去细胞支架材料构建组织工程心脏瓣膜研究进展

当前所有生物瓣，包括无支架生物瓣共同致命弱点是易钙化、衰坏。提高生物瓣的耐久性是当前研制生物瓣的根本方向。随着组织工程技术的发展，组织工程瓣成为提高生物瓣耐久性新尝试。组织工程心脏瓣膜是应用组织工程学制造出的一种具有细胞活性的新型生物瓣，其原理是利用可吸收的聚合物为支架，再种植细胞包裹瓣叶。因为理想的组织工程瓣膜具有以下特点：组织相容性好、无免疫原性、有活力、耐久性强，并有一定的增长能力和修复能力，所以有着广阔的临床应用前景。如何构建一种良好的组织工程瓣膜，是当前心血管研究领域的热点与前沿。近年来，组织工程瓣，特别是以去细胞基质为支架材料的组织工程瓣的研究取得了一定的进展。     

食管金属自膨式支架涂覆硅橡胶的组织相容性实验研究

对于食管癌患者,金属自膨式支架置入能立即改善吞咽困难、有效封堵食管-气管瘘且严重并发症发生率低,近年来已成为食管恶性梗阻主要姑息治疗方法。现在应用的金属支架大部分是覆膜支架[1],国内所采用的生物膜材绝大多数是医用级有机硅橡胶,但硅橡胶如与金属粘合不良,置入     

病毒性肝炎时肝B1-a细胞对肝脏保护作用的实验研究

目的:检测小鼠感染鼠肝炎病毒3型(MHV-3)后肝脏B-1a淋巴细胞亚群变化,探讨B-1a细胞在病毒性肝炎中的作用。方法:通过流式细胞术检测MHV-3诱导的耐受型小鼠及引起暴发性肝炎敏感小鼠肝脏中B细胞、B-1a细胞的基础水平,以及在感染后不同时间点的比例变化。磁珠分选出未感染敏感小鼠肝脏B-1a细胞并过继给敏感小鼠,观察感染MHV-3病毒72h后小鼠肝脏的病理组织学特征。结果:未感染时MHV-3耐受型小鼠肝脏中B细胞明显高于敏感型小鼠(43.6%±2.1%vs15.6%±3.3%,P<0.01),B-1a细胞在耐受型小鼠略高于敏感型小鼠(6.38%±2.13%vs5.84%±1.32%,P>0.05);感染后耐受型小鼠B-1a明显升高至(10.80%±2.82%,P<0.05),而敏感型小鼠呈现下降趋势。过继B-1a细胞的敏感小鼠肝脏坏死程度明显低于其它细胞组及PBS对照组。结论:肝脏固有B-1a细胞对MHV-3引起的病毒性肝炎具有保护性作用。     

肝脏干细胞与组织工程

临床上,肝炎、肝硬化及肝癌等肝脏疾病的治疗一直是全球性难题。目前有希望的治疗方法有原位肝移植、肝细胞移植、生物人工肝等,但这些方式都面临着肝源短缺问题。随着干细胞研究的不断深入,很多学者寻找能分化为肝细胞和胆管上皮细胞的肝干细胞,以用于各种难治性肝病的治疗。能满足临床治疗需要的理想的肝细胞来源必须具备以下几个特点：来源广泛,易采集,制备程序较简单。干细胞由于分化能力强、安全、性能稳定,受到广泛关注。     

