骨涎蛋白在亚慢性过量氟暴露大鼠骨组织中表达水平的研究

目的探讨亚慢性过量氟暴露对大鼠骨组织中骨涎蛋白（BSP）表达水平的影响。方法雄性Wistar大鼠60只,体重（90±5）g,随机分为4组,对照组（饮自来水）、低氟组（饮水含氟50mgF-/L）、中氟组（饮水含氟100mgF-/L）、高氟组（饮水含氟150mgF-/L）。采用免疫组织化学法检测大鼠骨组织中骨涎蛋白的表达水平。结果在同一个染氟月份内,各染氟组的平均综合光密度值均明显高于对照组（P〈0.01）;同一个染氟剂量组BSP的平均综合光密度值随着染氟时间的延长而不断升高（P〈0.01）。在同一染氟月份中,大鼠骨组织中BSP阳性表达的平均综合光密度与骨氟含量呈明显的正相关关系。结论亚慢性过量氟暴露对大鼠骨组织中骨涎蛋白表达水平有影响,各染氟组大鼠BSP的表达水平高于对照组,且BSP的表达水平与骨氟含量间存在着明显的正相关关系。推测BSP可能在慢性氟中毒的病理性骨转换过程中发挥重要的促进作用。     

骨桥蛋白在不同营养条件下氟中毒大鼠肝组织中的表达及意义

目的探讨骨桥蛋白（OPN）在氟中毒大鼠肝组织中的表达及其意义。方法通过给予48只Wistar大鼠不同钙营养状况、不同蛋白营养状况和投氟剂量的固体饲料,复制氟中毒大鼠模型,6个月后提取各组大鼠肝组织,应用免疫组化技术及RT-PCR技术检测OPN的表达水平。结果大鼠肝脏OPNmRNA表达及蛋白平均表达水随着大鼠骨氟含量的增加而依次增强。结论氟可促进大鼠肝组织OPN表达,并且过量氟和低钙、低蛋白对促进大鼠肝组织OPN表达具有协同作用,而且OPN的表达与氟中毒机体损伤的程度密切相关。     

苁蓉片对慢性氟中毒大鼠骨组织中G蛋白表达的影响

<正>地方性氟中毒是由于长期摄入过量的氟所导致的全身慢性中毒性病变。尤以损伤骨骼和牙齿最为严重,表现为氟骨症和氟斑牙。氟骨症的临床表现和危害极为严重,但由于其发病机制一直未得到彻底阐明,因此迄今尚无有效的治疗方法。大量研究表明,苁蓉具有抗氧化、抗衰老、抗炎及增强免疫功能、调节细胞功能等作用[1-4]。本实验用氟化钠诱发大鼠慢性氟中毒。测定G蛋白的表达。观察苁蓉片对氟中毒大鼠骨组织中G蛋白表达的影响,为防治地方性砷中毒提     

燃煤型氟中毒子代氟斑牙大鼠氧化应激与骨氟水平及miR-23a表达的相关性分析

目的 分析燃煤型氟中毒子代氟斑牙大鼠氧化应激与骨氟水平及微小RNA(miR)-23a表达的相关性。方法 选择36只SD大鼠（雌雄各半）,随机分为氟中毒组、对照组,氟中毒组通过饲料染氟法建立燃煤型氟中毒大鼠模型,对照组以正常饲料饲养。两组均于饲养8周后合笼交配,每只母鼠仔鼠中随机选择4只纳入研究。仔鼠断乳后给予正常饲料喂养。记录两组仔鼠出生21 d后下切牙状态,并检测其血氟、氧化应激指标以及骨氟、骨组织miR-23a水平。运用Pearson相关性分析,计算氟斑牙仔鼠氧化应激指标与骨氟、骨组织miR-23a表达水平的关联。结果 对照组36只仔鼠氟斑牙分级均为0级,即未见氟斑牙发生。氟中毒组36只仔鼠均发生氟斑牙。氟中毒组仔鼠血氟、MDA高于对照组仔鼠,其SOD、CAT低于后者,差异有统计学意义（P<0.05）。氟中毒组仔鼠骨氟含量及骨组织miR-23a表达水平均高于对照组仔鼠,差异有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关性分析示,血氟、骨氟水平及MDA均与miR-23a表达呈正相关,SOD、CAT与miR-23a表达呈负相关（P<0.05）。氟中毒组仔鼠骨小梁、骺...     

