HIF-1α和Glut-1在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中的表达

目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(Glut-1)在皮肤鳞状细胞癌(SCC)、基底细胞癌(BCC)组织中的表达.方法:采用免疫组织化学方法检测74例SCC、71例BCC及30例正常皮肤组织中HIF-1α和Glut-1的表达.结果:SCC中HIF-1α和Glut-1蛋白阳性表达率分别为68.92%和82.43%.BCC中HIF-1α和Glut-1蛋白阳性表达率分别为61.97%和56.34%.均高于正常皮肤组织0%和6.67%(P<0.05).HIF-1α和Glut-1的表达与SCC和BCC患者的年龄、性别、分化程度无关,但与SCC淋巴结转移密切相关(P<0.05).结论:HIF-1α和Glut-1的过度表达可能与SCC和BCC的发生和转移有关.     

GLUT-1、Ki-67在皮肤肿瘤中的表达及意义

目的：探讨葡萄糖转运蛋白-1（GLUT-1）在脂溢性角化病（SK）、日光性角化病（AK）、Bowen病（BD）、鳞状细胞癌（SCC）中的表达及其与细胞增殖因子Ki-67之间的关系。方法：采用免疫组化法检测了95例不同皮肤肿瘤GLUT-1及Ki-67的表达。结果：GLUT-1及Ki-67在SK及正常皮肤都不表达,在AK、BD及SCC表达上调,并且二者的阳性表达强度间具有正相关性。结论：GLUT-1在恶性皮肤肿瘤中表达上调,与肿瘤的侵袭和转移有关。其表达强度可作为判断皮肤肿瘤恶性程度的检测指标,对诊断及鉴别诊断具有参考价值。     

缺氧对HaCaT细胞HIF-1α、GLUT-1表达的影响及与细胞增殖的关系

目的 探讨缺氧条件下人角质形成细胞株HaCaT细胞HIF-1α、GLUT-1的表达及其与细胞增殖的关系.方法 应用实时定量PCR和Western Blotting检测不同缺氧时间段(0h、12h、24h、36h和48h)HaCaT细胞表达HIF-1α、GLUT-1的mRNA及蛋白水平.结果 缺氧条件下,HaCaT细胞表达H1F-1α蛋白的水平明显增加,mRNA水平变化不明显;GLUT-1的mRNA水平和蛋白水平均明显增加;GLUT-1的蛋白水平变化与HaCaT细胞增殖相关.结论 缺氧条件下,HaGaT细胞表迭HIF-1α、GLUT-1水平增加,且后者与细胞增殖相关,银屑病皮损中可能存在类似现象.     

GluT1 mRNA和VEGF mRNA在尖锐湿疣组织中的表达

目的探讨葡萄糖转运蛋白1(GluT1)mRNA和血管内皮生长因子(VEGF)mRNA在尖锐湿疣(CA)发病中的作用。方法采用原位杂交技术检测40例CA组织中GluT1 mRNA和VEGF mRNA的表达,并与20例正常包皮组织作对照。结果 CA组织中GluT1和VEGF mRNA阳性表达率分别为90.00%(36/40),95.00%(38/40),正常对照组分别为25.00%(5/20),90.00%(18/20);CA组织中GluT1 mRNA阳性表达强度多为(2+)～(3+),正常对照组多在(-)～(2+)。CA组织中VEGF mRNA阳性表达强度多为(2+)～(3+),正常对照组多在(+)～(2+)。GluT1 mRNA阳性表达率及表达强度与正常对照组比较差异具有统计学意义(P均<0.05);VEGF mRNA阳性表达率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但VEGF mRNA表达强度与正常对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。CA组织中GluT1和VEGF mRNA表达呈正相关(r=0.332,P=0.036)。结论尖锐湿疣组织中存在GluT1和VEGF mRNA过表达,GluT1和VEGF mRNA可能在CA能量代谢和血管生成中发挥一定作用。     

