IGF-1在成骨样细胞增殖中的作用及与钾离子通道的关系

目的 :研究胰岛素样生长因子 - 1(IGF - 1)促大鼠成骨样肉瘤细胞 (UMR10 6 )增殖作用及与钾离子通道活动的关系。方法 :采用磺基罗丹明 (SRB)染色法观察细胞增殖并用膜片钳技术记录细胞膜钾离子通道电流的变化。同时用3 H -TdR掺入测定DNA合成的改变。结果 :IGF - 1可以明显地促进UMR10 6细胞的增殖 ,且使3 H -TdR掺入率增加 93.5 7%。在含有生长因子IGF - 1(10 -8M)的培养液中培养 12h后 ,钾通道电流比对照有明显增加 ,而且用钾通道阻断剂后 ,3 H -TdR掺入率下降。结论 :IGF - 1可促进大鼠成骨样肉瘤的DNA合成和细胞增殖。且细胞膜钾通道的活动与此促增殖活动密切相关     

IGF—1在成骨样细胞增殖中的作用及与钾离子通道的关系

目的：研究胰岛素样生长因子－1（IGF－1）促大鼠成骨样肉瘤细胞（UMR106）增殖作用及钾离子通道活动的关系。方法：采用磺基罗丹明（SRB）染色法观察细胞增殖并用膜片钳技术记录细胞膜钾离子通道电流的变化。同时用3H－TdR掺入测定DNA合成的改变。结果：IGF－1可以明显地促进UMR106细胞的增殖，且使3H－TdR掺入率增加93．57％，在含有生长因子IGF－1（10^-8M)的培养液中培养12h后，钾通道电流比对照有明显增加，而且用钾通道阻断剂后，3H－TdR掺入率下降。结论：IGF－1可促进大鼠成骨样肉瘤的DNA合成和细胞增殖，且细胞膜钾通道的活动与此促增殖活动密切相关。     

复方丹参注射液对主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的 :探讨复方丹参注射液对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响。方法 :应用细胞计数法测定VSMC的数目 ,氚 -胸腺嘧啶核苷 (3 H -TdR)掺入实验观察VSMC的DNA合成 ,同时测定培养液中超氧化物歧化酶 (SOD)、脂质过氧化物 (LPO)的含量。结果 :复方丹参注射液剂量依赖性地抑制VSMC数目的增加和3 H -TdR掺入量 ,增强SOD的活性 ,降低LPO的含量。结论 :复方丹参注射液能明显抑制VSMC的增殖 ,作用机制可能与其清除氧自由基 ,抗脂质过氧化有关     

比那地尔与肺动脉平滑肌细胞的增殖和凋亡

目的:研究钾通道开放剂比那地尔(Pin)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡的作用.方法:通过非核素标记细胞增殖检测、3H-TdR掺入、形态学、流式细胞术等方法研究Pin对大鼠PASMC增殖和凋亡的作用.结果:25～500 μmol/L的Pin呈剂量依赖性地减少大鼠PASMC的细胞数和DNA合成,500 μmol/L的Pin显著减少S期和G2/M期的细胞比例,增加G0/G1期细胞的比例.50～500 μmol/L的Pin呈剂量依赖性地增加大鼠PASMC的凋亡率.结论:钾通道开放剂抑制大鼠PASMC增殖并促进其凋亡.钾通道开放剂可能成为今后预防和控制低氧性肺动脉高压血管重建的有效药物.     

甘草酸二铵对人肺癌细胞A549增殖作用的影响

目的研究甘草酸二铵对人肺癌细胞系A549增殖的影响。方法采用A549细胞体外培养的方法，以MTT、^3[H]-TdR掺入法及流式细胞术观察细胞的增殖情况。结果甘草酸二铵能促进A549细胞代谢MTT，增加其^3[H]的掺入率，并呈现剂量依赖性。在100ng／ml时，流式细胞术显示，甘草酸二铵可抑制A549细胞由静止期进入DNA合成期。结论甘草酸二铵能呈剂量依赖型抑制A549细胞的分裂增殖。     

