分光光度法测定蝉拟青霉多糖的含量

目的:建立一种蝉拟青霉多糖的含量测定方法。方法:应用分光光度法测定蝉拟青霉多糖的含量。结果:测定波长485 nm,在0.005-0.230 mg·ml-1范围内多糖浓度与吸收度有良好的线形关系,回归方程A=8.130C+0.033,r2= 0.996,平均回收率为97.99%±3.96%,RSD=4.04%。蝉拟青霉菌丝体的多糖含量为1.92%。结论:该方法操作简便,重复性好,显色稳定,可用于蝉拟青霉多糖的含量测定。     

蝉拟青霉不同纯化组分对体外抗肿瘤作用的基础研究

目的：为了进一步研究蝉拟青霉总多糖和腺苷单用或分别联合顺铂（DDP）或阿霉素（ADM）在体外的抗肿瘤作用。方法：用MTT法检测DDP、ADM、总多糖、总腺苷单独及联合用药对人肺腺癌（PAA-1）细胞的生长抑制能力;用流式细胞仪检测其对体外培养细胞系细胞周期的影响;用光镜检查其对体外培养PAA-1细胞系集落形成率的影响;用流式细胞仪检测其对体外培养淋巴细胞亚群分化的影响。结果：DDP、ADM、总多糖、腺苷对人肺腺癌（PAA-1）细胞生长抑制的IC50分别为9.05μg/mL、36.21μg/mL、10.86mg/mL、7.81mg/mL。DDP或ADM和多糖联用对PAA-1细胞的生长抑制主要表现出拮抗效应;0.5mg/mL、0.25mg/mL腺苷与4μg/mL阿霉素联合作用时,显示出拮抗效应,而当8mg/mL腺苷与4μg/mL阿霉素联用时,显示协同效应;不同浓度腺苷单用与和DDP联合使用相比,对细胞生长影响无显著性差异;腺苷和ADM联合作用,随着腺苷浓度的增加,G0/G1期细胞逐渐减少,而G2/M期相对增加。对体外培养PAA-1细胞系集落形成率多糖组和阴性对照组未见明显差异,不同浓度腺苷组的集落形成率略低于阴性对照组,随着腺苷浓度逐渐增加,集落形成率逐渐下降。     

蝉拟青霉总多糖对免疫抑制大鼠巨噬细胞激活作用的实验研究

蝉拟青霉Paecilomyces cicadidae（Miquel.）Samson即我国传统中药蝉花^[1,2]，与冬虫夏草的无性型——中国拟青霉为同属真菌^[2]，两者的化学成分十分相似。虫草及其多糖的研究报道很多，但蝉拟青霉及其多糖对正常及免疫抑制机体非特异性免疫调节作用的研究国内外未见报道。     

蝉拟青霉多糖对老年大鼠免疫功能的调节作用

目的:研究蝉拟青霉水提物多糖对老龄大鼠免疫功能的调节作用。方法:以生理盐水处理的10~12周龄SD青年大鼠、18月龄SD老龄大鼠为对照组,实验组以不同剂量蝉拟青霉水提物多糖(50,100,200 mg.kg-1.d^-1)处理老龄大鼠3周,观察对照组、实验组大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞对葡萄球菌的吞噬作用;以MTT法检测大鼠脾组织细胞分别在刀豆蛋白A(ConA),磷酸脂多糖(LPS)诱导下的淋巴细胞增殖活性;同时检测大鼠脾组织细胞内酸性磷酸酶(ACP),乳酸脱氢酶(LDH),精氨酸酶(ARG)等酶活力,并于透射电镜下观察大鼠脾组织超微结构。结果:与青年组比较,老龄组大鼠巨噬细胞的噬菌能力及脾组织淋巴细胞的增殖反应显著降低(P<0.01),脾细胞内ACP,LDH,ARG等酶活力也显著低下(P<0.01)。各种剂量蝉拟青霉多糖作用3周后老龄大鼠的这些指标均有改善,脾组织超微结构显示线粒体、内质网结构明显且数量增多。结论:蝉拟青霉水提物多糖能提高老龄大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞吞噬功能和脾细胞免疫功能及增殖反应能力,使老龄大鼠低下的免疫功能得以改善,可能具有一定的抗衰老作用。     

珠子参多糖提取纯化工艺研究

目的:确立珠子参多糖的提取纯化工艺。方法:以珠子参多糖的含量和得率为指标,采用正交实验法优选珠子参多糖的提取纯化工艺。结果:珠子参多糖提取最佳条件:8倍量水提取3次,每次1.5 h;纯化最佳条件:提取液浓度1/6(g/ml),醇沉浓度70%,醇沉时间12 h。结论:优化的珠子参多糖的提取纯化工艺简便、合理、可行。     

细脚拟青霉多糖Ⅰ的化学结构

目的研究细脚拟青霉多糖I的分离纯化方法、相对分子量、单糖组成及其结合方式.方法室温下水提取出粗多糖,采用Sephadex G-100柱层析纯化.经过酸全水解,利用阴离子交换柱测定单糖的组成.甲基化分析测定单糖的结合方式.IR以及NMR光谱的研究确定糖苷键的类型.结果经高效液相色谱检测为均一性组成,从以后的GC-MS及NMR图谱也获得证明.结论细脚拟青霉多糖I为α-(1→6)连结的葡聚糖,相对分子量为2.05×104u.     

