几种致癌物体外转化大鼠气管上皮细胞致癌的进程

已明确正常细胞与一定量的化学或物理致癌物接触后第一步成为癌前性变异细胞,进而发展为瘤性变体细胞。本文探讨大鼠气管上皮(RTE)细胞与不同致癌剂接触后,从形态学上的转化到细胞获不死性再进展为癌性细胞的过程与致癌剂的性质的关系。 本文用体外研究RTE细胞致癌作用的模式系统,将原代RTE细胞分为三组,分别与致突变浓度的DNA烷化剂N-甲基-N-硝基-N’-亚硝基胍(MNNG)0.3微克/毫升、非致突变浓度的DNA次甲基化剂5-氮杂胞苷(5-aza-C)4毫克分子浓度接触,另一为自发转化组°前二组得～30％的残存细胞,再培养5周能鉴别转化细胞并分离之,得到形态学上转化的变体细胞。后者被称为生长力增强的变体细胞,简称(EGV)。     

卵巢癌患者血清CA125与癌基因表达检测的临床意义

目的　评价卵巢癌患者血清CA 12 5表达水平的临床意义。方法　采用酶联免疫分析和流式细胞术对 3 3例卵巢癌患者血清CA12 5浓度和癌组织 p5 3V+ 、CD44S+ 、p170 + 及DNA异倍体细胞检出率进行了检测。结果　卵巢癌患者CA 12 5浓度、p5 3V+ 和 p170 + 细胞检出率均显著高于正常对照 (P <0 .0 1) ;CA 12 5浓度和 p5 3V+ 细胞表达率随临床分期增加而逐渐升高 ;p5 3V+ 和DNA异倍体细胞检出率随CA 12 5浓度增加而逐渐升高 ,CD 44S+ 细胞检出率却逐渐降低。结论　卵巢癌患者血清CA12 5浓度与癌组织 p5 3V+ 、CD44S+ 和DNA异倍体细胞检出率、肿瘤临床分期的关系都十分密切。     

癌瘤生物学研究近况(下)

二、癌变机理:细胞转化和基因功能表达 从细胞生物学角度看,癌细胞的形成和转化中涉及两个基本问题: 1.转化有没有引起基因或DNA的结构的变化?或者癌细胞的产生或致癌始动的基础是遗传的还是外遗传的改变? 此问题久已争论。体细胞突变理论在1915年前后提出。1926年证明X-射线引起突变致癌,后发现多环烃与DNA交互作用,致突变性和致癌性的相关以及肿瘤的染色体研究都支持了癌变的遗传理论。     

肺癌患者全线粒体DNA体细胞性突变检测

目的　检测肺癌患者线粒体DNA体细胞性突变并探讨它在肿瘤发生中的作用。方法　利用时相温度梯度凝胶电泳对 16例肺癌患者的肿瘤及相应癌旁组织全线粒体DNA进行突变筛查 ,然后直接测序明确突变并进行分析。结果　在 10例 ( 62 .5 % )患者中发现 2 9个体细胞性突变 ,其中 2个位于rRNA区( 6.90 % ) ,10个位于mRNA区 ( 3 4.48% ) ,17个位于高变D环区 ( 5 8.62 % )。检测到 2例肿瘤和 3例癌旁组织具有常见的 4977bp缺失突变。除np3 0 3～ 3 0 9位点具有长度不稳定外 ,未发现其它微卫星区域不稳定。结论　肺癌患者的线粒体DNA存在高频率的体细胞性突变。     

