Wortmannin与U73122对缺失磷脂酶C－γ1细胞迁移的影响

0 引言 磷脂酶C-γ1(phospholipase C-γ1,PLC-γ1)与三磷酸肌醇激酶(phosphatidylinositol-3 kinase,PI-3K)是生长因子介导的信号传递过程中的两个重要信号分子。尽管敲除plcgl基因后的小鼠不能正常发育，并于胚胎第9天死亡［1］；缺失PLC-γ1小鼠胚胎成纤维细胞(PLC-γ1-/-)在体外却能正常生长，且在表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)刺激下其受体激活与内吞、DNA合成、迁移能力等与正常细胞(PLC-γ1+/+)相似［2］。但PLC-γ1-/-并不出现其近亲PLC-γ2的代偿表达，PLC-γ1-/-细胞株迁移过程中PLC-γ1的信号传递功能是否由其他PLC同工酶或PI-3K通路代偿，目前还不清楚。为探讨PLC-γ1通路在信号传递过程中的代偿机制，本研究检测了PLC、PI-3K特异性抑制剂U73122、Wortmannin对PLC-γ1-/-细胞的EGF介导细胞迁移的影响。     

荧光素酶标记转基因人胚胎干细胞的活体观察

【目的】 研究荧光素酶作为报告基因在活体定量和定位监测转基因人胚胎干细胞移植的动向的可行性｡ 【方法】 酶切pGL3 base质粒获得荧光素酶基因,酶切LTBR-uGIP获得载体骨架,连接荧光素酶基因和载体骨架构建慢病毒载体pULP,按照常规方法包装和扩增｡ULP转导293T细胞以检测其荧光素酶的表达｡人胚胎干细胞H9 (P40)以W3R细胞为饲养层常规培养,人胚胎干细胞转导iDuet101-IDO (吲哚胺2,3双氧化酶,IDO) 或iDuet101-CTLA4Ig(细胞毒性T细胞相关分子4免疫球蛋白,CTLA4Ig),经过筛选后再次转导ULP,即iDuet101-ULP(有荧光素酶表达)､iDuet 101-CTLA4Ig-ULP(有荧光素酶和CTLA4Ig表达),iDuet101-IDO-ULP(有荧光素酶和IDO表达)｡经过2次转导的3组人胚胎干细胞分别移植于5只BALB/C小鼠(实验组,共15只)和2只RAG-/- γC-/-小鼠(对照组,共6只),在注射后当日､3､5､7､14､21 d和28 d检测荧光素酶信号｡ 【结果】 在体外最少22 000个两次转导外源基因的人胚胎干细胞可检测到荧光信号｡异种移植只需要5 × 106的细胞即可检测到荧光信号,iDuet 101-CTLA4Ig-ULP组与iDuet101-IDO-ULP组RAG-/- γC-/-小鼠在移植后荧光信号逐渐增强,观察期间逐渐上升到3 × 107电子和1.5 × 107电子, iDuet101-ULP组两只RAG-/- γC-/-小鼠在移植后第7天因伤口感染退出实验｡3组BALB/C小鼠在第7天荧光信号消失,直到移植后两个月信号没有恢复｡ 【结论】 构建慢病毒载体共表达抗生素抗性基因和目的基因,结合W3R细胞作为饲养层细胞以筛选细胞保证外源基因的表达｡在细胞移植免疫缺陷小鼠后,荧光素酶基因可用于活体定量和定位监测转基因人胚胎干细胞移植的动向｡     