壳聚糖/肝素共价包被先天性心脏病介入封堵材料生物相容性的体外实验研究

目的体外评价壳聚糖/肝素(Chi/Hep)共价包被先天性心脏病介入封堵材料的生物相容性。方法在南京医科大学第一附属医院心血管内科于2005年11月至2006年10月,通过体外实验检测Chi/Hep共价包被镍钛合金片的血液相容性和细胞相容性。实验分成血液对照组、未包被组、基础包被组、Chi/Hep包被组,其中按肝素质量浓度又分为低(0.1mg.mL-1)、中(1mg.mL-1)、高(10mg.mL-1)3个剂量组。Chi/Hep共价交联于试验用镍钛金属表面,(1)血液相容性实验:通过血液溶血试验,动态人全血接触试验评价其红细胞毒性及抗栓性能,扫描电子显微镜观察镍钛金属表面血小板粘附、聚集。(2)细胞相容性:利用纤维连接蛋白、Ki67免疫荧光标记人脐静脉内皮细胞(HUVECs)观察其细胞毒性。结果(1)血液相容性实验:实验各组红细胞、白细胞、血小板计数均在正常范围内,且组间比较差异无显著性意义,各实验组溶血率均小于5%。Chi/Hep包被组部分凝血活酶活化时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)均明显延长,血液对照组、未包被组及基础包被组两两比较差异无显著性意义,不同质量浓度肝素包被之间差异亦无显著性意义(APTT、PT方差均齐LSD、SNK法检验,TT方差不齐Dunnetts法检验P<0.05)。扫描电镜结果显示,Chi/Hep包被组金属表面少量血小板粘附。(2)细胞相容性实验:经过与HUVECs72h孵育,金属片边缘细胞生长、移行良好,无细胞变形;Fn免疫荧光标记HUVECs,发现不同包被镍钛金属片表面的HUVECs粘附顺序如下:基础包被组>未包被组>Chi/Hep组;Ki67免疫荧光标记HUVECs,随机双盲法计数细胞发现不同包被镍钛金属片表面的HUVECs增殖顺序如下:基础包被组=未包被组>Chi/Hep组(P<0.01)。结论体外观察Chi/Hep共价包被镍钛金属有良好抗血栓作用,但抑制内皮细胞粘附、增殖。     

心脏组织工程支架材料的研究进展

近年来,心脏组织工程研究的迅速发展,为心脏病的外科治疗提供了一种新的治疗策略.理想的支架材料是心脏组织工程成功的关键之一.了解支架材料的研究进展,可为心脏组织工程支架材料的选择提供参考.     

组织工程心脏瓣膜的体内实验

组织工程心脏瓣膜(TEHV)体内实验是TEHV研究的必经阶段.只有通过体内研究才能客观评价瓣膜功能,瓣膜支架降解及炎症反应情况,为将来应用于临床打下基础.本文对目前的研究成果和进展作一综述.     

己内酯/环氧乙烷共聚物降解行为及生物相容性

目的 研究己内酯/环氧乙烷共聚物(PCL-EO)在体内的降解规律和组织相容性,并对降解性输尿管支架材料的用途进行探讨.方法 20枚PCL-EO试样及20只大鼠分别随机分成5个时间组.实验动物麻醉后,于无菌条件下将消毒后的PCL-EO植入大鼠脊柱肌肉中.分别在2、4、6、8、12 w取出材料及周围组织.测量试件质量、分子量观察大体和微观形态变化.大鼠16只,分成4个时间组,PCL-EO植入大鼠脊柱肌肉中,于2、4、8、12 w,取出植入材料及周围的组织块,用组织学方法分析生物相容性.结果 ①PCL-EO在降解初期分子量下降迅速,随后趋缓,重量的损失滞后于分子量的损失,此种共聚物的降解为无规本体水解过程.②植入2 w时可见局部组织水肿,炎细胞浸润;4 w后,炎细胞数量减少,新生毛细血管形成.结论 PCL-EO 降解缓慢,吸收时间较长,埋植初期组织有炎性反应,此后,炎性反应减轻.PCL-EO适宜用作长期植入输尿管支架材料.     

组织工程心脏瓣膜支架材料进展

当前应用于临床的瓣膜置换物(生物瓣和机械瓣)都不同程度的存在着一定缺陷。组织工程心脏瓣膜为理想生物瓣膜替代物的出现带来了希望。组织工程心脏瓣膜的构建包括:⑴支架的选材及制备;⑵种子细胞的选择、分离与培养;⑶种子细胞在支架上的种植与培养三部分。现重点综述近年来国内外在组织工程心脏瓣膜支架材料研究上的新进展新突破,展望了支架材料发展的方向和前景。     

瓣膜组织工程构建的研究进展

瓣膜病是常见病和多发病,主要治疗手段为瓣膜置换术.目前临床上应用的人造心脏瓣膜主要有机械瓣、生物瓣(包括同种瓣),但这些瓣膜均无生长性.     

