输卵管切除术对体外受精-胚胎移植中卵巢超排卵的影响

目的：探讨输卵管切除术对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）超促排卵中卵巢反应性及结局的影响。方法：选择2006年2月至2007年6月在本中心行常规IVF-ET治疗的179例不孕患者为研究对象,共分为A、B、C、D四组,A组为48例单侧输卵管切除患者,B组为41例双侧输卵管切除患者,对照C组为50例双侧输卵管阻塞（不伴积水）患者,对照D组为40例单侧或双侧输卵管积水患者,比较4组患者在IVF-ET周期中卵巢对控制性超排卵的反应及其结局的差异。结果：4组患者的基础FSH水平、窦卵泡数、使用促性腺激素（Gn）的时间、注射hCG日的E2水平、冷冻胚胎数及受精率等指标均无明显差异（P〉0.05）;B组Gn的用量高于其他三组,其中与C组间的差异有显著性（P〈0.05）;A、B两组注射hCG日的卵泡数及获卵数少于C、D两组,差异均有显著性（P〈0.05）;D组临床妊娠率为28.2%,低于B、C组,差异有显著性（P〈0.05）。输卵管切除侧卵巢与对侧卵巢相比,窦卵泡数、注射hCG日卵泡数及最终获卵数要明显少于对侧（P〈0.05）。输卵管双侧切除患者中输卵管切除时间≥2.5年侧的注射hCG日卵泡数及最终获卵数要明显少于切除时间≤1年侧（P〈0.05）。结论：输卵管切除术可改善输卵管积水患者的临床妊娠率,但增加IVF-ET周期中的Gn用量,减少获卵数,降低了超促排卵中卵巢的反应性,并且将随着术后时间的延长进一步降低。     

控制超排卵周期中血清及卵泡液肿瘤坏死因子-α的水平

目的 观察控制超排卵过程中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在血清和卵泡液中的变化,以探讨TNF-α在卵巢局部生殖调节中的作用.方法 收集2008年6-10月在河北医科大学第二医院生殖医学科接受超排卵治疗的60例患者取卵日的血清和卵泡液,用放射免疫法、酶联免疫吸附法分别测定TNF-α、雌二醇(estradiol,E2) 和孕酮(progesterone,P)水平.其中10例在超排卵周期中卵泡早期、卵泡中期采血观察TNF-α水平的变化.结果 ①在超排卵周期中,血清TNF-α水平随着卵泡发育而逐渐降低,差异有统计学意义(F=70.115 3,P<0.01);②取卵日卵泡液TNF-α水平为(430.70±51.40)ng/L,血清TNF-α水平为(38.40±4.98)ng/L(t=115.297,P<0.01);③取卵日血清与卵泡液中TNF-α与E2水平呈显著负相关关系(r=-0.363,P<0.01;r=-0.421,P<0.01),与P水平无相关性;④随着获卵数的增加,卵泡液中TNF-α水平显著降低(r=-0.417,P<0.05);⑤妊娠组24例卵泡液TNF-α水平为(453.70±33.50)ng/L,非妊娠组36例为(402.80±28.90)ng/L(t=2.573 1,P<0.05).结论 卵泡是血清中TNF-α的主要来源,TNF-α水平可能受E2调节.TNF-α水平可能影响卵子的发育,参与控制超排卵的内分泌机制.     

体外受精妇女排卵时卵泡液中白血病抑制因子的变化及其意义

目的检测体外受精妇女排卵时卵泡液中白血病抑制因子(IIF)的水平,探讨其与卵泡发育及排卵的关系.方法应用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)检测45例体外受精妇女排卵时卵泡液和外周血中LIF的水平.结果①排卵时卵泡液中的LIF浓度(22.77±14.11)ng/L高于外周血中的浓度(3.20±1.25)ng/L(P<0.001).②成熟卵细胞的卵泡液中LIF的浓度(31.3±15.90)ng/L高于成熟前卵细胞的卵泡液中的浓度(11     

骨形态发生蛋白-4对人始基卵泡的作用

 【目的】 观察骨形态发生蛋白-4（BMP-4）对人卵巢组织体外培养中始基卵泡存活和生长发育的影响。【方法】 34例卵巢组织切成2 mm×2 mm×1 mm皮质片，每例标本的皮质片均随机分成3组：研究组（BMP-4组）、对照组和非培养组，培养15天后行组织学检查、雌孕激素测定和凋亡分析。【结果】 培养结束后对照组和研究组始基卵泡比例分别为58%±35%和48%±40%，低于非培养组（91%±9%），P＜0.05；窦前卵泡比例分别为52%±40%和42%±35%，高于非培养组（9%±9%），P＜0.05。研究组间质细胞凋亡指数和培养液孕激素浓度分别为（0.16±0.08）μg/L和（3.6±2.0）μg/L，低于对照组，对照组分别为（0.41±0.16）μg/L和（6±4）μg/L（P＜0.05）。【结论】BMP-4可以促进始基卵泡向窦前卵泡转化，降低细胞凋亡率，抑制孕激素分泌，是卵泡生长发育过程中的促进因子。     