Wnt诱导分泌蛋白3对软骨细胞增殖分化的作用

目的研究重组人Wnt诱导分泌蛋白3(rhWISP3)对人永生化软骨细胞株T/C-28a2增殖和分化的作用,探讨其作用是否通过胰岛素样生长因子-1(IGF-1)信号通路发生。方法分别应用不同浓度rhWISP3干预T/C-28a2细胞株,用[3H]-脱氧胸腺嘧啶([3H]-TdR)摄入法测定细胞增殖活性。rhWISP3与重组人IGF-1蛋白(rh IGF-1)同时干预T/C-28a2细胞,[3H]-TdR摄入法测定细胞增殖活性。免疫印记法检测不同浓度rhWISP3干预的T/C-28a2细胞Ⅱ型胶原表达变化。用IGF-1信号通路阻断剂JB1干预细胞后,免疫印记法检测rhWISP3对T/C-28a2细胞Ⅱ型胶原表达的影响。结果 rh-WISP3对软骨细胞增殖无明显影响。rh IGF-1明显促进T/C-28a2细胞增殖,rhWISP3对rh IGF-1促T/C-28a2细胞增殖作用无影响。rhWISP3明显促进软骨细胞Ⅱ型胶原的表达,呈浓度依赖性。rh IGF-1干预T/C-28a2细胞能明显促进软骨细胞Ⅱ型胶原的表达。IGF-1信号通路阻断剂JB1能阻断rh IGF-1促进软骨细胞Ⅱ型胶原的表达作用,不能阻断rhWISP3促进软骨细胞Ⅱ型胶原的表达作用。结论 rhWISP3对T/C-28a2细胞增殖作用无明显影响,呈浓度依赖型促进Ⅱ型胶原的表达,这种促表达的作用可能是通过独立于IGF-1信号通路而产生。     

磷脂酶C-γ1在小鼠胚胎组织表达的免疫细胞化学研究

目的 研究磷脂酶C-γ1在小鼠胚胎各组织的表达及规律。方法 制备小鼠胚胎标本，进行石蜡包埋并切片，采用免疫细胞化学方法检测磷脂酶C-γ1的表达。结果 各种胚胎组织中软骨、骨骼肌、心肌、肾脏集合小管、结缔组织、脑等均有不同程度的表达。结论 磷脂酶C-γ1相关的信号通路对于小鼠胚胎细胞（软骨、骨骼肌、肾脏集合小管、结缔组织、脑神经元等）的发育可能具有重要的生物学意义。     

补肾安胎冲剂调节TGF-β1及其下游PI3K/AKT信号通路改善复发性流产小鼠母胎界面血管生成

目的研究补肾安胎冲剂对复发性流产(RSA)小鼠蜕膜组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)相关蛋白的影响,探讨其降低胚胎流产率的作用机制。方法以CBA/J×Balb/c小鼠合笼建立正常妊娠小鼠模型。以DBA/2×CBA小鼠合笼建立RSA小鼠模型,将其随机分为模型组,黄体酮组,补肾安胎冲剂高、中、低剂量组。每组每日以相应药物灌胃,连续干预15 d后处死小鼠,收集样本,肉眼观察各组孕鼠胚胎丢失情况;HE染色法观察每组小鼠蜕膜组织病理形态学改变;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)、TGF-β1、PI3K、AKT的含量;采用免疫组化法及蛋白质印迹(Western blot)法检测各组小鼠蜕膜组织中TGF-β1、PI3K、AKT的蛋白表达。结果与正常组相比,模型组小鼠胚胎丢失率升高(P<0.01),血清中E2、P、TGF-β1、PI3K、AKT的含量均下降(P<0.01),蜕膜组织中TGF-β1、PI3K、AKT蛋白表达均下降(P<0.01)。与模型组相比,经药物干预后的小鼠胚胎丢失率均降低(P<0.01),血清中E2、P、TGF-β1、PI3K、AKT的含量均增加(P<0.01),蜕膜组织中TGF-β1、PI3K、AKT的蛋白表达水平均升高(P<0.01),其中补肾安胎冲剂高剂量组更为显著。结论补肾安胎冲剂能降低RSA小鼠流产率,其机制可能是通过上调TGF-β1/PI3K/AKT信号通路,促进RSA小鼠母胎界面血管生成,从而发挥保胎作用。     

