腺苷对豚鼠急性声损伤后听力暂时性阈移的保护作用

目的:研究腺苷在噪声造成急性声损伤中对听力的保护作用,探讨腺苷对耳蜗周围神经系统所起的神经调质作用.方法:豚鼠暴露118 dB SPL白噪声30 min,同时耳蜗外淋巴灌流单纯或含1 mmol/L腺苷的人工外淋巴液,测试噪声暴露前、后由click和各频率短纯音所诱发听神经复合动作电位的听阈,计算阈移值.结果:对照组噪声暴露后click测试的即刻阈移(TTS)为(40±6.68) dB,给药组为(20±5.70) dB;对照组短纯音测试TTS在32～50 dB;给药组测试TTS在20～35 dB;暴露2 h后对照组阈移值增大4～8 dB,给药组无明显变化.结论:腺苷对急性声损伤暂时性听阈偏移有一定的保护作用.     

噪声对豚鼠耳蜗外淋巴液中氨基酸浓度的影响

目的:观察噪声暴露于对耳蜗外淋巴液中氨基酸浓度的影响.方法:安静组和噪声组豚鼠分别暴露于安静环境(40 dB SPL)和白噪声(115 dB SPL) 2 h,抽取两组动物耳蜗外淋巴液,高效液相色谱(HPLC)荧光分光检测分析氨基酸浓度.结果:安静组动物耳蜗外淋巴液中含有14种氨基酸,与正常哺乳动物脑脊液氨基酸组成和含量十分接近.耳蜗外淋巴液中谷氨酸含量安静组为(6.6±0.2) μmol/L,而噪声组为(10.3±1.1) μmol/L, 后者比前者高55％,P<0.01.结论:噪声暴露可使耳蜗外淋巴中谷氨酸浓度明显提高, 推测这种提高可能和噪声导致毛细胞过度释放谷氨酸和谷氨酸转运体不能正常运转有关.     

Noise-induced nitrotyrosine increase and outer hair cell death in the guinea pig cochleaWeiju Hana, *, Xiaorui Shib, and Alfred Nuttallb,c

中文 目的：观察噪声损伤引起的豚鼠耳蜗内硝基酪氨酸变化,探讨耳蜗外毛细胞的死亡机制。方法：豚鼠随机分为噪声暴露组、SIN1耳蜗灌流组和对照组（每组各10只）,噪声暴露组动物暴露于120dBSPL的宽带噪声环境中每天4小时,连续2天;耳蜗灌流组向动物耳蜗内灌流的5 mg/ml外源性氮自由基供体SIN1 30分钟。豚鼠耳蜗分离解剖后,用碘化丙啶（PI）染色细胞核,以便观察噪声损伤前后细胞核形态变化,利用免疫荧光组织化学方法检测耳蜗外毛细胞及耳蜗外侧壁内硝基酪氨酸的分布及噪声损伤后的变化;按表面制备法行耳蜗铺片,激光共聚焦显微镜下观察耳蜗外毛细胞及耳蜗外侧壁的荧光信号变化。结果:(1) 噪声暴露及耳蜗外淋巴灌流SIN1后均发生耳蜗外毛细胞凋亡和坏死。（2）在正常情况下,耳蜗外毛细胞内有少量硝基酪氨酸分布,在暴露于上述噪声后,耳蜗外毛细胞内的硝基酪氨酸显著增加;（3）发生凋亡的耳蜗外毛细胞的细胞核及其周围硝基酪氨酸显著增加;（4）在正常情况下,耳蜗外侧壁有少量硝基酪氨酸分布,噪声暴露后,耳蜗外侧壁血管纹内的硝基酪氨酸显著增加。结论：本研究结果显示噪声刺激导致的耳蜗内硝基酪氨酸增加与耳蜗外毛细胞死亡有关,提示氮自由基参与了噪声性听力障碍的耳蜗病理损伤。     

