肝脏肿瘤标本资源库的建立、维护及管理

目的 探讨建立以肝癌组织样本为主的肝脏外科生物样本库及相关数据信息化管理的方法和标准化操作规程,为临床与基础研究提供高质量的临床标本资源平台。方法 收集肝脏肿瘤手术患者的血液标本（血清、血浆、白细胞）、组织标本(癌、癌旁、远端正常组织),将处理好的血液标本于-80℃冰箱保存,新鲜组织置液氮保存,定期随机抽取液氮保存的肿瘤组织样本进行RNA、DNA的提取及鉴定。结果 现收集并保存有完整临床信息及随访资料的肝脏肿瘤患者血液标本22103份,组织标本3319例,其中肝脏肿瘤组织标本807例,包括肝脏恶性肿瘤762例,良性肿瘤23例,肝硬化组织22例。随机抽取组织RNA、DNA鉴定均符合标本质量标准,能够满足后续实验要求。结论 初步建立标准化、规范化的肝脏肿瘤标本库,制定了标准化的标本库维护和管理规程,为肝脏肿瘤基础和临床研究提供了宝贵的实验材料。     

强直性脊柱炎生物样本库的建立与质量控制

目的建立标准化及具有完整临床资料的强直性脊柱炎(AS)生物样本库,为AS的基础研究提供高质量的样本。方法自2009-06—2015-06共收集168例AS病例及93例对照病例(20例新鲜股骨颈骨折、42例股骨头坏死、20例髋臼发育不良及11例类风湿性关节炎),按照标准化的操作流程对入选患者术前血液、尿液和术中新鲜髋关节韧带组织标本进行收集、处理、分装、储存,对部分韧带组织行石蜡包埋保存。采用临床数据库软件及样本库管理软件建立临床资料完整的AS生物样本库,定期对样本进行质量监测。结果建立标准化的强直性脊柱炎及对照病例样本库,随机抽取AS病例样本及对照病例样本各3例送至第三方(上海其明生物公司)进行质量检测,各样本经Trizol试剂提取组织RNA,用分光光度仪测定A260/A280值,RNA样本经1%琼脂糖凝胶电泳,检测结果合格。结论建立的标准化AS生物样本库可为AS发病机制的研究提供高质量的样本。     

建立乳腺癌组织标本库标准化程序的初步研究

目的:探讨建立乳腺癌标本库的标准化程序,为建立系统的、规范的乳腺癌组织标本库及信息管理体系奠定基础.方法:收集乳腺癌患者术中的肿瘤组织、癌旁组织、远端正常组织标本,并收集部分患者血标本提取血清、血浆及淋巴细胞,所有组织标本均深低温保存.采用一套信息管理体系对于标本进行管理.结果:共收集22例乳腺癌患者新鲜组织及血样标本共520份,其中导管内癌2例,小叶原位癌3例,浸润性导管癌10例,浸润性小叶癌7例;全套标本者19例;标本留取时间平均为(19.38±10.16) min;随机抽取20份肿瘤组织提取DNA和RNA作质量监测,合格率达到90％.结论:建立系统的、规范的乳腺癌组织标本库及信息管理体系,将为乳腺癌的基础与临床研究提供物质与信息资源.     

生物样本库在结直肠肿瘤转化中的研究价值

目的:分析生物样本库在结直肠肿瘤转化中的研究价值.方法:将结直肠肿瘤患者73例按入院顺序分为对照组36例和观察组37例.对照组患者接受常规转化评估,观察组患者接受生物样本库评估,比较2组判断结直肠肿瘤转化准确率.结果:观察组患者结直肠肿瘤转化判断准确率高于对照组(P<0.05).结论:生物样本库能提升结直肠肿瘤转化中的...     

