中国医学科学院中国协和医科大学输血研究所余蓉赵青蓉袁野许淑清华西医科大学药学院杜俊蓉传统工艺生产的凝血酶原复合物（ｐｒｏ－ｔｈｒｏｍｂｉｎｃｏｍｐｌｅｘｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ，ＰＣＣ）在临床应用中存在...     

一例O型患者误输AB型血后抗A,抗B效价观察

一例Ｏ型患者误输ＡＢ型血后抗Ａ、抗Ｂ效价观察林军（苏州医学院附属二院检验科，２１５００４）我院最近收治一例Ｏ型血患者，因误输ＡＢ型血液４００ｍｌ．发生急性溶血性输血反应，在救治的同时对患者血清中的抗－Ａ、抗－Ｂ效价作了追踪观察，现报道如下：１病例介绍...     

南昌地区汉族健康人群中抗A(B)抗体效价检测分析

目的探讨南昌地区汉族健康人群(献血人群和孕妇)中IgM和IgG抗A、抗B抗体效价的范围。方法 ABO正反定型和RhD血型鉴定均采用试管凝集法;抗体筛选和抗体筛选鉴定用盐水、凝聚胺法进行抗体筛选;抗体筛选阳性再用谱细胞于盐水、凝聚胺和抗人球蛋白介质中进行抗体鉴定;采用盐水倍比稀释直接离心试管法检测IgM抗A(B)抗体效价,用2-Me灭活IgM抗A(B)后,用凝聚胺法进行IgG抗A或抗B的血型抗体效价检测。结果 A:B:O=41:26:138;RhD阴性9例;85例孕妇中IgG抗A(B)效价≥64为8.4%(10/119),而120例无偿献血者和孕妇的丈夫IgG抗A(B)效价≥64为4.1%(8/193),IgM抗A(B)效价≥64为32.6%(61/187);孕妇IgG抗A(B)效价高的人数比其他健康人要多且均为O型。结论 A型和B型的人大多数是IgM为主,成年O型人血清中IgG抗A和抗B占有优势,尤其是有妊娠史或流产史的女性。为进一步探讨本地区IgM和IgG抗A、抗B抗体效价的高低与身体不同健康状态及某些疾病相关性提供了一定的参考价值。为南方汉族健康人群IgG抗A(B)效价提供参考。     

对两种大批量生产的凝血酶原复合物活性测定的初探

<正> 国外有关凝血酶原复合物(Prothrombin Complex,以下简称复合物)的制备及用于临床,已有20余年.近10多年来,此制品在我国的产量也逐年增加,业已成功地用于治疗乙型血友病、维生素K缺乏症和新生儿自然出血等疾病,并有良好的止血效果.     

肿瘤患者抗-A、抗-B效价的调查报告

<正> 为了解肿瘤患者的抗-A、抗-B效价同正常人是否有差异,我们对本院确诊的155例肿瘤患者进行了调查,现将结果报道如下。1 观察对象与方法1.1 对象 肿瘤组:本院确诊的肿瘤患者155例。对照组:重庆巴县地区来我院献血者183例。1.2 方法 试管法。采静脉血,用双草酸抗凝后,分离血浆,将血浆倍比稀释,每管加相对应的2％红细胞悬液1滴。1000r/min,离心1min;取出稍加振摇,仔细观察,以不显凝集的前一管作为抗体的效价。数据经t     

人凝血酶原复合物、生长抑素联合奥美拉唑治疗肝硬化并上消化道出血的临床分析

目的 观察人凝血酶原复合物、生长抑素联合奥美拉唑对肝硬化并发上消化道出血患者的临床疗效,分析对血流动力学、凝血功能及炎性因子的影响。方法 选取2019年1月至2022年1月我院收治的肝硬化并发上消化道出血的患者60例,随机地将其分为对照组和观察组各30例。对照组给予奥美拉唑治疗,观察组给予人凝血酶原复合物、生长抑素联合奥美拉唑治疗。比较两组治疗3天后血流动力学表现(门静脉血流量、脾静脉血流量)、凝血功能[D-二聚体(D-D)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)]、炎性因子[血清超敏C-反应蛋白(hsCRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、皮质醇水平(COR)]水平。结果 治疗后,两组门静脉、脾静脉血流量均下降,且观察组下降程度较对照组明显,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组D-D、FIB水平高于对照组,PT、APTT时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组hs-CRP、TNF-α、COR水平均有所下降,且观察组下降程度更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 人凝血酶原复合物、生长抑素联合奥美拉唑有利于改善肝硬化并发上消化道出血患者的血流动力学、增强凝血功能、降低炎性因子水平,安全可靠,值得临床推广。     

