经卵清蛋白致敏过敏性鼻炎模型豚鼠造模方法探讨

目的对经卵清蛋白（OVA）致敏过敏性鼻炎模型豚鼠造模方法进行改进。方法 AR模型动物、过敏原、致敏方式、致敏药物剂量及成模评价方法均参考有关文献进行。选择健康豚鼠经OVA致敏制作过敏性鼻炎模型。若成模率低或模型不稳定,进行造模方法的改进,即选用空白对照组分别以原剂量的1.5倍和2倍进行造模。结果本研究首次造模虽然增加了局部刺激时长,但豚鼠成模率仅为12.5%（2/16）,且不够稳定。在造模过程中,大部分豚鼠未出现喉头水肿、下呼吸道及全身过敏。追加药物剂量后,1.5倍和2倍剂量组分别有1只雌鼠和1只雄鼠的症状总分〉5分,而另1只鼠未达成模标准,造模成功率为50%（2/4）。4只豚鼠均曾观察到鼻塞,其中成模的雄鼠于第4、6次滴鼻后分别出现鼻翼翕动和呼吸困难。结论 AR模型造模成功与否可能与药物剂量、药物浓度、豚鼠体重、动物性别等有关。剂量分别增加至1.5倍和2倍时,成模时间较原剂量缩短,模型稳定程度更理想,在造模过程中未观察到显著的、因增加剂量而导致的不良反应。因此,将来可以考虑在原剂量的基础上,适当加大剂量对豚鼠进行造模。     

清蛋白试剂对总蛋白测定的交叉污染分析

目的探讨7150自动生化分析仪清蛋白试剂对总蛋白测定的影响。方法观察总蛋白检测时600,660,700 nm三种副波长条件下清蛋白对总蛋白的交叉污染。结果总蛋白检测副波长设置在600 nm时清蛋白对其交叉污染明显。结论总蛋白副波长设置不当可能影响其测定结果。     

总蛋白与清蛋白试剂互相错误引起误差原因分析

目的探讨总蛋白(TP)与清蛋白(ALB)试剂互相错误引起检测结果误差的原因。方法在AU2700自动生化分析仪上,把TP与ALB试剂互换,各自的设置参数不变,进行定标通过后检测标本,所得结果与日立H7180自动生化分析仪上的结果进行比对。结果 5份标本(浓度分布在各项目医学决定水平)比对结果显示,只有1份标本比对通过,其余4份标本均未通过,综合分析此次比对失败,由此说明TP与ALB 2个项目在AU2700自动生化分析仪上检测结果存在严重偏差。结论 TP与ALB 2个项目试剂位置互相交换错误本身是造成错误的根本原因,这从5份标本综合比对结果可以证实,但5份标本中有1份标本通过比对,由此说明TP与ALB 2个项目在错误的检测系统下也可以得出部分正确的结果,就是这个正确的结果容易造成实验室出现严重的错误。     

尿蛋白定性和定量及尿清蛋白与总蛋白比值临床价值研究

目的 比较尿蛋白定性和定量的三个指标干化学法尿蛋白、尿清蛋白、尿总蛋白及尿清蛋白与总蛋白比值应用于蛋白尿筛查的研究。方法选取2015年10月～2016年7月于首都医科大学附属北京安贞医院就诊患者282例新鲜样本,分别进行尿蛋白干化学试纸法、尿清蛋白和尿总蛋白定量分析。比较尿蛋白干化学试纸法各组区分尿蛋白的能力。研究检测尿蛋白三个指标的相关关系。最后分析尿清蛋白与总蛋白比值在正常清蛋白尿、轻度清蛋白尿、大量清蛋白尿之间的差异。结果①尿蛋白干化学试纸法结果为-,±,+,++,+++组对应的尿清蛋白、尿总蛋白及尿清蛋白与总蛋白比值分别为21.91±6.23,145.60±26.82,457.11±81.63,3 957.48±1 171.65,4 300±1 445.11 mg/L; 114.02±4.87,233.86±23.39,718.05±100.98,6 347.62±2 023.12,8 527.43±1 291.39 mg/L; 16.58%±1.26%,30.79%±3.60%,55.98%±4.31%,67.70%±4.20%,75.44%±4.93%。除弱阳性组外,尿蛋白干化学定性阳性各组与阴性组相比,尿清蛋白和尿总蛋白定量结果之间的差异均有统计学意义(F=68.196～81.66,P值均<0.01); 尿蛋白干化学阳性各组与阴性组相比,尿清蛋白与总蛋白比值之间的差异均有统计学意义(F=46.63,P<0.001)。②尿清蛋白/肌酐低于30 mg/g时,干化学蛋白定性、尿清蛋白、总蛋白相关性较差(尿清蛋白、尿总蛋白与尿蛋白干化学试纸法Spearman系数分别为0.049,0.225,P=0.534,P<0.01; 尿清蛋白与总蛋白Pearson相关系数为0.684,P<0.01); 尿清蛋白/肌酐高于30 mg/g时,三者相关性良好(尿清蛋白、尿总蛋白与干化学蛋白定性Spearman系数分别为0.736和0.806,P值均<0.01; 尿清蛋白与总蛋白Pearson相关系数为0.989,P<0.01)。③正常清蛋白尿组、轻度清蛋白尿组和大量清蛋白尿组比较,其尿清蛋白与总蛋白比值之间的差异均有统计学意义(F=365.266,P<0.01)。结论 干化学尿蛋白定性无法正确区分尿蛋白阴性和弱阳性。可以采用尿清蛋白与总蛋白比值在高危人群中筛查蛋白尿。     