HIF-1α、VEGF及Ang-2在妊娠伴尖锐湿疣组织中的表达

目的 探讨VEGF及其相关调节因子在妊娠伴尖锐湿疣组织中的表达及其意义.方法 将3组(实验组、阳性对照组各30例,阴性对照组15例)标本制成石蜡切片,免疫组化-SP法观察各组HIF-1α、VEGF及Ang-2的表达情况.结果 妊娠组中HIF-1α、VEGF及Ang-2的阳性表达率分别为86.67%、93.33%及83.33%,非妊娠组中HIF-1α、VEGF及Ang-2的阳性表达率分别为63.33%、66.67%及53.33%,对照组中HIF-1α、VEGF及Ang-2的阳性表达率分别为0.6.67%、0,妊娠组明显高于非妊娠组和对照组(P<0.05),差异有统计学意义.结论 HIF-1α、VEGF及Ang-2在妊娠组呈过度表达,与妊娠伴尖锐湿疣疣体的血管生成有关.     

MTA-1、HIF-1α、ER、PR在子宫内膜癌临床特征上的表达差异及相关性分析

目的 探究肿瘤转移相关基因-1(MTA-1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)在子宫内膜癌(EC)临床特征上的表达差异及相关性。方法 选取2017年6月至2020年6月保定市妇幼保健院收治的62例EC患者作为研究对象,设为研究组,获取其的病理标本。另选取同期于保定市妇幼保健院进行治疗的118例子宫肌瘤、子宫腺肌症、子宫内膜息肉等患者设为对照组,均行子宫全切术治疗并获取子宫内膜组织标本,其中56例为子宫内膜不典型增生患者,设为对照1组,60例为正常子宫内膜患者,设为对照2组。对纳入标本进行免疫组化检测,观察并比较MTA-1、HIF-1α、ER、PR阳性表达情况,分析MTA-1、HIF-1α、ER、PR在EC临床特征上的表达差异及相关性。结果 研究组MTA-1和HIF-1α阳性率高于对照组,对照2组高于对照1组(P<0.05);研究组ER和PR阳性率低于对照组,对照2组低于对照1组(P<0.05);EC患者在不同肌肉浸润程度、不同国际妇产科联盟(FIGO)分期、不同组织学分级及有无淋巴结转移中MTA-1、HIF-1α、ER、PR阳性率表达情况比较,差异具有统计学意义(P<0.05);MTA-1、HIF-1α阳性表达与肌肉浸润程度、FIGO分期及淋巴结转移呈正相关(r=0.316、0.254、0.347,0.376、0.412、0.269,P<0.05),与组织学分级呈负相关(r=-0.562、-0.447,P<0.05),ER、PR阳性表达与上述4个临床特征均呈负相关(r=-0.485、-0.226、-0.634、-0.215,-0.313、-0.664、-0.415、-0.532,P<0.05)。结论 MTA-1、HIF-1α在EC中的阳性表达率升高,ER和PR阳性表达率降低,MTA-1、HIF-1α、ER、PR与临床特征关系密切,具有一定相关性,上述指标的检测可对临床诊断和治疗EC患者提供有效依据。     

缺氧诱导因子-1α和环氧合酶-2在尖锐湿疣中的表达

目的：检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和环氧合酶-2（COX-2）在尖锐湿疣组织中的表达。方法：采用免疫组化SP法检测30例尖锐湿疣组织和20例包皮组织中HIF—1α和COX-2的表达。结果：尖锐湿疣组织中HIF-1α和COX-2的阳性表达率及阳性表达强度均显著高于正常对照组（均P〈0．01）,尖锐湿疣组织中HIF—1α与COX-2的表达呈正相关。结论：尖锐湿疣组织的过度增殖可能与组织中HIF—1α和COX-2的异常表达有关。     

