抗痛风胶囊对急性痛风性关节炎的作用及下调关节软骨组织MMP-1蛋白表达

目的:观察抗痛风胶囊对大鼠急性痛风性关节炎(AGA)的治疗作用及对软骨组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)蛋白表达的影响。方法:大鼠足踝关节注射尿酸钠悬液诱导AGA,容积法检测踝关节肿胀程度,HE染色观察关节软骨组织的病理组织学变化,免疫组织化学染色及图像分析检测关节软骨内MMP-1蛋白表达。结果:抗痛风胶囊0.3 mg/kg和1.2 mg/kg连续灌胃给药5d,明显减小AGA大鼠足容积,第5d关节肿胀抑制率高达70%～90%。HE染色后显微镜下观察,可见模型组大鼠足踝关节软骨组织细胞排列紊乱、出现充血、肿胀和关节表面的破坏,抗痛风胶囊治疗后,明显改善其病理组织学变化。免疫组织化学检测可见,与模型组比较,抗痛风胶囊和秋水仙碱(0.8mg/kg)均明显下调软骨细胞MMP-1蛋白的表达,其平均光密度值明显降低。结论:抗痛风胶囊对AGA具有明显治疗作用,且降低AGA大鼠关节软骨组织MMP-1蛋白表达可能该药缓解关节炎症肿胀的主要作用机制之一。     

痛风宁对急性痛风性关节炎模型大鼠IL-1β,TNF-α及NALP3炎性体的影响

目的:从核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NALP3)炎性体角度探讨痛风宁的抗炎作用机制。方法:将48只SD大鼠随机分为造模大鼠36只、正常大鼠12只。造模大鼠采用踝关节局部注射0.2 mL尿酸钠(monosodium urate,MSU)混悬液建立急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)模型,正常大鼠予相同部位注射生理盐水。造模成功后,随机分为模型组、痛风宁组、秋水仙碱组,分别用生理盐水、痛风宁药液、秋水仙碱混悬液灌胃,每天2次,共3 d。正常大鼠为正常组,同时予等量生理盐水灌胃。造模成功后72 h,行腹腔注射麻醉后取踝关节液及滑膜组织。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠踝关节液白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测滑膜组织NALP3炎性体相关蛋白与mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量显著升高,滑膜组织NALP3,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1),凋亡相关斑点样蛋白(ASC)蛋白及mRNA表达均显著增加(P0.01);与模型组比较,痛风宁组与秋水仙碱组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量显著下降,且滑膜组织中NALP3,Caspase-1,ASC蛋白及mRNA表达均显著降低(P0.01);与秋水仙碱组比较,痛风宁组大鼠踝关节液IL-1β,TNF-α含量仍较高(P0.05),但滑膜组织中NALP3,Caspase-1,ASC蛋白及mRNA表达均较低(P0.05,P0.01)。结论:痛风宁对AGA的抗炎作用机制可能是通过抑制NALP3炎性体相关蛋白及mRNA表达,从而减少IL-1β,TNF-α的生成,减轻关节炎症反应。     

痛风安胶囊对尿酸钠所致急性痛风性关节炎大鼠步态及关节的影响

目的:研究痛风安胶囊对尿酸钠所致急性痛风性关节炎大鼠步态及关节的影响。方法:以尿酸钠溶液注射大鼠踝关节,造成急性痛风性关节炎模型,观察痛风安胶囊对大鼠步态及关节的影响。结果:模型组与其他各组比较,步态变化差异有显著性意义。秋水仙碱对照组、痛风安胶囊高、中剂量组大鼠右足关节肿胀程度与同期模型组比较明显减轻。结论:痛风安胶囊能减轻关节肿胀,其作用与秋水仙碱相近。     

