鸡血藤黄酮类有效部位对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡与线粒体膜电位的影响

目的探讨鸡血藤黄酮类有效部位(spatholobus suberectus column extract,SSCE)对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡及线粒体膜电位的影响。方法采用细胞增生试剂盒cell counting kit-8,观察SSCE对A549细胞增生的影响;通过Annexin V-PI双染法结合Hoechst33324染色检测SSCE对A549细胞凋亡的影响;应用Mitotracker Red及JC-1染色,检测SSCE对细胞线粒体及线粒体膜电位的影响。结果浓度高于40 mg/L的SSCE对A549细胞生长有抑制作用,且具有浓度时间依赖性。SSCE作用24 h后,A549细胞呈现典型的凋亡现象:膜磷脂酰丝氨酸外翻;细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光;线粒体由棒状变成颗粒状,并向细胞核聚集;线粒体膜电位下降。结论 SSCE可以诱导人非小细胞肺癌A549细胞发生凋亡,改变线粒体形态且降低其线粒体膜电位。     

5,7-二甲氧基黄酮通过线粒体途径诱导人肺癌A549细胞凋亡

目的 探讨5,7-二甲氧基黄酮(5,7-dimethoxyflavone,5,7-DMF)诱导人肺癌A549细胞凋亡及其机制.方法 体外培养A549细胞.MTT法测定5,7-DMF对A549细胞活性的抑制作用;Annexin V/PI双染色分析细胞凋亡率;JC-1探针流式细胞术分析线粒体跨膜电位;Western Blotting法分析线粒体细胞色素c的释放和Bax蛋白表达.结果 5,7-DMF抑制人肺癌A549细胞活性,呈浓度依赖性.Annexin V/PI法检测结果显示10μmol/L的5,7-DMF作用A549细胞6、12和24h后,其凋亡率分别为(6.58±0.65)％、(16.70±1.85)％和(28.60±3.52)％.JC-1探针流式细胞术分析表明,5,7-DMF能降低'A549细胞线粒体跨膜电位.Western Blotting法分析证实,5,7-DMF能促进线粒体细胞色素c的释放和上调Bax蛋白表达.结论 5,7-DMF具有诱导A549细胞凋亡的作用,其作用机制与激活线粒体诱导凋亡途径有关.     

线粒体途径在丹参酮ⅡA诱导人宫颈癌细胞凋亡中作用

目的探讨丹参酮ⅡA诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的可能途径。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,用不同浓度丹参酮ⅡA处理后,流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡,JC-1染色后流式细胞仪检测线粒体膜电位的改变,Western印迹法检测细胞色素C(Cyto C)从线粒体释放情况。结果不同浓度丹参酮ⅡA作用48h后,与空白对照组比较,HeLa细胞凋亡率均增加;线粒体Cyto C表达减少,细胞质Cyto C表达增加;线粒体膜电位电压较高细胞(正常细胞)数量减少,线粒体膜电位降低的细胞数量增加,差异均有统计学意义(F=116.5～1 064.6,q=4.11～75.38,P<0.01)。结论丹参酮ⅡA对HeLa细胞的凋亡诱导作用与线粒体膜电位降低及线粒体释放Cyto C有关。     

Bcl-2家族在阿司匹林诱导人小细胞肺癌A549细胞凋亡中的作用

摘要 目的: 研究阿司匹林对人小细胞肺癌A549细胞体外增殖抑制作用及凋亡的影响,探究Bcl-2在诱导凋亡机制中的作用。方法:运用体外细胞培养,阿司匹林以不同浓度（1,2.5,5,7.5,10mmol/L）作用于人小细胞肺癌A549细胞。采用噻唑蓝(MTT)法测定阿司匹林对细胞杀伤率;用流式细胞检测法测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder 现象;Western blot检测凋亡相关基因Bcl-2等表达;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变。结果：阿司匹林对人小细胞肺癌A549细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和剂量依赖性;可使A549细胞G0/G1期和G2/M期比例明显下降,S期比例升高;诱导细胞凋亡发生;阿司匹林作用A549细胞后,Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase3活化,线粒体膜电位改变。结论：阿司匹林在体外可有效抑制人小细胞肺癌A549细胞增殖,可能通过影响肿瘤细胞DNA合成,改变细胞周期时相分布、诱导凋亡发挥抑制细胞增殖作用,其凋亡机制与Bcl-2表达减少,线粒体膜跨膜电位下降相关。     

姜黄素诱导人肺癌细胞凋亡及其机制

目的:探讨姜黄素诱导人肺癌细胞凋亡的分子机制.方法:MTT法检测姜黄素对肺癌细胞活力的影响,流式细胞计数法检测姜黄素对肺癌细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,Caspase活性试剂盒检测姜黄素处理后肺癌细胞Caspase活性的变化,Western-blot检测姜黄素对胞质中细胞色素C的含量及肺癌细胞Akt信号通路的活性的影响.结果:20 μmol/L以上浓度的姜黄素作用48 h后可显著抑制A549细胞的活力,显著诱导细胞发生凋亡,姜黄素作用24 h后肺癌细胞中的线粒体跨膜电位明显下降,细胞色素C释放到胞质增多,Caspase-9、-3活性显著增强,磷酸化Akt水平显著下降.结论:抑制Akt信号通路活性诱发线粒体通路介导的细胞凋亡可能是姜黄素抑制肺癌细胞的重要机制.     