缺氧诱导因子1α在肢端恶性黑素瘤组织中的表达

目的 探讨缺氧诱导因子（HIF）1α在肢端恶性黑素瘤（MM）中的表达及其与干细胞因子（SCF）/c-kit途径的关系。 方法 应用免疫组化法检测HIF-1α在93例MM、21例非肢端MM、39例肢端色素痣组织中的表达,并用15例肢端正常皮肤组织作对照。同时检测c-kit在93例肢端MM组织中的表达情况,采用Spearman相关分析,分析其与HIF-1α的相关性。 结果 在93例肢端MM中,81例（87.10%）阳性表达HIF-1α,在21例非肢端MM中19例（90.48%）阳性,39例肢端色素痣中6例（15.38%）阳性;15例肢端正常皮肤均为阴性。与肢端正常皮肤和肢端色素痣相比较,肢端MM中HIF-1α的表达增高,差异有统计学意义（均P < 0.01）;在肢端MM和非肢端MM组间,HIF-1α表达差异有统计学意义（P < 0.01）。HIF-1α表达水平与黑素瘤Clark分级、Breslow厚度分级均呈正相关（rs = 0.442,P < 0.01;rs = 0.368,P < 0.01）。在原位、侵袭性、转移性肢端MM组织中,HIF-1α表达水平与肿瘤进展呈正相关（rs = 0.420,P < 0.01）。在肢端MM中,HIF-1α表达与c-kit表达呈正相关（rs = 0.307,P < 0.01）。 结论 HIF-1α蛋白在肢端MM中呈高表达,且与肿瘤的分期、进展、侵袭性均呈正相关,与c-kit在肢端MM组织中的协同表达,提示可能共同参与肢端MM的发病机制。     

HIF-1α和VEGF在皮肤鳞状细胞癌和基底细胞癌中的研究进展

缺氧诱导因子-1(HIF-1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种核转录因子,是介导细胞对缺氧微环境进行适应性反应的关键性转录调控基因.HIF-1通过与靶基因缺氧反应元件(HRE)结合,促进其转录,引起一系列细胞对缺氧的反应.作为HIF-1最主要靶基因之一的血管内皮生长因子(VEGF),是目前所知作用最强的一种促血管生长因子.已知二者在皮肤鳞状细胞癌(SCC)及基底细胞癌(BCC)的多种恶性肿瘤中均有高表达,且表达呈正相关.HIF-lα和VEGF的联合表达在皮肤SCC和BCC的发生、发展中作用的研究,可能为皮肤SCC及BCC预后的判断和利用以HIF-1α和VEGF为靶点的基因生物治疗提供新的途径.     

HIF-1α与VEGF在银屑病皮损中的表达及其与血管生成的关系

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)在银屑病皮损中的表达,并分析两者的相关性,同时研究两者在银屑病血管形成中所起的作用。方法采用免疫组织化学SABC法及Western blotting检测32例进展期寻常型银屑病和20例正常人皮肤组织HIF-1α与VEGF蛋白的表达,同时用CD34标记血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。结果 20例正常对照组皮肤组织中HIF-1α,VEGF在表皮表达弱或几乎无表达,但在皮脂腺、毛囊、汗腺可见强表达,32例银屑病患者皮损中HIF-1α,VEGF均在表皮全层表达;与正常对照组相比,银屑病患者皮损中HIF-1α,VEGF表达均显著上调(P0.05);并均与MVD值呈显著正相关(r=0.743,P0.01;r=0.759,P0.01);银屑病皮损中VEGF的表达与HIF-1α的表达呈明显正相关(r=0.681,P0.01);结论银屑病皮损组织存在HIF-1α与VEGF蛋白的过表达,两者在促进银屑病新生血管生成中具有协同作用,可能在银屑病的发生、发展过程中起到重要作用。     

低氧诱导因子-1与皮肤的相关研究

低氧诱导因子-1是低氧时表达的一种蛋白,由低氧诱导因子-1α和低氧诱导因子-1β组成的异源二聚体。其中低氧诱导因子-1α决定着低氧诱导因子-1的活性,对伤口的愈合、新血管再生和肿瘤形成起着一定的作用,可能与皮肤疾病有一定关系。调控低氧诱导因子-1的水平可能为某些皮肤病的治疗开辟新的途径。     

Hypoxia accelerates the progression of angiosarcoma through the regulation of angiosarcoma cells and tumor microenvironment

Background

Angiosarcoma is a rare malignant tumor with a poor prognosis. It is known that hypoxic condition activates tumor progression in several cancers. Additionally, hypoxic tumor microenvironment accelerates immune escape. However, the presence and significance of hypoxia in angiosarcoma has not been adequately investigated.

