转化生长因子β1在胆囊癌中的表达及意义

目的：探讨转化生长因子β1（TGF－β1）与胆囊癌发生、发展的关系。方法：应用TGF－β1多克隆抗体对35例原发性胆囊癌、10例胆囊腺瘤及10例慢性胆囊炎标本进行S－P免疫组化标记。结果：胆囊癌TGF－β1的阳性率为57．1％,与胆囊腺瘤、胆囊炎（阳性率分别为20％和10％）比较差异有显著性意义（P＜0．01）,TGF－β1的阳性表达率在Nevin分期和伴淋巴结及远处转移的病人中,差异均有显著性意义（P＜0．05,P＜0．01）,TGF－β1表达率与病理组织学分级、性别及年龄无关。结论;TGF-β1与胆囊癌的发生发展密切相关,TGF－β1水平增高可增加胆囊癌转移的危险。     

雄激素和转化生长因子β1协同调节前列腺基质细胞增殖和分化

目的：探讨双氢睾酮（DHT）和转化生长因子β1（TGF－β1）对体外培养的前腺基质细胞增殖和分化的影响及前列腺基质增生的机制。方法：体外培养人前列腺基质细胞，加入DHT和TGF－β1，采用MTT法检测细胞增殖，免疫组化、RT－PCR方法检测平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达。结果：对平顶期的前列腺基质细胞，单独应用DHT或TGF－β1无显著刺激增殖作用（P＞0．05）；DHT和TGF－β1联合应用时，可显著刺激基质细胞增殖（P＜0．01），TGF－β1可使前列腺基质细胞中平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达增加（P＜0．05），与DHT联合应用时这种作用更强。结论：DHT和TGF－β1具有协同促进前列腺基质细胞增殖和分化的作用。TGF－β1和雄激素可能是前列腺基质增生和平滑肌细胞过度增殖的重要诱因。     

良性增生前列腺组织中TGFβ1mRNA和蛋白的表达

目的：在转录和翻译水平探讨转化生长因子β1（TGFβ1）在良性前列腺增生症（BPH）前列腺组织中的表达及意义。方法：应用原位杂交和 免疫组织化学法对22例BPH和10例正常前列腺（NP）组织标本中TGFβ1的表达进行定性、定位检测。结果：BPH前列腺和NP组织的上皮和间质都有明显的TGFβ1mRNA表达,其表达在BPH和NP间差异无显著性意义（P＞0．05）;在两组间,基质细胞TGFβ1mRNA表达明显高于上皮细胞（P＜0．01）。BPH前列腺和NP的上皮组织中TGFβ1蛋白表达较弱,且两者之间差异无显著性意义（P＞0．05）;间质中TGFβ1表达均为阳性,BPH前列腺间质中阳性表达显著强于NP的间质（P＜0．01）,以基质为主要成分的增生结节中表达更高。结论：TGFβ1是导致BPH前列腺间质增生的重要物质,启动BPH发生发展的因素在转录后水平调控TGFβ1的表达。     

化瘀解毒汤对TGF-β1及MMP1mRNA表达作用的探讨

目的：探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分（Ⅰ、Ⅲ型胶原）、TGF－β1mRNA及MMP1mRNA表达,并作尿α1－MG检测以及相关肾组织学检查。结果：模型组和各治疗组大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA的面积比显增加（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比显降低（P＜0．05）;各治疗组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比较模型组减少（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比较模型组增加（P＜0．05）;治疗组中以中药预防组鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比最低、MMP1mRNA面积比最高（P＜0．05）。经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善。结论：化瘀解毒汤通过下调TGF－β1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达、以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维。此外还可减轻肾小管病理性损伤。     