骨形态发生蛋白-4对人始基卵泡的作用

【目的】观察骨形态发生蛋白-4（BMP-4）对人卵巢组织体外培养中始基卵泡存活和生长发育的影响。【方法】34例卵巢组织切成2mm&#215;2mm&#215;1mm皮质片，每例标本的皮质片均随机分成3组：研究组（BMP-4组）、对照组和非培养组，培养15d后行组织学检查、雌孕激素测定和凋亡分析。【结果】培养结束后对照组和研究组始基卵泡比例分别为58％&#177;35％和48％&#177;40％，低于非培养组（91％&#177;9％），P〈0．05；窦前卵泡比例分别为52％&#177;40％和42％&#177;35％，高于非培养组（9％&#177;9％），P〈0．05。研究组间质细胞凋亡指数和培养液孕激素浓度分别为（0．16&#177;0．08）μg／L和（3．6&#177;2．0）μg／L，低于对照组，对照组分别为（0．41&#177;0．16）μg／L和（6&#177;4）μg／L（P〈0．05）。【结论】BMP-4可以促进始基卵泡向窦前卵泡转化，降低细胞凋亡率，抑制孕激素分泌，是卵泡生长发育过程中的促进因子。     

3种方法治疗控制超排卵中卵巢低反应的疗效分析

目的探讨治疗控制超排卵中卵巢低反应的有效、经济、安全的方法。方法选择22例曾在体外受精治疗过程中使用常规长方案超排卵而发生卵巢低反应的患者,观察、治疗36个周期,将该36个周期随机分成3组：A组：于月经周期第3天起皮下注射达必佳0.1mg/d,连用3～5d,同时注射果纳芬300u/d,3～5d后根据卵泡生长情况决定是否继续使用果纳芬及决定果纳芬剂量,果纳芬最高剂量450u/d;B组：于月经第3～7d予来曲唑2.5mg/d;C组：于月经第3～7天予克罗米芬50mg/d。B、C组均于月经周期第8天后根据卵泡生长情况决定是否加用果纳芬75u/d及调整果纳芬剂量,果纳芬最高剂量225u/d。C组并根据子宫内膜生长情况决定是否加用补佳乐。3组患者均于1～3个优势卵泡平均直径≥18mm时,停止使用果纳芬,肌注绒毛膜促性腺激素10000u,36h后取卵,体外培养6h内体外受精或卵母细胞胞浆内单精子显微注射,72h后行胚胎移植。移植前行胚胎质量评分。胚胎移植后14d行尿妊娠试验判定是否生化妊娠;胚胎移植后28d作阴道B超判定是否临床妊娠。结果3组治疗后取消周期率、平均获卵数、平均受精率、平均优质胚胎发生率和妊娠率等差异无显著性;平均促性腺激素（Gn）用量A组最高,B、C组差异无显著性;平均获卵数A、C组差异无显著性,稍高于B组。结论对卵巢低反应患者,盲目增加Gn用量,并不能达到获得足够卵子的目的,选择少量、廉价、有效的促排卵药物,保证该类患者有限的卵泡顺利生长,可能会是更好的选择。     

生长激素在体外授精-胚胎移植卵巢低反应患者中的应用

目的 探讨生长激素(GH)对体外授精-胚胎移植(IVF-ET)卵巢低反应患者的作用.方法 选择2010年1月至2010年12月在昆明医科大学第二附属医院生殖中心接受体外授精-胚胎移植的108例卵巢低反应患者.均用长方案促排卵,其中54例加用生长激素,作为研究组,其余54例作为对照组.观察促性腺激素(Gn)用量,MⅡ获卵数,受精率,卵裂率,临床妊娠率.结果 研究组Gn用量,用药时间明显低于对照组,MⅡ获卵数,受精率,妊娠率明显增加.结论 生长激素在IVF超排卵中有辅助作用,可减少Gn用量,改善卵子质量,提高临床妊娠率.     