白虎加桂枝汤对急性痛风性关节炎大鼠关节肿胀度及炎症因子影响的研究

目的：观察白虎加桂枝汤对尿酸盐结晶诱导的急性痛风性关节炎（AGA）大鼠模型关节肿胀度及炎症细胞因子的影响并探讨其作用机制。方法：将 32 只 Wistar 大鼠随机分为对照组、模型组、秋水仙碱组、白虎加桂枝汤组,每组 8 只。除对照组外,其它 3 组采用踝关节注射尿酸钠晶体溶液的方法诱导 AGA 模型。模型制备成功后,秋水仙碱组、白虎加桂枝汤组分别灌胃秋水仙碱混悬液、白虎加桂枝汤治疗,对照组和模型组灌胃等量生理盐水。测量各时间点大鼠右踝关节直径,测定关节软组织白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、环氧化酶-2（COX-2）及一氧化氮（NO）的表达水平。结果：与对照组比较,模型组大鼠右踝关节直径及关节软组织 TNF-α、IL-1β、COX-2、NO 表达水平均明显升高 （P＜0.05）。与模型组比较,秋水仙碱组及白虎加桂枝汤组大鼠右足踝关节直径及关节软组织 TNF-α、IL-1β、COX-2、NO 表达水平明显下降 （P＜0.05）。白虎加桂枝汤组与秋水仙碱组以上各指标比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：白虎加桂枝汤可明显改善 AGA 大鼠关节肿胀,抑制炎症因子 IL-1β、TNF-α、COX-2、NO 的表达,减轻炎症反应。     

痛风宁对急性痛风性关节炎抗炎作用的时效性研究

目的:从炎症指标的变化探讨痛风宁对急性痛风性关节炎(AGA)模型大鼠抗炎作用的时效性。方法:将SD大鼠分成正常大鼠与造模大鼠,造模大鼠采用踝关节腔注射尿酸钠(MSU)混悬液建立AGA大鼠模型,正常大鼠同部位注射生理盐水。于造模后4h模型鉴定成功后随机分成秋水仙碱组、痛风宁组、模型组和正常组,每组18只。秋水仙碱组及痛风宁组分别予相应药物灌胃,模型组与正常组同步予生理盐水灌胃,2次/d,共3d.在造模后24h,48h及72h三个时间点,每组各随机选6只取材。观察并检测各组各时间点关节液白细胞数、滑膜组织病理改变、关节液中炎症相关细胞因子IL-1β,TNF-α,PGE2及TGF-β1的含量。结果:痛风宁能降低关节液白细胞数、改善病变关节滑膜组织的病理形态及降低IL-1β,TNF-α及PGE2含量,同时可升高TGF-β1含量,各时间点与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05),且在48h对各项指标的改善作用最明显,优于24h和72h两个时间点,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:痛风宁对AGA有明显的抗炎作用,其作用机理可能是通过升高TGF-β1含量,抑制促炎性细胞因子IL-1β,TNF-α和PGE2的释放,减少关节液中白细胞数及改善关节滑膜组织病理变化,从而达到对AGA的抗炎作用,且在用药后48h效果最佳。     

痛风消停汤对AGA大鼠踝关节炎性因子表达的影响

目的:研究痛风消停汤对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠受试踝关节滑膜组织炎性因子的影响。方法:60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组,痛风消停汤低、中、高剂量组,每组10只。正常组常规喂养,其余各组采用尿酸钠(MSU)溶液注射法建立急性痛风性关节炎模型。造模前2日,正常组与模型组按20m L/kg予以生理盐水灌胃,秋水仙碱组0.3mg/kg灌胃,1日1次;痛风消停汤低、中、高剂量组分别按2g/kg、4g/kg、8g/kg体质量给予痛风消停汤灌胃,1日1次,直至造模后第7日,连续9日。实验结束后,检测血尿酸,采用ELISA法检测受试踝关节IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,免疫组化法检测TGF-β及其受体(TGF-βR1)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血尿酸、受试踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高(P0.05);与模型组比较,痛风消停汤各组大鼠血尿酸、受试踝关节滑膜组织中IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低(P0.05),而痛风消停汤各组TGF-β1及TGF-βR1的表达较其他各组明显增强(P0.05)。结论:痛风消停汤治疗急性痛风性关节炎的机制可能与上调TGF-β1及TGF-βR1的表达、抑制IL-1β、IL-6、TNF-α的表达有关。     