缺血修饰清蛋白自动化检测方法的建立与应用

目的：建立缺血修饰清蛋白（ischemia modified albumin，IMA）自动化检测方法，并应用于原发性癫痫病、急性冠脉综合征（acute coronary syndromes．ACS）患者，探讨癫痫病IMA水平和并发症发生的可能机理。方法：利用清蛋白结合重金属钴的能力随IMA增加而下降的特性，以游离钴显色率方式合理设置自动化参数，连续监测反应体系中游离钴，并和手工清蛋白结合钴（albumin cobalt binding，ACB）实验报告吸光度单位（absorbance units，ABSU）进行比较。结果：建立的IMA自动化检测．在游离钻显色率为100（ABSU：0．6349）内线性良好（回归方程：y=0．9552x-0．0134,r=0．9674，P〈0．01），最低生物检测限为10（ABSU：0，0635）．批内及批间CV分别为0．85％和6．7％，在TG〈4．74mmol／L、Hb〈15g／L时对结果无影响。正常人IMA95％参考上限为59．35（ABSU：0．3768），ROC曲线分析所得最适cutoff值为58．8（ABsu：0．373），曲线下面积0．956，在cutoff值为58．8（ABsU：0．373）时敏感性和特异性分别为90．1％和85．9％。结论：建立的IMA自动化检测，其灵敏度、重复性、线性范围、抗干扰性均优于手工ACB实验；初步应用显示，IMA不仅是评价急性心肌缺血非常有价值的生化指标，有可能提示癫痫病的近期发作情况，对于原发性癫痫病并发症的早期监测和预防，具有十分重要的意义。     

缺血修饰清蛋白测定及评价

目的建立一个清蛋白结合钴(ACB)试验方法检测缺血修饰清蛋白,用于对急性心肌缺血的早期诊断,排除急性冠脉综合征(ACS)及ACS危险性分层。方法ACB试验是用比色法,结果以吸光度单位(ABSU)报告。结果在470nm测定的平均ABSU±2s对照组和心肌缺血组分别为0.336±0.168和0.586±0.174(P<0.01)。批内及批间变异系数为4.3%和7.2%。结论ACB试验可用作评价心肌缺血有用的诊断工具。     

缺血修饰清蛋白测定试剂的性能评价

目的：评价终点法测定缺血修饰清蛋白（IM A ）试剂盒的性能,判断其分析性能是否满足临床要求。方法应用终点法测定血清中的IM A浓度,对试剂盒的精密度、正确度、线性及参考区间做出评价。精密度按照定量测量方法的精密度性能评价（EP5‐A2）指南标准进行评价;正确度按照定值参考物质检测的回收实验批准（EP15‐A ）指南标准进行评价;线性范围按照EP6‐A指南推荐方法进行评价;参考区间按照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准进行评价。结果该IMA试剂盒参考范围适用本实验室;线性良好,精密度、正确度均在规定范围内。结论该商品化IM A试剂盒符合实验室性能标准,性能良好,可供本实验室对大批量血清标本进行检测。     

两种方法对低清蛋白血症患者糖化清蛋白检测的影响

目的探讨溴甲酚绿(BCG)法与改良溴甲酚紫(mBCP)法对低清蛋白血症患者糖化清蛋白(GA)检测的影响.方法选取西安交通大学第一附属医院2017年1月至2018年12月低清蛋白血症的患者21 201例,检测其GA、清蛋白BCG、清蛋白mBCP的水平及清蛋白/球蛋白,分别计算GABCG、GAmBCP,分析比较两种方法检测...     

