思文霉素与DNA的作用方式及对拓扑异构酶Ⅰ的作用

思文霉素是我国首先分离提纯并报道的阿克拉霉素类新组份。它具抗癌作用强,毒性低,分化诱导作用强的特点,并明显抑制DNA、RNA的合成。本文主要研究该药与DNA作用方式及对拓扑异构酶Ⅰ的作用,并探讨了有关作用机制。为观察思文霉素与DNA相互作用,采用荧光光谱法,紫外光谱法和琼脂糖凝胶电泳。实验证明,药物与DNA结合且作用方式为嵌入。     

思文霉素的抗肿瘤作用及急性毒性的初步研究

阿克拉霉素(Aclacinomycin,ACM)是1975年日本梅泽滨夫等报道的新蒽环类抗生素。其主要组分有ACM-A和ACM-B。我所从中还发现了X组分——思文霉素(ACM-X),其为前两者的同系物,是一个。新的天然产物。实验结果 1.腹腔注射ACM一X一次的小自鼠LD     

阿拉克毒素B结合DNA和体外抑制依赖DNA的RNA合成的DNA顺序选择性比较

本文采用荧光淬灭法和体外无细胞RNA合成系统比较了阿克拉霉素B结合DNA和抑制依赖DNA的RNA合成的DNA顺序选择性。结果表明阿克拉霉素B与小牛胸腺DNA,Poly[d(A-T)]和Poly[d(G-C)]有明显结合;结合RNA的活性小。与DNA的结合更亲和未变性DNA。Scatchard分析显示结合三种DNA的亲和性     

雷帕霉素在免疫抑制和肿瘤抑制中的双重作用

雷帕霉素（rapamycin）是近年来应用较多的免疫抑制剂，它在肿瘤治疗中也发挥重要作用。雷帕霉素（rapamycin）与FKBP12结合，形成Rapamycin- FKBP12复合物，这一复合物抑制mTOR (mammalian target of rapamycin)的活性，进一步抑制mTOR下游的一系列分子的合成或功能。雷帕霉素可将免疫细胞滞留于G1期，阻止免疫细胞的增殖；抑制IL-2和其他的免疫分子的合成,从而发挥其免疫抑制作用。另一方面，对于肿瘤细胞，雷帕霉素抑制其生长和增殖，发挥肿瘤抑制作用。它的这一双重功能可应用在器官移植和肿瘤治疗的交叉领域。     

神经生长因子对体外培养的大鼠颈上节神经突起生长及RNA和DNA合成的作用的放射自显影研究

神经生长因子(NGF)可促进靶神经节神经突起生长晕的生长。本文应用3~H-尿嘧啶核苷和3~H-胸腺嘧啶核苷放射自显影术,进一步研究该作用与神经元合成RNA和DNA的关系。用新生大鼠颈上节,按Maximow双盖片法进行培养。培养物分NGF组(培养液内添加NGF粗制剂)和对照组(不用NGF)。NGF组培养物被3~H-尿嘧啶核苷标记的神经元百分率及标记颗粒水平,均高于对照组,而且每当培养物神经突起生长晕生长速度即将出现高峰时,神经元3~H-尿嘧啶核苷标记颗粒水平都明显地增高,说明NGF可促进颈上节神经元的RNA合成,后者与神经突起的迅速生长有一定相互关系。在3~H-胸腺嘧啶核苷标记培养物神经元的实验中,观察到NGF可促进培养第3天的颈上节少量的神经元合成DNA。     

思文霉素对人早幼粒性白血病细胞(HL-60)的诱导分化作用

传统的肿瘤化疗目的在于对肿瘤细胞的杀伤,但相应的毒副作用严重。对肿瘤细胞的分化诱导(逆转)是目前肿瘤化疗的新途径,分化诱导剂能促进肿瘤细胞的分化,使之在一定程度上变成或接近正常细胞(形态和功能方面),人早幼粒性白血病细胞(HL-60)细胞株是目前公认较为理想的研究分析诱导剂的模型。思文霉素系我国首     