氟中毒对儿童智力、体格发育及血清骨形态发生蛋白水平的影响

正随着研究的不断深入,临床已有氟中毒对儿童智力、体格发育及血清骨形态发生蛋白水平的影响的报道。本研究旨在探讨氟中毒对儿童智力、体格发育及血清骨形态发生蛋白水平的影响,为进一步制定有效的干预措施、保障儿童的正常生长发育提供实践依据。1资料与方法1.1一般资料随机选150例燃煤型地方性氟中毒病区儿童为研究对象,根据病区不同分为A组(重病区)、B组(轻病区),均75例,同时选75例非氟中毒病     

氟骨症骨转换过程中转化生长因子-β超家族成员的表达

目的探讨氟中毒大鼠的骨转换调控过程,分析转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)超家族成员骨形态发生蛋白(BMP)在氟骨症骨转换过程中的作用。方法4周龄雄性Wistar大鼠随机分为对照组和氟化钠组,氟化钠组饮用含氟(F-)150 mg／L的水溶液,对照组饮用自来水。每4周处死一批动物,共计6次,采用RT-PCR方法、免疫组织化学方法以及Western blot等方法,分析氟中毒大鼠长骨组织TGF-β超家族成员BMP-2、BMP-7、TGF-β1 mRNA及蛋白的表达情况。结果氟中毒大鼠骨组织中BMP-2、BMP-7、TGF-β1mRNA表达持续高于对照组,蛋白主要表达在骺板软骨增生期和肥大期细胞、关节软骨细胞、成骨细胞以及韧带细胞等部位。结论氟中毒大鼠骨组织中TGF-β超家族成员通过调控成骨过程而参与了骨转换过程     

慢性氟中毒调控caspase途径介导大鼠脑组织神经细胞凋亡的研究

目的研究慢性氟中毒是否通过激活caspase途径介导大鼠脑组织神经细胞凋亡。方法 90只SD大鼠随机分为3组,对照组(饮用正常自来水)、染氟组(饮用含氟量50 mg/L蒸馏水)、VitE(维生素E)拮抗组(饮用含氟量50 mg/L蒸馏水,按VitE 5 mg/kg体重灌胃)。10个月后观察大鼠氟斑牙情况,尿氟和骨氟含量;流式细胞仪检测各组大鼠海马细胞和皮质细胞凋亡率;Western-blot检测各组大鼠海马细胞和皮质细胞Cleaved-caspase3、9、8及Cytosolic Cyt-c蛋白表达情况。结果染氟组及VitE拮抗组大鼠均出现不同程度的氟斑牙;尿氟与骨氟含量、细胞凋亡率显著高于对照组(P0.05),VitE拮抗组低于染氟组(P0.05);染氟组及VitE拮抗组大鼠海马细胞和皮质细胞中Cleaved-caspase3、9、8及Cytosolic Cyt-c蛋白表达显著升高,VitE拮抗组低于染氟组。结论慢性氟中毒可能通过激活caspase途径参与大鼠脑组织神经细胞凋亡过程,维生素E对这一过程具有拮抗作用。     