尿γ-GT与β2-MG测定在小儿肾病诊断中的应用

尿 β2 -微球蛋白 (β2 - MG)含量作为肾脏疾病患者的有用诊断指标已有大量报道 [1 ,2 ] ,而对尿 γ-谷氨酰转移酶 (γ-GT)与临床疾病关系的报道尚少。某些肾脏疾病患者的尿 γ- GT活性也可增高 [2 ,3] 。我院对 74例各种肾脏疾病患儿及12 5例正常儿童尿γ- GT活性与尿β2 - MG含量进行对照测定 ,以探讨它们在小儿肾脏疾病诊治中的应用价值。1　临床资料1.1　研究对象　正常儿童 12 5例取自本院体检儿童 ,年龄 2～ 14岁。 74例肾脏疾病患儿为本院住院期间经各种检查确诊的患儿 ,其中 2 3例肾病综合征 ,年龄 2～ 12岁 ;18例紫癜肾 ,年龄 …     

荧光素酶标记转基因人胚胎干细胞的活体观察

【目的】研究荧光素酶作为报告基因在活体定量和定位监测转基因人胚胎干细胞移植的动向的可行性。【方法】酶切pGL3 base质粒获得荧光素酶基因,酶切LTBR-uGIP获得载体骨架,连接荧光素酶基因和载体骨架构建慢病毒载体pULP,按照常规方法包装和扩增。ULP转导293T细胞以检测其荧光素酶的表达。人胚胎干细胞H9（P40）以W3R细胞为饲养层常规培养,人胚胎干细胞转导iDuet101-IDO（吲哚胺2,3双氧化酶,IDO）或iDuet101-CTLA4Ig（细胞毒性T细胞相关分子4免疫球蛋白,CTLA4Ig）,经过筛选后再次转导ULP,即iDuet101-ULP（有荧光素酶表达）、iDuet101-CTLA4Ig-ULP（有荧光素酶和CTLA4Ig表达）,iDuet101-IDO-ULP（有荧光素酶和IDO表达）。经过2次转导的3组人胚胎干细胞分别移植于5只BALB/C小鼠（实验组,共15只）和2只RAG-/-γC-/-小鼠（对照组,共6只）,在注射后当日、3、5、7、14、21d和28d检测荧光素酶信号。【结果】在体外最少22000个两次转导外源基因的人胚胎干细胞可检测到荧光信号。异种移植只需要5&#215;10^6的细胞即可检测到荧光信号,iDuet 101-CTLA4Ig-ULP组与iDuet101-IDO-ULP组RAG-/-γC-/-小鼠在移植后荧光信号逐渐增强,观察期间逐渐上升到3&#215;10^7电子和1.5&#215;10^7电子,iDuet101-ULP组两只RAG-/-γC-/-小鼠在移植后第7天因伤口感染退出实验。3组BALB/C小鼠在第7天荧光信号消失,直到移植后两个月信号没有恢复。【结论】构建慢病毒载体共表达抗生素抗性基因和目的基因,结合W3R细胞作为饲养层细胞以筛选细胞保证外源基因的表达。在细胞移植免疫缺陷小鼠后,荧光素酶基因可用于活体定量和定位监测转基因人胚胎干细胞移植的动向。     

宫清方诱导T细胞亚群偏移减轻药物流产小鼠子宫出血的实验研究

目的:探讨宫清方诱导T细胞亚群偏移减轻药物流产后子宫出血的作用与机制。方法:孕鼠40只,随机分为米非司酮(RU486)组[1.5 mg/(kg.d)-1]及宫清方小[77.04 mg/(kg.d)-1]、中[154.08 mg/(kg.d)-1]、大[308.16 mg/(kg.d)-1]剂量组,各10只。改良碱性正铁血红素法检测子宫出血量,流式细胞术检测母胎界面Th1(CD3+CD4+IFNγ+)、Th2(CD3+CD4+IL-4+)、Th17(CD3+CD4+IL-17A+)、Treg(CD4+CD25+Foxp3+)亚群比例,RT-PCR法检测小鼠子宫组织干扰素γ(IFNγ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17A(IL-17A)、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA转录水平。结果:宫清方作用后,药物流产小鼠子宫出血量明显减少(P<0.05),Th1、Th17亚群比例(P<0.05)及Th1/Th2、Th17/Treg比值升高(P<0.05),Th2、Treg亚群比例降低(P<0.05),IFNγ、IL-17A mRNA表达升高,IL-4、TGF-βmRNA表达降低。结论:宫清方能优势诱导药物流产小鼠T细胞向Th1、Th17亚群偏移,进而有效减少药物流产后子宫出血。     