全自动细胞图像分析仪在胸腹腔积水诊断中的应用

背景与目的:胸腹水积良恶性细胞诊断是临床细胞病理上的一个难点,有多种方法用于胸腹积水细胞性质的鉴定,但因复杂而鲜在临床使用.本研究试用DNA全自动图像分析研究恶性胸腹积水细胞中的非整倍体细胞.方法:每例胸腹积水样本50～100 mL经离心去掉上清液,经涂片离心机制成2张玻片.一张玻片用Feulgen染色,用DNA倍体分析仪测定DNA含量:另一张作为对照,经瑞士染色作常规细胞学诊断.结果:463例胸腹积水中,经临床证实有203例为炎性积水,240为痛性积水,20例临床诊断不明.203例炎性积水中,有8例发现1～2个大于5c非整倍体细胞,其余均未见异常倍体细胞;而常规细胞学诊断193例为炎性积水,10例可疑核异质.在240例癌性积水中,DNA倍体分析除7例外,均发现有非整倍体细胞,其中包括6例1～2个大于5c细胞,81例3个或3个以上的大于5c细胞,146例可见异倍体细胞峰;而常规细胞诊断为177例转移性腺癌,16例淋巴瘤、30例间皮细胞瘤,17例发现核异质.20例临床诊断不明病例中DNA倍体分析发现有4例未见倍体异常细胞,16例有非整倍体细胞,其中包括14例1～2个大于5c细胞,2例3个以上大于5c细胞:常规细胞均可见核异质.结论:在大多数癌性胸腹积水中均可见到大于5c异倍体细胞及异倍体细胞峰,DNA倍体分析方法可用于鉴别诊断癌性或炎性胸腹积水.     

DNA含量和S期细胞比值与食管癌生物学特性的关系

目的 :研究食管癌患者不同组织细胞的DNA含量、S期细胞比值 (SPF)及倍体状态与临床病理特性的关系。方法 :应用流式细胞仪检测食管癌患者新鲜手术标本食管癌组织、癌旁组织、正常食管粘膜及淋巴结中DNA含量及S期细胞比值。结果 :食管癌组织的异倍体发生率明显高于癌旁组织、正常食管粘膜和淋巴结 (P <0 0 5)。二倍体组织之间的细胞DI差异无显著性 (P >0 0 5)。异倍体与二倍体细胞同一组织之间、异倍体组癌组织与癌旁组织、癌组织与正常组织、癌旁组织与淋巴结、正常组织与淋巴结之间DI差异显著 (P <0 0 5)。在二倍体组中癌组织与正常组织、癌组织与淋巴结之间SPE之间差异显著 (P <0 0 5)。DNA倍体与患者性别、肿瘤部位及大体病理类型等无关 (P >0 0 5) ,而与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结状况有关 (P <0 0 5)。结论 :食管癌DNA倍体及SPF均与肿瘤的增殖活性有关 ,有助于对食管癌生物学行为的了解和患者预后的判断。     

2-甲氧基雌二醇对多发性骨髓瘤患者骨髓细胞的影响

目的:探讨2-甲氧基雌二醇(2ME2)对多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞及造血前体细胞凋亡的影响。方法:采用DNA片断原位末端标记(TUNEL法)检测多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞及造血前体细胞凋亡。结果:14例多发性骨髓瘤患者骨髓瘤细胞经1、4、16μmol/L2-甲氧基雌二醇作用48小时后,凋亡率分别为(10.5±1.2)%、(21.2±2.3)%、(36.8±3.6)%,呈现剂量依赖性。经统计学分析,各组之间及与空白对照组相比,差异显著(P<0.05)。骨髓中粒系、红系、淋巴系细胞出现凋亡较少,经统计学分析,各组之间及与空白对照组相比,无明显差异(P>0.05)。相同的2ME2浓度条件下,骨髓中粒系、红系、淋巴系细胞凋亡率与骨髓瘤细胞组凋亡率相比,差异显著(P<0.05)。结论:2-甲氧基雌二醇可选择性诱导骨髓瘤患者骨髓中骨髓瘤细胞凋亡,对骨髓瘤患者骨髓中粒系、红系、淋巴系细胞影响很小。     

胡麻油烟凝聚物诱导人胚肺二倍体细胞恶性转化作用

背景与目的:研究胡麻油烟对人体潜在的致癌危险性.材料与方法:以胡麻油烟凝聚物(SOFA)作为受试物染毒人胚肺二倍体细胞,建立体外恶性转化实验系统,对转化细胞进行ConA凝集实验、软琼脂培养实验以及裸鼠体内致瘤实验,观察并检测细胞是否发生恶性变.结果:实验剂量范围内的SOFA(25～400 μg/ml)能够诱导人胚肺二倍体细胞形成细胞恶性转化灶,转化灶细胞生长失去接触抑制性、饱和密度增大、ConA凝集能力增强、锚着依赖性丧失及裸鼠体内具有成瘤性等多种细胞发生恶性变的生物学特性改变.结论:SOFA具有诱导人胚肺二倍体细胞恶性转化的作用,对人体具有潜在致癌作用.     