TRP-1 B细胞表位区在酵母中的表达纯化及生物学活性研究

目的　为进一步探索酪氨酸酶相关蛋白 -1(TRP 1)人源B细胞表位 ,利用甲醇营养型酵母Pichiapas toris表达系统表达TRP 1的B细胞表位区。方法　将本实验室已构建好的质粒 pUC19/TRP 1进行双酶切 ,将目的片段亚克隆至带有 6His标签的 pRSETA载体 ,将 6His融合的TRP 1整体PCR扩增出来 ,克隆到酵母表达载体pPIC3 .5K上 ,构建成重组质粒 pPIC3 .5K/6His TRP1。该质粒转化酵母菌GS115 ,经G418筛选得到高拷贝转化子。转化菌体经Mut表型鉴定后 ,用含 0 .5 %甲醇的培养基诱导表达 ,表达产物利用Ni NTAagarose柱通过金属螯合亲和层析进行纯化后 ,测定其生物学活性。结果　通过 4天的诱导 ,该系统成功表达了 6His TRP1蛋白 ,经亲和层析纯化后扫描分析重组蛋白分子量约为 18kD ,纯度可达 96%。Westernblotting及ELISA实验证实 ,表达产物具有良好的抗原性和特异性。生物学活性检测证实其具有结合白癜风病人IgG的能力。 结论　在Pichiapastoris表达系统中 ,获得了具有生物学活性的可溶性重组TRP 1的B细胞表位肽段 ,为深入研究TRP -1人源表位及白癜风的发病机制、免疫治疗及恶性黑素瘤的免疫治疗奠定了基础。     

TNF-α和IL-1β对HaCaT细胞诱生型一氧化氮合酶表达的影响

目的　探讨炎症性细胞因子肿瘤坏死因子 α(tumornecrosisfactor α ,TNF α)协同白细胞介素 1β(inter leukin 1β ,IL 1β)对体外培养角质形成细胞 (keratinocye ,KC)株HaCaT细胞诱生型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesyn thase ,iNOS)mRNA和蛋白表达的调节作用 ,以及地塞米松对TNF α和IL 1β作用的影响。 方法　用RT PCR、Westernblotting和免疫组织化学 (SP)方法检测HaCaT细胞iNOSmRNA和蛋白表达情况。结果　正常培养HaCaT细胞iNOS微弱表达或不表达 ,TNF α协同IL 1β显著上调HaCaT细胞iNOSmRNA和蛋白表达 ,地塞米松可显著抑制TNF α和IL 1β的作用。结论　推测TNF α和IL 1β可能通过上调角质形成细胞表达iNOS合成释放的一氧化氮 (niricoxide ,NO)参与皮肤免疫和炎症反应 ;地塞米松的治疗效应可能部分与其能抑制iNOS表达有关。     

UVB induces a biphasic response of HIF-1alpha in cultured human keratinocytes

Abstract:  Hypoxia in the skin is important in chronic degenerative dermo-epidermal changes, inflammation, photoageing and carcinogenesis. In these processes, vascular endothelial growth factor (VEGF) plays a crucial role and is known to be affected by ultraviolet radiation (UVR). Hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1) closely regulates the expression of VEGF in several experimental settings. We set out to study the impact of acute UVB irradiation on the level of HIF-1 as a major regulator of hypoxia-induced genes. Effects of UVB exposure on HIF-1α expression were investigated in HaCaT cells after a single irradiation by Western blots. Downstream target gene expression was measured by quantitative real-time polymerace chair reaction (PCR). UVB treatment resulted in an initial decrease of the HIF-1α protein level followed by a subsequent prolonged increase. If cells were exposed to additional UVB irradiation, another decrease in HIF-1α was provoked, similar to the original effect. The observed changes followed a strict timeline and were dose-dependent. The role of the PI3K/AKT pathway was examined. No change in the total level of AKT after UVB treatment was seen; however, its phosphorylation level was found to be markedly higher. In accordance with these observations, wortmannin, an inhibitor of PI3-kinase effectively blocked the UVB-induced increase in HIF-1α. In agreement with previous findings, UVB irradiation increased VEGF and haem oxygenase-1 mRNA levels determined by quantitative real-time PCR. It is concluded that changes in HIF-1α expression underlie the alterations in expression of VEGF upon UVB irradiation. Our findings indicate the involvement of PI3K in UVB-mediated HIF-1α upregulation.     