依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅲ与基因表达和基因治疗

依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅲ (polⅢ )能催化 5SrRNA、tRNA、U6SnRNA等一些小的、稳定的RNA的合成。文章综述了依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅲ的启动子和转录复合物 ,并介绍了RNA聚合酶Ⅲ的转录在基因表达和基因治疗 (核酶、反义核酸、RNA干扰技术等 )研究中的应用价值。     

用DNA分子克隆技术对RNA病毒的研究

由于产生重组体DNA的技术,有可能制得RNA病毒基因组的DNA复制品,已使对RNA病毒的研究有了革命性的变化,这样制得的DNA复制品就可用来进行限制性内切酶分析与序列分析。因而可以获得对RNA病毒基因组结构方面研究的详细资料。本文作者采用了重组体DNA方法对脊髓灰质炎病毒和逆转录病毒的基因组进行了研究。为了制备一种脊髓灰白质炎病毒RNA基因组的DNA复制品,作者利用寡聚脱氧胸苷酸作引物,逆转录RNA为一负链DNA,再让此单链DNA折回     

CircRNA锌指RNA结合蛋白在恶性肿瘤中作用研究进展

环状RNA是一类具有特殊共价闭合环状结构的RNA分子,环状RNA锌指核糖核酸结合蛋白(circRNA-ZFR)在诸多恶性肿瘤中呈异常表达,并且其表达水平与肿瘤临床分期、癌细胞转移及患者预后密切相关;circRNA-ZFR可通过内源竞争性吸附miRNA、调节细胞周期、激活多种信号通路等机制参与调控肿瘤的发生发展。深入研究circRNA-ZFR在恶性肿瘤中的表达及作用机制有助于相关肿瘤的早期诊断、靶向治疗和患者预后评估。     

体外制备RNA探针——一种极有希望的从质粒DNA合成单链RNA新技术

过去十年来,分子生物学的发展主要归功于那些必需技术的发展,而这些技术的中心则是体外放射标记高比活的DNA。目前,使用两种方法制备高比活的DNA分子——通过切口前移(nick-translation)标记双链DNA和通过引用单链DNA模板进行的DNA合成。现在,一种新的以特异重组的质     

新型超耐热菌的单链DNA结合蛋白表达和纯化及其增强DNA、cDNA的合成

目的 表达和纯化一种新的来自于超耐热菌(thermococcus kodakarensis) KOD1的单链DNA结合蛋白(缩写为kod-ssb),并探讨其对DNA、cDNA合成的影响.方法 采用Transrtta(DE3)表达kod-ssb,用镍柱亲和层析纯化,经SDS-PAGE分析检测表达纯化后的kod-ssb.使用PCR及qRT/qPCR检测kod-ssb对DNA、cDNA合成的影响.结果 将质粒pET11a-kod转化Transetta(DE3)中,得到重组菌株Transetta(pET11a-kod),经IPTG诱导.由SDS-PAGE分析可见表达的约40×103的特异条带;使用人类β球蛋白基因作为模板分别扩增5 kbp,9 kbp和13 kbp目的片段,结果加了kod-ssb的PCR目的片段比没加的产量高很多,而且kod-ssb显著降低了PCR反应的非特异性扩增.以流感细胞培养上清抽提的RNA为模板,实施RT-/qPCR反应.结果加kod的平均Ct值是19.42,而没加的为22.15.结论 kod-ssb在未来将被用于增强DNA和cDNA的合成.     

卵巢肿瘤细胞DNA及RNA含量的定量分析及其临床意义

本资料对９３例不同性质的卵巢肿瘤细胞ＤＮＡ及ＲＮＡ含量进行了定量研究，其中５０例良性、４３例恶性。并对患者进行１～５年的随访。结果是卵巢良性肿瘤的异倍率（假阳性）为４４％，恶性肿瘤异倍率为８６．０％。以“标准ＤＩ”及“标准ＲＩ”为指标判断卵巢肿瘤性质的准确率较以“异倍性”为高，且双指标同时应用高于任一单指标：对卵巢良恶性肿瘤的诊断准确率分别为９０％和９５．３％。提出“标准ＤＩ”和“标准ＲＩ”是判断卵巢肿瘤性质的理想指标。且ＤＮＡ及ＲＮＡ含量与卵巢癌预后有密切关系。     