SOX2在结直肠癌组织中的表达与临床病理学意义

目的:探讨结直肠癌组织中SOX2的表达及与结直肠癌临床病理特征的关系,为指导结直肠癌的临床治疗及预后判断提供重要据.方法:收集150例结直肠癌组织标本,采用LSAB免疫组化法检测癌组织中SOX2的表达.采用实时RT-PCR检测其中3例癌组织及癌旁组织中SOX2 mRNA的表达情况,分析SOX2蛋白表达与肿瘤临床病理的相关性.结果:SOX2阳性表达主要位结直肠癌癌细胞的细胞核内,且在127例呈中高表达(表达率84.6%)显著高例癌旁结直肠组织中的高表达(8%,P<0.01).SOX2 mRNA在结直肠癌组织的表达水平是癌旁结直肠组织的2.5~15倍.SOX2蛋白表达与结直肠癌患者的年龄、性别以及肿瘤部位、大小等无相关性(P>0.05),但与结直肠癌的浸润深度、淋巴结转移、Dukes’分期有显著相关性(P<0.01).结论:结直肠癌组织中SOX2蛋白和mRNA的表达显著高癌旁结直肠组织,其表达与结直肠癌的浸润深度、分化程度、淋巴结转移、Dukes’分期有关.     

�����淶���ΰ��걾��ľ��鼰���

目的通过建立肝癌组织标本库,保护并合理利用肝癌组织标本资源,为分子生物学及临床研究提供组织标本。方法查阅相关文献总结标本库建立规范化流程资料,提供理论依据。同时结合西安交通大学附属第一医院肝胆外科门诊病人量、手术例数及实验室条件拟定该院标本库建立流程。结果建立了肝癌标本库组织及血液标本收集的规范化流程及对应的信息管理系统,已完成了标本库建立的前期工作,开始初步规范化收集肝癌标本并完善相关临床病例资料。结论建立资料完整的规范化肝癌标本库对保护肝癌组织资源及今后肝癌研究都十分重要。     

门静脉高压症标本库的初步建立、质控及管理

目的 探索建立门静脉高压症(portal hypertension,PH)生物标本库及数据信息化管理方法和标准化操作流程,为PH基础与临床研究提供高质量的临床标本资源.方法 收集PH患者的血液、尿液、唾液、组织标本,将处理好的标本于-80℃冰箱保存,新鲜组织标本置于液氮保存,定期随机抽取标本进行质量控制.结果 现收集并...     

胆道系统肿瘤标本库的建立与分析

目的 建立胆道系统肿瘤血液及组织标本库,为进一步开展胆道肿瘤研究提供参考.方法 选取2010年3月至9月我院肝胆外科以胆道肿瘤为主要诊断而行手术切除的患者标本37例,留取血浆、血清及组织标本,制作石蜡包块并行常规病理组织学鉴定,并使用 Trizol 试剂提取总 RNA及基因组DNA.结果 37例标本中胆管癌18例,胆囊癌19例.两组间在性别、黄疸表现、是否合并胆道结石、能否根治性手术及近期生存时间存在差异.抽样检查显示77.8%的样本分子生物学指标稳定.结论 本实验建立的胆道肿瘤标本采集流程有效可行,临床资料收集完备,能够为今后胆道系统肿瘤的发生发展机制研究提供较好的标本资源.     

VEGF-C和FLT-4在结直肠腺癌中的表达

目的：研究VEGF-C和FLT-4在结直肠腺癌、癌旁组织以及正常肠组织的表达,探讨其在结直肠腺癌淋巴转移中的关系。方法：收集结直肠腺癌癌灶、癌旁组织和正常肠组织标本,分别采用免疫组化、HE染色检测癌灶组和癌旁组、正常组的VEGF-C表达水平,癌旁组与正常组的淋巴管数,并分析二者与结直肠腺癌淋巴转移和临床病理特征之间的关系。结果：癌灶组和癌旁组、正常组的VEGF-C表达水平有显著性差异,癌旁组与正常组的FLT-4（阳性淋巴管数）表达水平具有显著性差异,其中VEGF-C免疫组化染色的阳性率与FLT-4阳性染色脉管数在TNM分期中的0～Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期间有显著性差异。结论：联合检测VEGF-C和FLT-4在结直肠腺癌灶及癌旁组织中的表达,对结直肠腺癌淋巴转移有一定的预测价值,可以作为人结直肠腺癌淋巴转移的预测指标。     