慢性乙肝患者肝组织及血清中HBV DNA与肝脏组织病变的相关性

采用定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测45例慢性乙肝患者肝组织与血清中乙肝病毒（HBV）DNA的含量,并与丙氨酸氨基转移酶（ALT）及肝组织病理的关系进行相关性分析。结果 肝组织及血清中HBV DNA含量分别为2.8×10^5～1.1×109copies/cm3及2.4×10^3～8.1×10^7copies/cm3,P〈0.001,二者含量呈显著正相关（r=0.86,P〈0.001）。肝组织HBV DNA含量与ALT水平、肝组织炎症活动度及肝组织纤维化指标均无明显相关性。认为HBV复制程度与肝细胞损伤程度无明显相关性;肝组织中HBV DNA水平能更准确反映HBV的复制程度;血清中HBV DNA水平一定程度上可指导抗病毒治疗及判断疗效。     

聚乳酸-聚乙醇酸共聚物与心肌样细胞生物相容性的研究

目的: 探讨聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)与骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)衍生的心肌样细胞的生物相容性,为构建心肌组织工程及其进一步体内回植提供研究基础。方法: 以密度梯度离心法体外分离培养SD大鼠的BM-MSCs,将培养的第3 代细胞用终浓度为10 μmol/L的5-氮杂胞苷和0.1μmol/L的血管紧张素Ⅱ诱导分化。将诱导后的心肌样细胞接种到PLGA材料上, 用沉淀法测定细胞的黏附力和黏附率;MTT比色法检测细胞的增殖并绘制增殖曲线;扫描电镜观察细胞在PLGA材料上的形态学特征及细胞与该材料的相容性。结果: 心肌样细胞在PLGA支架材料上贴附、生长良好,可分泌细胞外基质,其黏附、增殖能力与单纯的细胞相比无显著统计学差异。结论: PLGA与心肌样细胞具有良好的生物相容性,可作为心肌样细胞的理想载体构建心肌组织工程。     

组织工程心脏瓣膜构建中细胞种植的实验研究

目的 观察不同细胞种植在脱细胞猪主动脉瓣叶支架上的生长特点。方法 将猪主动脉瓣叶行脱细胞处理．并在其上分别种植新生牛主动脉内皮细胞(BAECs)、平滑肌细胞(SMCs)、SMCs和BAECs。结果 猪主动脉瓣叶中的细胞成分能完全去除，种植的BAECs在脱细胞瓣叶表面形成一连续的细胞层．SMCs形成多层连续的细胞层，复合种植细胞则形成多层连续的细胞层；BAECs表面形成一连续的细胞层，其间为多层分布的SMCs，同时内皮细胞分泌前列环素(PGI2)的能力明显增强。结论 不同种类的细胞在脱细胞瓣叶表面均生长良好，并呈现不同的生长方式，SMCs和BAECs复合种植有可能为今后组织工程瓣膜构建中有关细胞种植提供参考。     

心脏瓣膜组织工程研究新进展

瓣膜置换术是目前临床上治疗心脏瓣膜病的最终手段。但临床应用的各种人工心脏瓣膜在持久性和远期疗效上,都存在着难以克服的缺陷。而随着组织工程技术的发展,组织工程瓣膜以良好的组织相容性、经久耐用且具有生物活性等多方面的优势而成为近年来心脏外科领域的研究热点之一。现综述了近年来国外组织工程心脏瓣膜在瓣膜材料、培养方式及种子细胞等方面的最新进展并展望了该领域的研究未来。     

TLR与肝脏疾病

1988年Hashimoto首次在果蝇体内发现Toll样受体（TLR）,对果蝇的天然免疫起作用。1997年发现的TLR为存在于人细胞表面的跨膜蛋白,TLR作为主要的模式识别受体,在机体先天性免疫应答中发挥着重要作用。目前在人体内已发现十多个TLR,广泛分布于各种组织中,其细胞及组织分布有特异性[1]。TLR介导特异的信号通路,形成一个复杂的、联合性的网络,特异地识别大量病原体及组织代谢产物等。目前     