FQ-RT-PCR法检测脐带血中β与γ珠蛋白mRNA的水平

目的 :探讨新生儿脐带血中 β与 γ珠蛋白 m RNA水平及其意义。方法 :用实时荧光定量逆转录—聚合酶链反应技术检测 2 3例新生儿脐带血和 2 5例正常对照组外周血中 β与 γ珠蛋白 m RNA水平。结果 :脐带血中 γ/ (β+γ) m RNA比值 [(4 4 .0 8±2 2 .4 1 ) % ]明显高于正常对照组 [(1 .5 5± 4 .1 4 ) % ](P <0 .0 0 1 )。脐带血中胎儿血红蛋白 (Hb F)比值 [(5 8.1 1± 7.1 9) % ]也明显高于正常对照组 [(0 .6 3± 0 .32 ) % ](P <0 .0 0 1 )。结论 :脐带血中 γ/ (β+γ) m RNA及 Hb F水平增高 ,可能说明出生时 γ珠蛋白仍未完全关闭 ,尚有部分表达     

龙胆苦苷对H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长抑制及抗血管生成的分析

目的探讨龙胆苦苷对H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及抗血管生成机制。方法右腋皮下注射H_(22)细胞悬液建立H_(22)肝癌小鼠模型,并随机分为模型组、龙胆苦苷低、高剂量组(50 mg/kg、100 mg/kg)及环磷酰胺组(20 mg/kg),每组10只;另选取10只健康小鼠,作为正常组;给药14 d后,检测体重、瘤重、抑瘤率、胸腺指数、脾指数、血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)含量及瘤组织碱性成纤维生长因子(b FGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达水平。结果与H_(22)肝癌模型组比较,龙胆苦苷低、高剂量组小鼠体重无明显变化(P0.05),而瘤重明显降低(P0.01),其抑瘤率分别为30.43%及42.93%;与H_(22)肝癌模型组比较,龙胆苦苷低、高剂量组小鼠胸腺指数、脾指数及血清IFN-γ、IL-2含量明显升高(P0.05或P0.01),而瘤组织b FGF、TGF-β、VEGF、p-PI3K及p-Akt表达明显降低(P0.05或P0.01)。结论龙胆苦苷对H_(22)肝癌小鼠肿瘤生长及血管生成均有抑制作用,该作用与提高免疫力,增加血清IFN-γ、IL-2含量及抑制PI3K/Akt信号通路的活化有关。     

D-半乳糖剂量及小鼠性别对衰老模型的影响

[目的]考察D-半乳糖剂量以及实验小鼠性别对衰老模型形成的影响。[方法]实验选用不同性别的ICR小鼠,分别采用随机数字表法分为正常对照组、D-半乳糖低(100 mg/kg)、中(300 mg/kg)、高(1 000 mg/kg)剂量组。每日将D-半乳糖于颈背部皮下注射,对照组注射等量生理盐水,连续注射10周,采用Morris水迷宫考察模型小鼠学习记忆能力,取血检测血中生长因子及氧化相关指标,取脑组织进行苏木-伊红(HE)染色,考察脑组织病理形态变化。[结果]与正常对照组比较,不同剂量D-半乳糖对小鼠学习记忆能力均有不同程度的损伤,但雌雄小鼠无明显差别,尤其高剂量组平均潜伏时间明显延长(P<0.05);D-半乳糖中、高剂量组小鼠血中血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)均呈不同程度降低(P<0.05或P<0.01),雌雄间无明显差异;D-半乳糖中、高剂量组小鼠血中丙二醛(MDA)浓度较正常对照组明显升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活力较正常对照组明显下降(P<0.05或P<0.01)。[结论]ICR小鼠皮下注射300-1 000 mg/kg剂量的D-半乳糖连续10周可以不同程度的引起小鼠学习记忆能力明显下降,并且可能与氧化反应升高和血中生长因子水平降低有关,实验小鼠性别对D-半乳糖致衰老模型无明显影响。     