氯化血红素对交链孢醇单甲醚致突变性的影响

交链孢醇单甲醚(AME)是直接致突变物,可能与食管癌病因有一定关系。氯化血红素(Hemin)是人体内源性成分,本文采用V_(79)细胞6-疏基鸟嘌呤抗性突变试验的方法,观察了Hemin对AME致突变性的影响。结果表明,所用剂量范围内的Hemom对V_(79)细胞无明显毒性和致突变性(P>0.05)。一 定剂量Hemin(15μM)对不同剂量AME (25-100μg/ml)诱发的V_(79)细胞突变频率低于AME单独作用(P<0.01)。此外,与仅含AME对照相比,不同剂量Hemin(5～20μM)能分别降低AME的突变频率(P<0.01),并随Hemin剂量增大,相对抑制率呈增高趋势具有剂量依赖性,显示Hemin对AME致突变性有抑制作用。     

儿童畸胎瘤细胞DNA含量及倍体改变的生物学意义研究

研究儿童畸胎瘤细胞DNA含量及倍体改变的生物学意义。方法　应用上海交通大学研制的医学图像分析仪 (ICM - 1 0 0型 )检测了 82例儿童畸胎瘤细胞DNA含量和倍体情况 ,以及大于 5倍体细胞百分比及S期细胞百分比 ,并结合病理诊断分型及临床随访资料进行分析。结果　卵黄囊瘤组DNA含量与DI值大于未成熟畸胎瘤组 ,未成熟畸胎瘤组该二参数大于良性畸胎瘤组 ,三组之间均存在显著差异 (P<0 .0 1 )。大于 5倍体细胞百分比 ;60例良性畸瘤中 2例出现大于 5倍体细胞 ,该 2例属非整倍体 ,2 2例恶性畸胎瘤中 2 1例出现大于 5倍体细胞 ,该 2 1例属非整倍体。S期细胞百分比 :良性畸胎瘤中S期细胞平均为 2 3 .35 % ,未成熟畸胎瘤为 2 8.73 % ,卵黄囊瘤为 31 . 99%。结论 :随着细胞DNA含量及倍体的增加以及大于 5倍体细胞百分比的增加 ,畸胎瘤恶性程度增高 ,患者生存期缩短。畸胎瘤细胞DNA含量及倍体情况以及大于 5倍体细胞和S期细胞百分比的检测对畸胎瘤的病理诊断和恶性程度估计提供了较为客观和可重复的数据和指标。     

c-erbB-2、PS2、PSA及DNA含量与乳腺癌神经内分泌分化的相关性研究

目的　探讨伴神经内分泌 (NE)细胞分化的乳腺癌的恶性程度及生物学行为。方法　用免疫组化法(L SAB)对 131例乳腺癌进行铬粒素 (chromogranin)、c- erb B- 2、PS2及前列腺特异抗原 (PSA)表达检测 ,以经典的Feulgen染色法及图像分析技术对 81例乳腺癌进行 DNA定量分析。结果　 NE细胞阳性乳腺癌 c- erb B- 2阳性表达率为 37.5 %及表达强度 ( ～ ) 33.3%均明显低于 NE细胞阴性肿瘤的 6 2 .6 %和 6 8.7% (P<0 .0 5 ,P<0 .0 5 ) ;NE细胞阳性乳腺癌 PS2、PSA表达率分别为 72 .2 %和 5 5 .0 % ,均显著高于 NE细胞阴性肿瘤的 45 .0 %与16 .4% (P<0 .0 5 ,P<0 .0 5 ) ;NE细胞 ( )组 DNA指数、DNA主干系峰值、>5 C异倍体细胞数以及异倍体率均显著高于 NE细胞 ( )乳腺癌组 (P<0 .0 5 ) ,NE细胞 ( )乳腺癌组积分吸光度、DNA指数、DNA主干系峰值、>5 C异倍体细胞数以及异倍体率均明显低于 NE细胞阴性组 (P<0 .0 5 ) ;在 ～ 级乳腺癌中 ,NE细胞阳性组的积分吸光度、DNA指数、DNA主干峰值、>5 C异倍体细胞数以及异倍体率均显著低于 NE细胞阴性组 (P<0 .0 1)。结论　伴神经内分泌分化的乳腺癌恶性程度较低 ,预后较好。     