1例先天性乏清蛋白血症及文献复习

<正>本院1例患者因“皮肤变黑,反复腹水,右下肢肿胀”就诊,实验室检查发现极低清蛋白（Alb）血症。该患者在外院和本院多次常规检测血清Alb均低于实验室常规检测方法下限,且除外常见导致低Alb血症的原因,包括如营养不良、肝脏疾病、肾脏疾病、肠蛋白丢失等。本实验室采用血清蛋白电泳、染料结合比色法（溴甲酚绿法、溴甲酚紫法）、免疫透射比浊法、免疫散射比浊法等检测方法确认该患者的Alb水平确实极低,结合其他实验室结果、患者临床表现与检查结果,综合文献分析,拟诊断为先天性乏Alb血症（congenital analbuminemia,CAA）。     

2 型糖尿病患者血清低清蛋白水平对糖化清蛋白检测结果的影响

目的 探讨2 型糖尿病患者血清低清蛋白水平对糖化清蛋白检测结果的影响。方法 回顾性统计分析了82 例2 型糖尿病患者的实验室检查结果, 按照实验室血清清蛋白< 35 g/L 为异常,其中血清清蛋白正常患者41 例为对照组,血清低清蛋白患者41 例为观察组;分别记录清蛋白(albumin,ALB)、糖化清蛋白（glycosylated albumin,GA）、空腹血糖（FBG）和糖化血红蛋白（HbA1c）,并分别计算GA/ALB 比值和GA/HbA1c 比值,然后统计比较两组患者的ALB,GA,FBG,HbA1c,GA/ALB 和GA/HbA1c,并分析GA 与ALB,FBG,HbA1c,GA/ALB 和GA/HbA1c 的相关性。结果 与对照组比较,FBG,HbA1c 和GA/ALB 差异均无统计学意义(t=0.087,0.074,0.924, 均P>0.05), 而ALB,GA 和GA/HbA1c 均显著降低,差异均有统计学意义(t=11.463,3.588,4.186,均P<0.05)。在对照组和观察组中GA 与ALB的相关性均无统计学意义(r=-0.238,P=0.183;r=0.383,P=0.053);在对照组中,GA 与FBG,HbA1c 均有强相关性,差异均有统计学意义(r=0.758,P=0.000;r=0.884,P=0.000);但是在观察组中GA 与FBG,HbA1c 相关性差异均无统计学意义(r=0.157,P=0.444;r=0.309,P=0.125)。结论 在2 型糖尿病患者伴有血清低ALB 时,检测的GA 结果存在假性降低,故在使用GA 监测2 型糖尿病患者短期血糖控制情况时, 需重视此影响。     

ELISA定量检测抗dsDNA抗体试剂盒性能验证方法的探讨

目的探讨ELISA定量检测抗双链DNA抗体(下简称抗ds DNA抗体)试剂盒的性能验证方法。方法依据美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)批准的EP15-A2文件方法验证精密度。通过检测过往室间质量评价(external quality assessment,EQA)质评物、与比较试剂进行比较、回收试验等3种方法验证准确度。通过检测空白样本验证检测低限(lower limit of detection,LLD)。通过《CNAS-CL39:医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学检验领域的应用说明》、CLSI C28-A3C文件提供的方法验证临界值。通过改良的Doumas法验证线性范围。结果实测批内、批间变异系数均小于厂家声称的变异系数或按EP15-A2公式计算的验证值。检测EQA质评物阴性符合率为98.4%(63/64),阳性符合率为100%(20/20),总符合率为98.8%(83/84)。与比较试剂的阴性符合率为91.2%(52/57),阳性符合率为87.0%(40/46),总符合率为89.3%(92/103),Kappa值为0.783(P=0.062),两种试剂具有优秀的一致性。平均回收率为99.65%。3种方法验证准确性均通过。实测LLD为0.5 IU/m L,低于厂家声称的1 IU/m L。按CNAS-CL39方法,实测的临界值为18.51IU/m L,与说明书建议的20 IU/m L接近。按C28-A3C方法,临界值验证也通过。线性回归方程为Y=0.978 8X-3.125 4,r~2为0.996 1,截距项-3.125 4与0差异无统计学意义(t=-0.772,P=0.483)。线性范围是1.6~212.5 IU/m L,与厂家声明一致,线性验证通过。结论候选抗ds-DNA抗体试剂盒的精密度、准确度、LLD、临界值、线性范围与厂家的声明一致,能满足临床诊断与治疗的需要。本研究采用的一系列验证方法为ELISA定量检测试剂的性能验证提供了新思路。     