声损伤中声预处理的听力保护作用及其MDA 机制

目的:观察声预处理对噪声性听力损失的保护作用,并从氧自由基途径探讨其机制.方法:32只雄性豚鼠随机分为声预处理 强噪声暴露组(A组),单纯强噪声暴露组(B组),仅预处理组(C组),无噪声对照组(D组),每组8只.A组豚鼠先经声预处理(87 dB白噪声暴露10 d,每天5 h),无噪声情况下恢复48 h后再暴露110 dB白噪声5 h.B组不经声预处理,直接暴露相同110 dB白噪声5 h.C组豚鼠仅接受声预处理(同A组).A、B、C 3组动物在噪声暴露前后分别测定听觉脑干诱发电位(ABR)阈值,D组动物在实验开始和结束各测定1次ABR.分别计算4组动物听力阈移.在最后1次测定ABR之后,将A、B、C、D 4组动物同时处死,取耳蜗,用TBA荧光法测定耳蜗组织匀浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量. 结果:C、D组动物阈移平均值范围为0.83～2.5 dB和0～1.36 dB,两组相比无统计学差异.A、B两组动物在强噪声暴露后24 h,A组click平均阈移为12.5 dB,短纯音(4、6、8 kHz)平均阈移范围为13.75～16.25 dB;B组click平均阈移为30.83 dB,短纯音(4、6、8 kHz)平均阈移范围为35～35.83 dB,明显高于A组(P＜0.05).A、B、C、D 4组动物耳蜗组织MDA含量为(164±18)、(188±24)、(149±14)和(146±11) nmol/L.统计结果表明,B组动物耳蜗组织MDA含量明显高于A组、C组、D组(P<0.05);而A组与C组和D组动物耳蜗组织MDA含量没有统计学差异. 结论:声预处理(87 dB 白噪声 10 d,每天5 h)不会造成豚鼠听力损失,并可以减轻随后强噪声(110 dB 白噪声 5 h)引起的听力损失;声预处理可能是通过降低MDA含量而发挥听力保护作用.     

谷氨酸对豚鼠耳蜗传入神经元的兴奋毒性损害

目的：观察不同剂量谷氨酸导致豚鼠耳蜗传入神经元兴奋性损伤性质及耳蜗形态、电生理改变。方法：经耳蜗鼓阶灌注高浓度谷氨酸(Glu-H,20 mmol/L,10 μl)、低浓度谷氨酸(Glu-L,10 mmol/L,10 μl)后检测不同时点复合动作电位 (CAP)反应阈,并观察耳蜗显微和超微结构变化。 结果：①Glu-L组(≤1 d)及Glu-H组CAP反应阈与正常对照组比较明显提高（P<0.001）;Glu-L组（≥1周）CAP反应阈与正常对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。②两给药组（Glu-H,Glu-L）蜗轴半薄切片Ⅰ型螺旋神经节细胞部分出现空泡样变化,胞浆变淡,胞核皱缩;正常对照组与给药组（Glu-H）之间螺旋神经节细胞病变率比较差异有统计学意义(P<0.05)。③两给药组电镜下耳蜗传入神经树突末梢、有髓神经纤维、Ⅰ型螺旋神经节细胞有变性坏死,呈明显的剂量依赖性,Glu-L组的神经元病变4周内可基本恢复,而Glu-H组进行性加重,由变性发展到坏死。结论：谷氨酸鼓阶灌注可导致豚鼠耳蜗传入神经元形态和功能的损害。小剂量（10 mmol/L）的谷氨酸可导致耳蜗传入神经系统的可逆性损害,而大剂量(20 mmol/L)的则可导致不可逆的神经元损害。     