结、直肠肿瘤肠道菌群特异性的临床研究

目的研究肠道菌群变化与结、直肠肿瘤之间的关系。方法病理检查证实的结、直肠肿瘤患者35例为研究组,同期结肠镜检查排除结、直肠肿瘤的患者35例为对照组。收集两组患者的粪便标本,采用扩增核糖体DNA限制性分析(ARDRA)技术对样本内细菌进行检测,比较两组菌种的变化及规律。结果两组70例样本共检出389 010条高质量序列,研究组和对照组Chao1指数分别为1.01×10~3和0.85×10~3,Shannon指数分别为0.11×10~2和0.14×10~2,两组菌群多样性和均匀性比较差异无统计学意义(P0.05)。而在菌种/属水平,有15种细菌丰度值比较差异有统计学意义(P0.05)。结论结直肠肿瘤患者肠道某些菌种与正常人存在差异,研究其变化规律有可能实现对结、直肠肿瘤进行早期的预防、早期诊断,并为微生态制剂作为结、直肠肿瘤的治疗方式提供依据。     

结直肠癌肝转移与门静脉血K-ras基因突变的关系

目的 检测结直肠癌患者门静脉血液、原发癌组织及肝转移灶中K-ras基因突变,探讨K-ras突变与结直肠癌肝转移的关系.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术和基因测序技术检测48例结直肠癌患者门静脉血液、原发肿瘤组织、相应的癌旁肠黏膜以及8例肝转移灶组织中K-ras基因突变.结果 48例结直肠癌组织中17例(35.4%)发现K-ras基因突变,48例癌旁黏膜中4例(8.3%)发现K-ras基因突变,明显低于癌组织的基因突变率(P＜0.05).48例结直肠癌患者中16例(33.3%)门静脉血中发现K-ras基因突变,与癌组织的基因突变率差异无统计学意义(P＞0.05).有肝转移患者门静脉血中K-ras基因突变率(7/10,70.0%)明显高于无肝转移者(9/38,23.7%,P＜0.05).16例门静脉血存在K-ras基因突变者,其相应的肿瘤组织中均发现K-ras突变.而结直肠癌组织中无K-ras基因突变者,患者门静脉血及癌旁黏膜无基因突变.8例同时性肝转移患者中5例门静脉血发现K-ras基因突变,且其相应的肝转移灶组织也发现相同的K-ras突变.2例异时性肝转移患者门静脉血检测到K-ras基因突变,手术时无肝转移,但分别于术后第6个月和第9个月经CT检查证实有肝转移.原发肿瘤组织K-ras基因突变类型与门静脉血、肝脏转移灶的K-ras基因突变一致,即K-ras基因12密码子GGT突变为GAT或GTT.结论 结直肠原发癌组织和患者门静脉血有K-ras基因的突变,预示着肿瘤可能有肝脏转移.