肾小管上皮细胞转分化在慢性移植肾肾病中的作用

目的探讨肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化在慢性移植肾肾病(CAN)的发生、发展中的作用。方法36例移植肾穿刺标本分为正常组(N组),CAN组(C组),依Banff 97标准将C组按CANⅠ、Ⅱ、Ⅲ级分为C_1、C_2、C_3组,每组9例。免疫组化染色半定量分析比较α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(VIM)、角质蛋白(CK_(AEI/AE3))和转化生长因子β1(TGF-β1)在各组中的表达,线性相关分析TGF—β1和α-SMA、VIM、CK_(AE1/AE3)表达的相关性。结果C_1、C_2、C_3组α-SMA表达积分分别为0．95±0．07、1．78±0．12、2．42±0．31,VIM表达积分分别为0．74±0．05、1．31±0．18、2．34±0．25,组间呈递增趋势,均明显高于N组α-SMA表达积分0．07±0．02、VIM表达积分0．09±0．02(P＜0．05)；移植肾组织中TGF-β1表达与α-SMA、VIM呈正相关(r分别为0．73、0．68,P＜0．05),而与CKAE1/AE3表达呈负相关(r=-0．71,P＜0．05)。结论肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化参与了CAN的发生、发展,而局部肾组织中TGF-β1的表达上调可能是介导肾小管上皮细胞转分化的重要原因。     

大肠癌患者血清转化生长因子-α水平及其临床意义

目的 观察大肠癌患者的血清转化生长因子－α（TGF－α）水平及探讨其临床意义。方法 采用放射免疫法检测54例大肠癌，25例正常人的血清TGF－α含量，并比较42例大肠癌手术前后血清TGF－α水平。结果 大肠癌患者血清TGF－α水平明显高于正常对照组（P＜0．01），D期患者较其它各期高（P＜0．01）；肿瘤细胞分化程度较差（低分化腺癌、黏液腺癌）大肠癌患者血清TGF－α水平明显高于肿瘤细胞分化程度较好（高分化腺癌、中分化腺癌）者（P＜0．01）；手术后大肠癌患者血清TGF－α水平明显低于术前（P＜0．01）。结论 高水平TGF－α与大肠癌临床分期病理有一定关系；检测血清TGF－α水平有助于判断大肠癌的病情和预后。     

瘢痕疙瘩成纤维细胞中转化生长因子 -βⅠ、Ⅱ型受体的表达及调控

目的：了解瘢痕疙瘩成纤维细胞中转化生长因子(Transforming growth factor,TGF)－βⅠ、Ⅱ型受体的表达及TGF－β1,β3对其的影响。方法；体外培养瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFB）和正常皮肤成纤维细胞（NFB），利用免疫组化及计算机图像分析系统测定TGF-βⅠ、Ⅱ型受体含量。结果：KFB胞浆内阳性信号明显强于NFB（P＜0．05）；经TGF－β1,β3处理组胞浆内阳性信号差别均不明显（P＞0．05）。结论：KFB存在高表达的TGF－βⅠ、Ⅱ型受体；TGF－β1,β3均能促进KFB TGF－βⅠ、Ⅱ型受体的表达。     

转化生长因子β及其受体在胃癌中表达的研究

目的：研究转化生长因子β（TGF－β）及其受体在胃癌中的表达，探讨其在胃癌发病中的作用机制及临床意义。方法：应用免疫组织化学SABC方法进行研究，结果：TGF－β表达主要分布于肿瘤细胞浆中，其在胃癌中的表达率71．43％明显高于正常组织的23．21％，P＜0．05，TGF－βI型受体表达主要分布于细胞膜和细胞浆中，其在胃癌和正常组织中的表达无明显差异，P＞0．05，TGF－βII型受体表达亦位于细胞膜和细胞浆中，其在胃癌中的阳性表达率44．64％明显低于正常组织的96．43％，P＜0．01，结论：TGF－β表达与胃癌发生，发展有着密切关系，其受体表达的缺失可能是肿瘤细胞逃逸TGF－β负调控的机制之一。     

转化生长因子在先天性肾积水中的表达研究

目的：探讨先天性肾积水转化生长子因子β1(TGF-β1)mRNA及蛋白表达变化的临床意义。方法：应用免疫组化及原位杂交方法对15例患肾、10例正常肾组织进行染色观察。结果：患肾组织TGF－β1蛋白及mRNA表达均增高,大部分近曲小管、少数肾小球、极少数远曲小管细胞浆内可见TGF－β1蛋白强阳性表达。大部分近曲小管的部分细胞核、极少数肾小球细胞核内可见TGF－β1mRNA的中度阳性表达。患肾肾盂及肾盂输尿管连接处狭窄段肌细胞和间质梭形细胞胞浆及胶原纤维内TGF－β1蛋白及mRNA表达增高。结论：先天性肾积水患肾组织TGF-β1表达增高可能与慢性肾损伤及间质纤维化有关。     