豚鼠耳蜗损伤引起的自发性耳声发射实验观察

目的 观察由耳蜗轻度损伤引起的豚鼠自发性耳声发射（SOAE）的听力学特性。方法 在耳蜗手术中引起高频听力损失较轻的23只豚鼠中发现18只有高频端SOAE。对其中SOAE持续时间较长的7只豚鼠在损伤后不同时间观察SOAE的振幅和持续时间。用白噪声刺激对侧耳,观察SOAE的抑制现象。对其中1只豚鼠的2个SOAE谱峰所产生的畸变产物耳声发射（DPOAE）进行分析。结果 术后观察到SOAE的7只豚鼠16 kHz以上的耳蜗复合动作电位的听阈阈移大于15 dB,小于24 dB。而16 kHz以下的阈移多数小于10 dB,所有阈移均在2~4 h内恢复。SOAE频率均在15 kHz以上,这与耳蜗开窗的部位的特征频率范围基本一致。这种SOAE也可以被对侧耳噪声刺激所抑制。观察到1例豚鼠的SOAE的2个谱峰产生畸变产物（2F1-F2）。结论 耳蜗轻度损伤后激发外毛细胞自发放电,引起振荡,产生SOAE,这种SOAE与其它原因所致的SOAE以及诱发性耳声发射一样,与另一个具有一定频比的纯音相互作用,可产生DPOAE,并可被对侧噪声刺激抑制,提示SOAE受到橄榄耳蜗束传出系统的调控。     

慢性次声暴露对豚鼠听阈及耳蜗毛细胞的影响

目的　观察慢性次声暴露对豚鼠听阈及耳蜗毛细胞形态学的影响和作用特点 .方法　通过听觉脑干诱发电位测试 (ABR)及扫描电镜分别观察了豚鼠在 8Hz,1 2 5 d B SPL ,1次· d- 1 ,2 h/次的次声暴露条件下 ,其听阈和耳蜗毛细胞听毛形态的变化情况 .结果　豚鼠在 click声及 9个频率的短纯音的听阈均有升高 ,最大阈移为 2 6 d B (4k Hz短纯音 ) ,最小阈移为 1 8d B(click声 ) ;豚鼠听阈的升高缺乏频率选择性 ,各频率阈移间无显著差异 .扫描电镜观察可见耳蜗毛细胞出现了以外毛细胞为主的损伤表现 ,且由底周至顶周外毛细胞听毛的损伤逐渐加重 .结论　慢性次声暴露确可使豚鼠听力出现下降 ,但与白噪声相比其又有自己的声损伤特点 ,可能在声损伤机制上二者是有差别的 .     

隐性听力下降小鼠耳蜗内毛细胞突触的病理改变

 目的 探讨噪声暴露后出现暂时性阈移的小鼠在听觉反应阈值完全恢复正常后耳蜗内毛细胞突触的病理改变。方法 将小鼠分为正常对照组和实验组,实验组小鼠进行强度98 dB SPL、时长2 h的噪声暴露,建立暂时性阈移模型。将对照组和暂时性阈移模型小鼠进行全基底膜铺片并行免疫荧光染色,共聚焦显微镜拍照成像并观察细胞形态。利用耳蜗长度计算耳蜗所处的频率位置,最后用图形处理软件对突触结构进行三维重建,观察对照组小鼠和实验组小鼠的耳蜗内毛细胞突触前、后结构的空间分布规律及其病理改变特点。结果 对照组小鼠耳蜗内毛细胞的突触复合体有明显的分布特点,每个内毛细胞通过5~30个突触与耳蜗神经纤维形成突触连接,靠近蜗轴侧的突触前结构体积较大,与之相匹配的突触后结构体积较小。靠近柱细胞侧的突触前结构体积偏小,与之相匹配的突触后结构体积偏大。实验组小鼠在高强度噪声暴露后第2天听觉测试结果显示,听性脑干反应(auditory brain-stem response, ABR)和畸变产物耳声发射(distortion product otoacoustic emission, DPOAE)阈值升高30~40 dB,2周后再次测试显示阈值恢复正常,但是ABR的Ⅰ波波幅下降46.1%,且耳蜗内毛细胞的突触复合体结构数量也减少了41.3%。 而内毛细胞和螺旋神经节细胞没有明显丢失。结论 听觉阈值功能测试对判断小鼠耳蜗内毛细胞突触的损害和丢失不敏感;而听觉阈上功能测试对评价小鼠耳蜗内毛细胞突触的损害和丢失相对敏感。     