Abstract：

Objective To detect mutations of K-ras oncogene in portal vein blood of patients with colorectal cancer, and to find out the relationship between mutated K-ras oncogene and liver metastases in colorectal cancer. Methods Forty-eight patients with colorectal cancer were screened for the mutations of K-ras oncogene in tissue samples from their tumors, portal vein blood, proximally adjacent mucosa and 8metastatic liver biopsies by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (PCR) and DNA sequencing. The results were analyzed with their clinical data. Results Sixteen of the 48 patients with colorectal cancer had K-ras point mutations at codon 12 in their portal vein blood, and 17 of 48 patients had K-ras mutations in their primary tumors, but only 4 of 48 patients had K-ras mutations in proximally adjacent mucosa. There was no significant difference in rate of K-ras mutation between tumor tissues and portal vein blood (P ＞ 0. 05 ), but significant difference was found between the tumor tissue and the proximally adjacent mucosa ( P ＜0. 05 ). The rate of K-ras mutations in portal vein blood of colorectal cancer with liver metastases (70. 0% ) was higher than that of without liver metastases (23.7%). Sixteen cases of mutated K-ras in portal vein blood showed mutations in tumor tissues. Patients without mutated K-ras in tumor tissue had no mutations in their portal vein blood and proximally adjacent mucosa. In 5 of 8 patients with simultaneous liver metastasis, mutated K-ras oncogenes were detected in portal vein blood, and the type of K-ras mutation detected in the tumor tissue was accord with that in metastatic liver biopsies. Two patients with mutated K-ras detected in their portal vein blood had no liver metastases during perioperation, but liver metastases were diagnosed by CT at the postoperative month 6 and 9 respectively. The main types of K-ras mutations at codon 12 included GGT to GAT and GGT to GTT. No one had point mutation at codon 13. Conclusion Mutated K-ras detected in both cancer tissue and portal vein blood may indicate livermetastases from colorectal cancer.     

ADAM23|αvβ3在大肠癌中的表达与大肠癌肝转移的关系

目的：探讨ADAM23,αvβ3在大肠癌中的表达及其与肝转移等临床病理因素的关系。方法：应用免疫组化和RT-PCR方法检测53例大肠癌及其癌旁组织及20例良性病变组织中ADAM23,αvβ3的表达情况,并分析两者的蛋白表达与临床病理因素的关系。结果：大肠癌组织中ADAM23蛋白与mRNA阳性表达率明显低于癌旁组织与良性病变组织（均P<0.05）,而αvβ3蛋白与mRNA阳性表达率明显高于癌旁组织与良性病变组织（均P<0.05）。大肠癌组织中ADAM23和αvβ3蛋白的表达呈负相关（χ2=10.3390;r=-0.637,P<0.01）。ADAM23和αvβ3的蛋白表达与患者的性别,年龄及分化程度无关（均P>0.05）,而与临床分期,淋巴转移及肝转移有关,此外ADAM23蛋白的表达还与大肠癌浸润深度有关（均P<0.05）。结论：大肠癌中ADAM23呈低表达,αvβ3呈高表达,两者可能与大肠癌的肝转移等不良临床转归有关。

     

Transgelin-2在结肠癌组织中表达的临床意义

目的:探讨肌动蛋白结合蛋白Transgelin-2在结肠癌组织中表达的临床价值。方法:以结肠癌组织蜡块标本329例作为研究对象,其中癌旁正常组织89例,结肠癌组织240例。对其进行组织芯片分析。结果:结肠癌组织中Transgelin-2阳性154例,阳性率为64.2%;而癌旁组织中Transgelin-2阳性14例,阳性率为15.7%。2种组织中Transgelin-2蛋白表达差异具有统计学意义(P<0.05)。Trans-gelin-2表达与结肠癌分化程度、淋巴结转移、远处转移以及TNM分期相关(P<0.05);结肠癌Trans-gelin-2表达阳性患者其术后生存时间低于阴性患者。结论:Transgelin-2表达情况与肿瘤的恶性程度以及预后有关,其可能作为一种评价结肠癌患者预后的肿瘤标志物。     

抑癌候选基因Ndrg2在结直肠癌组织中的表达特点及意义

目的 探讨抑癌候选基因Ndrg2在不同分化级别结直肠癌组织中的表达特点,分析其调控结直肠癌细胞分化的意义.方法 收集50例不同分化级别结直肠癌组织标本,分别通过免疫组织化学染色及蛋白印迹分析检测Ndrg2的表达;以150点结直肠癌组织芯片大样本分析Ndrg2的表达特点.结合组织芯片相关病例信息进行统计学分析.结果 32例结直肠癌组织Ndrg2表达显著低于其自身癌旁组织及正常组织,癌旁组织中的表达也显著低于正常组织中的表达.组织芯片统计分析显示,不同分化程度结直肠癌组织Ndrg2的表达差异有统计学意义(P=0.005);而Ndrg2表达与患者的年龄、性别、肿瘤部位、结直肠癌浸润深度、淋巴转移及UICC分期无关.结论 Ndrg2可能参与调控结直肠癌细胞的分化过程.     