阿克拉霉素抗癌作用和临床应用

阿克拉霉素(Aclacinomycin,简称ACM)是新的蒽环抗癌抗生素,由T.OKi和H.Umezawa(1975)得自加利利链霉菌(Streptomyces galilaeus)MA 144M_2菌株培养物。国内用加利利链霉菌思文变种77-3082(Streptomyces galilaeus Var Siwenesis)菌株也获得了相同物质。主要成份是ACM-A和ACM-B。多种阿克拉霉素中,以ACM-A和ACM-B抗癌作用较好,为国内外主要的研究成份。国     

反义RNA体外抑制丙型肝炎病毒基因表达的研究

目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)基因调控方式及反义RNA对HCV基因表达的体外抑制作用。方法 采用业已建立的HCV基因调控细胞模型，以重组质粒共转染策略，将反义RNA重组质粒与HCV5′非翻译区(5′UTR)调控的报道基因——虫荧光素酶(luc)重组质粒共同转染人肝癌细胞系(HepG2)，并以不表达反义RNA的原核重组质粒和不含有HCV5′UTR的luc重组质粒做为对照。转染细胞经短期培养后制备细胞提取液，荧光检测法检测luc基因的表达。结果 针对HCV5′uTR的反义RNA可以在体外有效抑制由HCV5′UTR调控的luc基因的表达，并具有剂量依赖效应。对照重组质粒转染实验证明，上述抑制作用呈序列特异性。结论 HCV5′UTR具有调控下游目的基因表达的重要功能，反义RNA可以在体外有效抑制由HCV5′UTR介导的病毒基因的表达。     

BNG乙醇提取物对P338白血病细胞DNA、RNA合成的影响

本文报告BNG乙醇提取物对小鼠P388白血病细胞,体外DNA、RNA合成的影响。采用~3H—TdR渗入DNA和~3H—uR渗入RNA的方法分别观察BNG乙醇提取物对P388细胞DNA、RNA合成的抑制作用。根据测得的对照组与给药组     

孕妇血浆及血清中胎儿游离DNA及RNA的研究进展

当今，无创伤性产前诊断越来越受到人们的关注，许多学者利用孕妇血中胎儿细胞进行产前遗传疾病的研究，但由于孕妇外周血中的胎儿细胞数量稀少，必须通过复杂的富集分离技术，但价格昂贵，因此限制了其临床推广应用。近来孕妇血浆及血清中的胎儿游离DNA及RNA的发现为无创伤性产前遗传病诊断开辟了一个新的天地。由于胎儿游离DNA及RNA具有含量较高且产后很快被清除等优点，使之成为未来最具潜力的无创伤产前诊断方法。     

从小量样品中同时提取高分子量DNA和RNA

基本原理 目前,提取DNA和RNA的方法有多种,但多为分别提取而不能由同一样品同时提取。常使需要同时研究同一样品中DNA和RNA的工作既浪费样品,又增加了操作步骤,耗物耗时,还易使所得之DNA和RNA产生一定程度的相互污染。特别在样品的来源有限或样品量少的情况下,用分别提取的方法来获得高分子量的DNA和RNA常顾此失彼,不能同时得到足够     

孕妇血浆及血清中胎儿游离DNA及RNA的研究进展

当今,无创伤性产前诊断越来越受到人们的关注,许多学者利用孕妇血中胎儿细胞进行产前遗传疾病的研究,但由于孕妇外周血中的胎儿细胞数量稀少,必须通过复杂的富集分离技术,但价格昂贵,因此限制了其临床推广应用。近来孕妇血浆及血清中的胎儿游离DNA及RNA的发现为无创伤性产前遗传病诊断开辟了一个新的天地。由于胎儿游离DNA及RNA具有含量较高且产后很快被清除等优点,使之成为未来最具潜力的无创伤产前诊断方法。