当归多糖的提取纯化工艺研究

目的 优选并确立当归多糖的最佳提取和纯化工艺。方法 以多糖收率为指标,采用正交试验法对提取过程中加水倍量,提取时间及提取次数进行优化研究;以多糖收率和质量分数为考察指标,采用传统乙醇沉淀法进行比较。结果 最优提取工艺为加水10倍量,提取3次,每次提取时间3 h;最佳纯化工艺为：当归水提液浓缩后,加入乙醇使醇沉体积分数达到80％,静置12 h,醇沉2次。结论 所得当归多糖的质量分数达到50％以上,满足实验要求。     

大蒜多糖提取纯化工艺研究进展

综述近几年大蒜多糖提取及分离纯化技术研究进展,从而对进一步开发大蒜多糖具有积极意义.     

薏苡仁多糖提取及纯化工艺的研究

目的：优选薏苡仁多糖提取、分离及纯化的最佳工艺。方法：通过正交试验法确定薏苡仁多糖的最佳提取工艺;采用单因素优选法考察醇沉浓度及醇沉时间对多糖得率的影响;用Sevag法（正丁醇一氯仿混合液1：5）和三氯乙酸法（TCA）脱蛋白。结果：薏苡仁多糖最佳提取工艺条件为10倍量水提取2次,每次1h;醇沉时多糖含量与乙醇浓度呈正比,且当乙醇浓度为90％时,多糖含量达到最大,醇沉时间为9小时。结论：该工艺稳定、简便易行、提取物中多糖含量及纯度均较高。     

板蓝根多糖的提取和纯化工艺研究

目的 研究板蓝根水溶性多糖的提取纯化工艺条件.方法 通过正交实验,考察液料比、提取时间、提取温度、醇沉时间、醇液比对多糖得率的影响.结果 液料比是影响提取工艺的主要因素,最佳工艺条件为:液料比30:1,提取温度90℃,提取时间6 h.三氯乙酸法脱蛋白,葡聚糖凝胶柱层析纯化分离.结论 板蓝根多糖得率25.63%,多糖含量76.42%.纯化后的板蓝根多糖为分子大小均一的单一组分多糖,不含核酸和蛋白质.     

蝉花总多糖对细胞免疫和体液免疫反应的促进作用

目的：研究蝉花总多糖（CCP）体内外对细胞免疫和体液免疫的影响。方法：首先用MTT法和ELISA法测定小鼠脾细胞增殖和IgG抗体的生成水平,以研究CCP体外对细胞免疫和体液免疫的影响;然后通过DNFB诱导的小鼠迟发型超敏（DTH）反应和绵羊红细胞（SRBC）诱导的小鼠血清抗体生成实验进一步观察CCP体内对特异性细胞免疫和体液免疫反应的影响。结果：CCP 0.16~100μg/mL各浓度不仅能直接刺激小鼠脾细胞的增殖和IgG抗体生成,对Con A或LPS诱导的小鼠T、B淋巴细胞增殖和IgG抗体生成也具有显著的促进作用,并呈现良好的浓度依赖性。CPP 20 mg/kg可显著提高小鼠的DTH反应;10和20 mg/kg可剂量依赖性地显著提高抗SRBC抗体的生成。结论：CCP在体内外均能有效促进细胞免疫和体液免疫反应。     

蝉衣多糖的提取及理化性质测定

目的：研究中药蝉衣中多糖的制备和性质。方法：将蝉衣洗去泥沙,在一定温度条件下采用酸、碱的方法,进行脱钙、脱蛋白、脱乙酰等处理,低温烘干,获得一定纯度的蝉衣多糖;采用酸碱滴定法测定脱乙酰度,凯氏定氮法测定含量,红外光谱法测定其部分性质,探讨了蝉衣多糖的溶解性和与部分试剂的反应。结果：蝉衣多糖的平均提取率为30．91％,脱乙酰度为96．95％,在酸性溶液中有很好的溶解度,与甲基红、甲基橙、苯胺蓝、蒽醌、荧光黄、萘酚等试剂反应呈现不同的颜色,其红外图谱与壳聚糖极为相似。结论：蝉衣中含有大量多糖,属碱性多糖,容易制备且纯度高,值得开发利用。     

蝉花对小鼠血糖及造血功能影响

目的：观察蝉花对血糖和造血功能的影响。方法：腹腔注射四氧嘧啶形成糖尿病小鼠模型,观察蝉花对糖尿病小鼠和正常小鼠血糖的影响。采用尾尖端放血和腹腔注射盐酸苯肼的方法,形成小鼠失血性贫血和盐酸苯肼贫血的模型,分组给药后采血测定小鼠的Hb、RBC,观察蝉花对造血作用影响。结果：蝉花能降低四氧嘧啶造成的糖尿病小鼠和正常小鼠的血糖。蝉花能明显对抗失血性贫血和对抗盐酸苯肼贫血。且高剂量组的作用与阿胶组相似。结论：证明蝉花对糖尿病小鼠和正常小鼠血糖均有显著的降低血糖的作用。具有明显抗失血性贫血和抗盐酸苯肼贫血作用。     