人凝血酶原复合物中磷酸三丁酯残留量检测方法验证

目的 建立气相色谱法测定人凝血酶原复合物中磷酸三丁酯残留量的方法,并进行方法验证。方法 采用酸改性聚二乙醇(20M)毛细管柱,正己烷为溶剂,各项色谱参数为：气化室温度220℃、柱温箱温度155℃、检测器温度220℃、柱流量为2.0 mL/min、载气为氮气、检测器FID、采集时间10 min,进行准确性、重复性、线性、专属性、中间精密度、检测限、定量限、范围、耐用性的方法验证。结果 验证结果显示该方法专属性良好;标准曲线的直线回归相关系数为0.999 90;在50%、100%、150%(100%水平浓度为30μg/mL)三个水平浓度的的回收率分别是98.4%、97.5%、95.7%,平均回收率为97.2%,相对偏差为2.15%;在水平浓度为100%重复性为2.08%,中间精密度的相对偏差为1.63%;检测限为0.255μg/mL,定量限为0.511μg/mL,在改换同一厂家同一型号不同批号的毛细色谱柱之后系统适用性实验满足要求,方法耐用性良好。结论 该方法能满足实验室人凝血酶原复合物磷酸三丁酯残留量的测定。     

凝血酶原复合物的制备及其临床应用进展

凝血酶原复合物(prothrombin complex concentrates,PCC)是由从健康人混合血浆中分离制备的1种能促进血液凝固的静脉注射血浆蛋白制剂.PCC主要含有依赖于维生素K的凝血酶原(FⅡ)、凝血酶原转化因子(FⅦ)、抗血友病乙型因子(FⅨ)和自身凝血酶原(FⅩ),由于这些因子都属糖蛋白,都在肝脏合成,并由维生素K介导,其理化性质(如分子量、等电点等)极为相似,故在规模化生产中用一般的理化方法很难将其分开.商品PCC几乎都含有上述4种因子,因而在临床上,除了用于治疗乙型血友病外,PCC更多的是用于治疗因维生素K缺乏或患肝病而引起的出血性症状.随着PCC分离技术的发展和制品安全性的提高,以及临床医生越来越认同,PCC的使用量正在逐年增加.将就PCC的制备及其临床应用等方面的研究进展,综述如下.     

抗A抗B血型定型试剂的质量分析

目的 评价按照生物制品批签发管理的血筛诊断试剂之抗A抗B血型定型试剂品种的产品质量。方法 按照《中国药典》要求,检查抗A抗B血型定型试剂成品的外观、特异性、亲和力、效价、冷凝集素和不规则抗体以及稳定性等性能指标。结果 4家国产336批抗A抗B血型定型试剂成品的质量均满足《中国药典》要求。抗A试剂均为透明的蓝色液体,抗B试剂均为透明的黄色液体;抗A试剂与A1、A2B红细胞均产生凝集,与O及B型红细胞均不凝集,抗B试剂与B红细胞均产生凝集,与A1、O红细胞均不凝集;抗A试剂与A1、A2、A2B红细胞出现凝集的时间均分别≤15 s、≤30 s、≤45 s,抗B试剂与B红细胞出现凝集的时间均≤15 s,且在3 min内凝集块均达到1 mm2以上;抗A试剂与A1、A2、A2B型红细胞的凝集效价均不低于国家参考品的同步测定结果,抗B试剂与B型红细胞的凝集效价均不低于国家参考品的同步测定结果;抗A试剂与10例非血缘性O型红细胞和3例B型红细胞在4℃、18～25℃、37℃三个反应条件下均不出现凝集反应,也不发生溶血,抗B试剂与10例非血缘性O型红细胞和3例A型红细胞在4℃、18～25℃、37℃三个反应...     

O型人血中缺乏IgM抗A,抗B一例

Ｏ型人血中缺乏ＩｇＭ抗Ａ、抗Ｂ一例张萍（苏州医学院附属二院，江苏２１５００４）人血清中缺乏相应的ＡＢＯ血型抗体，本院发现一例Ｏ型人血清中缺乏ＩｇＭ抗Ａ、抗Ｂ。现报告如下。１病例摘要患者徐××，男，１７岁，住院号１７５２９，于１９９４年９月１５日因肺脓...     