Excel电子表格在ELISA定量分析中的应用

目的 为给实验室提供ELISA定量分析二次方函数数据处理方法。方法 应用Excel电子表格中的数据图表功能,根据标准点(OD值,标定值)绘制出抛物线型标准曲线,并显示相应方程式(Y=aX2+bX+c)。结果 依据所得方程式可由测定物的OD值(X)返回浓度值(Y)即可求得被测物的浓度。结论应用Excel电子表格绘制遵循二次方函数关系的标准曲线及求被测物浓度,为准确进行ELISA定量分析,使人工绘制非直线型标准曲线及查询测定物结果成为可能。     

乙型肝炎表面抗原酶联免疫法检测试剂的性能评价

目的对我室使用国产乙型肝炎表面抗原酶联免疫法（ELISA）检测试剂进行性能评价。方法用ELISA法使用国产试剂检测国家参考品（n=33）、临床科研血清盘（n=40）及临床标本（n=270）,判断其是否符合国家检定标准,并分析其真实性、可靠性和收益指标。结果检测国家参考品的阴性符合率为100%（20/20）,阳性符合率为100%（3/3）,三种亚型的最低检出量均为0.5ng/mL;其真实性指标：灵敏度、特异性、粗一致性和约登指数（Youden）分别为96.88%、99.45%、98.39%和0.96;可靠性指标：变异系数（CV）和Kappa值分别为5.2%和0.96;收益指标：阳性预测值与阴性预测值分别为99.20%和97.84%。结论国产试剂性能评价结果优质,适用于临床标本检测。     

ELISA和TRUST法在梅毒检测中的应用价值

目的探讨梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)在梅毒诊断中的应用价值。方法应用TRUST、ELISA法分别检测2862例患者血清;梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测的43例患者与ELLSA、TRUST结果进行了对比观察。结果ELISA法检出率为1.61%(46/2862);TRUST法检出率为1.11%(32/2862),两者之间的总符合率为99.13%(2840/2862);ELISA法假阳性、假阴性率分别为0.06%(l/17)、7.69%(22/26);TRUST法假阳性、假阴性率分别为29.41%(5/17)、57.69%(15/26)。结论在输血前、疑似梅毒血清学检查中两者联合检测具有重要临床价值。     

ELISA检测抗荚膜组织胞浆菌抗体方法的建立

目的 建立检测小鼠血清中抗荚膜组织胞浆菌抗体的ELISA方法。方法 制备荚膜组织胞浆菌（HC）抗原和结核分枝杆菌（MTB）抗原免疫小鼠,通过不同免疫次数获得不同效价的小鼠抗HC血清。以荚膜组织胞浆菌蛋白提取物（P—HTPM）为包被抗原,“方阵滴定法”确定包被抗原和抗血清的最适工作浓度,建立检测抗HC抗体ELISA法。结果 HC抗原免疫小鼠3次获得4份低效价抗血清,平均A值为0．345,免疫4次获得8份高效价血清,平均A值为0．991。ELISA方法中包被抗原和抗血清的最佳工作浓度为1μg／孔及1：1000。P—HTPM和TB—PPD与各自免疫血清均呈阳性反应,A值分别为0．993±0．216和1．606±0．263,但二者之间无交叉反应。结论 本文建立的ELISA方法将成为荚膜组织胞浆菌病和结核病的一种鉴别诊断方法。     

Evaluation of an ELISA for the detection of anti-Histoplasma ribosomal and antihistoplasmin antibodies in histoplasmosis