原位PCR检测胰腺癌中TGF—βmRNA的表达及意义

目的 研究TGF－β1在胰导管癌中的表达及意义。方法 采用RT－PCR、原位PCR杂交技术检测23例胰导管腺癌和4例正常胰腺组织中TGF-βmRNA的表达。结果 正常胰腺组织中无TGF－β1的表达。胰腺癌组织中TGF-βmRNA表达率为69．6％（16／23）,原位PCR杂交显示其表达位于胰腺癌细胞膜上,TGF－β1表达程度与肿瘤的病理分期、淋巴结转移有明显的相关性（P＜0．05）。TGF－β1阳性者1年生存率为13．3％（2／15）,明显低于阴性者（5／6）。结论 TGF－β1与胰腺癌的病理分期、预后相关,临床检测可用于评估其生物学行为。     

脾次全切除术对肝纤维化影响的实验研究

目的 研究脾次全切除术对肝纤维化的影响。方法 用60％ CCL4加5％乙醇制作大鼠肝纤维化模型,然后行全脾或脾次全切除,观察不同术式下大鼠血清肝纤维化指标的变化,用原位杂交和免疫组化的方法了解不同术式对肝中TGF－β1、MT1-MMP、MMP2、TIMP1表达的影响。结果 肝纤维化大鼠脾手术前后外周血PCIII、HA、LN和PLC均显著高于正常对照组（P＜0．01）,不同术式组间比较差异无显著性意义（P＞0．05）。TGF－β1、MT1－MMP、MMP2、TIMP1主要表达在激活的肝贮脂细胞（肌成纤维细胞）中,图像分析显示TGF－β1的表达术后明显低于术前（P＜0．01), 但均较正常对照组显著升高（P＜0．01）,而术后各组间比较差异无显著意义（P＞0．05）。纤维化肝中MT1－MMP、MMP2、和TIMP1的表达均高于正常组（P＜0．01）,但术前术后及术后各组间比较差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论 脾次全切除后保留的残脾没有加重纤维化。     

甲状旁腺激素促进系膜细胞合成分泌转化生长因子β1

目的：研究甲状旁腺激素（PTH）对大鼠系膜细胞合成与分泌转化生长因子β1（TGF－β1）的影响。方法：（1）分别以10^-12,10^-11,10^-10,10^-9,10^-8mol/l的hPTH1-34刺激大鼠系膜细胞6，12，24，48h后，ELISA方法测定上清中TGF－β1的浓度；（2）分别以10^-12,10^-11,10^-10,10^-9,10^-8mol/L的hPTH1-34刺激大鼠系细胞48h,采用半定量RT－PCR方法检测细胞TGF－β1 mRNA的表达；（3）以10^-8mol/L的hPTH1-34分别刺激大鼠系膜细胞6，12，24，48h，采用半定量RT－PCR方法检测细胞TGF－β1 mRNA的表达，结果：（1）ELISA结果显示，hPTH1-34促进大鼠系膜细胞合成与分泌TGF－β1分泌作用达高峰（P＜0．01），（2）半定量RT－PCR方法结果显示，hPTH1-34促进大鼠系膜细胞TGF－β1 mRNA的表达，并具有浓度依赖和时间依赖性特点（各组与对照组间P＜0．05），结论：hPTH1-34从蛋白和基因水平显著促进系膜细胞TGF－β1的合成与分泌，且呈浓度依赖和时间依赖性特点。     

间隙连接蛋白43表达改变对肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 研究肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化（TEMT）过程中间隙连接蛋白43（connexin 43）表达和细胞间通讯功能的变化,以及上调connexin 43水平对TEMT的影响。方法 用转化生长因子（TGF）β1刺激人肾小管上皮细胞系（HKC）,检测connexin 43、上皮细胞标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）和肌成纤维细胞标志物α-SMA、vimentin的表达。用激光共聚焦显微镜荧光漂白恢复（FRAP）技术检测HKC细胞间通讯功能。通过pLNCX2- connexin 43病毒质粒转染HKC上调connexin 43的表达,检测以上各指标的变化,观察对TEMT的影响。结果 HKC经TGF-β1刺激后．其α-SMA和vimentin mRNA和蛋白质表达增强,而E-cadherin和connexin 43表达下降（P＜0．05）,细胞间通讯功能降低（P＜0．05）。connexin 43高表达后,TEMT程度明显减轻。结论 上调肾小管上皮细胞间通讯功能可部分减轻TEMT程度。     