骨形态发生蛋白-2和骨形态发生蛋白-7在氟中毒大鼠膝关节滑膜中的表达

目的 探讨氟中毒大鼠膝关节滑膜中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)的表达及二者与氟中毒性关节病发病机制的关系.方法 断乳2周的SD大鼠32只,按体质量随机分为4组(对照组、低氟组、中氟组和高氟组),每组8只.对照组食用正常饲料;低、中、高氟组分别食用含25%、35%、68%贵州省氟中毒病区玉米(含氟量为148.00 mg/kg)的配方饲料,复制燃煤型氟中毒大鼠模型.染氟第140天,用免疫组织化学法检测各组大鼠滑膜组织中BMP-2和BMP-7蛋白的表达,图像分析系统分析吸光度值:HE染色观察各组滑膜组织的形态变化,根据病理分级标准,计算各组滑膜病理学总积分.结果 对照组大鼠滑膜组织中BMP-2(32.50±2.73)和BMP-7(38.90±2.56)蛋白少量散在表达;与对照组比较,低、中、高氟组大鼠滑膜组织中BMP-2(59.43±5.12、79.82±6.41、101.76±7.56)和BMP-7(55.10±4.82、78.42±5.61、98.46±6.05)蛋白表达增加(P＜0.05),且随染氟剂量的上升而明显增加(P＜0.05).滑膜病理学总积分,低、中、高氟组(1.04±0.98、4.69±1.28、8.60±2.07)较对照组(0.54±0.21)显著升高(P＜0.05).BMP-2和BMP-7蛋白表达与滑膜病理学总积分呈高度正相关(r值分别为0.98、0.99,P＜0.05).结论 BMP-2和BMP-7在氟中毒性关节病的发生发展中具有重要的作用,可能是通过调控成骨过程而发挥作用.     

番茄红素对饮水型氟中毒大鼠肾损伤STC1、UCP2的表达干预作用

<正>肾脏是机体代谢排出氟最主要的脏器,同时也是氟中毒的靶器官,也是氟中毒非骨相系统研究的热点之一,但其损伤机制仍不明确。本研究通过复制氟中毒肾损伤大鼠模型,观察与氧化应激、钙离子代谢密切相关的两种蛋白UCP2、STC1表达及番茄红素对其影响,探讨番茄红素对氟中毒肾损伤从线粒体层面的保护作用,为进一步研究番茄红素对氟中毒大鼠肾抗氧化能力影响的分子机制提供科学的理论依据。1材料与方法     

氟中毒大鼠骨组织中OPG、RANKL和RANK的表达及丹蓝仙硼疗氟胶囊的拮抗作用

目的观察骨保护素（OPG）、骨保护素配体（RANKL）、细胞核因子κB受体活化因子（RANK）在饮水型氟中毒大鼠骨组织中mRNA表达水平,探讨丹蓝仙硼疗氟胶囊对饮水型氟中毒大＂鼠OPG/RANKL/RANK系统表达的影响。方法以SD大鼠为研究对象,按体重均衡随机分为6组（组内雌雄各半）：对照组、氟中毒组、高剂量药物组、中剂量药物组、低剂量药物组、硼砂治疗组。在饮用水中加入氟化钠使水中氟含量为50 mg/L,复制氟中毒动物模型。提取骨组织总RNA,通过逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法,观察骨组织中OPG、RANKL和RANK mRNA表达的变化。结果氟中毒时,骨组织中的OPG、RANKLmRNA的表达呈上升趋势,RANKmRNA表达呈下降趋势。用药后,骨组织中的OPG、RANKLmRNA的表达呈下降趋势,RANKmRNA表达呈上升趋势。结论过量氟可引起成骨与破骨活动均增强的骨转换增高状态,并可通过改变OPG/RANKL/RANK系统表达提高骨吸收的活性。丹蓝仙硼疗氟胶囊能拮抗过量氟对大鼠骨组织的作用,通过0PG/RANKL/RANK系统影响骨重建。     

地方性氟中毒患者血清骨保护素水平表达情况分析

<正>氟作为人体所必需的微量元素之一,在人机体新陈代谢过程中有着重要的作用。为了阐明地方性氟中毒患者的发病机制及预防措施,本研究通过对部分地方性氟中毒患者骨保护素(OPG)表达情况进行研究。1对象与方法选取80名地方性氟中毒的患者作为氟中毒组,该地流行病学历史资料显示,该地有高水氟情况。该80例患者通过采集其尿样中检测氟含量1.5 mg/L,并且患者氟斑牙分度≥3。再抽取40人尿样中氟值     