基于卵泡液代谢组学的卵巢低反应生物标志物研究*

目的 通过卵泡液代谢组学探寻与卵巢低反应相关的生物标志物。方法 采用超高液相色谱-高分辨质谱联用仪对行体外受精-胚胎移植/单精子卵泡浆内显微注射-胚胎移植（IVF-ET/ICSI-ET）的卵巢低反应组30例,以及同时仅因男方因素行IVF-ET/ICSI-ET的对照组49例进行卵泡液代谢组学分析。对比两组的差异代谢物。结果 与卵巢低反应相关的潜在生物标志物有30种,其上调的代谢物有9种,包括L-苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、1-羟基-2-氧代丙基四氢蝶呤、水杨酸镁、尿苷二磷酸、LysoPC（18∶1）、LysoPC（18∶2）及LysoPC（18∶3）;下调的代谢物有21种,包括6-氧代己酸酯、亚油酸酯、油酸、十六烷、花生四烯酸、二十二碳六烯酸、13,14-二氢视黄醇、石胆酸、7-脱氢甾醇、硬脂酰肉碱、25-羟基维生素D3、27-羟基胆固醇、3α,7α,12α-三羟基-5β-胆甾烷、13-羟基-α-生育酚、强啡肽A、LysoPC（16∶1）、LysoPC（16∶0）、LysoPC（18∶0）、LysoPC（20∶5）、LysoPC（20∶4）、LysoPC（20∶3）。结论 卵巢低反应患者在卵巢储备、卵巢反应、卵子数目、质量方面比正常女性低;卵巢低反应患者卵泡液代谢物与正常女性比较,差异有统计学意义（P?<0.05）。这些差异代谢物可以作为卵巢低反应的生物标志物。     

多囊卵巢综合征患者卵泡液和血清中MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-1水平分析

目的 测定多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者取卵日卵泡液、血清基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、9及基质金属蛋白酶抑制因子(tissue inhibitors of metalloproteinase,TIMP)-1、2的水平,探讨其在PCOS发病中可能的作用机制.方法 收集因PCOS接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗患者30例取卵日卵泡液及血清,以30例同期因输卵管因素接受体外受精(in vitro fertilization,IVF)的卵巢功能正常患者作为对照组,采用酶联免疫吸附测定方法检测卵泡液及血清中MMP-2、9和其抑制物TIMP-2、1的水平.结果 ① PCOS组卵泡液、血清MMP-2、MMP-9水平均高于对照组(P<0.01),而TIMP-2 、TIMP-1水平均低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05);②PCOS组卵泡液、血清MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1值均高于对照组(P<0.01);③卵泡液、血清MMP-2 与TIMP-2水平呈负相关(r=-0.404、-0.448,P<0.05),MMP-9与TIMP-1亦呈负相关(r=-0.428、-0.446,P<0.05).结论 PCOS患者卵泡液、血清MMP-2,MMP- 9水平升高表明,PCOS的多卵泡发育可能与溶解明胶的活性及细胞外基质重塑的异常有关.     

促性腺激素释放激素拮抗剂方案在有卵巢低反应风险患者中的应用价值

目的:评估促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)方案在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的超促排卵过程中存在卵巢低反应风险患者中的应用价值.方法:回顾性分析48例存在卵巢低反应风险的IVF-ET周期,其中24例周期使用GnRH-ant方案,24例周期使用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)长方案.比较两组的降调节天数、促排卵的时间和剂量,分析两组hCG日E2峰值、获卵数、受精率、获得胚胎数、优质胚胎数、移植新鲜胚胎数、冷冻胚胎数、新鲜胚胎移植周期胚胎着床率、新鲜胚胎移植周期临床妊娠率、胚胎复苏率、冷冻胚胎移植周期临床妊娠率、累计临床妊娠率.结果:GnRH-ant方案组所需降调节天数、促排卵天数、Gn用量均少于GnRH-a长方案组(P<0.001、<0.05、<0.05),hCG日E2峰值、获卵数低于GnRH-a长方案组(均P<0.05),但获得的胚胎数、优质胚胎数、移植新鲜胚胎数、冷冻胚胎数、新鲜胚胎移植周期胚胎着床率、新鲜胚胎移植周期临床妊娠率、胚胎复苏率、冷冻胚胎移植周期临床妊娠率、累计临床妊娠率两组无统计学差异.结论:与GnRH-a长方案相比,GnRH-ant方案用于存在卵巢低反应风险的患者可减少促排卵天数及Gn用量,虽然hCG日E2峰值及获卵数降低,但并不影响胚胎着床率和临床妊娠率.     