NNK及X-射线诱导大鼠气管上皮细胞转化的研究

本文采用无血清F12培养基培养大鼠气管上皮(RTE)细胞。RTE细胞可在该种培养基中生长,增殖。形成典型的上皮细胞集落。当无血清培养基换成含血清的选择性培养基时,正常细胞停止生长进而退化死亡,而转化的RTE细胞则可以继续生长,成为转化集落。转化集落经多次传代可在裸鼠体内引起肿瘤。大鼠暴露于致癌物NNK或X射线后,收集其RTE细胞,先在体外进行无血清培养然后再进行选择性培养,其转化率明显高于对照组。RTE细胞体内—体外转化实验对于探究人类肺癌发生机制有一定意义。     

城市回用水致突变性研究

背景与目的： 对城市回用水的致突变性进行分析。 材料与方法: 分别于丰水期(2005年8月)、枯水期(2006年3月)采集处理前、后的某城市回用水水样,利用固相萃取技术提取水中有机物。采用Ames试验、体外胞质阻滞法微核试验和质粒DNA断裂试验研究水样对遗传物质的损伤,并采用基因测序方法研究水样对p53基因外显子的致突变性。 结果: 对两次水样的出水和入水检测结果显示,除丰水期入水在活化条件下无致突变性外,其余水样在非活化和活化条件下TA98和TA100菌落回变数均为自然回变菌落数的2倍以上,且具有剂量-反应关系(P<0.05)。微核试验中相当于原水体积16.7、33.3和66.7 ml/ml 的3个剂量组中,微核数仅在相当于原水66.7 ml/ml浓度组有升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。DNA断裂试验显示随着城市回用水(出水及入水)剂量的增加,对质粒的损伤作用也明显增加(P<0.05),且在枯水期水样的实验中出现了线性DNA。基因测序法证实,城市回用水(出水及入水)有机提取物能诱导人胚肝细胞(L-02细胞)p53基因突变。 结论: 城市回用水具有一定的致突变作用,对环境与健康具有潜在的风险。     

MUTAGENICITY RESEARCH OF No.Ⅱ DRUG

目的与方法 :用Ames试验、CHO_K细胞染色体畸变试验及微核试验对Ⅱ号药进行了致突变性研究。 结果 :Ames试验在1～5000μg/皿剂量范围内加与不加S9 条件下 ,4个菌株的回变菌落数均未有2倍以上的增加 ;微核试验显示在25～125mg/kg剂量 ,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核细胞率(MNCF)与对照组比较无显著性差异(P>0.05) ;CHO_K细胞染色体畸变试验显示在不加S9 条件下 ,31～250μg/ml剂量范围内染色体畸变率小于5 %,在加S9 条件下250μg/ml剂量组畸变率为8 %,属可疑阳性。 结论 :Ames试验和微核试验均为阴性 ,在高剂量组加S9 条件下 ,染色体畸变率为可疑阳性 ,表明在高剂量条件下 ,Ⅱ号药对体细胞有可疑遗传毒性     