槲皮素对自然流产小鼠模型母胎免疫耐受的影响

目的 研究槲皮素对自然流产（spontaneous abortion, SA）动物模型的影响,从免疫耐受调节的角度探讨槲皮素对SA的免疫机制。方法 将雌性CBA/J小鼠与雄性BALB/c小鼠合笼交配建立正常妊娠模型,为正常组,共6只;将雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠合笼交配建立SA模型,24只SA模型小鼠再随机分为模型组、地屈孕酮组、低浓度槲皮素组、高浓度槲皮素组,每组6只。第1天起,地屈孕酮组[3.75 mg/（kg·d）]、低浓度槲皮素组[300 mg/（kg·d）]、高浓度槲皮素组[600 mg/（kg·d）]开始灌胃,正常组、模型组灌胃等体积的助溶剂,1次/d。第14天,脱颈处死小鼠,计算孕鼠的流产率;ELISA法检测血清小鼠肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10, IL-10)、γ-干扰素（interferon-γ, IFN-γ）、雌二醇（estradiol, E2）、孕酮（progesterone, P）的水平;流式细胞术检测外周血CD3-CD56+CD16+自然杀伤（natu...     

接触性超敏反应小鼠不同部位T细胞亚群的变化

[目的]比较接触性超敏反应(CHS)小鼠不同部位CD4 +/CD8+T细胞以及辅助性T细胞(Th1/Th2)、细胞毒性T细胞(Tc1/Tc2)的平衡状态.[方法]以二硝基氟苯(DNFB)致敏和攻击BALB/c小鼠,建立CHS模型.采用三色流式细胞术分析CHS小鼠脾脏(SP)、耳后淋巴结(RLN)、小肠派氏结(PPs)和肠系膜淋巴结(MLN)中CD4+T细胞和CD8+T细胞的变化及其胞内细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)与白细胞介素-4(IL-4)的表达水平,观察CHS小鼠不同部位Th1/Th2、Tc1/Tc2比例的变化.[结果]与正常组比较,CHS组RLN与SP中CD4/CD8比值显著下降(均P＜0.01),RLN中以Tc1与Th1占优势,SP中以Tc1与Th2占优势,PPs中Tc1细胞比例、CD4/CD8比值显著上升(均P＜0.05),MLN中各指标无显著性差异.[结论]DNFB诱发的CHS小鼠机体总体免疫平衡向Th1类偏移,Tc1(CD8+ IFN-γ+)细胞是主要的效应细胞.     

利用荧光素酶报告基因在体观察移植的人胚胎干细胞的动向

目的利用慢病毒载体携带荧光素酶报告基因并转导人胚胎干细胞,以实现在体观察移植细胞的增殖情况。方法酶切pGL3base质粒获得荧光素酶基因序列,酶切LTBR-GIP获得载体骨架,经过酶切产物热失活、平末端处理、CIP处理、胶纯化和连接,所构建慢病毒载体命名为ULIP,包括UBC启动子和IRES连接,能同时表达荧光素酶基因和Puromycin抗性基因。以ULIP转导人胚胎干细胞H9,并以Puromycin筛选稳定转导的细胞。随后移植于BALB／c小鼠和RAG^-/- γC^-/-小鼠,在XenogenIVIS（r）50成像系统进行荧光信号检测。结果稳定转导ULIP或LTBR—GIP的H9移植到BALB／c小鼠,ULIP组3d后荧光信号明显减弱,5d后基本上不能检出。而移植到RAG^-/-γC^-/-小鼠后,ULIP组的荧光信号在第3天稍有下降,随后荧光信号逐渐增强。LTBR-GIP-H9在移植BALB／c小鼠和RAG^-/-γC^-/-小鼠后均未能检测到荧光信号。结论荧光素酶报告基因可以用于观察移植细胞在体内的动向,实现实时观察移植细胞的存活情况。     