改良凝胶吸附法制备的凝血酶原复合物

采用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ凝胶从人血浆中吸附制备经Ｓ／Ｄ病毒灭活处理后的ＰＣＣ制品，ＤＥＡＥ洗脱液经Ｓ／Ｄ处理（０．３％磷酸三丁脂和１％Ｔｗｅｎ８０，６～８ｈ，２４℃）后，使所加入具有感染剂量（＞１０６）的标志病毒ＶＳＶ、Ｓｉｎｄｂｉｓ、ＨＩＶ均被有效灭活；ＰＣＣ制品中Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子的比活性（Ｕ／ｍｇ）分别为０．７９９±０．３４９、０．３４３±０．２５２、０．７４７±０．３４８、０．５８０±０．１９９（ｎ＝７），均比传统ＰＣＣ提高１．５～２．５倍（其中ＦⅨ∶Ｃ的比活性提高有显著性，ｔ＝３．１０５，Ｐ＜０．０１），同时也优于国内同类制品（ｔ＝２．３６０，Ｐ＜０．０５），对其杂蛋白（ＡＴ－Ⅲ、Ｆｎ、ＰＫＡ、Ｐｌｇ、ⅧＲ∶Ａｇ抗Ａ、抗Ｂ凝集素）的分析也反映出ＰＣＣ纯度有所提高。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＩＥ、ＣＩＥ电泳图谱及ＨＰＬＣ层析图谱证实上述结果，ＰＣＣ中ＴＮＢＰ残留量≤１０μｇ／ｍｌ，Ｔｗｅｅｎ８０残留量≤１００μｇ／ｍｌ，均在安全范围内。     

凝血酶原复合物制备过程吸附条件的研究

目的探讨凝血酶原复合物制备过程凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的吸附条件,提高活性收率。方法选择DEAE-SephadexA-50凝胶平衡体系中柠檬酸钠、氯化钠、pH 3种可变因素,每因素取3水平,根据L9(33)正交表设计试验,配制平衡液,分别对DEAE-SephadexA-50凝胶进行平衡处理后,按1.67g/L加入等量健康人混合去冷沉淀血浆,4℃搅拌,吸附凝血因子;吸附后凝胶洗涤、洗脱,检测洗脱液中凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ活性并进行活性回收率正交试验直观分析,获得较优吸附条件并进行验证。此外,分析吸附平衡体系电导率与4种因子活性收率间关系。结果柠檬酸钠、氯化钠、pH对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ吸附影响不同;在所考察范围内,pH对4种凝血因子吸附影响效应趋势一致,pH越低,吸附效果越佳;柠檬酸钠及氯化钠浓度对4种凝血因子吸附影响效应趋势不一致,柠檬酸钠浓度越高,凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ吸附越佳,而凝血因子Ⅸ在(0.012～0.02)mol/L水平较佳;氯化钠浓度越低,凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ吸附越佳,而凝血因子Ⅹ在(0.1～0.14)mol/L水平较佳;平衡体系电导率与4种因子活性收率间不存在线性关系。结论吸附条件中pH及柠檬酸钠浓度对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ吸附效果影响较大。柠檬酸钠(0.02～0.028)mol/L,氯化钠(0.02～0.06)mol/L,pH6.6～6.9条件,4种凝血因子吸附效果相对较佳。电导率对4种因子吸附效果影响不明显。     

不同工艺凝血酶原复合物在兔停滞模型中致血栓性的比较研究

凝血酶原复合物(prothrombin complexconcentrate,PCC)是一种混合人血浆制成的冻干制剂,它含有维生素K依赖的凝血因于Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ及Ⅹ,在临床广泛用于治疗乙型血友病和由肝病、维生素K缺乏而继发的Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ及Ⅹ因子所致出血。目前PCC制剂主要存在病毒感染和血栓形成的危险性。为此,研制出安全性高、血栓形成副作用小的PCC换代产品供临床使用是当今十分迫切的重要课题。我们采     

孕妇血浆IgG抗A(B)抗体效价检测的临床意义

目的探讨孕妇血浆IgG抗A(B)抗体效价检测的临床意义。方法用微柱凝胶方法对IgG抗A(B)的抗体效价进行检测。结果在1 906例IgG抗A(B)孕妇中血清效价大于1∶256者有327例,占17.1%。结论在产前保健孕妇中进行血型抗体效价检测及早发现异常、及时治疗可减少由于母婴血型不合引起的溶血疾病发生,对新生儿溶血病的预防有重要意义。     

国产抗-H和抗-A_1外源凝集素与进口试剂的比较研究

<正> 抗-H 和抗-A_1是 ABO 亚型鉴定必需的试剂。我国使用的抗-H 试剂,以前靠进口,价格较贵。而用 H 物质免疫鸡制备抗-H,方法繁琐,特异性不强。近年来四川城口县开发种植的欧洲荆豆(Ulex europaeus),提供了抗-H 凝集素的原料。本文将国产欧洲荆豆提取的抗-H 凝集素和江西巴蜗牛提取的抗-A_1