组织工程心脏瓣膜构建的机遇与挑战

随着组织工程学的发展，构建组织工程心脏瓣膜(TEHV)的研究已取得初步进展，当前TEHV研究的方向主要集中于三个方面：种子细胞、生物材料及组织构建。本文就种子细胞的来源、分离、培养和鉴定，生物材料的种类、要求，TEHV的构建方法和构建环境，和TE-HV的动物实验和临床应用方面的研究进展做一概述。     

三足鼎立的三重奏一糖尿病发病与肝脏组织及其临床处理

胰岛素抵抗和胰岛B细胞功能缺陷是2型糖尿病发病的两个关键因素,而肝脏是调节体内糖代谢的重要器官,各种肝脏疾病均可使肝脏生理功能受损,通过一系列相关机制引起机体糖代谢紊乱,甚至出现糖耐量减低或糖尿病。在我国,肝损害引起的糖尿病主要以慢性肝炎、肝硬化为主,而在发达国家,非酒精性脂肪肝、     

心肌组织工程研究进展

冠心病是现代社会危害公众健康的主要疾病之一,而现有的治疗手段并不能从根本上治愈冠心病所引起的心肌损害和心功能下降,心肌组织工程概念的提出有望为解决这一难题提供新途径。本文结合近年来的文献对心肌组织工程的国内外研究进展作一综述。     

肝脏炎性疾病患者血浆中组织因子途径抑制物与抗凝血酶Ⅲ的表达与临床意义

目的研究肝脏炎性疾病患者血浆中组织因子途径抑制物（ＴＦＰＩ）与抗凝血酶Ⅲ（ＡＴ－Ⅲ）的改变及其临床意义。方法ＴＦＰＩ抗原（ＴＦＰＩ：Ａｇ）采用双夹心ＥＬＩＳＡ抗原测定法，ＴＦＰＩ活性（ＴＦＰＩ：Ａ）采用发色底物法，ＡＴ－Ⅲ：Ａｇ采用免疫浊度法，ＡＴ－Ⅲ：Ａ采用发色底物法。结果急性中毒性肝炎１４例，急性病毒性肝炎２０例，慢性乙型肝炎４８例，共８２例肝脏炎性疾病患者ＴＦＰＩ：Ａｇ与ＴＦＰＩ：Ａ均高于正常值（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），ＡＴ－Ⅲ：Ａｇ均接近正常值，ＡＴ－Ⅲ：Ａ除慢性乙肝中度低于正常值外，其余接近正常值。结论肝脏炎性疾病ＴＦＰＩ均上调，表明组织受损，炎症存在。而ＡＴ－Ⅲ可正常或降低，表明肝细胞分泌ＡＴ－Ⅲ有一定程度减少。     

环氧氯丙烷对组织工程瓣去细胞支架材料理化性质的影响

目的研究环氧氯丙烷（EC）处理对组织工程心脏瓣膜去细胞支架材料理化性质的影响。方法对EC处理的去细胞组织工程猪瓣支架材料进行胶原酶消化实验,茚三酮实验,血浆蛋白吸附率和血小板黏附率实验,与戊二醛（GA）处理的及未经处理的去细胞猪瓣支架材料进行对照研究,评价EC处理对生物材料理化性质的影响。结果胶原蛋白经EC或GA处理后,抗消化能力显著增加（P<0.01）;GA处理后的胶原蛋白再经EC处理后,抗消化能力进一步增加（P<0.01）。胶原蛋白经EC和GA处理后,茚三酮值均明显下降（P<0.01）,GA处理后的胶原蛋白经EC处理后,茚三酮值进一步下降（P<0.01）。EC和GA处理胶原蛋白的交联度增加,EC处理能使GA处理的胶原蛋白交联度进一步增加（P<0.01）。EC处理的组织工程瓣膜去细胞支架材料血浆中蛋白质吸附率和血小板黏附率均降低。结论EC处理能够进一步改善组织工程瓣膜去细胞支架材料的理化性质,有利于提高血液相容性和减缓钙化,是组织工程瓣生物支架材料很好的处理方法。