We have developed an indirect sandwich enzyme-lined immunosorbent assay (ELISA) for the detection of antibodies to Histoplasma ribosomes and histoplasmin; we used this test for demonstration of these antibodies in sera from proven cases of histoplasmosis and other infections. Serum dilutions from five negative controls used in each experiment were normalized against 50 normal sera, and a factor of the mean absorbance was used to establish a positive reaction. Antiribosomal antibodies were detected in 97% of the known histoplasmosis patients with ELISA titers ranging from 1:100 to over 1:12,800. In contrast, antibodies to histoplasmin were detected in only 75% of these sera; titers ranged from 1:100 to 1:12,800. Cross-reactions with sera from other fungal infections (blastomycosis, coccidioidomycosis, paracoccidioidomycosis, cryptococcosis, candidiasis, and aspergillosis) were seen in 46% of the cases with ribosomes and 37% with histoplasmin. Fifty percent of the sera from tuberculosis patients gave positive reactions with ribosomes and 29% with histoplasmin. These results warrant further studies on the significance of antibodies to ribosomes and histoplasmin in immunity to histoplasmosis.     

ECLIA和ELISA检测血清HBsAg的结果比较

目的 比较电化学发光免疫分析(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg结果。方法 采用ECLIA一步法和KLISA一步法、二步法测定定值血清中的HBsAg:用ELISA一步法和二步法检测经ECLlA筛选的190例HBsAg模式如下的临床标本：①HBsAg光放射强度(COI)在1-20，20例；②HBsAg COI在21-4000、160例；③HBsAg COI大于4000、6例；④HBsAg阴性(其COI值小于1)，HBeAg和HBcAb阳性4例；结果 ELISA一步法灵敏度为1ng／ml．二步法灵敏度为0．2ng／ml、ECLIA灵敏度为0．05ng／m1；在190例临床标本中。ELISA一步法阳性检出率为84．2％，二步法阳性检出率为92．6％．ECLIA阳性检出率为97，4％：结论 ELISA一步法受钩状效应(hook effect)影响明显，敏感度低。HBsAg漏检明显：ELISA二步法能较好地避免钓状效应，敏感度较高，HBsAg漏检率较低，但费时：而ECLIA灵敏度高．受HOOK效应影响较小、HBsAg漏检率低，且自动化程度高，检测时间短。     

相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法的建立与评价

目的建立相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法并进行方法学评价。方法优化最佳相思子毒素多抗包被浓度后建立了相思子毒素双抗夹心ELISA检测方法,鉴定其检测灵敏度、线性范围、特异性、重复性、回收率等。结果双抗夹心ELISA方法检测相思子毒素的最小检出限为1ng/mL,标准曲线在10～100ng/mL范围内线性良好。血清中加入已知量的标准毒素蛋白,测得平均回收率为89%。结论本方法检测相思子毒素的可测范围广、特异性强、灵敏度高、变异系数较小,表明其灵敏、特异、可靠。     

光敏生物素标记质粒DNA检测双链DNA抗体ELISA的建立及初步应用

建立一种既可定性也可定量检测血清抗双链ＤＮＡ抗体的ＥＬＩＳＡ，进一步提高对系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）诊断和监测的水平。以链霉亲合素处理微孔板，包被光敏生物素标记的质粒ＤＮＡ，用ＨＲＰ－羊抗人ＩｇＧ测定血不表双链ＤＮＡ抗体。分别以自制ＥＬＩＳＡ和Ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ公司ＥＬＩＳＡ抗ｄｓＤＮＡ定量试剂盒和胶体金斑点免疫渗滤法定性检测了３２例活动期ＳＬＥ，６例类风湿关节炎（ＲＡ），３０例健康人血清，阳     

双抗体夹心ELISA检测肺炎支原体抗原方法的建立

目的　建立检测肺炎支原体(MP)抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),并探讨其临床应用的可行性。方法　采用不同株MP单抗,用双抗体夹心ELISA检测MP抗原,优化该方法检测MP抗原的最佳实验条件。对MP标准株及147份临床标本进行测定,观察双抗体夹心ELISA的敏感性和特异性及该方法与聚合酶链反应(PCR)检测的符合率。结果　包被单抗量为20μg/ml,酶标记单抗1∶200稀释时,阳性对照与阴性对照吸光度之比(P/N值)最大,检测MP抗原敏感度达2μg/ml,和其他支原体没有交叉反应; 147份临床标本PCR检测阳性率13. 6% (20 /147),双抗体夹心ELISA检测阳性率12. 2% ( 18 /147 ),两者符合率达95. 9%。结论　建立的双抗体夹心ELISA检测MP抗原具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点。