三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的评价PBP2a乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用价值。方法以PCR法扩增mecA基因为金标准,用三种方法对临床分离的105株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果105株细菌中有82株mecA基因阳性,头孢西丁纸片扩散法、乳胶凝集法与PCR法结果一致,苯唑西林纸片扩散法与PCR法结果相符合均为98.8%。结论头孢西丁纸片扩散法与PBP2a乳胶凝集法一样比苯唑西林纸片扩散法能更准确检测MRSA,值得推广应用。     

三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的评估

目的 评价PBP2a乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林纸片扩散法对检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用价值.方法 以PCR法扩增mecA基因为金标准,用三种方法对临床分离的105株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较.结果 105株细菌中有82株mecA基因阳性,头孢西丁纸片扩散法、乳胶凝集法与PCR法结果一致,苯唑西林纸片扩散法与PCR法结果相符合均为98.8%.结论 头孢西丁纸片扩散法与PBP2a乳胶凝集法一样比苯唑西林纸片扩散法能更准确检测MRSA,值得推广应用.     

评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床价值.方法用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测临床分离的200株金黄色葡葡球菌,以测定PBP2a的MRSA-乳胶凝集试验作为″金标准″.结果92株PBP2a阳性金黄色葡萄球菌中,头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法分别检出MRSA 91株和84株;108株PBP2a阴性中,头孢西丁纸片扩散法全部为阴性,苯唑西林纸片扩散法阴性为103株.以PBP2a检测结果为标准,头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA的特异性分别为100.0%和95.4%,敏感性分别为98.9%和91.3%.5株苯唑西林纸片扩散法检测为中介的菌株,经PBP2a检测结果证实,3株为MRSA,2株为MSSA.结论头孢西丁比苯唑西林更适合检测MRSA,并能提高测定MRSA的可靠性,是临床实验室常规检测MRSA的首选方法.     

评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法测定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧两林金黄色葡萄球菌（MRSA）的临床价值。方法用头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测临床分离的200株金黄色葡葡球菌，以测定PBP2a的MRSA-乳胶凝集试验作为“金标准”。结果92株PBP2a阳性金黄色葡萄球菌巾．头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法分别检出MRSA91株和84株：108株PBP2a阴性中，头孢西丁纸片扩散法全部为阴性，苯唑西林纸片扩散法阴性为103株。以PBP2a检测结果为标准．头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA的特异性分别为100．0％和95．4％．敏感性分别为98．9％和91.3％。5株苯唑西林纸片扩散法检测为中介的菌株。经PBP2a检测结果证实，3株为MRSA，2株为MSSA。结论头孢西丁比苯唑西林更适合检测MRSA．并能提高测定MRSA的可靠性，是临床实验室常规检测MRSA的首选方法。     

三种检测甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌方法的比较

目的:比较苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林-高盐琼脂筛选试验和PBP2′乳胶凝集试验(PBP2′ latex agglutination test,LA)检测甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的差异。方法:用上述3种方法同时检测85株临床分离的金黄色葡萄球菌。结果:3种方法同时检测出38株MRSA和47株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌,一致性为100%。结论:LA法适于临床实验室快速准确检测MRSA。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的临床应用

目的以PCR检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）mecA基因为金标准,评价头孢西丁纸片扩散法检测MRS的临床应用。方法收集各种细菌感染性标本分离到的葡萄球菌,细菌的鉴定采用法国梅里埃全自动微生物分析系Vitek-60,分别采用PCR扩增mecA法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和抗青霉素结合蛋白2a（抗PBP2a）胶乳凝集法检测葡萄球菌中MRS。结果经PCR检测mecA证实西安地区SA中MRSA的发生率为69．2％（54／78）,CNS中MRCNS的发生率为67．7％（65／96）;其余三种方法检测SA中的MRSA发生率分别为67．9％,57．7％,66．7％,CNS中MRCNS的发生率分别为64．6％,58．3％,63．5％。头孢西丁纸片扩散法与mecA基因法结果相比较检测MRSA,其灵敏度和特异度分别为98．1％和100．0％,两者符合率为98．7％;MRSCoN的灵敏度和特异度分别为95．4％扣100．0％,两者符合率为96．9％。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感度和特异度高于苯唑西林纸片扩散法,与PCR检测mecA法具有较好的一致性,可作为临床实验室常规检测MRS的常规方法。     

4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评估

目的:评价4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法的临床应用价值。方法:用mecA基因检测MRSA乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法对临床分离的160株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果:160株中有127株为MRSA,4种检测方法结果一致。结论:头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRSA的简便又准确的实验方法,并值得推广应用。     