钾通道与肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡关系中钙通道所起作用的研究

目的:观察钾通道与肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡关系中钙通道所起的作用.方法:将PASMC分为对照、钾通道阻断剂四乙胺TEA (开放剂比那地尔Pin)、钾通道阻断剂(开放剂) 钙通道阻断剂硝苯地平Nif(开放剂Bay K8644)组,采用非核素增殖试剂盒、3H-TdR掺入测定细胞增殖.将PASMC分为对照、钾通道开放剂、钾通道开放剂 钙通道开放剂组,采用细胞凋亡检测试剂盒测定细胞凋亡.结果:与对照组相比,10～20 mmol/L的钾通道阻断剂TEA显著增加PASMC细胞数(P<0.01),15～30 mmol/L TEA显著增加DNA合成(P<0.05, P<0.01).TEA 5 μmol/L Nif组中只有20 mmol/L TEA使DNA合成增加(P<0.05),其余浓度组与对照组均无统计学差异.TEA Nif组与TEA组相比,TEA浓度在10～25 mmol/L时2组细胞数相差显著(P<0.01),15～30 mmol/L TEA时2组DNA合成相差显著(P<0.05,P<0.01).与对照组相比,25～500 μmol/L Pin显著减少PASMC细胞数和DNA合成(P<0.01).Pin 1 μmol/L Bay组与Pin组相比,当Pin浓度为25～500 μmol/L时2组PASMC细胞数相差显著(P<0.01),当Pin浓度在50～500 μmol/L时DNA合成相差显著(P<0.01).Pin Bay组与对照组相比,50～500 μmol/L的Pin仍能显著减少PASMC细胞数(P<0.01), 25～500 μmol/L的Pin显著减少DNA合成(P<0.01).与对照组相比,50～500 μmol/L的Pin显著增加PASMC凋亡率(P<0.05,P<0.01).Pin 1 μmol/L Bay组与Pin组相比,细胞凋亡率无显著差异.结论:钙通道在钾通道与PASMC增殖关系中起重要作用,但在钾通道与PASMC凋亡关系中无明显作用.     

阻断p38MAPK信号通路对大鼠肝星状细胞活性及c-myc蛋白表达的影响

目的：研究 p38MAPK对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞（HSC）活性及 c-myc蛋白表达的影响,探讨影响酒精性肝纤维化的相关机制。方法用不同浓度的p38特异性阻断剂SB203580干预乙醛刺激的大鼠HSC,显微镜下观察细胞形态变化,MTT法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期分布,SABC法检测 c-myc蛋白表达。结果（1）乙醛刺激后的 HSC体积增大,增殖迅速,但随着加入 SB203580的药物浓度增大,细胞增殖变缓,体积变小,变形的细胞增多。（2）p38阻断剂 SB203580可抑制乙醛刺激的 HSC增殖,且高药物浓度组抑制效果更明显。（3）随着阻断剂浓度增高,G0及 G1期细胞增加,S期细胞逐渐减少,同时 c-myc蛋白表达阳性率减少。结论阻断 p38MAPK通路活性能抑制乙醛刺激的大鼠 HSC增殖,可能与下调 c-myc蛋白表达,阻止细胞由 G0/G1期进入 S期的DNA合成有关。     

番茄红素对乳腺癌MDA-MB-231细胞周期和增殖的影响

目的:研究番茄红素对体外培养的雌激素受体阴性(ER-)细胞MDA-MB-231的抑制作用及其可能作用机制。方法:采用MTT法和H3-TdR掺入法观察番茄红素对乳腺癌细胞增殖的影响;流式细胞仪观察同步化的细胞经番茄红素作用后细胞周期及凋亡的变化,RT-PCR检测cyclinD1、bcl-2、bax的mRNA表达的变化。结果:番茄红素抑制MDA-MB-231细胞的增殖和DNA合成、诱导其凋亡、改变细胞周期分布(使G0/G1期细胞增多、而S期和G2/M期细胞减少)。RT-PCR结果显示cyclinD1和bcl-2的mRNA表达水平下调,而bax的mRNA表达水平上调。上述作用呈剂量效应关系。结论:番茄红素可诱导MDA-MB-231细胞凋亡、改变细胞周期分布、影响cyclinD1、bcl-2、bax的mRNA的表达,从而达到抑制肿瘤细胞增殖的可能。     

延迟整流性K^＋通道在人肝癌细胞增殖中的作用

目的：研究延迟整流性Ｋ＾＋通道在人肝癌细胞增殖中的作用。方法：采用膜片钳技术的全细胞记录方式记录入肝癌细胞在不同浓度ＥＧＦ中延迟整流性Ｋ＾＋通道的跨膜电流。利用氚标记的胸腺嘧啶核苷掺入技术观察ＥＧＦ和Ｋ＾＋通道阻断剂（ＴＥＡ）对人肝癌细胞ＤＮＡ合成的影响。结果：发现表皮生长因子（ＥＧＦ）促进肝癌细胞增殖的同时使肝癌细胞膜离子通道的跨膜Ｋ＾＋电流增加。Ｋ＾＋通道阻断剂四乙胺（ＴＥＡ）能显著抑制ＥＧＦ     