痛风宁颗粒对急性痛风性关节炎模型大鼠关节局部炎证因子及TLRs/MyD88的影响

目的 探讨痛风宁颗粒对急性痛风性关节炎的抗炎机制. 方法 36只雄性SD大鼠,随机设立正常组、模型组、痛风宁颗粒组及秋水仙碱组,以尿酸钠混悬液关节腔注射建立急性痛风性关节炎动物模型,运用病理学、放射免疫及RT-PCR等技术方法,观测大鼠膝关节液中性粒细胞数、TNF-α、IL-1β含量及关节滑膜组织TLR-2、4及MyD88 mRNA的表达情况. 结果 痛风宁颗粒能显著降低急性痛风性关节炎模型大鼠关节液中中性粒细胞数、TNF-α、IL-1β含量及滑膜组织TLR-2、4及MyD88 mRNA的表达. 结论 痛风宁颗粒对急性痛风性关节炎的抗炎机制可能是通过抑制TLR-2、4及MyD88基因的表达,阻止TLRs/MyD88信号通路的激活,减少TNF-α、IL-1β的生成,进而减轻急性痛风性关节炎症反应.     

刺血疗法联合苗药痛风酊对急性痛风关节炎模型大鼠IL-1β、IL-18、TNF-α及滑膜功能的影响

目的:探讨刺血疗法联合苗药痛风酊对急性痛风性关节炎模型大鼠血清炎性因子IL-1β、IL-18、TNF-α及滑膜功能的影响。方法:将36只健康SD大鼠随机分为空白对照组(9只)和模型制备组(27只)两组。空白组不进行处理;对于模型制备组,除进行造模处理外,还在右后肢踝关节关节腔内注射尿酸钠(MSU)溶液,制备急性痛风性关节炎模型,然后将造模成功后的模型制备组随机分为3组,分别为模型对照组、阳性对照组和治疗组,每组9只。其中阳性对照组给予秋水仙碱灌胃治疗,模型组给予等容积量的蒸馏水灌胃,治疗组给予刺血疗法联合苗药痛风酊外擦。观察造模后1～7天关节肿胀度;造模7天后采用苏木精-伊红染色观察滑膜病理改变,ELISA检测血清中IL-1β、IL-18、TNF-α水平。结果:(1)模型对照组大鼠关节肿胀度,血清中IL-1β、IL-18、TNF-α水平升高,滑膜组织有明显炎性细胞浸润和滑膜细胞肿胀、增生;(2)阳性对照组、治疗组关节肿胀度,血清中IL-1β、IL-18、TNF-α水平明显改善。结论:刺血疗法联合苗药痛风酊外擦能明显改善急性痛风性关节炎大鼠关节症状,下调炎症因子表达水平,改善滑膜功能。     

上中下通用痛风汤对尿酸钠诱导急性痛风性关节炎的抗炎镇痛研究

目的 研究上中下通用痛风汤对尿酸钠诱导大鼠急性痛风性关节炎(GA)的抗炎镇痛作用.方法 取60只大鼠,随机分成6组,即对照组,模型组,吲哚美辛组,上中下通用痛风汤高、中、低剂量组,每组10只.除对照组外,其余5组采用尿酸钠晶体溶液踝关节注射建立急性痛风性关节炎模型.以上中下通用痛风汤与吲哚美辛对比治疗,观察大鼠步态,测定关节肿胀度,ELISA方法检测血清IL-1、IL-6、TNF-α水平.结果 上中下通用痛风汤高、中、低剂量在致炎后各时间点均能不同程度的抑制尿酸钠所致大鼠踝关节疼痛,减轻肿胀程度,降低步态评分,降低炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α含量,与模型对照组比较差异有显著性(P＜0.05).结论 上中下通用痛风汤对尿酸钠所致急性痛风性关节炎症有较好的抗炎镇痛作用,其作用机制可能与降低炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α水平有关.     

痛风合剂治疗高尿酸血症及急性痛风性关节炎的实验研究

目的:观察痛风合剂(痛风1号、痛风2号)的抗炎、镇痛、消肿及降尿酸作用。方法:通过对高尿酸血症小鼠的实验,观察其降尿酸作用;观察急性痛风性关节炎大鼠的右后踝肿胀度、血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及大鼠滑膜组织和踝关节周围软组织病理形态学变化,及其抗炎、镇痛及消肿作用。结果:①痛风1号能显著抑制急性痛风性关节炎大鼠的右后踝肿胀度、血清IL-1β、TNF-α水平及关节滑膜炎性细胞浸润,减少尿酸盐晶体沉积;②痛风2号可降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平。结论:痛风合剂具有显著的抗炎、镇痛、消肿及降尿酸作用。