三种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的比较

[摘要]目的:对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)3种检测方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法：用检测mecA基因的PCR扩增法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁制片扩散法对临床分离的84株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果:苯唑西林纸片扩散法检的敏感性、特异性分别为97.6%、95.3%,mecA基因的PCR扩增法和头孢西丁纸片扩散法的敏感性、特异性均为100.0%。结论:PCR技术检测MRSA具有快速、敏感和特异的特点,是一种非常有效的鉴别方法。纸片扩散法简便易行,成本低廉, 尤其是头孢西丁纸片扩散法的敏感性和特异性较苯唑西林纸片扩散法更高,值得在临床实验室中推广应用。 [关键词]　耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；mecA基因；PCR；苯唑西林；头孢西丁     

五种方法在不同温度下检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的评价

目的:探讨用五种方法在不同培养温度下检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的特异性和灵敏度.方法:收集临床分离的金黄色葡萄球菌120株,经过触酶,凝固酶(试管法)阳性和经自动微生物鉴定仪鉴定.分别进行头孢西丁纸片、水解-酪蛋白琼脂(MHA)中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、苯唑西林纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂,以PBP2a胶乳凝集作为MRSA检测标准,其在30℃和35℃对金黄色葡萄球菌(120株)检出MRSA的情况.按CLSI 2006版标准操作和判读结果.结果:头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、苯唑西林纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂在30℃检测MRSA灵敏度分别为95.8%、98.6%、88.9%、90.3%和97.2%,特异性分别为100%、100%、98.5%、100%和100%,其中一株苯唑西林24h的抑菌环直径为11 mm,延长3 h后其抑菌环直径为9 mm.在35℃检测MRSA灵敏度分别为93.1%、97.2%、86.1%、88.9%和95.8%.加盐耐药菌株的抑菌圈直径为(11.05±5.59)不加盐耐药菌株的抑菌圈直径为(13.01±5.75)(P<0.05).结论:五种方法均能检测MRSA,但添加4%NaCl的头孢西丁在30℃时孵育下敏感性和特异性均好,更能提高对MRSA的检出率.     

两种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的K-B法应用评价

目的评价两种分别使用MH琼脂(头孢西丁)和高盐琼脂(苯唑西林)纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床应用价值。方法用头孢西丁纸片在MH琼脂平板上进行纸片扩散法(K-B法)检测临床分离的89株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法(K-B法)、mecA基因检测进行比较。结果在MH琼脂使用头孢西丁纸片检测MRSA优于高盐琼脂苯唑西林纸片扩散法,并与PCR检测mecA基因的方法高度一致。结论头孢西丁纸片扩散法是筛选和确认耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)一种简单、可靠的实验方法。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的　评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)在临床的应用价值。方法　用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的 94株金黄色葡萄球菌 ,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果　mecA基因阳性的 77株金黄色葡萄球菌 ,头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论　头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致 ,是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因(mecA基因法)为标准，评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的灵敏度和特异性。方法PCR扩增葡萄球菌的特异性mecA基因片段，头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌，药敏试验方法按标准K—B(Kirby-Bauer)法进行。结果在190株临床分离的葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(金葡菌)138株，表皮葡萄球菌30株，溶血葡萄球菌22株，经。PCR法检测mecA基因，金葡菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为81.2％(112／138)、96．1％(50／52)。头孢西丁纸片扩散法检测金葡菌中MRSA和CNS中MRCNS的发生率分别为81.2％(112／138)、94．2％(49／52)，与mecA基因法结果相比较，头孢西丁纸片扩散法检测葡萄球菌中MRS的灵敏度和特异度分别为99．4％(161／162)、100．0％(28／28)，两者符合率为99．5％(189／190)。2种方法所获得的结果经统计学处理，两者差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度和特异度，适合在临床微生物实验室中进行推广。     

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的临床应用评价

目的用PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为参比方法,评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的临床应用价值。方法临床分离的163株葡萄球菌,分别用头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法、PCR法检测mecA基因,以PCR扩增法检测mecA基因作为参比方法进行比较。结果163株临床分离的葡萄球菌经PCR法检测mecA基因,阳性率为81.0%,其中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为74.1%和83.8%。头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法用于检测MRSA与PCR法检测mecA基因有很好的一致性,其敏感性和特异性均为100.0%,而对于凝固酶阴性葡萄球菌,头孢西丁纸片扩散法比苯唑西林纸片扩散法检测MRS的敏感性和特异性高,敏感性分别为100.0%和94.3%,特异性分别为96.0%和88.0%。结论头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度,但对于mecA基因阴性的凝固酶阴性葡萄球菌,用头孢西丁纸片法检测,约有5%菌株要误报为MRCNS。由于头孢西丁纸片扩散法操作简单,较苯唑西林纸片扩散法检出MRS的敏感度和特异性高,结果与PCR法检测mecA基因有很好的相关性,不需特殊仪器设备,可在临床微生物实验室常规开展。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec检测及耐药性分析