抑癌候选基因Ndrg2在结直肠癌组织中的表达特点及意义

目的 探讨抑癌候选基因Ndrg2在不同分化级别结直肠癌组织中的表达特点,分析其调控结直肠癌细胞分化的意义.方法 收集50例不同分化级别结直肠癌组织标本,分别通过免疫组织化学染色及蛋白印迹分析检测Ndrg2的表达;以150点结直肠癌组织芯片大样本分析Ndrg2的表达特点.结合组织芯片相关病例信息进行统计学分析.结果 32例结直肠癌组织Ndrg2表达显著低于其自身癌旁组织及正常组织,癌旁组织中的表达也显著低于正常组织中的表达.组织芯片统计分析显示,不同分化程度结直肠癌组织Ndrg2的表达差异有统计学意义(P=0.005);而Ndrg2表达与患者的年龄、性别、肿瘤部位、结直肠癌浸润深度、淋巴转移及UICC分期无关.结论 Ndrg2可能参与调控结直肠癌细胞的分化过程.     

散发性结直肠癌的hMSH3和hMSH6基因突变

目的　研究错配修复基因hMSH3和hMSH6在散发性结直肠癌发生中的作用。方法　应用放射性同位素为基础的PCR技术 ,检测了 4 8例散发性结直肠癌和 2 0例癌旁组织中hMSH3和hMSH6基因的突变。结果　hMSH3和hMSH6在散发性结直肠癌中的突变率分别为 5 / 4 8(10 .4 % )和12 / 4 8(2 5 % ) ,在癌旁组织中未见突变。结论　错配修复基因hMSH3和hMSH6参与了部分散发性结直肠癌的发生过程     

Prognostic significance of E-cadherin expression in human colorectal cancer tissue

The expression of E-cadherin was determined by immunohistochemical staining in tumor tissue and in adjacent normal mucosae taken from 100 resected specimens of colorectal carcinomas. The expression of E-cadherin was preserved in all normal mucosae, but in the tumor tissue specimens it was preserved in 43, heterogeneous in 32, and lost in 25 samples. The lost or heterogeneous expression of E-cadherin correlated closely to the following: an advanced clinical stage of colorectal cancer, advanced tumor penetration, undifferentiated tumor histology, widespread lymph node involvement, liver metastasis, and permeation into the lymphatic and venous channels. The lost or heterogeneous expression of E-cadherin in tumor tissue was also significantly associated with an increased incidence of tumor recurrence after apparently curative resection, a reduced overall survival rate, and a reduced disease-free patient survival rate. A multivariate analysis disclosed that the expression of E-cadherin in tumor tissue was a significant prognostic variable independent of other clinicopathological features.     

CD133、肝细胞生长因子和垂体肿瘤转化基因在大肠癌中的表达及临床意义

目的：探讨CD133、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）和垂体肿瘤转化基因（pituitary tumor transforming gene,PTTG）在大肠癌患者肿瘤组织、肿瘤旁正常组织和淋巴结中的表达及其与肿瘤患者临床之间的关系。方法应用免疫组化法检测70例大肠癌患者的肿瘤组织、肿瘤旁的正常组织和淋巴结,分别检测CD133、HGF、PTTG的表达情况。结果 CD133、HGF、PTTG三种蛋白均在肿瘤组织中高表达,且表达均与大肠癌的淋巴结转移及术后生存期有关（P＜0．05）,而与患者性别、年龄、肿瘤发生部位、临床病理分期及肿瘤大小无关（P＞0．05）;三种蛋白的表达两两之间无相关性。结论 CD133、HGF、PTTG三种蛋白对于大肠癌的诊断及鉴别诊断有一定的意义;三种蛋白的表达对大肠癌患者的术后复发、转移及其预后可能有指导意义。