γ-干扰素在小剂量美法仑治疗肿瘤过程中对荷瘤小鼠外周血红细胞的影响

[目的]探讨γ-干扰素(IFN-γ)在小剂量美法仑治疗肿瘤过程中对荷瘤小鼠外周血红细胞的影响。[方法]利用单一剂量美法仑治疗荷瘤野生型C57BL/6小鼠模型,取遗传背景相同、基因型不同的IFN-γ+/-和IFN-γ-/-C57BL/6小鼠各6只,观察7.5 mg/kg美法仑治疗后两组荷瘤小鼠肿瘤结节直径的变化,并且分别在美法仑用药前第3天、用药后6 h、第4、7、11、15、28天内眦静脉取血,肝素抗凝后检测外周血RBC数、Hb含量和Hct。[结果]美法仑7.5 mg/kg用药后第1天,两组荷瘤小鼠肿瘤结节缩小均不明显;用药后第4天,荷瘤IFN--γ/-小鼠肿瘤生长轻度受抑后进行性增大,并在用药后2周内所有小鼠肿瘤复发、死亡;而IFN-γ+/-小鼠肿瘤的肿瘤结节进行性缩小、肿瘤消退并治愈。7.5 mg/kg美法仑治疗后11 d内,IFN-γ免疫功能不同的荷瘤IFN--γ/-和IFN-γ+/-小鼠外周血RBC计数、Hb含量和Hct之间差异无显著性意义(P>0.05);美法仑治疗11 d后,IFN-γ免疫功能缺陷的荷瘤IFN-γ-/-小鼠外周血RBC计数、Hb含量和Hct明显低于IFN-γ免疫功能正常的荷瘤IFN...     

热休克蛋白gp96的纯化及其对荷肝癌小鼠的治疗作用

肿瘤的手术治疗和放射治疗有着立竿见影的作用 ,但肿瘤的治愈率很难得到突破。疫苗能充分调动全身的免疫细胞及 /或免疫分子 ,发挥抗肿瘤效应 ,显示出广阔的应用前景[1] 。近年来有研究证实热休克蛋白 (ＨＳＰ)具有抗肿瘤作用[2 ] ,我们用蛋白层析法及Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹法分离并鉴定小鼠肝癌细胞Ｈ2 2 的ｇｐ96 ,并以ｇｐ96免疫治疗Ｂａｌｂ/ｃ小鼠 ,观察其抗肿瘤效应。一、材料与方法1 材料 :(1)主要试剂及仪器 :ＣＤ4 ＰＥ单抗、ＣＤ8 ＰＥ单抗、γ干扰素 (ＩＦＮ γ) 荧光素异硫氰酸脂 (ＦＩＴＣ)单抗、白细胞介素 (ＩＬ 10 ) ＦＩＴ…     

地塞米松诱导小鼠胸腺细胞凋亡和ERK1/2 MAPK及钙离子浓度关系的研究

目的:研究胸腺细胞凋亡和ERK1/2途径及钙离子内流之间关系,以进一步探讨细胞凋亡可能的信号通路机制.方法:以地塞米松(DEX)诱导小鼠胸腺细胞凋亡为模型,通过流式细胞术和电镜测定模型的稳定性,利用激光扫描共聚焦分析测定细胞内[Ca2 ]i、SDS-PAGE及Western blot检测细胞内总量和磷酸化ERK1/2MAPK.结果:仅在完全RMPI 1640培养基培养条件下,小鼠胸腺细胞自发凋亡百分率为(2.90±0.62)%,而在2.5×10-6mol/L DEX诱导下,3 h培养组(12.70±2.44)%、6 h培养组(53.55±4.59)%发生了细胞凋亡,细胞内Fluo-3绿色荧光明显增强;正常细胞ERK1/2总量随时间变化不明显,而DEX刺激下,ERK1/2总量随时间呈递减趋势.结论:DEX诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中,磷酸化ERK1/2信号被迅速抑制,细胞内[Ca2 ]i迅速上升,推论磷酸化ERK1/2信号阻断与[Ca2 ]i有密切关系.     