番茄红素及维生素E对燃煤型氟中毒致大鼠睾丸组织中Clusterin蛋白表达的影响及机制

目的研究番茄红素及维生素E对燃煤型氟中毒致大鼠睾丸组织中Clusterin蛋白表达的影响及机制。方法 60只雄性SD大鼠分为低、中、髙氟组、髙氟+维生素E组、髙氟+番茄红素组和对照组,每组10只。染毒组喂饲含不同比例的燃煤型氟中毒病区煤烘玉米的饲料,构建燃煤型氟中毒动物模型,髙氟+维生素E组和髙氟+番茄红素组分别喂饲添加维生素E和番茄红素的病区煤烘玉米配制饲料,对照组给予正常饲料。观察各组大鼠氟斑牙情况;氟离子选择电极法检测大鼠尿和睾丸组织氟含量;HE染色光镜下观察睾丸组织病理学改变;原位缺口末端标记(TUNEL)染色观察生精细胞凋亡情况;免疫组化法检测大鼠睾丸组织中Clusterin蛋白表达。结果与对照组相比,低、中、高氟组大鼠氟斑牙严重程度、尿氟及睾丸组织氟含量、睾丸组织病理学损伤程度和睾丸组织生精细胞凋亡指数均依次增加(P0.05),各氟剂量组上述指标随氟剂量的增大而增大;与高氟组相比,髙氟+维生素E组和髙氟+番茄红素组上述指标明显降低;与对照组相比,低、中、高氟组大鼠Clusterin蛋白水平依次下降(P0.05),各氟剂量组Clusterin蛋白表达水平随氟剂量的增大而下降。与高氟组相比,髙氟+维生素E组和髙氟+番茄红素组Clusterin蛋白水平明显升高。结论燃煤型氟中毒可引起大鼠睾丸组织的性生殖损害,生精细胞凋亡率增加,Clusterin蛋白的表达降低。抗氧化剂可显著降低生殖细胞凋亡率,提高Clusterin蛋白的表达,改善雄性生殖功能的损伤。     

丹蓝仙硼疗氟胶囊对氟中毒大鼠骨保护素/核因子κβ受体活化因子配体/核因子κβ受体活化因子系统表达水平的影响

目的 观察慢性氟中毒大鼠骨组织中骨保护素(OPG)、核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)、核因子κβ受体活化因子(RANK)蛋白表达水平,探讨OPG/RAN KL/RANK系统与慢性氟中毒大鼠骨骼损伤的关系及丹蓝仙硼疗氟胶囊的拮抗作用.方法 将SD大鼠按体质量随机分为6组(组内雌雄各半):氟中毒组、高剂量药物组、中剂量药物组、低剂量药物组、对照组、硼砂(阳性药物对照)组,每组12只.对照组饮用自来水,其余5个实验组饮用含氟水(50 mg/L),而高、中、低剂量药物组另摄入丹蓝仙硼疗氟胶囊,剂量分别为0.8、O.4、O.2 g/kg,硼砂组另摄入硼砂,剂量为0.8 g/kg.6个月时用免疫组织化学方法检测OPG、RANKL、RANK蛋白在大鼠股骨干骺端的表达.结果 与对照组(173.79±5.23、174.17±5.O1、155.63±7.11)比较,氟中毒组大鼠股骨干骺端OPG、RANKL(156.83±5.80、157.74±6.70)表达增高,RANK(173.92±4.37)表达降低,差异有统计学意义(P均＜0.05).与氟中毒组比较,高、中剂量药物组OPG、RANKL(169.67±5.07、168.08±5.05,170.78±5.01、168.41±7.19)表达降低,RANK(162.12±4.24、166.69±5.78)表达增高,差异有统计学意义(P均＜O.05).与硼砂组(167.27±4.08、167.85±5.O1、166.14±3.95)比较,低剂量药物组OPG、RANKL(163.40±4.11、159.49±5.78)表达增高,RANK(171.54±8.06)表达降低,而高剂量药物组RANK(162.12±4.24)表达增高,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 慢性氟中毒可引起成骨与破骨活动均增强的骨转换增高状态,并可通过改变OPG/RANKL/RANK系统表达影响骨吸收的程度.丹蓝仙硼疗氟胶囊能通过OPG/RANKL/RANK系统影响骨重建,对氟致骨损伤有拮抗作用.     