外源性谷氨酸对内耳毛细胞及听阈的影响

目的: 观察外源性谷氨酸对内耳毛细胞及听阈的影响. 方法: 将成年豚鼠随机分为3组,经耳蜗钻孔分别给予谷氨酸(Glu)(5, 10, 20 mmol/L). 左耳为给药耳,右耳为对照耳,采用听觉脑干诱发电位(ABR)、畸变产物耳声发射(DP-OAE)、耳蜗铺片、硝酸银染色及透射电镜技术,观察Glu处理前后不同时间的听力学、形态学改变. 结果: 术耳给药后,1 kHz ABR平均阈值分别为(25.0±3.4),(33.9±2.7),(32.2±4.2) dB,8 kHz分别为(28.9±3.7),(38.3±2.8),(37.8±3.8) dB,与对侧耳相比有显著差异(P<0.05). 耳声发射示: 给予低浓度Glu,图形在本底噪声之上. 随浓度的加大,耳声发射不能引出. 形态学改变: 耳蜗注入低浓度Glu时,外毛细胞(外3排)有轻微的错乱,内毛细胞较连贯. 随浓度的加大,外毛细胞三排都有较明显的改变,出现错乱、缺失. 内毛细胞出现缺失,形态改变. 与听力学变化一致.结论: Glu对豚鼠内耳毛细胞具有毒性作用.     

盐酸山莨菪碱对豚鼠噪声性听力损伤的保护作用

目的:观察盐酸山莨菪碱(654-2)对豚鼠噪声性听力损伤的保护作用.方法:30只豚鼠随机分为对照组、损伤组与654-2防治组.损伤组与654-2防治组均给予噪声暴露.654-2防治组在噪声暴露前30 min肌内注射654-2,另2组同法注射生理盐水.各组豚鼠在噪声暴露前与暴露后3 d、14 d、28 d分别测ABR阈值,并采用硫代巴比妥钠荧光比色法测定耳蜗MDA含量.结果:噪声暴露后3 d、14 d、28 d损伤组和防治组ABR阈移与耳蜗MDA含量均较对照组升高(P＜0.01);654-2防治组噪声暴露后14 d与28 d时,以上2指标均低于损伤组(P＜0.05或0.01).结论:654-2可部分减轻噪声所致的听力损失.其机制可能为654-2在一定程度上清除了噪声产生的过量过氧化物从而保护了毛细胞,使听力得到部分恢复.     

Prophylactic effect of Ca2+- deficient artificial perilymph perfusion on noise-induced hearing loss

Theioncompositionofcochlearendolymphissimilartointracellularfluid PreviousstudiesshowedthatCa2 + inendolymphplaysanimportantroleinhearing 1　NoiseexposureinducesincreasedCa2 + concentrationalongwithlinearABRthresholdshifts 2 　TheincreaseinCa2 +concentrationmaybecausedbydifferentmechanismssuchasdamagetothestriavascularis (SV) ,calciuminthetectorialmembrane (TM)orstereociliaofhaircellspossiblybeingreleasedintothelymphasfreeCa2 + afterloudnoise exposureandCa2 + diffusingfromperilymphintoint…     

Suppressing effect of substance P receptor antagonist on sound evoked potentials recorded from the guinea pig cochlea

ＴｈｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ（ＳＰ）ａｎｄｉｔｓｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｔｈｅｃｅｎｔｒａｌａｎｄｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｙｓｔｅｍ,１,２ｔｏｇｅｔｈｅｒｗｉｔｈｉｔｓｐｒｏｎｏｕｎｃｅｄｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃ...     

卡那霉素内耳中毒对豚鼠外淋巴液中SOD含量的影响

目的：通过对过豚鼠实验性卡那霉素（ＫＭ）内耳中毒时血清及耳蜗外淋巴液中ＳＯＤ含量的检测，以探讨ＫＭ耳毒性内耳损伤自由基产生与可能的作用机制。方法：用放射免疫法和硫代巴比妥酸荧光法测定豚鼠实验性ＫＭ内耳中毒时血清和耳蜗外淋巴液中ＳＯＤ及耳蜗组织中丙二醛（ＭＤＡ）的含量，测定了内耳中毒有后脑干诱发电位（ＡＢＲ）阈移变化。结果：应用ＫＭ１２ｄＡＢＲ阈移明显增高的豚鼠ＭＤＡ含量也相应明显增高，而血清及外淋     