斑蝥酸钠维生素B_6注射液对人肺癌细胞系A549增殖抑制及核因子κB和Caspase3/7的影响

目的探讨斑蝥酸钠(SC)维生素B6注射液对人非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡及核因子κB(NF-κB)、凋亡分子Caspase3/7的影响。方法用不同浓度(0、1.0、2.5、5.0 mg/L)的SC维生素B6注射液处理A549细胞,观察光镜及Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡形态;用噻唑蓝(MTT)比色法检测SC维生素B6注射液对细胞增殖的抑制作用;罗丹明123检测线粒体膜电位;Caspase3/7活性检测试剂盒检测Caspase3/7活性;蛋白印迹检测NF-κB P65、I-κB蛋白表达。结果 SC维生素B6注射液对A549细胞的体外增殖有明显抑制作用,细胞形态出现明显凋亡改变,5.0 mg/L组作用A549细胞72 h后,细胞增殖抑制率最大达到67.37%。细胞线粒体膜电位检测结果显示,随着SC维生素B6注射液浓度的增加及时间的延长,线粒体膜电位逐渐减弱,同时Caspase3/7蛋白活性增强;SC维生素B6注射液作用A549细胞后NF-κB P65蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而I-κB蛋白表达水平则无显著变化。结论 SC维生素B6注射液可能通过抑制NF-κB P65表达,激活Cas...     

白藜芦醇诱导人肺腺癌A549细胞细胞凋亡及其与p38 MAPK信号途径的联系

目的 探讨白藜芦醇( Res)诱导人肺癌A549细胞株凋亡及其与p38 MARK信号通路的联系. 方法 CCK-8 法检测 Res 对人肺癌 A549 细胞增殖抑制作用, Annexin V-FITC/PI双染法检测Res对肺癌A549 细胞凋亡率, Western blot 法检测 Res 对人肺癌 A549 细胞 Caspase 剪切片断(Caspase-1、Caspase-3)表达的影响,及其对丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路蛋白(p38、p-p38)表达的影响.结果 Res对人肺癌A549细胞株生长呈浓度依赖性的抑制作用,48 h的Res作用肺癌A549的半数抑制浓度( IC50 ) 值为( 10. 6 ±1. 2)μmol/L. 用10 μmol/L Res处理 A549 细胞24、36、48 h,细胞凋亡率较对照组明显增加( P<0. 01 ). Res作用于A549 细胞 48 h 后, Western blot 法检测显示 Caspase-1、Caspase-3蛋白出现断裂片断,p38、p-p38表达亦增高. 结论Res明显诱导人肺癌A549细胞毒作用,诱导A549细胞凋亡,其机制与激活p-p38 MAPK途径有关.     

X射线对人非小细胞肺癌细胞的辐射损伤效应研究

目的 探究X射线对人非小细胞肺癌细胞A549的辐射损伤效应。方法 将A549细胞根据X射线辐射剂量不同分为0 Gy组、10 Gy组和20 Gy组,3组细胞经辐射并孵育24 h后,采用克隆形成检测辐射对A549细胞存活的影响;采用膜联蛋白V及碘化丙啶(PI)双染检测辐射后A549细胞凋亡情况;采用活性氧荧光探针检测辐射后A549细胞活性氧(ROS)的变化;采用二氢乙锭探针检测辐射后A549细胞超氧阴离子变化;采用JC-10探针检测辐射后A549细胞线粒体膜电位变化情况;采用PI探针检测辐射后A549细胞周期变化情况;采用蛋白质印迹技术检测辐射后A549细胞线粒体转录因子A(mtFAM)蛋白表达情况。结果 与0 Gy组比较,10 Gy组和20 Gy组A549细胞凋亡比例、ROS及超氧阴离子水平增加,且20 Gy组明显高于10 Gy组(P<0.05);10 Gy组和20 Gy组A549细胞存活数量、线粒体膜电位及mtFAM蛋白表达水平均明显上升,且20 Gy组高于10 Gy组(P<0.05)。结论 X射线辐射导致A549细胞线粒体受损,且通过抑制mtFAM蛋白表达,使线粒体的修复...     

ALP小分子抑制剂对脑神经胶质瘤细胞凋亡的影响

目的:探讨ALP小分子抑制剂对脑神经胶质瘤细胞凋亡作用的影响。方法:采用JC-1染色检测线粒体膜电位的变化及流式细胞术法检测C6脑神经胶质瘤细胞凋亡率。结果:ALP小分子抑制剂对C6脑神经胶质瘤细胞具有明显的抑制作用,并在48 h作用最为明显。荧光显微镜下观察:ALP小分子抑制剂抑素(2 000μg/ml)治疗组可见典型的细胞凋亡形态学特征性改变;线粒体膜电位显著降低;细胞凋亡率明显增加分别与空白对照及ALP小分子抑制剂(1 000μl/ml)治疗组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ALP小分子抑制剂可能通过降低细胞线粒体膜电位,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤生长作用。     

细胞色素C亚细胞分布和Caspase-3活性改变在丝裂霉素C诱导膀胱癌细胞凋亡中的作用

目的:探讨丝裂霉素C(MMC)诱导人膀胱癌细胞凋亡的分子机制。方法:不同浓度MMC作用于膀胱癌BIU-87细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,吖啶橙(AO)荧光染色、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,并对半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性、细胞色素C亚细胞分布变化进行检测。结果:BIU-87细胞存活率与MMC浓度呈负相关(r=-0.97,P<0.05)。对照组和16、32、64、128μg/ml的MMC处理组凋亡率分别为(1.10±0.20)%、(10.93±1.51)%、(22.51±2.49)%、(31.71±3.39)%、(53.2±3.81)%,Caspase-3活性分别为0.152±0.009、0.201±0.010、0.275±0.009、0.479±0.012、0.594±0.013,MMC处理组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。MMC处理组线粒体内细胞色素C含量显著低于对照组(P<0.05)。结论:促进线粒体细胞色素C释放和Caspase-3激活可能是MMC诱导膀胱癌细胞凋亡的重要机制。