骨保护素配体在燃煤型氟中毒大鼠骨组织中的表达

目的观察骨保护素配体(osteoprotegerin ligand,OPGL)在燃煤型氟中毒大鼠骨组织中的表达,(?)讨燃煤型氟中毒对大鼠OPGL表达的影响。方法以SD大鼠为研究对象,按体质量均衡随机分为5组(组内雌雄各半)：高氟组、高氟偏食组、低氟组、低氟偏食组、对照组(实验中所设偏食组为相对于对照组的低钙偏食)。以氟中毒病区煤烘玉米为主要饲料,复制氟中毒动物模型。对其胫骨干骺端进行常规组织切片,HE染色观察组织学改变；用免疫组织化学方法检测OPGL在大鼠胫骨干骺端的表达。氟离子选择电极法测定大鼠牙氟、骨氟。结果①OPGL表达水平：高氟组(118．62±1．27)、高氟偏食组(97．62±1．22)、低氟组(156．25±1．02)、低氟偏食组(145．25±1．25)大鼠干骺端OPGL表达增高,与对照组(189．23±1．25)比较差异有统计学意义(P＜0．05)。高氟偏食组与高氟组、低氟偏食组与低氟组比较,OPGL表达升高且差异有统计学意义(P＜0．05)。②骨病理改变：高氟、低氟组大鼠骨皮质厚度增加、密度增高,骨小梁成骨细胞数轻度增加,湿示成骨活跃：高氟偏食组大鼠胫骨骨皮质密质骨出现松质化。③骨密度：高氟偏食组大鼠骨密度低于对照组(P＜0．05),其余各实验组高于对照组,高氟组、低氟组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0．05)。④牙氟、骨氟：各染氟组牙氟、骨氟均高于对照组(P＜0．05)。结论①过量氟造成骨转换增高,氟可通过增强OPGL的表达来加强破骨细胞的活性；②低钙偏食可使氟骨症破骨性骨吸收增强。     

人与不同种类动物骨及牙齿中的氟含量分析

目的 探讨氟中毒和非氟中毒的人和不同种类动物骨、牙齿中的氟含量,为地方性氟中毒防治研究提供有意义的数据。方法 采用扩散一电极法测定骨和牙齿中氟含量。结果 氟中毒大白鼠的骨和牙齿氟含量明显高于饮低氟水的健康大白鼠骨、牙齿氟（Ｐ〈０．０１）,且随给氟剂量的增加而升高。所有被测的氟中毒动物和人的骨、牙齿氟含量均高于非氟病区同种动物,相同部位的骨、牙齿氟,有的甚至高出１０倍。结论 氟中毒动物骨、牙齿氟含量     

涎腺肿瘤患者中p185蛋白和p16蛋白表达及临床意义

用免疫组化LSAB法检测维吾尔族患涎腺恶性肿瘤13例、涎腺多形性腺瘤11例及涎腺非肿瘤组织10例的p185蛋白及p16蛋白的表达及变化，探讨抑癌基因p16（表达产物为p16蛋白）、原癌基因C－erbB-2）表达产物为p185蛋白）在新疆维吾尔族涎腺肿瘤患中的异常表达与肿瘤病理生物学特征间关系及临床意义，为涎腺恶性肿瘤的有效防治提供科学实验依据，本研究得出：（1）免疫组化法检测p185及p16蛋白的表达，可对良、恶性病变从分子水平进行评估，并可作为早期诊断及临床治疗涎腺恶性肿瘤的分子生物学指标；（2）p185蛋白的过度表达可能与良性病变的恶性转化有关。     

慢性氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα的变化

目的探讨氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα的变化及它们之间的关系。方法通过低钙与含氟饮食建立氟中毒大鼠模型,采用Elisa法测定氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα表达。结果氟摄入可以提高血清OPG、IL-1β和TNFα水平;低钙饮食提高血清OPG水平,不影响IL-1β和TNFα水平;低钙与氟摄入协同能提高血清RANKL水平。结论慢性氟中毒大鼠血清中OPG、RANKL、IL-1β和TNFα发生了变化;OPG升高是主要的,可以反应机体内破骨或协同破骨因素总的变化程度。     