热休克蛋白70的诱导表达对豚鼠耳蜗听功能的影响

OBJECTIVE: To investigate the effect of evoked heat shock protein 70 (HSP70) expression on the hearing function of the cochlea in guinea pigs. METHODS: Guinea pigs were divided into pre-exposure group (pre-treated with white noise exposure at 100 dB SPL for 45 min) and none pre-exposure group. Auditory brainstem response (ABR) thresholds were recorded at 12, 60 and 108 h after the animals in both groups were exposed to loud white noise (125 dB SPL, 90 min). RESULTS: HSP70 expression was evoked by pre-treatment with white noise (100 dB SPL, 45 min). There was no significant difference of ABR thresholds between the 2 groups (P>0.05) at 12 h after exposure to loud noise, while ABR thresholds became lower in pre-exposure group than in none pre-exposure group (P<0.01) at both 60 and 108 h. In the pre-exposure group, ABR thresholds at 108 h were significantly lower than that measured at 60 h (P<0.05), but which was not the case in none pre-exposure group. CONCLUSION: HSP70 expression induced by pre-exposure to noise protects the hearing function of the cochlea in guinea pigs.     

热休克蛋白70的诱导表达对豚鼠耳蜗听功能的影响

目的探讨热休克蛋白(heat shock protein,HSP)70的诱导表达对豚鼠耳蜗听功能的影响。方法将经白噪声预刺激(100 dB SPL,45 min)诱导耳蜗产生HSP70的豚鼠与无预刺激的正常豚鼠同时暴露于强噪声(125 dB SPL,90 min)中,观察强噪声刺激后不同时间的听性脑干反应(ABR)阈值。结果100 dB SPL的白噪声能诱导耳蜗HSP70的表达。强刺激后12 h,两组间ABR阈值无显著差异(P>0.05);强刺激后60 和108 h,预刺激组的ABR阈值均低于无预刺激组(P<0.01)。在预刺激组内,108 h ABR阈值低于60 h ABR阈值(P<0.05),而在无预刺激组内,108和60 h ABR阈值无显著差异(P>0.05)。结论经预刺激诱导耳蜗产生的HSP70对豚鼠耳蜗听功能具有保护作用。     

Solid Lipid Nanoparticles Loaded with Edaravone for Inner Ear Protection After Noise Exposure

Background:Antioxidants and the duration of treatment after noise exposure on hearing recovery are important.We investigated the protective effects of an antioxidant substance,edaravone,and its slow-re...     

Cochlear function after selective spiral ganglion cells degeneration induced by ouabain

Background Ouabain, a cardiac glycoside that specifically binds to Na/K-ATPase and inhibits its activity, was applied to gerbils to develop a method for studying auditory neuropathy. Methods Ouabain was applied to the round window of the cochlea in each gerbil by using a piece of gelfoam with 3 μl or 24 μl （1 mmol/L） ouabain solution. The changes of the threshold of auditory brainstem response, cochlear function round window electrocochleography, as well as the morphological changes of the spiral ganglion cells of the cochlea were observed after application of ouabain for 24 hours or 96 hours. Results In ouabain treated gerbils, auditory brainstem response and compound action potential thresholds showed either elevation or no response at all. However, the thresholds of cochlear microphonic and distortion product otoacoustic emissions were not affected. Degeneration and necrosis of some spiral ganglion cells in ears with applications of ouabain （24 hours, 3 μl, 1 mmol/L; 96 hours, 24 μl, 1 mmol/L ouabain）. The number of spiral ganglion cells was decreased （24 hours, 3 μl, 1 mmol/L ouabain） or near to a total loss （96 hours, 24 μl, 1 mmol/L ouabain）. Conclusions These results indicate a high degree of independence between the spiral ganglion ceils and the outer hair cell systems in the cochlear transduction mechanism. The method used in this study would provide a valuable tool for studying auditory neuropathy.