虫草多糖脂质体联合丹参抗肝纤维化的疗效评价

目的：探索抗肝纤维化的有效药物。方法：采用虫草多糖脂质体联合丹参治疗慢性活动性肝炎和早期肝硬化患者６８例，分别于治疗前、治疗４个月后检测血清肝纤维化３项指标（ＨＡ，ＰＣⅢ，ＬＮ）。结果：３项指标料治疗前有明显降低，前后相比有显著性差异（Ｐ〈０．０１或Ｐ〈０．０５）。结论：由虫草多糖和丹参组成的扶正化瘀法具有一定抗肝纤维化作用。     

蝉花中ISP类免疫活性组分含量测定的研究

目的建立快速、高效测定蝉花ISP类免疫活性组分含量的方法。方法采用茚三酮比色法测定ISP类次生代谢产物的含量，通过线性度和线性范围、精密度、稳定性及准确度等指标评价该方法。结果该方法检测线性范围为6—30μg／ml，相关系数为0．9997，平均回收率为101．20％，RSD为0．79％。结论茚三酮比色法简便快捷、结果稳定、灵敏度高，可作为测定蝉花ISP类免疫活性组分的有效方法。     

虫草多糖抗免疫损伤性大鼠肝纤维化的作用及其机理研究

采用牛血清白蛋白免疫损伤大鼠肝纤维化模型,以虫草菌丝和秋水仙碱为对照,通过肝组织病理学与Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原及ＴＧＦβ１、ＴＧＦβＲ１,Ｄｍ阳性细胞免疫组化观察,肝Ｈｙｐ含量与肝胶原酶活性检测,观察虫草多糖抗肝纤维化的作用与机制。结果显示,虫草多糖与虫草菌丝及秋水仙碱均能减轻肝纤维化程度,降低Ｈｙｐ含量,减少胶原及ＴＧＦβ１生成与分泌,降低ＴＧＦβＲ１表达,减少Ｄｍ阳性细胞,其中虫草多糖对Ⅳ型胶原与Ｔ     

蒙药匝迪—5水溶性多糖提取及组成分析和微量钙的测定

本文提取了匝迪－5中水溶性多糖,用气相色谱测定水溶性多糖由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,它们的摩尔比为156：0．43：6．46：4．80：23．14。用化学滴定法测定了匝迪－5中的微量钙为488．17μg/g,平均回收率为99．77％,RSD为0．56％。     

超声波对古尼虫草菌丝体多糖免疫调节活性的影响

目的:研究古尼虫草菌丝体多糖经超声波解聚前后的免疫调节活性.疗法:用超声波解聚古尼虫草菌丝体多糖,并分别采用MTT法、中性红比色法测定古尼虫草菌丝体多糖及其解聚物对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞(PMφ)吞噬功能以及细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的影响.结果:解聚后的古尼虫草菌丝体多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖、PMφ吞噬功能以及CTL活性的免疫抑制效果明显增强,尤其在10μg/ml和100μg/ml剂量时的抑制效果更好.古尼虫草菌丝体多糖并不随超声波解聚时间的延长而提高其免疫抑制活性,解聚1～2h和4～8 h的抑制效果没有显著的差异.结论:古尼虫草菌丝体多糖经超声波解聚后有更强的免疫调节活性,其解聚时间以1～2 h为宜.     

冬虫夏草多糖抑制肝纤维化作用机制的研究进展

肝纤维化是肝脏对各种慢性损伤的一种修复反应过程,主要是由于肝脏中纤维组织增生和分解不平衡,导致肝脏纤维结缔组织过度沉积,是多种慢性肝脏疾病的共同中间环节,在这一病理过程中,细胞与细胞因子之间相互作用,使肝脏细胞外基质代谢紊乱,造成纤维组织在肝脏内沉积过多,最后导致肝纤维化,其持续恶化会逐步发展成肝硬化,甚至肝癌。由于肝纤维化及肝硬化早期可以逆转,因此控制肝纤维化这一可逆过程,对于肝硬化和肝癌的预防及治疗至关重要。冬虫夏草作为我国特有的名贵药用真菌之一,受到科学工作者的普遍关注与研究,其药理作用广泛。冬虫夏草中含量最高的生物活性物质冬虫夏草多糖,近年来研究发现其具有抗肝纤维化的作用,随着分子生物学技术的应用,国内外对于中药抗肝纤维化机制的研究逐渐向细胞分子水平深入。本文将分别从与肝纤维化发生有关的细胞基础、细胞因子、胶原酶以及脂质过氧化层面,探讨冬虫夏草多糖对肝纤维化形成的抑制作用,以阐明其具体作用机制,为抗肝纤维化药物的研制提供参考。