输卵管切除术对卵巢功能的影响

目的：研究输卵管切除术对卵巢功能的影响。方法：以行体外受精-胚胎移植（IVF—ET）的单侧（54例）和双侧（64例）输卵管切除的不孕患者为研究组，以同期双侧输卵管堵塞的不孕患者（59例）为对照组。比较三组患者基础内分泌值、超促排卵周期中的获卵情况、促性腺激素（Gn）用量及妊娠结局。结果：三组患者各项基础内分泌值均无统计学差异（P〉0．05）；双侧输卵管切除组的Gn用量、用药天数多于双侧输卵管堵塞组，获卵数少于双侧输卵管堵塞组（P〈0．05）；单侧输卵管切除组的Gn用药天数多于双侧输卵管堵塞组（P〈0．05），其获卵数、总Gn用量与双侧输卵管切除组、双侧输卵管堵塞组比较差异均无显著性（P〉0．05）；单侧输卵管切除患者输卵管切除侧获卵数明显少于输卵管未切除侧（P〈0．05）。三组患者的受精率、卵裂率、优质胚胎率、着床率、临床妊娠率、优质胚胎数无统计学差异（P〉0．05）。结论：输卵管切除术对IVF—ET周期妊娠结局无显著影响，在一定时间内不引起患者基础内分泌的改变，但降低手术侧卵巢的反应性。     

BMP-4基因上两个多态性位点与颈椎后纵韧带骨化症的关联性研究

目的通过测定颈椎后纵韧带骨化症患者与对照组骨形态发生蛋白-4上的2个单核苷酸多态性位点序列,探讨骨形态发生蛋白-4与颈椎后纵韧带骨化（OPLL）的遗传关联性。方法 OPLL病例组和正常对照组各200例,利用PCR和直接测序法分析骨形态发生蛋白-4（BMP4）上2个单核苷酸多态性位点6007C〉T（rs17563）,3564C〉T（rs2855532）基因型及等位基因型的分布。应用SPSS13.0软件进行统计学分析。检验水准α=0.05,如果P〈0.05认为有统计学意义。结果两组间位点rs17563,rs2855532基因型与等位基因型差异具有统计学意义（P=0.013,0.000）。OPLL组中rs17563带C等位基因型与不带C等位基因型骨化椎体数量差异具有统计学意义P〈0.001,前者骨化椎体数量明显少于后者;rs2855532T＋等位基因型（TT TC）与T-等位基因型（CC）骨化椎体数量差异也有统计学意义（P〈0.05）,前者骨化椎体数量多于后者。结论骨形态发生蛋白-4上的两个单核酸多态性位点rs17563,rs2855532等位基因型的突变与颈椎后纵韧带骨化症的发生和发展有关。     

轻度子宫内膜异位症不孕患者腹腔液和血清NO水平与IVF-ET结局

目的:明确腹腔液一氧化氮(NO)与轻度子宫内膜异位症(内异症)不孕发病的关系,以及探讨解决轻度内异不孕问题的有效途径。方法:采用荧光法检测60例轻度内异症不孕患者(内异组)、60例输卵管性不孕患者(管性组)和20例对照组患者的腹腔液容积、血清和腹腔液的NO水平,并比较了内异组和管性组的IVF指标。结果:内异组和管性组行IVF-ET后,两组胚胎植入率、妊娠率和流产率均无统计学差异(P>0.05),但受精率内异组显著低于管性组(P<0.05);内异组腹腔液容积显著高于对照组和管性组;对照组、管性组和内异组腹腔液中NO代谢物水平(ΔF/F,中位数)分别为9.98、13.76和20.72,内异组腹腔液中NO代谢物水平增高,与对照组和管性组比较,差异有统计学意义(P<0.017);对照组、管性组和内异组血清中NO代谢物水平(ΔF/F,中位数)分别为12.25、13.00和13.60,三组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:腹腔液NO水平变化可能与轻度子宫内膜异位症及轻度子宫内膜异位症不孕的发病有关。IVF-ET是治疗与轻度内异相关不孕的有效手段。     