硼、硒、氟宁、维生素C对氟中毒动物生化指标的影响

通过给大白鼠饮用高氟水,导致骨软化型氟中毒动物模型,同时分别给予四硼酸钠、亚硒酸钠、蛇纹石、维生素C,观察动物血中钙、磷含量及碱性磷酸酶活性,骨中胶原、钙及氟水平和尿氟含量的变化。 实验结果显示:硼能降低血清ALP活性;氟宁能增加骨中胶原及钙含量;硒能提高血钙浓度加速尿氟排泄;维生素C亦能增加血钙、骨胶原和尿氟含量。这些药物对氟的生化改变的影响,对防治氟中毒将起重要作用。     

钙调蛋白在氟中毒大鼠肝组织中的表达

目的探讨钙调蛋白在氟中毒大鼠肝组织中的表达及意义。方法在饮水中加入氟化钠进行大鼠染毒试验,3个月后采用免疫组化技术及RT-PCR技术检测大鼠肝脏中钙调蛋白(CaM)的表达水平。结果与对照组相比,染氟浓度为25mg/L、50mg/L、100mg/L组大鼠肝脏CaM mRNA及蛋白表达水平均增高,并随染氟浓度的增加,表达增强。结论氟可以导致大鼠肝脏CaM mRNA及蛋白表达水平增强。     

燃煤型氟中毒对大鼠脑组织NO含量及NOS mRNA和蛋白表达的影响

目的观察燃煤型氟中毒对大鼠脑组织NO含量及NOS mRNA和蛋白表达的影响。方法健康SD大鼠24只,体质量100～120 g,按体质量随机分为3组,每组8只。对照组饲以常规饲料,低氟组和高氟组以氟病区燃煤烘烤的玉米为主要饲料(含氟量分别为11.30、104.20 mg/kg),来复制氟中毒大鼠模型,染氟时间为3个月。用氟离子选择电极法检测动物尿氟、骨氟、脑氟含量,观察大鼠海马CA1区神经元病理变化,用Biomias 2000图像分析系统测试大鼠海马CA1区神经元胞体平均面积、周长及平均灰度值,比色法测定脑组织NOS活性,硝酸还原酶法测定脑组织NO含量,蛋白印迹方法测定NOS蛋白水平;实时荧光定量PCR方法测定NOS mRNA水平。结果低、高氟组大鼠尿氟为(2.61±0.11)(4.39±0.13) mg/L,骨氟(2 734±137)(4 323±203) mg/kg,脑氟(1.00±0.08)(1.14±0.02) mg/kg;与对照组尿氟(1.59±0.10) mg/L、骨氟(1 399±152) mg/kg、脑氟(0.41±0.06) mg/kg比较,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);尼氏染色显示,与对照组大鼠神经元平均灰度值(119.0±9.7)比较,染氟组大鼠均明显增加[低氟(153.0±8.9),高氟(159.4±2.9)];低氟组、高氟组大鼠脑组织总NOS活性[(8.57±2.40)、(11.49±3.10) kU/g]较对照组(16.80±3.20) kU/g显著性下降(P0.05),高氟组大鼠脑组织NO含量(2.05±0.25)μmol/L较对照组(4.68±1.78)μmol/L显著性降低(P0.05)。低氟组、高氟组大鼠脑组织NOS蛋白表达水平[(0.53±0.24),(0.82±0.28)]较对照组(0.17±0.02)显著增加(P0.05/0.01),低氟组、高氟组大鼠脑组织NOS mRNA水平[(1.37±0.07),(1.38±0.08)]均较对照组(1.53±0.17)显著下降(P0.05)。结论低剂量氟具有一定神经毒性,表现为食用燃煤型氟中毒病区燃煤烘烤的粮食低剂量、早期可导致动物脑氟含量增高,使大鼠海马CA1区神经元蛋白合成功能下降,脑组织NOS活性、NO含量、NOS蛋白及mRNA表达改变。