马兜铃酸对人肾细胞作用的实验研究

目的：探讨马兜铃酸（AA）对体外培养的人肾小管上皮细胞株（HK－2）及人肾间质成纤维细胞（hRIFs)的作用。方法：（1）用MTT比色法检测细胞增殖反应。（2）用乳酸脱氢酶（LDH）释放试验检测AA的细胞毒作用。（3）应用RT－PCR观察细胞I型胶原（Col I)、转化生长因子β（TGF－β）、纤溶酶原激活物抑制物1（PAI－1）、基质金属蛋白酶1（MMP－1）及金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP－1）的mRNA表达。结果：（1）AA在10、20和40μg/ml时对HK－2及hRIFs无刺激增殖及细胞毒效应（P＞0．05）；而在80和160μg/ml时却能明显杀伤上述细胞（P＜0．01）。（2）40μg/ml浓度的AA孵育细胞16h，可显著上调HK－2的TGF－β、PAI－1和TIMP－1 mRNA表达（P＜0．05），也可上调hRIFs的Col、TGF－β、PAI－1和TIMP－1 mRNA的表达（P＜0．05）；而10和20μg/ml浓度的AA未观察到上述作用。结论：80和160μg/mlAA对HK－2有明显细胞毒作用，此作用可能与急性马兜铃酸肾病发病相关；而40μg/mlAA可上调HK－2及hRIFs的TGF－β、PAI－1和TIMP－1 mRNA表达，并能上调hRIFs的Col I mRNA表达，此作用可能与慢性马兜铃酸肾病发病相关。     

转化生长因子-β1对人胚肌腱细胞增殖和胶原及内源性Smads基因表达的影响

目的 探讨转化生长因子（TGF）－β1对人胚腱细胞增殖和代谢及其下游信号分子Smad的影响。方法 采用^3H－胸腺嘧啶脱氧核苷和^3H-脯氨酸掺入法观察TGF－β1对人胚腱细胞的DNA和胶原合成的影响。采用半定量反转录聚－合酶链反应（RT－PCR）检测TGF－β1作用24h肌腱细胞Smad2、3和7mRNA表达水平的变化。结果 在体积分数为0．5％胎牛血清条件下TGF－β1可刺激腱细胞增殖,其作用在0．5－10．0μg/L之间呈剂量依赖性增强（P＜0．05）,饱和剂量10μg/L增加DNA合成73％。TGF－β1各剂量组对胶原蛋白合成均有促进作用（P＜0．05）,最大效应剂量为5μg/L（107％）。TGF－β1能显著下调Smad2和Smad3基因的表达水平,同时诱导TGF－β1信号拮抗因子Smad7的产生。结论 TGF－β1能有效促进腱细胞增殖及胶原合成,同时能对其细胞内信号分子Smad的表达起自身调控作用。     

系统性红斑狼疮患者尿α1—微球蛋白与尿微量蛋白测定及意义

目的：了解α1－微球蛋白（α1－mG)，与尿微量白蛋白（u-Alb)对系统性红斑狼疮（SLE）患者早期肾损害的诊断价值，方法：通过放射免疫方法对31例SLE患者（尿常规正常组10例，尿常规异常组21例）及19例健康对照组的α1－mG,β2－微球蛋白（β2-mG)u-Alb进行检测，结果，SLE病人尿α1－mG,β2-mG,u-Alb明显高于正常对组（P＜0．01），无论尿常规正常与否，其尿α1－mG,β2－mG,u-Alb均明显高于健康对照组（P＜0．01），结论：尿α1－mG及u-Alb是系统性红斑狼疮患上期肾损害的敏感指标。     

转化生长因子β1对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的：探讨转化生长因子β1（TGFβ1）对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其意义。方法：采用非放射性细胞增殖检测,3H－胸腺嘧啶摄入,3H－哺氨酸摄入及DNA定量分析方法,观察TGFβ1对体外培养的生长融合后早期（24h)的病理性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞的增殖活性和胶原合成的作用。结果：经TGFβ1作用后,来自瘢痕的成纤维细胞的3H－胸腺嘧啶核苷和3H－脯氨酸掺入增强（P＜0．01）,但来自正常皮肤的无明显变化（P＞0．05）。结论：在细胞生长融合后早期（24h),TGFβ1对瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原合成具有正性调控作用,其在瘢痕的形成中可能具有重要作用。     