多囊卵巢综合征患者颗粒细胞AQP9的表达

目的:研究多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)卵巢组织中窦状卵泡和在超促排卵(COH)周期黄素化颗粒细胞AQP9的表达,探讨颗粒细胞AQP9表达水平与COH周期卵泡液中甾体激素水平的关系。方法:行体外受精-胚胎移植的PCOS患者18例,对照组18例。收集卵泡(直径≥1.8 cm)液,测定甾体激素E2、P和T水平;取卵时分别收集大卵泡(直径>1.6 cm)和小卵泡(直径<1.4 cm)的黄素化颗粒细胞。用RT-PCR检测COH周期黄素化颗粒细胞AQP9mRNA的表达,免疫组化定位AQP9在PCOS卵巢内窦状卵泡和COH周期的黄素化颗粒细胞的表达。结果:RT-PCR检测证实黄素化颗粒细胞有AQP9 mRNA表达,PCOS组AQP9 mRNA表达水平与对照组比较差异无显著性(P>0.05),PCOS组大卵泡的颗粒细胞AQP9表达高于小卵泡,但无统计学差异。免疫组化显示PCOS患者卵巢的窦状卵泡内颗粒细胞和COH周期的黄素化颗粒细胞均有AQP9的表达,染色定位于胞浆和胞膜。在COH周期,颗粒细胞AQP9 mRNA表达水平与卵泡液中E2、P和T均无显著性相关。结论:PCOS患者卵巢组织中窦状卵泡的颗粒细胞及在COH周期黄素化颗粒细胞均有AQP9表达,推测AQP9可能通过水转运介导卵泡发育和窦卵泡形成。在COH周期,PCOS的大卵泡AQP9的表达有高于小卵泡的趋势,可能与卵泡发育有关。在COH周期,颗粒细胞AQP9 mRNA表达水平与甾体激素的分泌无相关性。     

脱氢表雄酮对卵巢储备功能减退患者IVF结局及卵泡液GDF-9、BMP-15的影响

目的 探讨脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone, DHEA)对卵巢储备功能减退(diminished ovarian reserve, DOR)患者的卵巢功能、卵泡液中生长分化因子-9(growth differentiation factor-9, GDF-9)、骨形态发生蛋白-15(bone morphogenetic protein-15, BMP-15)浓度及体外受精/卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植(in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection-embryo transfer, IVF/ICSI-ET)结局的影响。方法 采用历史性队列研究,共纳入163例行IVF/ICSI-ET助孕的DOR患者,根据预处理方案分为DHEA组和对照组。比较两组患者基础内分泌水平、抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone, AMH)、窦卵泡数(antral follicle counts, AFC)、促性腺激素(gonadotropin, Gn)总量、Gn使用天数、人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,hCG)日激素浓度和子宫内膜厚度、获卵数、成熟卵数、受精率、优胚率、胚胎种植率及临床妊娠率。比较两组患者卵泡液GDF-9、BMP-15浓度,并将其与卵巢储备功能指标进行相关性分析。结果 DHEA预处理前两组基础内分泌、AMH、AFC差异均无统计学意义(P>0.05),预处理后,DHEA组基础卵泡刺激素(basal follicle stimulating hormone, bFSH)降低、AFC增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。Gn总量、Gn天数、hCG日激素浓度、hCG日子宫内膜厚度、获卵数、成熟卵数、受精率、优胚率、胚胎种植率、临床妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。DHEA组卵泡液中BMP-15浓度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),GDF-9差异无统计学意义(P>0.05)。双侧Pearson相关系数分析显示卵泡液BMP-15表达与基础雌二醇(estradiol,E₂)呈正相关。结论 DHEA可通过增加AFC和下调FSH改善DOR患者的卵巢储备功能并提高卵泡液BMP-15的浓度。     

卵泡液和血清EG-VEGF、VEGF和TGF-β1水平与IVF妇女卵巢反应的关系及其对妊娠结局的预测价值

目的 探讨卵泡液和血清中内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF）、血管内皮生长因子（VEGF）和转化生长因子β1（TGF-β1）水平与体外受精（IVF）妇女卵巢反应的关系及其对妊娠结局的预测价值。方法 选择60例因输卵管和（或）男性因素而接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者作为研究对象。ELISA法检测取卵当日卵泡液中和取卵后第2天血清中EG-VEGF、VEGF和TGF-β1的水平,分析其与卵巢反应和IVF妊娠结局的关系。结果 卵泡液EG-VEGF、血清EG-VEGF、卵泡液VEGF浓度均与控制性超排卵周期中人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日血清雌二醇（E₂）浓度呈显著负相关（r=－0.622, P<0.01; r=－0.511, P<0.01; r=－0.427, P<0.01）,卵泡液EG-VEGF与卵泡液VEGF浓度呈显著正相关（r=0.354, P<0.01）。60例不孕症患者中,妊娠31例,未妊娠29例。与非妊娠组比较,妊娠组hCG注射日血清E₂浓度较低（P<0.05）,而血清EG-VEGF浓度较高（P<0.01）;而两组间卵泡液和血清VEGF、TGF-β1的浓度比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 卵泡液和血清EG-VEGF及卵泡液VEGF水平均与卵巢反应呈显著负相关。黄体早期血清EG-VEGF水平与IVF妊娠结局相关,可能具有预测IVF妊娠结局的潜在价值。