延迟整流性K+通道在人肝癌细胞增殖中的作用

目的：研究延迟整流性Ｋ＋通道在人肝癌细胞增殖中的作用。方法：采用膜片钳技术的全细胞记录方式记录人肝癌细胞在不同浓度ＥＧＦ中延迟整流性Ｋ＋通道的跨膜电流。利用氚标记的胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）掺入技术观察ＥＧＦ和Ｋ＋通道阻断剂（ＴＥＡ）对人肝癌细胞ＤＮＡ合成的影响。结果：发现表皮生长因子（ＥＧＦ）促进肝癌细胞增殖的同时使肝癌细胞膜离子通道的跨膜Ｋ＋电流增加。Ｋ＋通道阻断剂四乙胺（ＴＥＡ）能显著抑制ＥＧＦ促进ＤＮＡ合成的作用,具有明显的量效关系和时间依赖性,但对细胞的活力无明显影响。结论：人肝癌细胞的增殖活动需要延迟整流性Ｋ＋通道参与。     

Effect of Calmodulin and Voltage-dependent Ca~(2+) Channel on the Proliferation of Heptoma Cells Induced by Epidermal Growth Factor

Epidermal growth factor(EGF) has been impli-cated as a hepatotrophic factor during liver regenera-tion.EGF plays a role in the proliferation of hep-atoma cells.In general,EGF induces tumor cells di-vision and proliferation through a series of signaltransduction by binding with EGF receptor(EGFR)and activate its thyrosine protein kinase and therebyinducing phosphoration of itself and its protein sub-strate[1] .This postreceptorsingnal transduction isas-sociated with phosphoylinositolpathw…     

The cellular and molecular mechanism of laminin-glycopeptides on anti-metastasis

Objective To further study the anti-metastasis mechanism of laminin-glycopeptides on carcinoma cell proliferation, apoptosis and the secretion of matrix metalloproteinases. Methods Human hepatocellular carcinoma cells in serum free medium were incubated on laminin-coated substrate with or without laminin-glycopeptides at a final concentration of 50 μg/ml. The total number of surviving cells after incubating for the indicated time was assayed by MTT assay. DNA synthesis of the incubated cells was detected by (3)H-TdR incorporation.Cell cycle was analysed by FACS.The mitotic index of Giemsa stained cells was assessed.Cell apoptosis was detected by both FACS and an acridine orange staining method.Matrix metalloproteinase secretion was analysed by gelatin zymography. Results The total number of surviving cells incubated on laminin in the absence of laminin-glycopeptides was significantly larger than that in the presence of laminin-glycopeptides. Laminin promoted (3)H-TdR incorporation of carcinoma cells, decreased the percentage of cells in G1 phase and increased the percentage of cells in S phase.In contrast, laminin-glycopeptides could inhibit the effect of laminin as shown by (3)H-TdR incorporation and cell cycle analysis. The percentage of cells in G2+M phase and the mitotic index among various groups showed no significant difference.Matrix metalloproteinases secretion from cells treated by laminin-glycopeptides was much less compared to that without the treatment by laminin-glycopeptides. Conclusion Laminin may stimulate cell proliferation, while laminin-glycopeptides could significantly inhibit the effect of laminin by inhibiting DNA synthesis and arresting the carcinoma cell cycle from G1 to S phase.These effects may inhibit not only tumor growth of the primary carcinoma, but also the establishment of metastases at ectopic tissues. Laminin-glycopeptides could also inhibit the secretion of matrix metalloproteinases from carcinoma cells and this may contribute to their decreased invasive and metastatic phenotype. This study further revealed the cellular and molecular mechanism of laminin-glycopeptides on anti-metastasis.     

Effect of calmodulin and voltage-dependent Ca<Superscript>2+</Superscript> channel on the proliferation of heptoma cells induced by epidermal growth factor

Summary The effect of thyrosine kinase, calmodulin and voltage-dependent Ca²⁺ channel on the proliferation of hepatoma cells induced by EGF was studied. Hepatoma cell line SMMC7721 was cultured in RPMI1640 serum-free medium. DNA synthesis rate of hepatoma cells was measured by H-TdR incorporation. 10⁻⁹ mol/L EGF could significantly stimulate the proliferation of hepatoma cells (P<0.05), and this effect might be significantly inhibited by tyrosine kinase inhibitor (P<0.001). Calmodulin inhibitor W-7 had no effect on the basic phase of cultured hepatoma cells (P>0.05), but it had very significantly inhibitory effect on the proliferation of hepatoma cells induced by EGF (P<0.001). Voltage-dependent Ca²⁺ channel inhibitor Varapamil had no inhibition on the proliferation of hepatoma cells induced by EGF (P>0.05). It had no effect on the basic phase of cultured hepatoma cells, (P>0.05). It is suggested that tyrosine kinase and Ca²⁺-calmodulin-dependent pathway may play a critical role on the proliferation of heptoma cells induced by EGF and voltage-dependent Ca²⁺ channel is independent of the effect of EGF. WU Binwen, male, born in 1968, M. D., Ph.D.     