膀胱移行细胞癌E—Cadherin和α—Catenin的表达及临床意义

目的：探讨上皮钙粘素（E－Cadherin)和α－连环素（α-Cadherin)在膀胱移行细胞癌中的表达及其生物学行为之间的关系。方法：采用免疫组织化学SABC法检测E－Cadherin和α-Catenin在65例膀胱移行细胞癌石蜡标本中的表达。结果：E－Cadherin在G1、G2、G3级和Tis-T1,T2-T4期肿瘤中的正常表达率分别为76．2％、34．8％、4．8％和54．1％、17．9％,α-Catenin在G1、G2、G3级和Tis-T1,T2-T4期肿瘤中的正常表达率分别为71．4％、34．8％、4．8％和51．4％、17．9％,二者的表达情况均与肿瘤的病理分级和临床分期密切相关（P＜0．01）;65例肿瘤标本中E-Cadherin 和α-Catenin表达同时正常或异常者占83．1％,二者表达之间具有显著相关性（P＜0．01）;E－Cadherin或α-Catenin正常和异常表达者间癌复发差异具有显著性意义（P＜0．05）。结论：E－Cadherin和α-Catenin的表达情况可以作为监测膀胱移行细胞癌恶性程度及复发的重要指标。     

TGF-β1和TGF-α在膀胱癌侵袭和转移中的作用

目的 探讨转化生长因子-β（TGF-β1）和转化生长因子－α（TGF-α）对膀胱癌细胞株（EJ）生长的影响以及促进膀胱癌侵袭和转移的可能途径。方法 采用MTT、Western Blot和RT－PCR方法,观察TGF－β1和TGF－α对DJ细胞株生长以及在mRNA和蛋白水平上对金属基质蛋白酶（MMPs)和组织特异性金属蛋白酶抑制剂－2（TIMP－2）表达的影响。结果 （1）TGF-β1和TGF－α对EJ细胞生长存在抑制趋势,但差别无显著性意义。（2）TGF－β1和TGF－α作用于EJ细胞48h时 ,MMP－2、TIMP－2、MT1－MMP mRNA表达降低;TGF－β1组MMP-9 mRNA表达增加,而对照组和TGF－α组无MP－9mRNA表达。（3）当TGF－β1浓度为0．1、1．0ng/ml时,增加细胞培养上清液中MMP－2蛋白含量对TIMP－2蛋白水平无影响。当浓度为5．0、10．0ng/ml时对MMP－2无影响而降低TIMP－2表达;TGF－α在浓度为1.0、5.0、10.0ng/ml时,对MMP－2蛋白表达无影响而降低TIMP－2表达;在100．0ng/ml时增加MMP－2蛋白表达而对TIMP－2表达无影响;无论在对照组和实验组均未检测到MMP－9。结论 TGF-β1、TGF-α不能抑制EJ细胞生长,参与肿瘤侵袭和转移作用可能与调节MMPs、TIMP－2表达途径有关。     

细胞因子IL-1β和TNF-α mRNA在人精子表达的变化及意义

目的：了解IL－1β和TNFα在人精子表达的变化及意义。方法应用逆转录聚合酶链式反应（RT－PCR）检测13例正常生育者、30例不育者及30例慢性及30例慢性前列腺炎患者精子IL－1β和TNFα mRNA表达。结果不育精子中IL－1β和TNFα mRNA表达增显著低于正常生育者（P＝0．018和P＝0．046）。慢性前列腺炎患者精子中TNFα mRNA的表达显著低于正常生育者（P＝0．018）。而IL－1βmRNA表达与正常生育者相比差别无显著性意义（P＝0．42）。IL－1β和TNFα mRNA－NA在不育者与慢性前列腺炎患者精子中的表达差别无显著性意义（P＝0．49和P＝0．62）。结论某些因素可能干扰不育症患者精子IL－1βTNFα合成,导致精液质量下降及不育。生殖道炎症也可能影响精子TNFα表达,其机制和意义有待进一步研究证实。