目的探明耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的流行情况,分析葡萄球菌盒染色体mec（SCCmec）的主要分型,通过检测葡萄球菌属细菌的耐药性,为MRSA的流行病学调查和临床治疗提供理论依据。方法用头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌,用青霉素结合蛋白2a（PBP2a）测定法对MRSA进行确证;应用实时荧光定量PCR系统扩增葡萄球菌染色体mec盒,并对MRSA进行基因分型;用VITEK 32全自动微生物分析仪检测其耐药性。结果 97株MRSA菌株中包括SCCmec II型12株、Ⅲ型77株、IV型8株。所有菌株对包括苯唑西林在内的多种抗生素耐药,对利福平的耐药率均较低,对万古霉素完全敏感,各型别间差异无统计学意义。Ⅲ型MRSA菌株表现为多重耐药,耐药率高于II型、IV型MRSA菌株。结论深圳东部地区临床分离的MRSA SCCmec基因型以Ⅲ型菌株为主,且具有对抗生素多重耐药的特征。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌产色培养基临床应用评估

目的通过头孢西丁纸片法、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）产色筛选平板法和聚合酶链反应（PCR）检测MRSA,评估MRSA产色筛选平板的敏感性和特异性。方法收集仁济医院2008年8月至9月临床分离的金黄色葡萄球菌68株,分别采用头孢西丁纸片法、MRSA产色筛选平板法和PCR检测MRSA,以PCR检测femA基因和mecA基因结果为金标准,比较MRSA产色筛选平板的敏感性和特异性。结果甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）除万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺外,对其他11种抗菌药物的敏感率明显高于MRSA。68株金黄色葡萄球菌中,头孢西丁纸片法筛选出50株MRSA,产色平板法筛选出51株MRSA,PCR检测到51株mecA基因阳性,MRSA产色筛选平板结果和mecA基因检测结果符合率为100%。结论MRSA产色筛选平板可用于临床快速检测MRSA。     

头孢西丁纸片法筛查耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的评价

目的评价头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法.方法采用NCCLS推荐的30μg头孢西丁纸片法和苯唑西林纸片法检测MRSA,以PCR方法检测mecA基因为金标准.同时做头孢西丁对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC).结果用PCR方法检测145株金黄色葡萄球菌,其中mecA基因阳性83株,阴性62株.用头孢西丁纸片法筛查MRSA阳性82株,阴性63株.敏感性为98.8%,特异性为100%.而苯唑西林纸片法检测MRSA敏感性为95.2%,特异性为96.8%.结论头孢西丁纸片法筛查MRSA与mecA基因检测具有很好的一致性,该方法可在常规工作中推广使用.     

Evaluation of different methods for detecting methicillin (oxacillin) resistance in Staphylococcus aureus

OBJECTIVES: To evaluate the performance of oxacillin, cefazolin, cefoxitin, cefotaxime and imipenem discs; Etest for oxacillin; microdilution; agar screening plates with 2 and 6 mg/L of oxacillin; and PBP2' agglutination for detection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). METHODS: A total of 102 clinical S. aureus isolates, including 51 MRSA isolates, tested by PCR for the presence or absence of the mecA gene (gold standard method), isolated from different patients and at different times, were tested with: oxacillin (1 microg), cefazolin, cefoxitin, cefotaxime and imipenem (all 30 microg) discs; Etest for oxacillin; microdilution with oxacillin; agar screening tests (ORSAB medium) with 2 mg/L or 6 mg/L of oxacillin; and PBP2' agglutination with two different kits for detection of MRSA strains. RESULTS: The cefoxitin disc, ORSAB medium and PBP2' detection all showed 100% sensitivity. The cefoxitin, cefazolin and imipenem discs, Etest for oxacillin, microdilution and agar screening method with 6 mg/L at 24 h showed the highest specificity (100%), although variable degrees of sensitivity. The cefoxitin disc, which showed negative and positive predictive values of 100% and 98%, respectively was the best method for detecting MRSA isolates. CONCLUSIONS: In the absence of availability of molecular biology techniques, the cefoxitin disc was the best predictor of methicillin resistance in S. aureus from among the techniques tested.