Study on Lymphocyte Activation and Proliferation Induced by Anti-CD3 McAb

ＳｔｕｄｙｏｎＬｙｍｐｈｏｃｙｔｅＡｃｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎＩｎｄｕｃｅｄｂｙＡｎｔｉ－ＣＤ３ＭｃＡｂＬＩＭｉｎｇ（李鸣）；ＹＡＮＧＪｉｎｇ（杨敬）；ＳＨＥＮＧｕａｎ－ｘｉｎ（沈关心）（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＩｍｍｕｎｏｌ...     

奥曲肽对食管癌细胞株Eca9706增殖的影响

目的 研究奥曲肽对食管癌细胞株Eca9706增殖的影响。方法 将不同浓度的奥曲肽加入食管癌细胞．用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制效应。^3H-胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)掺入实验测定对DNA合成的影响,显微镜下观察细胞形态变化，流式细胞仪(FCM)检测细胞周期。结果 奥曲肽对Eca9706细胞的生长及DNA合成均有抑制作用。显微镜下可见明显的细胞病变，细胞变圆、变小、脱落，FCM显示奥曲肽作用后，G0／G1期细胞增多，S期、G2／M期细胞减少。结论 奥曲肽能明显抑制食管癌细胞株Eca9706的DNA合成，并能形成G0／G1期阻滞，使细胞存活率下降，表明奥曲肽显著抑制Eca9706的增殖。     

流式细胞术法与3H-TdR掺入法观察细胞增殖的相关性研究

目的:研究3H-TdR掺入法和流式细胞术法研究指标的相关性,探讨用流式细胞术法来替代3H-TdR掺入法的数据依据.方法:用3H-TdR掺入法和流式细胞术法对细胞DNA合成和有丝分裂进行检测.结果:流式细胞仪指标与3H-TdR掺入实验指标呈高度的正相关关系,相关系数分别为:PI与cpm相关系数为r=0.964;SPF与3H-TdR,掺入的相关悉数r=0.876,且经检验有统计学意义(P＜0.01).结论:主动脉平滑肌细胞增殖指数、S期细胞分数与3H-TdR掺入值密切相关.     

渗透浓度对肝癌细胞增殖的影响

目的 :观察渗透浓度对人肝细胞肝癌 (HHCC)细胞系增殖的影响 ,为容积调控氯离子通道参与细胞增殖提供进一步证据。　方法 :改变培养液的渗透浓度 ,应用噻唑蓝比色分析法及细胞计数法观察细胞增殖情况 ;流式细胞仪检测细胞周期时相。　结果 :细胞在低渗培养液中增殖旺盛 ,在高渗培养液中增殖减慢 (P <0 .0 1 )。经高渗处理 4 8h的HHCC细胞G1 期细胞比例比对照组明显增高 ,S期及G2 期细胞比例明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,而经低渗处理 4 8h的细胞 ,G1 期细胞比例明显降低 ,S期及G2 期细胞比例明显高于对照组 ,并且低渗对细胞周期的影响可被氯离子通道阻断剂尼氟灭酸 (NFA)减弱 (P <0 .0 5 )。　结论 :渗透浓度可以通过影响细胞增殖周期而影响细胞增殖。     

HERG通道阻断剂对胃癌细胞增殖能力的影响

目的探讨HERG通道阻断剂对胃癌细胞增殖能力的影响。方法应用HERG通道阻断剂干预胃癌细胞的HERG电流后,采用MTT法对胃癌细胞进行生长曲线的描绘;采用平板克隆形成实验检测胃癌细胞的克隆形成能力;采用流式细胞计数检测胃癌细胞细胞周期分布的变化。结果HERG通道阻断剂对胃癌细胞的增殖有抑制作用,而对GES细胞的增殖则无明显抑制作用;随着药物剂量的增加及作用时间延长,其抑制作用显著增强。HERG通道阻断剂降低了胃癌细胞的克隆形成能力（P〈0．05）,阻止胃癌细胞由G1期进入S期。结论HERG通道阻断剂可抑制胃癌细胞的增殖和克隆形成能力,并抑制胃癌细胞G1／S期转化,说明HERG电流在胃癌细胞的增殖中发挥作用,HERG蛋白是一个潜在的胃癌生物治疗的靶分子。