他克莫司对UVA照射后HaCaT细胞表达ICAM-1的影响

目的研究他克莫司(TM)对长波紫外线(UVA)照射后HaCaT细胞表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响,以探讨TM治疗光敏性皮肤病的作用机制。方法采用ELASI和免疫组化法检测在不同强度UVA照射后,HaCaT细胞表达ICAM-1的情况。结果与未经UVA照射组细胞比较,未加TM组经UVA照射24h后,HaCaT细胞表达ICAM-1水平明显升高(P<0.01),而加入TM组的ICAM-1表达明显受到抑制(P<0.01)。结论TM对UVA照射后HaCaT细胞表达ICAM-1有抑制作用,提示对UVA引起的炎症有抑制作用。     

Elevated Serum Insulin-like Growth Factor-1 (IGF-1) Levels in Women with Postadolescent Acne

The purpose of this study was to measure the serum levels of IGF-1 in women with postadolescent acne compared to normal controls, and evaluate the relationship of these levels to the levels of androgens, in order to investigate the possible role of IGF-1 in the pathogenesis of acne. Eighty-two female patients with acne between 20 and 25 years of age and thirty-one age-matched control women were studied. We measured the serum levels of total testosterone (T), free testosterone (FT), dihydrotestosterone (DHT), dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S), and insulin-like growth factor-1 (IGF-1). The levels of IGF-1 in patients with acne (1.26 ± 0.52 U/ml) were significantly (p<0.001) increased over those of controls (0.96 ± 0.32 U/ml). Of 82 acne patients, six (7%) had IGF-1 levels which exceeded the normal range, but there were no significant correlations between IGF-1 and T, FT, DHT or DHEA-S levels or between IGF-1 and acne severity. Since the measurement of serum IGF-1 levels is a convenient indicator of GH secretion, the increase of serum IGF-1 levels seen in some acne patients might reflect an increase of GH.     

Expression of the c-Met Proteins in Malignant Skin Cancers

Background

The expression of c-Met is substantially elevated in most malignant human cancers. We therefore searched for c-Met expression and compared the expression level among malignant skin cancers.

Objective

The aim of this study was to determine the c-Met expression pattern and the protein expression level in selected malignant cutaneous tumors.

Methods

G361 cells (malignant melanoma cell line) and A431 cells (squamous cell carcinoma cell line) were cultured and analyzed, using immunoprecipitation and Western blot analysis, for expression of c-Met. Additionally, 16 separate specimens of malignant melanomas (MMs), 16 squamous cell carcinomas (SCCs), 16 basal cell carcinomas (BCCs) and 16 normal tissues were analyzed for the expression of c-Met using immunohistochemical studies.

Results

Based on cultured cell immunoprecipitation and Western blot analysis, both A431 cells and G361 cells expressed c-Met, however, c-Met was expressed substantially more in G361 cells. Immunohistochemical examination of c-Met showed that it was over-expressed in all malignant skin cancers. In addition, c-Met expression was more increased in MM compared to other cancers.

Conclusion

In our study, c-Met is involved in malignant skin cancer development and the level of its expression is thought to be related to the degree of malignancy in melanoma cancers.     

阴道念珠菌病小鼠模型中单核细胞趋化蛋白-1的表达及其意义

目的检测阴道念珠菌病小鼠模型中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达,并对其在阴道念珠菌病发病中的作用进行探讨。方法建立阴道念珠菌病小鼠模型,以免疫组化染色SABC法检测小鼠阴道黏膜中MCP-1蛋白的表达,并应用HMIAS-2000型全自动医学彩色图像分析系统对小鼠阴道黏膜MCP-1的表达进行半定量分析。结果与对照组及正常小鼠相比,感染组小鼠阴道黏膜MCP-1表达水平明显升高,且随时间延长逐渐升高,14天达到高峰,第21天略有下降。结论MCP-1可能在局部阴道黏膜内对白念珠菌的感染起一定的防御作用。