γ—谷氨酰半胱氨酸合成酶和多药耐药的相关蛋白基因在膀胱癌中的表达及相关性分析

为探讨 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 (γ- GCS)及多药耐药相关蛋白 (MRPs)与膀胱癌化疗耐药的关系 ,应用逆转录多聚酶链式反应 (Rt- PCR)技术检测了 32例膀胱癌及其癌周正常膀胱粘膜上 γ- GCS亚单位 γ- GCSh、γ- GCSl以及 MRPs家族成员 MRP1 和 MRP2 的 m RNA的表达 ,并以 β- actin m RNA为内对照半定量进行相关分析。结果显示 :γ-GCSh、γ- GCSl、MRP1 和 MRP2 m RNA在癌组织的平均相对表达水平均高于其在正常粘膜的表达 ;γ- GCSh和 MRP1 在化疗复发病例的癌组织的平均表达水平明显高于在未接受过任何化疗的初发病例 ,同时显示两者在癌组织的表达具有较强的相关性 (r=0 .786 ,P<0 .0 1)。提示 :正常细胞的恶性化可上调 γ- GCS和 MRPs的表达 ;膀胱癌临床化疗耐药的形成与 γ- GCSh和 MRP1 的过表达密切相关 ,两者的相关性表达提示两者之间可能存在共同的调节机制     

量子共振磁化干预对化学性肝损伤小鼠的保护作用

[目的]观察量子共振磁化干预对化学性肝损伤模型小鼠肝脏的保护作用.[方法]酒精性肝损伤模型:取雌性昆明种小鼠,随机分为正常组、模型组、直接组(1h/d)、间接组(饮用量子共振磁化水)、直-间接组(1h/d+饮用量子共振磁化水)、Vita 500组(0.01mL/g),连续干预2周.第14d除正常组外其余各组均灌胃给予560mL/L红星二锅头0.014mL/g,记录耐受时间和醉睡时间,采血,测定血清ALT,AST,γ-GT活性.四氯化碳诱导肝损伤模型:取雌性昆明种小鼠,随机分为正常组、模型组、直接组(1h/d)、间接组(饮用量子共振磁化水)、直-间接组(1h/d+饮用量子共振磁化水)、益肝灵组(70mg/kg),连续干预2周.除正常组外其余组每日腹腔注射给予1.25mL/L四氯化碳0.01mL/g.第14d处死,采血,测定血清ALT,AST,γ-GT活性.[结果]各组灌酒小鼠均醉睡,间接组和直-间接组耐受时间与模型组比较明显延长(P<0.01,P<0.05);模型组ALT活性与正常组比较明显增高(P<0.05),直接组和直-间接组ALT活性与模型组比较明显降低(P<0.05);各组睡眠时间、AST及γ-GT活性间差异均无统计学意义(P>0.05).模型组血清中ALT,AST活性明显高于正常组(P<0.01、P<0.05),γ-GT间差异无统计学意义(P>0.05);3个干预组ALT,AST,γ-GT活性与模型组比较差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]量子共振磁化间接干预可提高对酒精的耐受性;量子共振磁化直接干预可在一定程度上预防酒精性肝损伤的发生.     

林蛙油对哮喘缓解期模型小鼠气道炎症的影响

[目的]探讨林蛙油对哮喘缓解期模型小鼠气道炎症的作用及其可能机制.[方法]给予林蛙油小、大剂量组0.05,0.50g/kg林蛙油匀浆液.采用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4,IL-5及γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化,观察BALF中炎性细胞和肺组织病理学改变.[结果]与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎性细胞计数、IL-4,IL-5水平均显著增高(P<0.05),IFN-γ水平显著降低(P<0.05).与哮喘模型组比较,林蛙油小、大剂量组小鼠BALF中炎性细胞计数、IL-4,IL-5水平均明显降低(P<0.05),IFN-γ水平显著增高(P<0.05).林蛙油小、大剂量组哮喘小鼠肺组织病理学改变明显减轻.[结论]林蛙油对哮喘模型小鼠具有保护作用,其机制可能与调节Th1/Th2平衡失调、减轻炎性细胞浸润有关.