细胞周期调控基因p21WAF1／CIP1与肿瘤

肿瘤细胞区别于正常细胞的基本特征是细胞生长失控和分化受阻。细胞生长和分化受两类信号调控：正性信号(即癌基因)阻止分化，促使细胞生长；负性信号(即抑癌基因)则与正性信号相反。近几年来，在抑癌基因、抑癌基因与细胞周期调控关系方面的研究均取得明显的进展。抑癌基因的改变既在正常体细胞转化为恶性肿瘤细胞中发挥重要作用，又涉及种系细胞改变，这就成为肿瘤易感性的基础。……     

视黄酸对致癌剂苯芘环氧化及其与DNA结合的抑制作用

本文采用氚标记苯芘及体外细胞培养方法,探讨维生素A的重要衍生物视黄酸的防癌机理,发现视黄酸对前致癌剂苯芘环氧化为终致癌剂及其与BALB/c系小鼠骨髓瘤细胞DNA的结合均有显著的抑制作用(P<0.01)。     

血清转化生长因子α浓度作为肝硬化并发肝细胞癌的指标

血清转化生长因子(TGFα)是从镶嵌在细胞膜上的大分子前体分离出来的一个50氨基酸肽。TGFα表达最常见于肿瘤细胞系,在各种恶性细胞中刺激DNA合成。推测TGFα以自分泌的方式起致癌或促癌的作用,并受其血清和尿浓度增高的影响。尽管TGFα在体内外肝细胞癌(HCC)细胞中的表达和产生已有许多报道,但血清TGFα浓度     

眼镜蛇毒短链神经毒素的致突变试验

背景与目的:舟山眼镜蛇(Najaatra)毒短链神经毒素被用于临床镇痛,我们采用短链神经毒素,研究其高浓度下有无致突变性,为临床应用的安全性提供依据。材料与方法:应用中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验和Ames试验检测短链神经毒素潜在的致突变性。结果:短链神经毒素浓度高于0.64μg/ml时,部分菌株的Ames试验结果呈阳性,高于0.32μg/ml时,部分试验组CHL细胞染色体畸变为阳性,但均远低于阳性对照组,而且回复突变和畸变率与神经毒素的浓度不呈线性关系。结论:从致突变角度考虑,短链神经毒素作为药物在临床应用的剂量水平是安全的。     

二乙基鄰菲缠啉二氯锡的细胞毒作用和对DNA的损伤

本文研究了二乙基鄰菲缠啉二氯锡(SnI)的细胞毒作用和对DNA的损伤。用噻唑蓝(MTT)法,SnI与HeLa细胞一起温育48小时后,细胞生长半数抑制浓度(IC50)为4.4μg/ml。用台盼蓝拒染法,SnI与HeLa细胞一起温育72小时后,IC50为0.32μg/ml。两种方法表明二乙基鄰菲缠啉二氯锡对HeLa细胞有显著的细胞毒作用。用琼脂糖凝胶电泳技术表明,SnI浓度为50μg/ml能直接使P_4DNA和PBR_(322)DNA断裂水解而不要求DNA拓扑异构酶Ⅱ的参予。     

重组人催乳素对骨髓移植小鼠的造血与免疫重建效应

加快自体骨髓移植(BMT)后的造血与免疫系统的重建可以缩短骨髓衰竭与免疫缺陷的间期,已经发现了系列细胞因子可以促进骨髓和免疫系统的重建,同时发现催乳素和生长激素的受体与其它造血生长因子(IL-2～7,GM-CSF,G-CSF,M-CSF,EPO等)受体在结构上极为相似,从而促使我们进一步观察rhPRL的促造血效应.小鼠BMT后给予腹腔照射rhPRL(10μg/次/天,连续1O天).发现rhPRL治疗组内小鼠的肝脏和骨髓中造血前体细胞的频率(CFU-C,BFU-C)和细胞总数均大幅度增加,外周血的WBC、PLT和HCT亦大幅增加并时相提前.粒细胞前体细胞(8C5~ 细胞)在脾脏和骨髓中大幅度增加,B细胞前体细胞(B220~ sIgM~-细胞)在脾脏和骨髓中亦大幅度增加.同时发现B细胞对LPS丝裂原